МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СОВЕТ ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ, МЕТРОЛОГИИ И СЕРТИФИКАЦИИ

(МГС)

INTERSTATE COUNCIL FOR STANDARDIZATION, METROLOGY AND CERTIFICATION

(ISC)

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ

СТАНДАРТ

ВЕЩЕСТВА ПОВЕРХНОСТНО-АКТИВНЫЕ

Метод определения фитотоксичности на семенах высших растений

Издание официальное

Москва

Стандартинформ

2016

Предисловие

Цели, основные принципы и порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0-2015 «Межгосударственная система стандартизации. Основные положения» и ГОСТ 1.2-2015 «Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены»

Сведения о стандарте

1    РАЗРАБОТАН Обществом с ограниченной ответственностью «Научно-исследовательский институт бытовой химии «Росса» (ООО «Росса НИИБХ»), Техническим комитетом по стандартизации ТК 354 «Бытовая химия» и ООО «НПФ ВНИИПАВ и СП»

2    ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК354 «Бытовая химия»

3    ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (прокол № 87-П от20 апреля 2016 г.)

За принятие проголосовали:

Краткое наименование страны по МК (ИСО 3166) 004—97 Код страны по МК (ИСО 3166) 004—97 Сокращенное наименование национального органа по стандартизации Армения AM Минэкономики Республики Армения Беларусь BY Госстандарт Республики Беларусь Казахстан KZ Госстандарт Республики Казахстан Киргизия KG Кыргызстандарт Россия RU Росстандарт Таджикистан TJ Таджикстандарт

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 30 июня 2016 г. № 760-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 33777-2016 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 января 2017 г.

5 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном информационном указателе «Национальные стандарты», а текст изменений и поправок — в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети «Интернет» (www.gost.ru)

©Стандартинформ, 2016

В Российской Федерации настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии

УДК: 661.185.543:542:006.354

МКС 71.040.40 71.100.40

Ключевые слова: поверхностно-активные вещества, фитотоксичность, фактор разбавления, класс фитотоксичности

Сдано в набор 06.07.2016. Редактор А.Л. Волкова Технический редактор В.Ю. Фотиева Корректор В.И. Баренцева Компьютерная верстка А.Н. Золотаревой Подписано в печать 26.07.2016. Формат 60x84^. Гарнитура Ариал.

Уел. печ. л. 1,40. Уч.-изд. л. 1,20. Тираж 27 экз. Зак. 1788. Подготовлено на основе электронной версии, предоставленной разработчиком стандарта

Издано и отпечатано во ФГУП «СТАНДАРТИНФОРМ», 123995 Москва, Гранатный пер., 4. www.gostinfo.ru    info@gostinfo.ru

ГОСТ 33777-2016

Содержание

1    Область применения...................................................1

2    Нормативные ссылки..................................................1

3    Термины и определения................................................2

4    Общие указания......................................................2

5    Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы и реактивы................3

6    Подготовка к выполнению испытаний........................................3

7    Выполнение испытаний.................................................4

8    Обработка результатов испытаний..........................................4

Приложение А (обязательное) Определение класса фитотоксичности ПАВ.................6

Приложение Б (обязательное) Форма протокола определения показателей фитотоксичности.....7

ГОСТ 33777-2016

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

ВЕЩЕСТВА ПОВЕРХНОСТНО-АКТИВНЫЕ Метод определения фитотоксичности на семенах высших растений

Surface-active agents. Method for determination of phytotoxicity for higher plants seeds

Дата введения —2017—01—01

1    Область применения

Настоящий стандарт распространяется на анионные, неионогенные, катионные и амфолитные поверхностно-активные вещества (далее — ПАВ) и их смеси и устанавливает метод определения класса фитотоксичности ПАВ.

Сущность метода заключается в графическом определении пороговой массовой концентрации (ПК) испытуемого ПАВ в растворе, при которой среднее значение длин главных корней семян тест-растений равно среднему значению длин корней семян тест-растений в питьевой воде.

2    Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие межгосударственные стандарты:

ГОСТ OIML R 76-1—2011 Государственная система обеспечения единства измерений. Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания

ГОСТ OIML R 111-1—2009 Государственная система обеспечения единства измерений. Гири классов Е₂,    F₂,    М₁.₂,    М₂,    М₂.₃ и М₃. Часть 1. Метрологические и технические требования

ГОСТ 427-75 Линейки измерительные металлические. Технические условия ГОСТ 1770-74 (ИСО 1042—83, ИСО 4788—80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия

ГОСТ 12038-84 Семена сельскохозяйственных культур. Методы определения всхожести ГОСТ 21241-89 Пинцеты медицинские. Общие технические требования и методы испытаний ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ 27025-86 Реактивы. Общие указания по проведению испытаний

ГОСТ 28498-90 Термометры жидкостные стеклянные. Общие технические требования. Методы испытаний

ГОСТ 28950-91 Инструменты чертежные. Общие технические требования и методы испытания ГОСТ 29169-91 (ИСО 648—77) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки с одной отметкой ГОСТ 32509-2013 Вещества поверхностно-активные. Метод определения биоразлагаемости в водной среде

Примечание — При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодному информационному указателю «Националь-ные стандарты», который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по выпускам ежемесячного информационного указателя «Национальные стандарты» за текущий год. Если ссылочный стандарт заменен (изме-

Издание официальное

нен), то при пользовании настоящим стандартом, следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

3 Термины и определения

В настоящем стандарте применены следующие термины с соответствующими определениями:

3.1    фитотоксичность: Способностьхимическихвеществ (вт. ч. ПАВ), растворенных в воде, угнетать (ингибировать) прорастание семян высших растений.

3.2    область угнетения прорастания семян: Область значений массовых концентраций водных растворов испытуемого ПАВ, в которой средние значения длин главных проросших корней меньше, чем в питьевой воде.

Примечание — Для углеводородных ПАВ область угнетения прорастания семян тест-растений наблюдается в области массовых концентраций ПАВ в водном растворе, обуславливающих появление мицелл (т. н. ККМ), а именно 10—300 мг/дм³.

3.3    область стимулирования прорастания семян: Область значений массовых концентраций водных растворов испытуемого ПАВ, в которой средние значения длин главных проросших корней больше, чем в питьевой воде.

Примечание — Для отдельных углеводородных ПАВ область стимулирования наблюдается в области массовых концентраций 2—50 мг/дм³ (в области достижения предельной адсорбции молекул ПАВ на границе вода—воздух).

3.4    тест-объект: Семена высших растений (рисунок 1).

Примечание — Для оценки фитотоксичности используют семена двух видов высших растений: одного однодольного и одного двудольного. В качестве однодольного растения используют овес (Avena sativa), в качестве двудольного — редьку масличную (Brassica гара).

1 — проростки; 2 — корни; 3 — главный корень Рисунок 1

3.5    главный корень: Корень максимальной длины.

3.6    пороговая массовая концентрация, ПК, мг/дм³: Минимальная массовая концентрация ПАВ в воде замачивания, при которой проявляется фитотоксический эффект.

Примечание — ПК рассчитывают по активному веществу ПАВ (индивидуальных или технических).

3.7    фитотоксический эффект: Угнетение роста корней семян растений в растворе испытуемого ПАВ по сравнению с проращиванием семян техже растений в питьевой воде.

3.8    коэффициент разбавления, K_R: Кратность разбавления раствора испытуемого ПАВ с массовой концентрацией 10ОО мг/дм³ до значения ПК.

4 Общие указания

4.1    Общие указания по проведению испытаний — по ГОСТ27025.

4.2    Допускается применение других средств измерений с метрологическими характеристиками и оборудования с техническими характеристиками не хуже, а также реактивов по качеству не ниже указанных в настоящем стандарте.

2

ГОСТ 33777-2016

4.3 При выполнении испытаний в лаборатории должны быть соблюдены следующие условия:

-    температура окружающего воздуха в помещении: (22 + 1) °С;

-    температура в термостате: (22 + 1) °С;

-    атмосферное давление: (84—106) кПа;

-    относительная влажность: 60 %—80 %.

5    Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы и реактивы

Весы неавтоматического действия с неавтоматическим установлением показаний высокого (II) класса точности с действительной ценой деления 0,05 мг и максимальной нагрузкой 200 г по ГОСТ OIMLR 76-1.

Набор гирь (1 г — 100 r)F, поГОСТ OIMLR 111-1.

Термостат, обеспечивающий поддержание температуры в пределах от 20 °С до 30 °С.

Термометр жидкостный стеклянный с диапазоном измерений температуры от 0 °С до 100 °С и ценой деления шкалы 1 °С по ГОСТ 28498.

Колба 2-100-2 по ГОСТ 1770.

Пипетки 2-2-2,2-2-50 по ГОСТ 29169.

Чашка Петри ЧБН-1—100 по ГОСТ 25336.

Бумага листовая для офисной техники.

Пинцет по ГОСТ 21241.

Линейка по ГОСТ 427.

Часы.

Кронциркуль разметочный по ГОСТ 28950.

Вода питьевая.

Семена овса, используемые для сыроедения, по действующей технической документации.

Семена редьки масличной по действующей технической документации.

6    Подготовка к выполнению испытаний

6.1    Приготовление растворов испытуемого ПАВ

Необходимые для испытания растворы ПАВ с массовой концентрацией от 1000 мг/дм³до 1 мг/дм³ (приблизительно) готовят следующим образом: из испытуемого ПАВ готовят раствор с массовой концентрацией 1000 мг/дм³.

Затем пипеткой 2-2-50 отмеряют 50 см³ приготовленный раствор, помещают в мерную колбу вместимостью 100 см³, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. Получают раствор с массовой концентрацией ПАВ 500 мг/дм³.

Пипеткой 2-2-50 вновь отмеряют 50 см³ полученного раствора с массовой концентрацией ПАВ 500 мг/дм³, помещают в следующую колбу вместимостью 100 см³, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. Получают раствор с массовой концентрацией 250 мг/дм³.

Аналогичным образом готовят остальные растворы с массовой концентрацией 125,0 мг/дм³; 62,5 мг/дм³; 31,2 мг/дм³; 15,6 мг/дм³; 7,8 мг/дм³; 3,9 мг/дм³; 2,0 мг/дм³; 1,0 мг/дм³.

При расчете массы навески для приготовления растворов учитывают массовую долю основного вещества ПАВ, определяемую в соответствии с нормативным или техническим документом.

Для приготовления растворов используют питьевую воду.

6.2    Подготовка семян

Для испытаний используют неповрежденные, недеформированные, непротравленные семена овса и редьки масличной, имеющие всхожесть не менее 95 %.

Семена растений проверяют на всхожесть по ГОСТ 12038.

Отбирают по 120—180 семян каждого вида растений, однородных по форме и имеющих разброс по массе ±10 %.

6.3    Подготовка чашек Петри

Для испытаний используют 12 чашек Петри: одна — контрольная (с питьевой водой) и одиннадцать — с растворами испытуемого ПАВ, приготовленными по 6.1.

Перед каждым испытанием чашки Петри обрабатывают раствором перманганата калия с массовой долей 1 % (или хромовой смесью) и промывают питьевой водой.

з

Примечание — При испытаниях на фитотоксичность средств, содержащих перфтор ПАВ (или ПАВ других элементоорганических соединений), используют одноразовые чашки Петри.

7 Выполнение испытаний

В каждую чашку, покрытую одним слоем бумаги, с помощью пинцета помещают по 10—15 отобранных по 6.2 семян овса. Затем в каждую из одиннадцати чашек пипеткой 2-2-2 приливают 2 см³ раствора испытуемого ПАВ определенной концентрации, приготовленного по 6.1, в одну из чашек— питьевую воду (контрольный опыт). Раствор (или вода) должен покрывать только половину каждого семени.

Чашки Петри с увлажненными семенами помещают в термостат (или в помещение) с контролируемой температурой. Испытания проводят при температуре (22,0 + 0,5) °С. Длительность испытаний — 3 сут до появления главного корня семени.

По истечении срока экспозиции проросшие семена из чашек Петри помещают на бумагу и измеряют длины (/,) главных корней с помощью разметочного кронциркуля и линейки.

Результаты измерений оформляют в виде таблицы 1.

Таблица 1

№ чашек с семенами 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 Массовая концентрация раствора испытуемого ПАВ, мг/дм3 (р() 0 1000 500 250 125 62,5 31,2 15,6 7,8 3,9 1,95 1 1д(Р/) Средняя длина корней (//ср)*, мм, в конце испытаний (через 72 ч) /1 k и '5 h ^9 ^10 /ц * //ср вычисляют по формуле /. =2^, ,ср п ’ где /(- — длина главного корня каждого семени в чашке, мм; ]Г/, — сумма длин главных корней; п — количество семян в чашке

Аналогично проводят испытание с семенами редьки масличной.

8 Обработка результатов испытаний

8.1 Критерии оценки результатов испытаний

Изменения длин главных корней проросших семян тест-растений в контролируемых условиях в водных растворах ПАВ обусловлены адсорбцией молекул ПАВ на поверхностях смачиваемых семян и описываются зависимостями, аналогичными зависимостям адсорбции молекул ПАВ от концентрации ПАВ на границе вода—воздух

где /,- — длина проросшего корня в водном растворе ПАВ, мм; р,- — массовая концентрация водного раствора ПАВ, мг/дм³; а — поверхностное натяжение водного раствора ПАВ, мДж/м².

Угнетение прорастания семян наблюдается при концентрациях ПАВ от 0,1 до 0,5 критической концентрации мицеллообразования, т. е. в интервале 10—500 мг/дм³.

8.2 Определение пороговой массовой концентрации (ПК)

Пороговую массовую концентрацию (ПК, мг/дм³) определяют графически (рисунок2). По результатам испытаний (таблица 1) строят зависимость /_/ = f(lgp_/).

Параллельно оси (/д р) проводят прямую /₀ линию контроля.

От точки пересечения /₍и /₀ (по точкам) строят прямую до оси ординат (Ig р).

4

ГОСТ 33777-2016

Область пересечения прямых /,• и /₀ соответствует lg (ПК). По значению 1д (ПК) вычисляют значение

ПК.

1 — зона стимулирования прорастания семян; 2 — зона ингибирования прорастания семян

Рисунок 2

По значению ПК и максимальной массовой концентрации (1000 мг/дм³) ПАВ рассчитывают коэффициент разбавления (K_R) lg р мг/дм³

Результаты испытаний приводят в протоколе испытаний (приложение Б).

По величине K_R, с учетом класса биоразлагаемости ПАВ (определяется по ГОСТ 32509) устанавливают класс фитотоксичности ПАВ (приложение А).

5

Приложение А (обязательное)

Определение класса фитотоксичности ПАВ

По величине коэффициента разбавления (K_R) с учетом биоразлагаемости ПАВ устанавливают класс фитотоксичности ПАВ.

Таблица А.1

Коэффициент Класс фитотоксичности 1-й малоопасные 2-й умеренно опасные З-й опасные 4-й чрезвычайно опасные разбавления, KR Более 150 Быстро Быстро Умеренно Медленно разлагаемые разлагаемые разлагаемые разлагаемые 16—150 Быстро Умеренно Медленно Чрезвычайно разлагаемые разлагаемые разлагаемые медленно разлагаемые 6—15 Умеренно Медленно Чрезвычайно Чрезвычайно разлагаемые разлагаемые медленно медленно разлагаемые разлагаемые Менее 5 Медленно Чрезвычайно Чрезвычайно Чрезвычайно разлагаемые медленно медленно медленно разлагаемые разлагаемые разлагаемые

6

ГОСТ 33777-2016

Приложение Б (обязательное)

Форма протокола определения показателей фитотоксичности

Испытательный центр АТТЕСТАТ АККРЕДИТАЦИИ ИСПЫТАТЕЛЬНОЙ ЛАБОРАТОРИИ (ЦЕНТРА)

№ РОСС    Действителен    до

Утверждаю: Руководитель Испытательной лаборатории (центра) «_»_20    г.

ПРОТОКОЛ ИСПЫТАНИЙ №

ПАВ по показателям фитотоксичности

Срок действия протокола до

1.    Производитель (и/или заказчик) и его адрес.

2.    Характеристика образца:

-    наименование продукции;

-    обозначение нормативной или технической документации;

-    состав (% масс.).

3.    Нормативные или технические документы, на соответствие которым производятся испытания.

4.    Номер партии (акт отбора образца).

5.    Дата получения образца.

6.    Дата проведения испытаний.

7.    Условия проведения испытаний (в соответствии с настоящим стандартом).

Настоящий протокол распространяется на образец, имеющий состав, указанный в паспорте.

При изменении состава продукта или технологии его производства, испытания должны быть проведены заново.

8.    Результаты испытаний

8.1 Показатели фитотоксичности испытуемого ПАВ представлены в таблице Б.1.

Таблица Б.1

Наименование показателя Единицы измерения Результат испытаний Наименование оборудования и средств измерений ig (пк) ПК мг/дм3 Kr —

8.2 Класс фитотоксичности определен на основании приложения А (обязательного) к настоящему ГОСТ. Результаты определения представлены в таблице Б.2.

Таблица Б.2

Коэффициент разбавления {KR) Класс биоразлагаемости Класс фитотоксичности

9. Заключение.

Наименование ПАВ; изготовитель; ТУ или НД

-    относится к......классу фитотоксичности по ГОСТ........;

-    допускается (не допускается) для обращения на рынке без ограничений (с ограничениями). Исполнители:

7