Стр. 1
 

8 страниц

Купить официальный бумажный документ с голограммой и синими печатями. подробнее

Цена на этот документ пока неизвестна. Нажмите кнопку "Купить" и сделайте заказ, и мы пришлем вам цену.

Официально распространяем нормативную документацию с 1999 года. Пробиваем чеки, платим налоги, принимаем к оплате все законные формы платежей без дополнительных процентов. Наши клиенты защищены Законом. ООО "ЦНТИ Нормоконтроль".

Наши цены ниже, чем в других местах, потому что мы работаем напрямую с поставщиками документов.

Способы доставки

  • Срочная курьерская доставка (1-3 дня)
  • Курьерская доставка (7 дней)
  • Самовывоз из московского офиса
  • Почта РФ

Распространяется на масла и смазки и устанавливает методы лабораторных испытаний на стойкость к возведению плесневых грибов:

1 - для установления грибостойкости масел и смазок при отсутствии минеральных и органических загрязнений;

2 - для установления грибостойкости смазок в условиях, имитирующих минеральные загрязнения;

3 - для установления грибостойкости масел в условиях, имитирующих минеральные загрязнения;

4 - для установления грибостойкости масел и смазок в условиях, имитирующих минеральные и органические загрязнения

Ограничение срока действия снято: Протокол № 3-93 МГС от 12.03.93 (ИУС № 5-93)

Показать даты введения Admin

Страница 1

НАЦИОНАЛЬНЫЕ СТАНДАРТЫ

СМАЗОЧНЫЕ МАТЕРИАЛЫ, ИНДУСТРИАЛЬНЫЕ МАСЛА И РОДСТВЕННЫЕ ПРОДУКТЫ

Методы анализа

Издание официальное

Страница 2

ОТ СТАНДАРТИНФОРМ

Сборник «Смазочные материалы, индустриальные масла и родственные продукты. Методы анализа» содержит стандарты, утвержденные до 1 марта 2006 т.

УДК 621.892:006.354


В стандарты внессны изменения, принятые до указанного срока.

Текущая информация о вновь утвержденных и пересмотренных стандартах, а также о принятых к ним изменениях публикуется в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты*.

Ф Стандартинформ. 2006

Страница 3

Группа Г99

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

Единая система зашиты от коррозии и старении МАСЛА И СМАЗКИ

ГОСТ

Методы лабораторных испытаний на стойкость    1    '    1

к воздействию плесневых грибов    9.052—88

Unified system of corrosion and ageing protection. Oils and greases. Laboratory test methods for mould resistance

MKC 19.(M0 75.100 ОКСТУ 0009

Дата введения 01.01.89

Настоящий стандарт распространяется на масла и смазки и устанавливает методы лабораторных испытаний на стойкость к воздействию плесневых грибов:

1    — для установления грнбостойкости масел и смазок при отсутствии минеральных и органических загрязнений;

2    — для установления грнбостой кости смазок в условиях, имитирующих минеральные загрязнения:

3    — для установления грнбостой кости масел в условиях, имитирующих минеральные загрязнения:

4    — для установления грнбостой кости масел и смазок в условиях, имитирующих минеральные и органические загрязнения.

Смазки, применяемые для оптических приборов, испытывают только методом 1.

Методы применяют при испытании масел и смазок, к которым в стандартах или технических условиях предъявляют требования грнбостой кости.

1. МЕТОД 1

1.1.    Сущность метода заключается в выдерживании образцов, зараженных волной суспензией спор грибов, в условиях, оптимальных для развития грибов, без дополнительного источника минерального и органического питания.

1.2.    Отбор образцов

1.2.1.    Масла и смазки отбирают по ГОСТ 2517 массой 10—15 г.

1.2.2.    Образцами являются масла и смазки в состоянии поставки, без специальной очистки и стерилизации.

1.2.3.    Количество параллельных образцов должно быть не менее пяти.

1.3.    Виды грибов

1.3.1.    Для испытаний применяют чистые культуры следующих видов плесневых грибов: Aspergillus niger van Tieghem

Penicillium chrvsogenum Thom Penicillium cyclopium Westling Scopulariopsis brevicaulis (Sacc.) Bainier Paecilomyces varioti Bainier

1.3.2.    Культуры грибов получают в Институте биохимии и физиологии микроорганизмов АН СССР, поддерживают периодическим пересевом и выращивают непосредственно перед испытаниями.

Издание официальное *

Перепечатка воспрещена

Страница 4

С. 2 ГОСТ 9.052-88

1.3.3. Пересев, выращивание и хранение культур грибов — по ГОСТ 9.048.

1.4.    Аппаратура, материалы и реактивы — по ГОСТ 9.048.

1.5.    Подготовка к испытаниям

1.5.1.    Посуду и материалы готовят по ГОСТ 9.048.

1.5.2.    Среды для выращивания, хранения культур грибов и для испытаний готовят по ГОСТ

9.048.

Рецептура сред приведена в таблице.

Наименование реактива

Среда 1 (Чапека-Докса с аиром)

Среда 2 (Чаиека-Докса с аиром без сахаро!М>

Среда 3 {выщелоченный агар)

Среда 4 (сусло-агар 1

Среда 5 (минеральная беи caxapoiu)

Олнозамсшенный фосфорнокислый калий, г

0.7

0,7

1,0

Двузамсщенный фосфорнокислый калин, г

0.3

0,3

Сернокислый магний, г

0,5

0.5

0,5

Азотнокислый натрий, г

2.0

2.0

3,0

Хлористый калий, г

0.5

0.5

2,0

Сернокислое железо, г

0.01

0.01

Сахароза, г

30,0

Агар-агар, г

30,0

Выщелочен

Выщелочен

30,0

Четырехбаллинговос неохмеленное пивное сусло (4 % сахара), см1

ный

30,0

ный

30.0

До 1000

Дистиллированная вода, см1 Водопроводная вода, см5

До 1000

До 1000

1.5.3 Чистые культуры грибов пересевают и выращивают по ГОСТ 9.048. используя грибы, приведенные в п. 1.3.1.

1.5.4.    Для размещения образцов масел в чашку Петри наливают 20—30 см' среды 3 и дают ей застыть. В застывшей среде просверливают пять лунок глубиной около 5 мм с помощью стерильного сверла диаметром 10 мм и наливают образцы масел на 1 мм ниже уровня среды.

Образцы смазок наносят на предметные стекла, покрывая всю поверхность слоем 1,5—2.0 мм, и помешают в чашки Петри.

1.5.5.    Контроль жизнеспособности спор грибов проводят по ГОСТ 9.048.

Для контроля жизнеспособности спор грибов в чашку Петри наливают среду 1 или 4 в количестве 20—30 см ' и дают ей застыть.

1.6. Проведение испытаний

1.6.1.    Водную суспензию спор грибов готовят по ГОСТ 9.048, используя грибы, выращенные, как указано в п. 1.5.3.

1.6.2.    Предметные стекла в чашках Петри, чашки Петри с образцами масел помещают в бокс. 11оверхность образцов заражают водной суспензией спор грибов с помощью пульверизатора, не допуская слияния капель.

1.6.3.    Образцы масел и смазок после заражения выдерживают 1—2 ч при температуре (25± 10) *С.

1.6.4.    Предметные стекла в чашках Петри и чашки Петри с зараженными образцами и средами помешают в эксикатор, на дно которого налита вода. Эксикатор устанавливают в термостат с температурой (29+2) *С.

1.6.5.    Образцы выдерживают в термостате 56 сут.

1.6.6.    Через 3—7 сут после начала испытаний осматривают контрольную чашку Петри. Если на поверхности среды развитие грибов не наблюдается, споры грибов считают нежизнеспособными. Испытания прекращают и повторяют их на новых образцах с вновь приготовленной суспензией спор из новой партии грибов.

4

Страница 5

ГОСТ 9.052-88 С. 3

1.6.7.    Через 28 сут производят промежуточный осмотр образцов. Испытания образцов, па которых обнаруживают развитие грибов, прекращают.

1.6.8.    По окончании испытаний предметные стекла в чашках Петри и чашки Петри извлекают из эксикатора и осматривают образцы.

1.7. Обработка результатов

1.7.1.    Образцы смазок и масел осматривают под микроскопом при 50- 60-кратном увеличении.

1.7.2.    Масла и смазки считают грибостойкими при отсутствии развития грибов на всех испытанных образцах.

2.    МЕТОД 2

2.1.    Сущность метода заключается в выдерживании образцов, зараженных суспензией спор грибов в водном растворе минеральных солей, в условиях, оптимальных для развития грибов, на среде с дополнительным источником минерального питания.

2.2.    Отбор образцов — по п. 1.2.

2.3.    Виды грибов — по п. 1.3.

2.4.    Аппаратура, материалы и реактивы — по ГОСТ 9.048.

2.5.    Подготовка к испытаниям — по пп. 1.5.1 —1.5.3, 1.5.5.

2.5.1.    Для размещения образцов смазок среду 2 наливают в чашку Петри в количестве 20—30 см3 и дают ей застыть.

2.6.    Проведение испытаний

2.6.1.    Суспензию спор грибов в среде 5 готовят по ГОСТ 9.048.

2.6.2.    Смазки наносят скальпелем в количестве пяти образцов размером 1010 мм толщиной 1.5—2,0 мм на поверхность среды в чашку Петри, подготовленную, как указано в п. 2.5.1.

2.6.3.    Дальнейший порядок проведения испытаний соответствует требованиям пп. 1.6.2—1.6.4.

2.6.4.    Образцы выдерживают в течение 28 сут.

2.6.5.    Дальнейший порядок проведения испытаний — по пп. 1.6.6—1.6.8 с промежуточным осмотром образцов через 14 сут.

2.7.    Обработка результатов — по пп. 1.7.1, 17.2.

3.    МЕТОД 3

3.1.    Сущность метода заключается в выдерживании образцов, заряженных суспензией спор грибов в водном растворе минеральных солей, в условиях, оптимальных для развития грибов, на среде с дополнительным источником минерального питания.

3.2.    Отбор образцов — по п. 1.2.

3.3.    Виды грибов — по п. 1.3.

3.4.    Аппаратура, материалы и реактивы — по ГОСТ 9.048.

3.5.    Подготовка к испытаниям — по пп. 1.5.1 —1.5.3 и 1.5.5.

3.5.1.    Дтя размещения образцов масел готовят пробирки с 2—3 см3 суспензии спор грибов в среде 5.

3.5.2.    Контролем служит суспензия спор грибов в среде 5.

3.6.    Проведение испытаний

3.6.1.    Суспензию спор грибов в среде 5 готовят по ГОСТ 9.048.

3.6.2.    Образцы масел в количестве 2 см! вносят не менее чем в пять пробирок, приготовленных, как указано в п. 3.5.1.

3.6.3.    Пробирки помещают в наклонном положении под углом 30" и выдерживают в термостате при температуре (29±2) ’С.

3.6.4.    Пробирки с образцами выдерживают в термостате 10 сут.

3.6.5.    Через 5 и 7 сут осматривают образцы. Допускается отбирать пробы минеральной среды из пробирок дня оценки грнбостойкости биолюминесцентным методом, при этом пробирки с образцами выдерживают в термостате 3 и 5 сут.

При появлении признаков развития грибов в образцах испытания прекращают.

3.6.6.    По окончании испытаний пробирки с образцами извлекают из термостата и осматривают невооруженным глазом или с помощью лупы при 2.5—5.0-кратном увеличении.

3.7. Обрабогка результатов

5

Страница 6

С. 4 ГОСТ 9.052-88

3.7.1.    Масла считаются грибостойкими, если отсутствует развитие грибов на всех испытанных образцах (отсутствует пленка на границе раздела среда—масло, в пробирках среда прозрачна и не пигментирована, нет осадка).

3.7.2.    Масла считаются не стойкими к плесневым грибам, если на образцах наблюдается развитие грибов, признаком которого служит образование пленки на границе раздела среда — масло, помутнение и пигментация среды, образование осадка.

3.7.3.    Допускается оценивать грибостой кость масел бнодюминеснешгным методом, приведенным в приложении.

4. МЕТОД 4

4.1.    Сущность метода заключается в выдерживании образцов, зараженных суспензией спор грибов в водном растворе минеральных солей, в условиях, оптимальных для развития грибов, на среде с дополнительным источником минерального и органического питания.

4.2.    Отбор образцов — по п. 1.2.

4.3.    Виды грибов — по п. 1.3.

4.4.    Аппаратура, материалы и реактивы — по ГОСТ 9.048.

4.5.    Подготовка к испытаниям — по пп. 1.5.1 —1.5.3, 1.5.5.

4.5.1.    Для размещения образцов смазок готовят чашки Петри, как указано в п. 2.5.1, используя среду 1 или 4.

4.5.2.    Для размещения образцов масел готовят лунки, как указано в п. 1.5.4. используя среду 1 или 4.

4.6.    Проведение испытаний — по п. 2.6.

4.6.1.    Образцы выдерживают в термостате в условиях, приведенных в п. 1.6.4. 14 сут.

4.6.2.    Промежуточный осмотр образцов производят через 7 сут после начала испытаний.

4.7.    Обработка результатов — по пп. 1.7.1 и 1.7.2.

5. ТРЕБОВАНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ - по ГОСТ9.048

ПРИЛОЖЕНИЕ

Обязательное

БИОЛЮМИНЕСЦЕНТНЫЙ МЕТОД ОЦЕНКИ ГРИБОСТОЙ КОСТИ

Сущность метода заключается в определении количества внутриклеточной аденозин-5-трифосфорной кислоты динатриевой соли (АТФ) в минеральной среде после испытания масел на фнбостойкость (п. 3.6.5) с помощью специфической ферментативной хемилюмннссцентной реакции с использованием люциферин-лю-циферазной системы светляков. Интенсивность излучаемого свечения прямо пропорциональна концентрации АТФ. Концентрация АТФ пропорциональна количеству живых клеток, гак как ее содержание во всех типах живых клеток примерно одинаково и составляет 1 — 10 мг/г сухого веса. Этот факт является основой биолюми-неснснтното метода определения биомассы.

1. Аппаратура, материалы и реактивы

Хемилюминометр медицинский ДЛИ 31.560.000, предназначенный для измерения интенсивности сверхслабого свечения в области спектра 400—600 нм. Допускается использовать другие приборы аналогичного назначения, обеспечивающие измерение световых потоков от 10* до 10® квант/с.

Весы для статического взвешивания по ГОСТ 29329.

Термостат, обеспечивающий температуру нагрева до 200 ’С.

Холодильник бытовой электрический по ГОСТ 16317.

Дозатор для отбора проб 0.1 см3.

Лабораторный рН-метр.

Пробирки стеклянные по ГОСТ 25336.

Колбы цилиндрические мензурные вместимостью 25 см3 по ГОСТ 1770.

Пипетки вместимостью I. 10 см3.

Адснозин-5'-трифосфорной кислоты динагриевая соль. 3-водная (АТФ).

Люцифераза светляков.

Люциферин.

Диметилсульфоксид (ДМСО), х. ч.

Трис-(оксимстил)-аминомстан. х. ч.

Кислота уксусная, х. ч. по ГОСТ 61.

6

Страница 7

ГОСТ 9.052-88 С. 5

Магний сернокислый. 7-водный, х. ч. по ГОСТ 4523.

Соль динатриевая этилендиамин —    .V. N\ N'— тстрауксусной КИСЛОТЫ. 2-водная (трилон Б) (ЭДТА)

по ГОСТ 10652.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

2. Подготовка к испытаниям

2.1.    Стерилизуют посуду по ГОСТ 9.048.

2.2.    Гоговяг расгвор АТФ 1 ммоль/дм3: 13,8 мг АТФ помешают в мерную колбу вместимостью 25 см5, доводят до метки дистиллированной водой и перемешивают до полного растворения. Раствор АТФ 1 ммоль/дм ' разливают на порпии объемом I см1 и хранят при температуре минус 20 ‘С. В замороженном виде раствор АТФ допускается хранить не более 3 мес.

2.3.    Готовят стандаргный раствор АТФ 10 мкмоль/дм3: порцию раствора АТФ 1 ммоль/дм3 (по п. 2.2) размораживают, отбирают с помощью дозатора 0,1 см3 раствора и помещают его в пробирку, содержащую 10 см ' дистиллированной воды. Раствор АТФ 10 мкмоль/дм3 готовят непосредственно перед применением.

2.4.    Готовят 20%-ный расгвор уксусной кислоты: 10 см5 уксусной кислоты разбавляют 40 см ’ дистиллированной воды.

2.5.    Готовят 0.1 моль/дм3 трис-аиетатный буферный раствор с рН-7,6, содержащий 10 ммоль/дм3 сернокислого магния. 2 ммоль/дм3 ЭДТА: в мерную колбу вместимостью 50 см3 загружают 0.605 г трис-(оксиметил)-аминометана. 0.123 г сернокислого магния, 0,036 г ЭДТА. доводят до метки дистиллированной водой и перемешивают до полного растворения. Затем все содержимое колбы переносят в стакан вместимостью 100 см1 и титруют 20%-ным раствором уксусной кислоты до рН-7,8.

2.6.    Готовят раствор люпиферазы: 10 мг люпиферазы растворяют в 10 см3 0,1 моль/дм3 трис-аиетатном буферном растворе (п. 2.5). Приготовленный расгвор люпиферазы хранят во льду.

2.7.    Готовят раствор люциферина: 3 мг люциферина растворяют в 10 см3 0,1 моль/дм3 трис-ацетатного буферного раствора (п. 2.5).

2.8.    Готовят экстракт клеток: отбирают из пробирок с образцами после выдержки их в термостате 3 и 5 суг (п. 3.6.5) пробу минеральной среды объемом 0.1 см3 и добавляют ее в пробирку к 0.9 см3 димегилсульфоксида (ДМСО). Смесь перемешивают вегряхиванием в течение 1—2 мин. Экстракт пригоден для анализа в течение 1 сут.

3.    Проведение испытаний

3.1.    Помещают в кювету люминомсгра с помошью дозатора последовательно 0,1 см3 раствора люциферина, 0,1 см3 раствора люпиферазы. 0,7 см3 трисацетатного буферного раствора и регистрируют интенсивность фонового свечения 1^и в милливольтах.

3.2.    Добавляют в ту же кювету дозатором 0,1 см3 экстракта клеток (п. 2.8), перемешивают и регистрируют сигнал интснсивносги люминесценции /,.

3.3.    Добавляют в ту же кювету 0.02 см3 стандартного раствора АГФ (п. 2.3) и регистрируют сигнал интенсивности люминесценции /,.

4.    Обработка результатов

4.1.    Интенсивность люминесценции образца U^) в милливольтах вычисляют по формуле

А-^фои-    М

4.2.    Интенсивность люминесценции стандартного раствора АТФ (/с1) в милливольтах вычисляют по формуле

Wj-A    (2)

4.3.    Концентрация АТФ (АТФ^ в микромолях в образце вычисляют по формуле

’ К-, IАТФ1 10

сU    - •    <з>

где V — объем экстракта клеток, равный 0,1 см3;

К, — объем    реакционной    смеси до добавления стандартного раствора АТФ,    равный    1    см3;

V2 — объем    реакционной смеси после добавления стандартного раствора    АТФ.    равный    1.02 см3;

Va — объем    добавленного    стандартного раствора АТФ. равный 0,02 см3;

(АТФ|СТ — концентрация АТФ    в стандартном растворе, равная 10 мкмоль;

10 — коэффициент, учитывающий разбавление пробы образна при экстракции клеток диметнлеуль-фоксидом в 10 раз.

При упрощении формула (3) приобретает вид:

АТФо01> = ^2.19,6.

СТ

4.4.    Масла являются грибостойкими, если концентрация АТФ меньше или равна 10-7 моль, масла не грибостойкн. если концентрация АТФ в образцах больше И)”7 моль.

Страница 8

С. 6 ГОСТ 9.052-88

ИНФОРМАЦИОННЫЕ ДАННЫЕ

1.    РАЗРАБОТАН И ВНЕСЕН Министерством высшего и среднего специального образования СССР

2.    УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Государственного комитета СССР но стандартам от 25.03.88 № 754

3.    ВЗАМЕН ГОСТ9.052-75

4. ССЫЛОЧНЫЕ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИЕ ДОКУМЕНТЫ

Обозначение НТД. ни коюрий дана ссылка

Номер пункта, подпункта, приложения

ГОСТ 9.048-89

1.3.3, 1.4. 1.5.1. 1.5.2, 1.5.3. 1.6.1. 2.4. 2.6.1, 3.4, 3.6.1. 4.4. приложение

ГОСТ 61-75

Приложение

ГОСТ 1770-74

Приложение

ГОСТ 2517-85

1.2.1

ГОСТ 4523-77

Приложение

ГОСТ 6709-72

Приложение

ГОСТ 10652-73

Приложение

ГОСТ 16317-87

Приложение

ГОСТ 25336-82

Приложение

ГОСТ 29329-92

Приложение

5. Ограничение срока действия снято по протоколу № 3—93 Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации (ИУС 5-6—93)

6. ПЕРЕИЗДАНИЕ

Заменяет ГОСТ 9.052-75