Товары в корзине: 0 шт Оформить заказ
Стр. 1
 

31 страница

Устанавливает методы очистки экстрактов, полученных методами, описанными в ISO 3890-1/IDF 75-1. В настоящем стандарте также приведены рекомендуемые методы определения остаточного содержания хлорорганических соединений в молоке и молочных продуктах, а также подтверждающие тесты и процедуры очистки.

 Скачать PDF

Идентичен ISO 3890-2:2009/IDF 75-2:2009

Оглавление

1 Область применения

2 Нормативные ссылки

3 Метод А. Жидкость-жидкостное разделение ацетонитрилом и очистка на колонке с Florisil

4 Метод В. Жидкость-жидкостное разделение диметилформамидом (ДМФА) и очистка на колонке, заполненной оксидом алюминия

5 Метод С. Жидкость-жидкостное разделение диметилформамидом (ДМФА) и очистка на колонке, заполненной Florisil

6 Метод D. Колоночная хроматография на оксиде алюминия точно определенной активности

7 Метод Е. Колоночная хроматография на колонке, заполненной оксидом алюминия

8 Метод F. Колоночная хроматография на частично дезактивированном Florisil

9 Метод G. Колоночная хроматография на частично дезактивированном силикагеле

10 Метод Н. Гель-проникающая хроматография

11 Подтверждающие тесты

12 Дополнительные процедуры очистки

Приложение ДА (справочное) Сведения о соответствии ссылочного международного стандарта межгосударственному стандарту

Библиография

 

31 страница

Дата введения01.07.2017
Добавлен в базу01.02.2017
Актуализация01.01.2019

Этот ГОСТ находится в:

Организации:

14.11.2013УтвержденМежгосударственный Совет по стандартизации, метрологии и сертификации44-2013
23.08.2016УтвержденФедеральное агентство по техническому регулированию и метрологии936-ст
ИзданСтандартинформ2016 г.
РазработанБелГИМ

Milk and milk products. Determination of residues of organochlorine compounds (pesticides). Paгt 2. Test methods for crude extract purification and confirmation

Стр. 1
стр. 1
Стр. 2
стр. 2
Стр. 3
стр. 3
Стр. 4
стр. 4
Стр. 5
стр. 5
Стр. 6
стр. 6
Стр. 7
стр. 7
Стр. 8
стр. 8
Стр. 9
стр. 9
Стр. 10
стр. 10
Стр. 11
стр. 11
Стр. 12
стр. 12
Стр. 13
стр. 13
Стр. 14
стр. 14
Стр. 15
стр. 15
Стр. 16
стр. 16
Стр. 17
стр. 17
Стр. 18
стр. 18
Стр. 19
стр. 19
Стр. 20
стр. 20
Стр. 21
стр. 21
Стр. 22
стр. 22
Стр. 23
стр. 23
Стр. 24
стр. 24
Стр. 25
стр. 25
Стр. 26
стр. 26
Стр. 27
стр. 27
Стр. 28
стр. 28
Стр. 29
стр. 29
Стр. 30
стр. 30

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СОВЕТ ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ, МЕТРОЛОГИИ И СЕРТИФИКАЦИИ

(МГС)

INTERSTATE COUNCIL FOR STANDARDIZATION, METROLOGY AND CERTIFICATION

ГОСТ

ISO 3890-2— 2013

(ISC)

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ

СТАНДАРТ

МОЛОКО И МОЛОЧНЫЕ ПРОДУКТЫ

Определение остаточного содержания хлорорганических соединений (пестицидов)

Часть 2

Методы очистки экстракта и подтверждение

(ISO 3890-2:2009/IDF 75-2:2009, IDT)

Издание официальное

Москва

Стандартинформ

2016

Предисловие

Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены в ГОСТ 10-2015 «Межгосударственная система стандартизации. Основные положения» и ГОСТ 1.2-2015 «Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные. правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия. обновления и отмены»

Сведения о стандарте

1    ПОДГОТОВЛЕН Республиканским унитарным предприятием «Белорусский государственный институт метрологии» (БелГИМ) на основе собственного перевода на русский язык англоязычной версии международного стандарта, указанного в пункте 5

2    ВНЕСЕН Государственным комитетом по стандартизации Республики Беларусь

3    ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 14 ноября 2013 г. N8 44-2013)

За принятие проголосовали:

Краткое наименование страны по МК (ИСО 3166) 004—97

Код страны по МК (ИСО 3166) 004-97

Сокращенное наименование национального органа по стандартизации

Армения

AM

Минэкономики Республики Армения

Беларусь

BY

Госстандарт Республики Беларусь

Киргизия

KG

Кыргызстандарт

Молдова

MD

Молдова-Стандарт

Россия

RU

Росстандарт

Таджикистан

TJ

Таджикстандарт

4    Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 23 августа 2016 г. № 936-ст межгосударственный стандарт ГОСТ ISO 3890-2-2013 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 июля 2017 г.

5    Настоящий стандарт идентичен международному стандарту ISO 3890-2:2009/IDF 75-2:2009 «Молоко и молочные продукты. Определение остаточного содержания хлорорганических соединений (пестицидов). Часть 2. Методы очистки экстракта и подтверждение» («Milk and milk products — Determination of residues of organochlorine compounds (pesticides) — Pari 2: Test methods for crude extract purification and confirmation», IDT).

Международный стандарт разработан подкомитетом SC 5 «Молоко и молочные продукты» Технического комитета ISO/TC 34 «Продукты пищевые сельскохозяйственные» Международной организации по стандартизации (ISO) и Международной молочной федерацией (IDF).

Официальные экземпляры международного стандарта, на основе которого подготовлен настоящий государственный стандарт, и международных стандартов, на которые даны ссылки, имеются в Федеральном агентстве по техническому регулированию и метрологии.

При применении настоящего стандарта рекомендуется использовать вместо ссылочного международного стандарта соответствующий ему межгосударственный стандарт, сведения о котором приведены в дополнительном приложении ДА

6 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

5 Метод С. Жидкость-жидкостное разделение диметилформамидом (ДМФА) и очистка на колонке, заполненной Florisil

5.1    Сущность метода

(См. ссылку (6)).

Хлорорганические соединения вместе с жиром экстрагируют из пробы по методике, описанной в 5.4.1. Экстракт выпаривают почти досуха, затем растворяют в петролейном эфире. Хлорорганические соединения затем выделяют, используя диметилформамид. После добавления раствора сульфата натрия хлорорганические соединения далее разделяют петролейным эфиром.

Органическую фазу очищают, используя хроматографию на колонке, заполненной Florisil. применяя петролейный эфир/диэтиловый эфир в качестве элюирующего растворителя. Элюат выпаривают и анализируют, используя газожидкостную хроматографию.

5.2    Реактивы

Применяют реактивы только установленной аналитической квалификации, если не установлено иное, а также дистиллированную или деминерализованную воду или воду эквивалентной чистоты.

5.2.1    Петролейный эфир с температурой кипения 30—40 °С. подвергнутый повторной перегонке.

5.2.2    Диэтиловый эфир (Cjl-^CX^H^, не содержит пероксидов.

5.2.3    Петролейный эфир с температурой кипения 60—0 "С. подвергнутый повторной перегонке.

5.2.4    Элюирующий растворитель: смесь диэтилового эфира (5.2.2) и летролейного эфира (5.2.1) (6 : 94 по объему).

5.2.5    Адсорбент: Florisil. от 60 до 100 меш.

Адсорбент нагревают в муфельной печи при температуре 650 °С в течение 2 ч. Охлаждают до температуры 130 °С и выдерживают при этой температуре в течение 5 ч в сушильном шкафу. Дают остыть до комнатной температуры в эксикаторе, затем переносят в плотно закупоренный сосуд с широким горлом. Добавляют 5 частей дистиллированной воды к 95 частям адсорбента (по обьему) и встряхивают, пока не исчезнут комочки. Дают отстояться в течение 24 ч и перед использованием встряхивают.

5.2.6    Сульфат натрия (NajSO^ гранулированный, безводный.

Нагревают при температуре (500 ± 25) °С в течение 4 ч. Охлаждают и хранят в стеклянной посуде с притертой пробкой.

5.2.7    Диметилформамид (ДМФА). насыщенный петролейным эфиром. Перегоняют ДМФА и отбирают фракцию с температурой кипения 15—154 °С. Насыщают его петролейным эфиром (5.2.1).

5.2.8    Петролейный эфир, насыщенный диметилформамидом.

5.2.9    Раствор сульфата натрия. 2-процентный раствор.

5.2.10    н-гексан (СН3(СН2)4СН3].

5.3 Оборудование

Применяют обычное лабораторное оборудование.

5.3.1    Высокоскоростной смеситель.

5.3.2    Роторный испаритель (Kudema-Danish или эквивалентный) с колбой вместимостью 500 сми прикрепленной градуированной пробиркой.

5.3.3    Хроматографические колонки внутренним диаметром 20 мм и длиной 300 мм с запорными кранами из политетрафторэтилена (ПТФЭ) и пластинами из пористого стекла.

5.4 Методика

5.4.1    Экстракция жира и хлорорганических соединений

Для общих методов см. ISO 3890-1/IDF 75-1 (приложение А).

5.4.2    Экстракция жира и пестицидов с применением ДМФА

Пробу экстракта, содержащего от 2 до 5 г жира, растворяют в 25 см3 летролейного эфира, насыщенного ДМФА (5.2 8). Переливают в делительную воронку вместимостью 250 см3. Экстрагируют небольшими порциями измеренного обьема (например. 75 см3) ДМФА, насыщенного петролейным эфиром (5.2.7), который добавлен в делительную воронку. Каждый раз энергично встряхивают в течение 1—2 мин. и сливают ДМФА-фазу в делительную воронку вместимостью 500 см3. Перемешивают соединенные фазы с 200 см3 раствора сульфата натрия (5.2.9) и каждый раз встряхивают в течение 1—2 мин. с одной порцией в 40 см3 и тремя порциями по 25 см3 летролейного эфира (5.2.3). Фазы летролейного эфира 6

ГОСТ ISO 3890-2-2013

собирают и промывают приблизительно 10 см3 воды. Обезвоживают над сульфатом натрия (5.2.6) и пропускают через фильтр из ваты. Добавляют через ватный тампон около 5 см3 н-гексана (5.2.10) и уменьшают объем примерно до 5 см3 в роторном испарителе (5.3.2).

5.4.3 Очистка на Florisil с петролейным эфиром

Хроматографическую колонку (5.3.3) до половины наполняют петролейным эфиром (5.2.3). Добавляют 20 г дезактивированного адсорбента (5.2.5) маленькими дозами через воронку, держа при этом запорный кран из политетрафторэтилена (ПТФЭ) частично открытым, и осторожно постукивают колонку. Используют только колонки без видимых вкраплений воздуха Покрывают слоем 20 мм безводного сульфата натрия (5.2.6) и дают петролейному эфиру впитаться.

Экстракт пробы наносят на колонку с несколькими кубическими сантиметрами элюирующего растворителя (5.2.4). Дают ему просочиться в колонку через открытый кран до тех пор. пока мениск не достигнет слоя сульфата натрия (5.2.6).

Ополаскивают первоначальную емкость несколькими кубическими сантиметрами элюирующего растворителя (5.2.4) и продолжают, как описано выше. Элюируют колонку 200 ал3 элюирующего растворителя в колбу с круглым дном вместимостью 500 см3 при скорости потока, не превышающей 5 см3/мин. Выпаривают элюат в роторном испарителе (5.3.2) до 5 см3. Перемещают выпаренный экстракт в градуированную пробирку с диэтиловым эфиром (5.2.2) и разбавляют до определенного обьема 10—20 см3 диэтиловым эфиром

5.5 Газовая хроматография

См. ISO 3890-1/IDF 75-1 (пункт 6.2). Для предварительных испытаний см. ISO 3890-1/IDF 75-1 (разделы 10—14).

6 Метод D. Колоночная хроматография на оксиде алюминия точно определенной активности

6.1    Сущность метода

(См. ссылку [7]).

Хлорорганические соединения экстрагируют из пробы, используя ацетон/н-гексан. Ацетон отделяют с водным сульфатом натрия; н-гексан осушают и концентрируют. Определенное количество экстракта жира очищают, используя хроматографию на оксиде алюминия точно определенной активности, применяя н-гексан в качестве элюирующего растворителя.

Элюат осушают, затем анализируют с помощью ГЖХ

6.2    Реактивы

Применяют реактивы только установленной аналитической квалификации, если не установлено иное, а также дистиллированную или деминерализованную воду или воду эквивалентной чистоты.

6.2.1    Ацетон (СН 3СОСН3).

6.2.2    н-гексан (СН3(СН2)4СНз)

6.2.3    Сульфат натрия (Na^O,*) гранулированный, безводный.

Нагревают при температуре 500 °С в течение 4 ч. затем охлаждают и хранят в закрытом сосуде.

6.2.4    Раствор сульфата натрия. 2-процентный раствор.

6.2.5    Оксид алюминия (А120з), нейтральный (W2001)). степень активности — Super 1 или эквивалентная.

Материал при получении предварительно прогревают при температуре (500 ± 25) °С в течение 3—4 ч для удаления влаги и любых лишних органических веществ и охлаждают над пентоксидом фосфора Дезактивируют порцию, добавляя примерно 10 см3 воды на 90 г оксида алюминия, порциями по 2 или 3 см3, вращая при этом колбу или другую стеклянную посуду. Плотно закупоривают и встряхивают или помещают на вращающийся валик для тщательного перемешивания. Перед применением дают отстояться в течение 24 ч в закрытом сосуде и температуре окружающей среды. Материал проверяют следующим образом. Взвешивают 22.0 г оксида алюминия. Готовят суспензию в небольшом обьеме н-гексана (6 2.2) и переносят ее в хроматографическую колонку (6.3.2). Добавляют слой 10 мм

1 > W 200 — пример изделий, имеющихся в продаже Данная информация приведена для удобства пользователей настоящего стандарта

7

безводного сульфата натрия (6.2.3) и промывают колонку 15—20 см3 н-гексана. Устанавливают слой н-гексана немного ниже слоя сульфата натрия.

Помещают под колонку подходящий приемник (объемом не менее 250 см3). В верхнюю часть колонки пипеткой вводят небольшой объем раствора н-гексана. содержащий 1 г масла или животного жира. Пипетка должна быть сухой, и масло не должно пройти в нижнюю часть колонки. Дают уровню масла в растворе н-гексана впитаться ниже верхней поверхности слоя сульфата натрия. Добавляют 2 см3 н-гексана и опять дают ему впитаться.

Элюируют колонку 150 см3 н-гексана. Выпаривают элюат до небольшого объема в испарителе (6.3.3) и переносят его в сосуд для взвешивания, предварительно прогретый до 110 X, охлажденный и взвешенный. Удаляют оставшийся растворитель нагревом под слабым потоком азота. Высушивают в печи при температуре 110 “С в течение 5 мин. Охлаждают в эксикаторе и взвешивают с точностью до 0.01 г. Необходимо удостовериться, что масса жира стала постоянной. Допустим, масса жира равна тА.

Отмеряют пипеткой такой же объем первоначального раствора н-гексана в другую предварительно взвешенную колбу, выпаривают, высушивают и взвешивают как описано раньше. Допустим, масса жира равна тв.

Способность поглощения жира в колонке равна (mBА) г, вычисленная с точностью до 0.01 г. Активность оксида алюминия регулируют при необходимости в несколько этапов так. чтобы способность поглощения жира в колонке была равна (0,62 ± 0.02) г животного или рафинированного растительного жира или (0,52 ± 0.02) г молочного жира.

Для проведения ряда анапизов определенного объема жира дезактивируют достаточное количество оксида алюминия (например, остающееся количество в стеклянной посуде вместимостью 500 г).

6.3 Оборудование

Применяется обычное лабораторное оборудование, а также указанное ниже.

6.3.1    Высокоскоростной смеситель.

6.3.2    Хроматографическая колонка внутренним диаметром 20 мм и длиной 300 мм с запорным краном из политетрафторэтилена (ПТФЭ).

6.3.3    Роторный испаритель (Kudema-Danish или эквивалентный) с колбой вместимостью 500 сми прикрепленной градуированной пробиркой.

6.3.4    Вата, промытая петропейным эфиром

6.4    Методика

6.4.1    Общие методы

Для общих методов см. ISO 3890-1/IDF 75-1 (приложение А).

6.4.2    Тестируемый образец

Взвешивают с точностью 0.01 г такое количество навески, чтобы получить приблизительно 0.7 г жира. Если продукты твердые, то их хорошо измельчают.

6.4.3    Экстракция жира и хлорорганических соединений

Измельчают тестируемый образец с 50 см3 ацетона (6.2.1) в высокоскоростном смесителе (6.3.1) в течение 2 мин. Добавляют 200 см3 н-гексана (6 2.2) и продолжают измельчать, пока не получат полностью измельченную пробу. Дают фазам разделиться. Декантируют максимальный объем экстракта в делительную воронку вместимостью 1 дм3 через фильтр из безводного сульфата натрия (6.2.3) на стекловате (6.3.4). Дважды промывают экстракт 500 см3 раствора сульфата натрия (6.2.4), сливая в отходы нижние водные слои и немного слоя н-гексана.

Переносят 10 см3 экстракта н-гексана в предварительно взвешенную стеклянную посуду для взвешивания и определяют экстрагированный жир в соответствии с 6 4 4. На основе вычислений по 6.4 4 переносят объем экстракта н-гексана. содержащего 0,40 г молока, сыра или молочного жира в роторный испаритель (6.3.3). Выпаривают перенесенное количество до объема 5—8 см3, разъединяют и продолжают выпаривать до 1—2 см3 на водяной бане при температуре 60—70 X под током азота.

6.4.4    Определение экстрагированного жира

Помещают 10 см3 экстракта гексана в предварительно взвешенный сосуд для взвешивания. Выпаривают досуха при температуре 60 °С под током азота. Сушат остаток в шкафу при температуре 105 X в течение 15 мин., охлаждают и взвешивают сосуд с его содержимым. Повторяют процесс сушки до тех пор. пока масса сосуда с содержимым не станет постоянной. Вычисляют количество жира в граммах на 10 см3 экстракта гексана, учитывая разницу между конечной массой (в граммах) после сушки и

ГОСТ ISO 3890-2-2013

массой (в граммах) предварительно взвешенного сосуда для взвешивания Данное определение жира не используют для вычисления содержания хлорорганических остатков.

6.4.5    Очистка

Готовят суспензию из 22 г дезактивированного оксида алюминия (6.2.5). имеющего приемлемую способность поглощения жира, в небольшом объеме н-гексана и переносят ее в хроматографическую колонку (6.3.2). Добавляют слой 10 мм безводного сульфата натрия (6.2.3) в верхнюю часть колонки и промывают колонку 15—20 см3 н-гексана Регулируют уровень н-гексана чуть ниже верхней части слоя сульфата натрия В верхнюю часть колонки переносят аликвотную часть концентрированного раствора н-гексана. содержащего 0,50 г жира (0.40 г — для масла, молока или сыра), подготовленного, как описано в 6.4.3. Колонку элюируют 150 см3 н-гексана. и элюат выпаривают примерно до 8 см3 в роторном испарителе.

При необходимости переносят в градуированную пробирку и продолжают выпаривание на водяной бане при температуре 50 °С под током азота до объема 2-3 см3. Пробирку с элюатом вынимают из водяной бани и продолжают выпаривание при температуре окружающей среды до конечного объема в

1.0 см3, затем пробирку закупоривают.

6.5    Газовая хроматография

См. ISO 3890- 1/IDF 75-1 (пункт 6.2). Относительно предварительных испытаний см. ISO 3890-1/ IDF 75-1 (разделы 10—14).

7 Метод Е. Колоночная хроматография на колонке, заполненной оксидом

алюминия

7.1    Сущность метода

(См. ссылку [8]).

Хлорорганические соединения экстрагируют из пробы, используя петролейный эфир. Определенное количество экстракта жира очищают, используя хроматографию на основе оксида алюминия точно определенной активности, с применением петролейного эфира в качестве элюирующего растворителя. Элюат выпаривают, затем исследуют ГЖХ.

7.2    Реактивы

Применяют реактивы только установленной аналитической квалификации, если не установлено иное, а также дистиллированную или деминерализованную воду или воду эквивалентной чистоты.

7.2.1    Петролейный эфир с интервалом кипения от 40 до 60 вС, перегнанный.

7.2.2    Ацетон (СН3СОСН3).

7.2.3    Сульфат натрия (N82804). гранулированный, безводный.

Нагревают при температуре 500 °С в течение 4 ч. затем охлаждают и хранят в закупоренном сосуде.

7.2.4    Песок, промытый кислотой.

Нагревают при температуре (500 ± 25) *С в течение 4 ч. затем охлаждают и хранят в закупоренном сосуде.

7.2.5    Оксид алюминия (A^Oj), нейтральный (W 200), степень активности — Super 1 или эквивалентная.

Взвешивают стеклянную посуду, не открывая Быстро добавляют к содержимому (обычно это 515 г) 27 г воды. Стеклянную посуду немедленно закрывают. Энергично встряхивают и оставляют на 24 ч. Содержимое переносят в хорошо закупоренную стеклянную посуду.

Взвешивают пустую стеклянную посуду и вычисляют содержание воды в дезактивированном оксиде алюминия. Соотношение полученных пропорций должно быть 9.5 : 0.5 (по объему). При необходимости следует отрегулировать. Проверяют активность оксида алюминия, проводя хроматографию стандартного раствора /г-ГХЦГ с контрольным жиром в соответствии с описанной ниже процедурой. Степень извлечения /f-ГХЦП так же как и удерживание жира, должно быть больше 95 %. Если степень извлечения /f-ГХЦГ слишком низкая, то необходимо увеличить содержание воды в оксиде алюминия, постепенно смешивая 0.2 части дистиллированной воды с 99.8 частями оксида алюминия (по массе).

9

ГОСТ ISO 3890-2-2013

7.3 Оборудование

Применяется обычное лабораторное оборудование, а также указанное ниже.

7.3.1    Аппарат Сокслета.

7.3.2    Роторный испаритель (Kudema-Danish или эквивалентный) с колбой вместимостью 500 см3 и прикрепленной градуированной пробиркой.

7.3.3    Высокоскоростной смеситель.

7.3.4    Центрифуга, способная вращаться с частотой 2500 об/мин.

7.3.5    Кварцевая вата

7.3.6    Хроматографическая колонка внутренним диаметром 6 мм и длиной 175 мм. имеющая выпускное отверстие внутренним диаметром 1 мм и длиной 40 мм и резервуар для растворителя внутренним диаметром 70 мм и длиной 125 мм.

7.3.7    Градуированная пробирка вместимостью 25 см3.

7.4    Методика

7.4.1    Экстрагирование жира и хлорорганических соединений

7.4.1.1    Общие методы

См. ISO 3890-1 /IDF 75-1 (приложение А).

7.4.1.2    Специальные методы

7.4.1.2.1    Безводный молочный жир

Жир нагревают до температуры около 50 °С и пропускают через сухой теплый фильтр. Жир растворяют в летролейном эфире (7.2.1) для получения раствора, содержащего 35—50 мг/см3. Для анализа используют 2 см3.

7.4.1.2.2    Молоко

В высокоскоростной смеситель (7.3.3) наливают в следующем порядке 40 см3 молока. 80 см3 ацетона (7.2.2) и 80 см3 петролейного эфира (7.2.1). Перемешивают и центрифугируют смесь с частотой вращения 2500 об/мин в течение 5 мин. Отбирают аликвотную часть, например 10 см3, верхнего слоя (петролейного эфира). Высушивают фильтрованием через сульфат натрия (7.2.3) и промывают сульфат натрия небольшим количеством петролейного эфира. Удаляют основную массу петролейного эфира в роторном испарителе (7.3.2). Регулируют объем так, чтобы была получена концентрация жира 35—50 мг/см3. Для анализа используют 2 см3 (см. также метод В. 4 4.1.2).

7.4.1.2.3    Сыр

Смешивают 20—25 г пробы с 50 см3 петролейного эфира (7.3.3) в высокоскоростном смесителе (7.2.1). Высушивают фильтрованием через сульфат натрия (7.2.3) и промывают сульфат натрия небольшим количеством петролейного эфира. Удаляют основную массу петролейного эфира в роторном испарителе (7.3.2).

Регулируют объем так. чтобы была получена концентрация жира 35—50 мг/см3. Для анализа используют 2 см3.

7.4.2 Колоночная хроматография

Небольшой тампон кварцевой ваты (7.3.5) помещают в выходное отверстие хроматографической колонки (7.3.6). Взвешивают 4.0 г дезактивированного оксида алюминия (7.2.5) и помещают его в колонку. Хорошую укладку обеспечивают, постукивая по стенкам колонки В колонку переносят 2 см3 раствора. полученного в соответствии с 7.4.1. Внутренние стенки колонки ополаскивают тремя порциями по 1 см3 петролейного эфира (7.2.1). Элюируют с 25 см3 петролейного эфира, собирают весь элюат в градуированную пробирку (7.3.7) и выпаривают до определенного объема.

Для достижения хорошей степени извлечения, в особенности //-ГХЦГ. важно использовать не менее 70 мг жира на колонке, заполненной 4.0 г оксида алюминия. Данная колонка может также аккумулировать до 100 мг жира. При необходимости анализа большего количества жира (например, когда чувствительность детекторов недостаточна) вышеупомянутое количество оксида алюминия и петролейного эфира должно быть увеличено соответствующим образом. На этапе очистки объем жира может быть постепенно увеличен до 250 см3.

7.5    Газовая хроматография

См. ISO 3890-1/IDF 75-1 (пункт 6.2). Относительно предварительных испытаний см. ISO 3890-1/ IDF 75-1 (разделы 10—14).

Ю

ГОСТ ISO 3890-2-2013

8 Метод F. Колоночная хроматография на частично дезактивированном Florisil

8.1    Сущность метода

(См. ссылки (9). (10] и (11]).

Хлорорганические соединения вместе с жиром экстрагируют из исследуемой пробы по методике, описанной в ISO 3890-1/IDF 75-1 (А.6). Экстракт выпаривают почти досуха и растворяют в петролей-ном эфире. Определенное количество экстракта жира очищают, используя хроматографию на Florisil. применяя летролейный эфир/дихлорметан в качестве элюирующего растворителя. Элюат выпаривают почти досуха, затем повторно растворяют в петролейном эфире для анализа ГЖХ.

Специальные методы разработаны для молока, сгущенного молока без сахара и сгущенного молока с сахаром.

8.2    Реактивы

Применяют реактивы только установленной аналитической квалификации, если не установлено иное, а также дистиллированную или деминерализованную воду или воду эквивалентной чистоты.

8.2.1    Петролейный эфир с интервалом кипения от 40 до 60 *С. перегнанный.

8.2.2    Дихлорметан. подвергнутый перегонке над гранулами гидроксида натрия (точка кипения 39 °С).

8.2.3    Элюирующий растворитель: смесь петролейного эфира (8.2.1) и дихлорметана (8.2.2) (4 : 1 по объему).

8.2.4    Адсорбент: Florisil 60—100 меш.

В течение ночи нагревают при температуре (550 ± 25) вС. Охлаждают и хранят в хорошо закупоренном контейнере.

Перед использованием нагревают при температуре (130 ± 2) °С в течение не менее 5 ч и добавляют 3 части дистиллированной воды к 97 частям адсорбента (по массе). Смесь встряхивают в течение 20 мин. и затем хранят в хорошо закупоренном контейнере в течение 10—12 ч. чтобы обеспечить однородное распределение воды. Используют в течение 3 дней.

8.3    Оборудование

Применяется обычное лабораторное оборудование, а также указанное ниже.

8.3.1    Роторный испаритель (Kudema-Danish или эквивалентный) с колбой вместимостью 500 сми прикрепленной градуированной пробиркой.

8.3.2    Хроматографические колонки внутренним диаметром 22 мм и длиной 600 мм с запорными кранами из политетрафторэтилена (ПТФЭ).

8.4    Методика

8.4.1    Экстрагирование жира и хлорорганических соединений

8.4.1.1    Общие методы

См. ISO 3890-1/IDF 75-1 (приложение А).

8.4.1.2    Специальные методы

8.4.1.2.1    Молоко и сгущенное молоко без сахара

Взвешивают 10 г навески в лабораторном стакане вместимостью 250 см3 и добавляют 25 г адсорбента (8.2.4). размешивают стеклянной палочкой Важно, чтобы порошок был без комков и мог пройти через узкую воронку.

8.4.1.2.2    Сгущенное молоко с сахаром

Взвешивают 10 г навески в лабораторном стакане вместимостью 250 см3. Тщательно перемешивают с 5 см3 дистиллированной воды. Добавляют 25 г адсорбента (8 2 4) и перемешивают, как описано выше.

8.4.2    Очистка на Florisil

В хроматографическую колонку (8.3.2) помещают небольшое количество стекловаты. Вливают 100 см3 петролейного эфира (8.2.1) и добавляют 25 г адсорбента (8.2.4). После заполнения колонки до определенного уровня дают растворителю стечь до высоты на 10 мм выше слоя адсорбента. Растворяют 0.5—1.0 г экстрагированного жира в 10 см3 петролейного эфира и количественно переносят его на абсорбент в колонку.

При исследовании молока или сгущенного молока (8 4.1.2) добавляют адсорбент, пропитанный молоком или сгущенным молоком, через узкую воронку на адсорбент (8.2.4) в колонке, подготовленный как описано выше. Элюируют 300 см3 элюирующего растворителя (8.2.3). Скорость элюирования не

11

ГОСТ ISO 3890-2-2013

Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном информационном указателе «Национальные стандарты», а текст изменений и поправок — в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». В случае пересмотра (замены) или отмены наслюящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет (www.gost.ru)

© Стандартинформ. 2016

В Российской Федерации настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен. тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии

III

ГОСТ ISO 3890-2-2013

Содержание

1    Область применения..................................................................1

2    Нормативные ссылки..................................................................1

3    Метод А. Жидкость-жидкостное разделение ацетонитрилом и очистка

на колонке с Florisil.....................................................................1

4    Метод В Жидкость-жидкостное разделение диметилформамидом (ДМФА)

и очистка на колонке, заполненной оксидом алюминия.......................................4

5    Метод С. Жидкость-жидкостное разделение диметилформамидом (ДМФА)

и очистка на колонке, заполненной Florisil..................................................6

6 Метод D. Колоночная хроматография на оксиде алюминия точно определенной активности.......7

7 Метод Е. Колоночная хроматография на колонке, заполненной оксидом алюминия..............9

8    Метод F. Колоночная хроматография на частично дезактивированном Florisil..................11

9    Метод G. Колоночная хроматография на частично дезактивированном силикагеле.............12

10    Метод Н. Гель-проникающая хроматография............................................14

11    Подтверждающие тесты.............................................................15

12    Дополнительные процедуры очистки...................................................22

Приложение ДА (справочное) Сведения о соответствии ссылочного международного стандарта

межгосударственному стандарту..........................................24

Библиография........................................................................24

IV

ГОСТ ISO 3890-2-2013

Введение

Международный стандарт ISO 3890/IDF 75 состоит из следующих частей под общим заголовком «Молоко и молочные продукты. Определение остаточного содержания хлорорганических соединений (пестицидов)»:

-    часть 1. Общие положения и методы экстракции;

-    часть 2. Методы очистки экстракта и подтверждение.

V

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

МОЛОКО И МОЛОЧНЫЕ ПРОДУКТЫ Определение остаточного содержания хлорорганических соединений (пестицидов)

Часть 2

Методы очистки экстракта и подтверждение

Milk and milk products Determination of residues of organochlonne compounds (pesticides) Part 2:

Test methods for crude extract punfication and confirmation

Дата введения — 2017—07—01

ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ — Применение настоящего стандарта может быть связано с использованием опасных материалов, операций и оборудования. Настоящий стандарт не определяет все проблемы безопасности, связанные с его применением. Пользователь должен установить санитарно-гигиенические требования и определить применение регулирующих ограничений до начала их использования.

1    Область применения

Настоящий стандарт устанавливает методы очистки экстрактов, полученных методами, описанными в ISO 3890-1/IDF 75-1 В настоящем стандарте также приведены рекомендуемые методы определения остаточного содержания хлорорганических соединений в молоке и молочных продуктах, а также подтверждающие тесты и процедуры очистки.

2    Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы ссылки на межгосударственные стандарты, которые являются обязательными. Для датированных ссылок применяют только указанное издание. Для недатированных ссылок применяют последнее издание ссылочного стандарта (включая все его изменения:

ISO 3890-1/1DF 75-1:2009 Milk and milk products. Determination of residues of organochlonne compounds (pesticides). Pari 1: General considerations and extraction methods (Молоко и молочные продукты. Определение остатков хлорорганических соединений (пестицидов). Часть 1. Общие положения и методы экстракции)

3    Метод А. Жидкость-жидкостное разделение ацетонитрилом и очистка

на колонке с Florisil1)

3.1 Сущность метода

(См. ссылку [3]).

Хлорорганические соединения вместе с жиром экстрагируют из пробы, применяя один из методов. описанных в ISO 3890-1/IDF 75-1. Экстракт выпаривают почти досуха, затем повторно растворяют

1 > Florisil (например, от Flondil Со) — это пример изделий, имеющихся в продаже Данная информация приведена для удобства пользователей настоящего стандарта

Издание официальное

в петролейном эфире и хлорорганические соединения выделяют с помощью ацетонитрила. После смешивания ацетонитрила с большим количеством воды хлорорганические соединения выделяют с помощью петролейного эфира Данную органическую фазу очищают хроматографированием на колонке с Florisil. используя петролейный эфир/диэтиловый эфир в качестве элюирующего растворителя. Элю-аты концентрируют и затем анализируют методом газожидкостной хроматографии (ГЖХ). Для сыра используют специальный метод.

3.2 Реактивы

Применяют реактивы только установленной аналитической квалификации, если не установлено иное, а также дистиллированную или деминерализованную воду или воду эквивалентной чистоты.

3.2.1    Петролейный эфир с температурой кипения в диапазоне от 40 до 60 °С. Перегоняют над гидроксидом калия или гидроксидом натрия в гранулах.

3.2.2    Ацетонитрил (CH3CN), насыщенный петролейным эфиром.

Для очистки смешивают 4 дм3 ацетонитрила с 1 см3 ортофосфорной кислоты и 30 г пентоксида фосфора в стеклянной колбе с круглым дном. Добавляют стеклянные шарики и перегоняют при температуре от 81 до 82 °С (температура не должна превышать 82 °С).

Очищенный ацетонитрил смешивают с петролейным эфиром перед самым началом фазы разделения.

3.2.3    Диэтиловый эфир (С2Н5ОС2Н5), не содержащий пероксидов.

Перегоняют и стабилизируют, используя 2-процентный по объему чистый этанол (С2Н5ОН).

3.2.4    Элюирующий растворитель А: смесь диэтилового эфира (3.2.3) и петролейного эфира (3.2.1) (6 : 94 по объему). Обезвоживают 10—25 г безводного сульфата натрия (3.2.6).

3.2.5    Элюирующий растворитель В: смесь диэтилового эфира (3.2.3) и петролейного эфира (3.2.1) (15:85 по объему). Обезвоживают 10—25 г безводного сульфата натрия (3.2.6).

3.2.6    Сульфат натрия (Na2S04) гранулированный, безводный.

Нагревают при температуре (500 ± 25) °С в течение 4 ч. Охлаждают и хранят в стеклянной посуде с притертой пробкой.

3.2.7    Адсорбент: Florisil. 60—100 меш.

Активируют нагреванием при температуре (650 ± 25) °С в течение 4 ч и немедленно высыпают адсорбент в стеклянную посуду с хорошо притертыми пробками, хранят в темном месте. Перед использованием нагревают до температуры 130 °С в течение не менее 5 ч.

Адсорбент должен храниться либо при температуре (130 ± 2) °С. либо при комнатной температуре в эксикаторе В последнем случае его следует нагревать до температуры (130 ± 2) °С каждые два дня.

Каждую партию адсорбента проверяют время от времени следующим образом.

Пропускают 1 см3 стандартного раствора гексана, содержащего 0.1 мг/дм3 линдана, гепта-хлорэпоксида, альдрина и дильдрина. а также 0.3 мг/дм3 эндрина. через адсорбционную колонку (см. ISO 3890-1/IDF 75-1:2009. пункт 9.3). Элюируют и выпаривают, как описано в 3.4.3. Проводят определение. используя газовую хроматографию.

Адсорбент считают удовлетворительным, если линдан, гептахлор, альдрин и гегггахлорэпоксид обнаруживают в элюирующем растворителе А (3.2.4). а дильдрин и эндрин в элюирующем растворителе В (3.2.5).

3.2.8    Раствор хлорида натрия (NaCI). 2-процентный раствор.

Перед изготовлением раствора сухой хлорид натрия нагревают при температуре (500 ± 25) *С в течение 4 ч.

3.2.9    Этанол (С2Н5ОН). чистый.

3.2.10    Оксалат натрия (Na^O^ или оксалат калия (К2С204).

3.3 Оборудование

Применяют обычное лабораторное оборудование.

3.3.1    Хроматографические колонки внутренним диаметром 20 мм и длиной 300 мм с запорными кранами из политетрафторэтилена (ПТФЭ) и дисками из пористого стекла или тампоны из стекловаты.

3.3.2    Роторный испаритель (Kudema-Danish1 2* или эквивалентный) с колбой вместимостью 500 сми прикрепленной градуированной пробиркой.

ГОСТ ISO 3890-2-2013

3.3.3    Высокоскоростной смеситель.

3.3.4    Делительные воронки вместимостью 125 и 1000 см3.

3.4    Методика

3.4.1    Экстракция жира и хлорорганических соединений

3.4.1.1    Общие методы

См. ISO 3890-1/IDF 75-1 (приложение А).

3.4.1.2    Специальный метод для сыра

Достаточное количество измельченной пробы (для выделения 3 г жира), около 2 г оксалата натрия или калия (3.2.10) и 100 см3 этанола (3.2.9) помещают в высокоскоростной смеситель (3.3.3) и смешивают в течение 2—3 мин. (если опыт обращения с продуктом показывает, что эмульсии не разрушатся при центрифугировании, то перед смешиванием добавляют 1 см3 воды на 2 г пробы). Гомогенизированную суспензию переливают в емкость центрифуги вместимостью 500 см3, добавляют 50 см3 диэти-лового эфира (3.2.3) и энергично встряхивают в течение 1 мин. Добавляют 50 см3 петролейного эфира

(3.2.1)    и энергично встряхивают в течение 1—2 мин. (или разливают в две емкости вместимостью 250 сми экстрагируют каждую путем сильного встряхивания в течение 1—2 мин. с 25 см3 петролейного эфира. Продолжают, как описано в ISO 3890-1/IDF 75-1 (А.6.3.3).

3.4.2    Жидкостное разделение

Взвешивают 1—3 г экстрагированного жира с точностью до 0,01 г, переносят в делительную воронку вместимостью 125 см3 (3.3.4) и растворяют в 15 см3 петролейного эфира (3.2.1). Добавляют 30 см3 ацетонитрила, насыщенного петролейным эфиром (3.2.2), и энергично встряхивают в течение 1—2 мин. После разделения фаз переносят нижний слой ацетонитрила в делительную воронку вместимостью 1000 см3 (3.3.4). содержащую 700 см3 раствора хлорида натрия (3.2.8) и 100 см3 петролейного эфира (3.2.1). Слой петролейного эфира, оставшийся в делительной воронке вместимостью 125 см3, энергично встряхивают три раза с порциями ацетонитрила (3.2.2) обьемом 30 см3.

Соединяют экстракты ацетонитрила в делительной воронке вместимостью 1000 см3 и осторожно встряхивают. Сливают нижнюю водную фазу во вторую делительную воронку вместимостью 1000 см3 и встряхивают ее в течение 12 с со 100 см3 петролейного эфира. Соединяют фазы петролейного эфира из обеих делительных воронок вместимостью 1000 см3. Воронки дважды промывают порциями воды или раствора хлорида натрия (3.2.8) обьемом 100 см3. Обезвоживают петролейный эфир над сульфатом натрия (3.2.6) и фильтруют в колбу роторного испарителя (3.3.2) вместимостью 500 см3 с прикрепленной градуированной пробиркой. Промывают сульфат натрия тремя порциями петролейного эфира

(3.2.1)    по 10 см3. Затем выпаривают раствор петролейного эфира до объема 10 см3, используя роторный испаритель (3.3.2).

3.4.3    Очистка на Florisil

В хроматографическую колонку (3.3.1) добавляют слой адсорбента 100 мм (3.2.7). Покрывают слоем 10 мм сульфата натрия (3.2.6) и промывают 40—50 см3 петролейного эфира (3.2.1). В колонку

(3.3.1)    пипеткой добавляют 10 см3 концентрата петролейного эфира (3 4.2), двахщы ополаскивают емкость порциями петролейного эфира обьемом примерно по 5 см3. Элюируют в колбу испарителя (3.3.2) с прикрепленной градуированной пробиркой, используя 200 см3 элюирующего растворителя А (3.2.4). Скорость элюирования не должна превышать 5 см3/мин. Сменив емкость, таким же образом элюируют, используя 200 см3 элюирующего растворителя В (3.2.5).

Выпаривают оба элюата по отдельности до заданного небольшого объема, используя роторный испаритель (3.3.2). Каждый элюат проверяют с помощью газожидкостной хроматографии. Если требуется дополнительная очистка, то она может быть проведена во второй, заново приготовленной адсорбирующей колонке или как описано в ISO 3890-1/IDF 75-1 (приложение А).

Первый элюат содержит любые ГХБ. изомеры ГХЦГ. гептахлор, гептахлорэпоксид, альдрин. ДДЕ, ДДД и ДДТ. Второй элюат содержит дильдрин и эндрин.

3.5    Газовая хроматография

См. ISO 3890-1/IDF 75-1 (пункт 6.2). Относительно предварительных испытаний см. ISO 3890-1/ IDF 75-1 (разделы 10—14).

4 Метод В. Жидкость-жидкостное разделение диметилформамидом (ДМФА) и очистка на колонке, заполненной оксидом алюминия

4.1    Сущность метода

(См. ссылки (4J, (5D-

Хлорорганические соединения вместе с жиром экстрагируют из пробы по методике, описанной в ISO 3890-1/1DF 75-1 (А.6). затем остатки разделяют, используя диметилформамид После добавления раствора сульфата натрия хлорорганические соединения далее разделяют «-гексаном. Органическую фазу очищают, применяя хроматографию на нейтральном оксиде алюминия с использованием «-гексана в качестве элюирующего растворителя Элюат выпаривают и анализируют, используя газожидкостную хроматографию (ГЖХ).

Для молока и масла описаны специальные методы.

4.2    Реактивы

Применяют реактивы только установленной аналитической квалификации, если не установлено иное, а также дистиллированную или деминерализованную воду или воду эквивалентной чистоты.

4.2.1    н-гексан (СН3(СН2)4СН3) с температурой кипения 68—70 °С.

Проверяют методом газовой хроматографии на чистоту при рабочих условиях. Перегоняют над гидроксидом калия, если необходимо.

4.2.2    Ацетон (СН3СОСН3] общего назначения, лабораторного качества.

4.2.3    Диметилформамид (ДМФА).

Проверяют н-гексановый экстракт ДМФА водного раствора ДМФА на наличие интерферирующих пиков, используя газожидкостную хроматографию. Если необходимо, повторно перегоняют растворитель и собирают фракцию с температурой кипения 152—154 "С.

4.2.4    н-гексан. насыщенный диметилформамидом.

4.2.5    Диметилформамид. насыщенный н-гексаном.

4.2.6    Песок, промытый киспотой.

Нагревают при температуре 500 °С в течение 4 ч. затем охлаждают и хранят в стеклянной посуде с притертой пробкой.

4.2.7    Сульфат натрия (Na-jSO^ гранулированный, безводный.

Нагревают при температуре 500 °С в течение 4 ч. затем охлаждают и хранят в стеклянной посуде с притертой пробкой.

4.2.8    Оксид алюминия (А1203) нейтральный, активированный.

Нагревают оксид алюминия до температуры 500 °С в течение 4 ч. затем охлаждают. Осторожно добавляют 7 частей воды к 93 частям оксида алюминия (массовая доля) и тщательно перемешивают твердую фазу в закрытом сосуде в течение не менее 90 мин. Сосуд хранят хорошо закупоренным и используют оксид алюминия в течение 10 дней.

4.2.9    Раствор сульфата натрия. 2-процентный раствор.

4.3 Оборудование

Применяют обычное лабораторное оборудование.

4.3.1    Прибор Сокслета для экстрагирования.

4.3.2    Роторный испаритель (Kudema-Danish или эквивалентный) с колбой вместимостью 500 см3 и прикрепленной градуированной пробиркой.

4.3.3    Высокоскоростной смеситель.

4.3.4    Хроматографические колонки внутренним диаметром 12 мм и длиной 300 мм с запорными кранами из политетрафторэтилена (ПТФЭ).

4.3.5    Микроколонка Snyder’).

’) Микроколонка Snyder — пример изделий, имеющихся в продаже Данная информация приведена для удобства пользователей настоящего стандарта 4

ГОСТ ISO 3890-2-2013

4.4    Методика

4.4.1    Экстракция жира и хлорорганических соединений

4.4.1.1    Общие методы

См. ISO 3890-1/IDF 75-1 (приложение А).

4.4.1.2    Специальные методы

4.4.1.2.1    Молоко

В вихревую мешалку вместимостью 250 см3 наливают в следующем порядке: 40 см3 хорошо перемешанного молока, 80 см3 ацетона (4.2.2) и 80 а.»3 н-гексана (4.2.1). Гомогенизируют смесь в течение 3 мин. Затем немедленно переливают ее в центрифужную пробирку вместимостью 250 см3, промывают лопасти мешалки 10 см3 н-гексана. затем 5 см3 воды и добавляют их в пробирку.

Пробирку вращают в центрифуге с частотой вращения 2500 об/мин в течение 5 мин. Отделяют н-гексановый слой и пропускают его через короткую колонку, заполненную безводным сульфатом натрия (4.2.7). Промывают содержимое пробирки последовательно двумя порциями н-гексана по 25 см3 и пропускают промывные воды через колонку. Объединенные экстракты концентрируют в роторном испарителе (4.3.2) примерно до 15 см3. Раствор переливают в делительную воронку вместимостью 100 см3, делают метку 25 см3 и доводят объем до 25 см3 (см. также метод 7.4.1.2.2 для молока).

4.4.1.2.2    Масло

Растворяют 5 г очищенного молочного жира (расплавленного и декантированного через фильтр) в 10 см3 н-гексана. Переносят раствор в делительную воронку вместимостью 100 см3, используя последовательно 3 порции н-гексана объемом 5 см3.

4.4.2    Разделение жира и хлорорганических соединений с применением ДМФА

Экстрагируют жир из 25 см3 раствора гексана (4 4.1), используя 10 см3 диметилформамида

(ДМФА). насыщенного н-гексаном (4.2.5) путем встряхивания в делительной воронке. Через 2—3 мин. переносят нижний слой ДМФА во вторую делительную воронку вместимостью 100 см3 (оставляя межфазную эмульсию в первой делительной воронке). Процесс экстракции раствора н-гексана повторяют еще с двумя порциями ДМФА (4.2.5) объемом по 10 см3. Соединяют экстракты ДМФА и промывают их 10 см3 н-гексана, насыщенного ДМФА (4.2.4).

Отделяют 10 см3 н-гексана и опять промывают 10 см3 ДМФА (4.2.5). Отбрасывают н-гексан и добавляют промытый ДМФА в первоначальные 30 см3 экстракта ДМФА в делительную воронку вместимостью 500 см3 (или желательно 350 см3). Добавляют 6 см3 н-гексана (4.2.1) и 200 см3 раствора сульфата натрия (4.2.9) и энергично встряхивают в течение 2 мин.

Дают отстояться в течение 20 мин. для расслоения. Собирают фазу н-гексана посредством легкого вращения. Сливают водный слой, вытирают досуха делительную воронку фильтровальной бумагой и выливают н-гексан в градуированную пробирку со шлифом, в которой должно находиться 15 см3 растворителя. Делительную воронку ополаскивают небольшим количеством н-гексана и добавляют промывную жидкость в пробирку.

Соединяют пробирку с микроколонкой Snyder (4.3.5) и выпаривают экстракт н-гексана до объема приблизительно 2 см3.

4.4.3    Очистка на колонке, заполненной оксидом алюминия с н-гексаном

Суспензию из 5 г приготовленного оксида алюминия (4.2.8) в н-гексане (4.2.1) выливают в хроматографическую колонку (4.3.4), содержащую тампон из ваты, промытой растворителем (ISO 3890-1/IDF 75-1. А.5.15). Дают оксиду алюминия осесть и покрывают его слоем 30 см3 безводного сульфата натрия (4 2.7). Сливают н-гексан до тех пор. пока мениск не достигнет верха слоя сульфата натрия. Наносят экстракт н-гексана (4.4.2) на колонку и промывают колонку порциями н-гексана объемом 2 см3.

Элюируют 50 см3 н-гексана (4.2.1) при скорости потока не более 5 см3/мин. собирая элюат в градуированную пробирку роторного испарителя (4.3.2). Элюат выпаривают до объема приблизительно 5 см3. Отсоединяют градуированную пробирку, подсоединяют микроколонку Snyder (4.3.5) и выпаривают элюат до объема 1 см3.

4.5    Газовая хроматография

См. ISO 3890-1/IDF 75-1 (пункт 6.2). Относительно предварительных испытаний см. ISO 3890-1/ IDF 75-1 (разделы 10—14).

5

1

Испаритель Kuderna-Danish — пример изделий, имеющихся в продаже Данная информация приведена для удобства пользователей настоящего стандарта

2

3