МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СОВЕТ ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ, МЕТРОЛОГИИ И СЕРТИФИКАЦИИ

(МГС)

INTERSTATE COUNCIL FOR STANDARDIZATION, METROLOGY AND CERTIFICATION

(ISC)

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ

СТАНДАРТ

Продукция алкогольная и сырье для ее производства ИДЕНТИФИКАЦИЯ Метод определения отношения изотопов ¹³С/¹²С спиртов и сахаров в винах и суслах

Издание официальное

Предисловие

Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0-92 «Межгосударственная система стандартизации. Основные положения» и ГОСТ 1.2-2009 «Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные. правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, применения, обновления и отмены»

Сведения о стандарте

1    РАЗРАБОТАН Государственным научным учреждением Всерос-сийским научно-исследовательским институтом пивоваренной, безалкоголь-ной и винодельческой промышленности Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИИПБиВП Россельхозакадемии)

2    ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии

3    ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 30 мая 2014 г. № 67-П)

За принятие проголосовали:

Краткое наименование страны no МК (ИСО 3166) 004-97 Код страны по МК (ИСО 3166) 004-97 Сокращенное наименование национального органа по стандартизации Армения AM Минэкономики Республики Армения Беларусь BY Госстандарт Республики Беларусь Киргизия KG Кыргызстандарт Молдова MD Молдова-Стандарт Россия RU Росстандарт Украина UA Минэкономразвития Украины

4    Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 25 июня 2014 г. № 669-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 32710-2014 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 января 2016 г.

Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 18 ноября 2014 г. № 1649-ст дата введения в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации межгосударственного стандарта ГОСТ 32710-2014 перенесена с 1 января 2016 г. на 1 января 2015 г.

5    ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

Информация об изменениях к настоящему cmamkipmy публикуется в еже.ч*)ном информационном указателе «Национальные стандарты», а текст изменений и поправок в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». В случае пересмотра <замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячном информационном указателе «Национальные сташУарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в шн/юрмацион-НОб системе общего пользования на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет

О Стандартинформ. 2014

В Российской Федерации настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен. тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

Продукция алкогольная и сырье для ее производства ИДЕНТИФИКАЦИЯ Метод определения отношения изотопов ^ПС/¹²С спиртов и сахаров в винах и суслах

Alcoholic beverages and raw materials for its production Identification Method for determination of alcohols and sugars ’ C/ ‘C isotopes ratio in wines and mashes

Дата введения - 2015-01-01

1 Область применения

Настоящий стандарт распространяется на вина, виноградное сусло, виноградное концентрированное сусло, виноградное концентрированное ректификованное сусло и устанавливает метод определения отношения изотопов С/12С (далее - о CVPDB) спиртов и сахаров в указанных продуктах.

Для спиртов и сахаров вин и сусел. произведенных из винограда,    установлено,    что    зна

чение o' CVPDB находится в диапазоне от минус 29 до минус 26. промилле. %о.

Отклонение отношения изотопов С/^1?С от установленных пределов свидетельствует о наличии в продукции спиртов и/или сахаров невиноградного происхождения.

2 Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие межгосударственные стандарты:

ГОСТ 12.0.004-90 Система стандартов безопасности труда. Организация обучения безопасности труда. Общие положения

ГОСТ 12.1 004-91 Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования

ГОСТ 12.1 005-88 Система стандартов безопасности труда. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны

ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности

ГОСТ 12.2.007.0-75 Система стандартов безопасности труда. Изделия электротехнические. Общие требования безопасности

ГОСТ 12.2.085-2002 Сосуды, работающие под давлением. Клапаны предохранительные. Требования безопасности

ГОСТ 12.4.009-83 Система стандартов безопасности труда. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание

ГОСТ 12.4.021-75 Система стандартов безопасности труда. Системы вентиляционные. Общие требования

ГОСТ 12.4.103-83 Система стандартов безопасности труда. Одежда специальная защитная, средства индивидуальной защиты ног и рук. Классификация

ГОСТ 1770-74 (ИСО 1042-83. ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия

ГОСТ 5583-78 (ИСО 2046-73) Кислород газообразный технический и медицинский. Технические условия

ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия ГОСТ 8050-85 Двуокись углерода газообразная и жидкая. Технические условия ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ 26313-84 Продукты переработки плодов и овощей. Правила приемки и методы отбора

проб

ГОСТ 28498-90 Термометры жидкостные стеклянные. Общие техни-ческие требования. Методы испытаний

ГОСТ 29169-91 (ИСО 648-77) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки с одной меткой.

ГОСТ 31730-2012 Продукция винодельческая. Правила приемки и методы отбора проб

Примечание - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или ежегодному информационному указателю «Национальные стандарты», который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по выпускам ежемесячного информационного указателя за текущий год Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

3 Термины, определения и сокращения

3.1    В настоящем стандарте применены следующие термины с соответствующими определениями и сокращения:

3.1    6¹³Суров* Характеристика изотопного состава углерода, определяемая как относительное отклонение изотопного отношения углерода в анализируемой пробе от изотопного отношения углерода в международном образце сравнения МАГАТЭ, промилле. %о.

3.2    международный образец сравнения PDB: Изотопный состав углерода карбоната кальция ископаемого ракушечника Belemnitella Americana позднемелового периода из формации PDB (Южная Каролина. США).

Примечание - Образец сравнения PDB характеризуется однородным изотопным составом В настоящее время в качестве образца сравнения применяют венский эквивалент PDB-VPDB Значение о¹³ CVPDB вычисляют формуле

•1000,

13^ • ^,\

12

где

ное 0.0112372.

3.3 МАГАТЭ: Международное агентство по атомной энергии.

4 Сущность метода

Метод основан на определении характеристики изотопного состава углерода методом масс-слектрометрии стабильных изотопов, посредством одновременного измерения масс 44, 45. 46. характерных для всех изотопных комбинаций элементов в газообразном диоксиде углерода С02. образованном при брожении сахаров и выделенном путем отбора аликвоты газа специальным устройством, для последующего определения характеристики изотопного состава диоксида углерода в анализируемой пробе относительно международного образца сравнения PDB (6 'CVPDB).

5 Средства измерений, вспомогательное оборудование, посуда, реактивы и материалы

5.1 Масс-спектрометр изотопный с анализатором элементного состава и специальным интерфейсом с техническими характеристиками:

-    диапазон массовых чисел, а. е. м. - 1-70;

-    чувствительность (молекул/ион). не менее - 900;

ГОСТ 32710-2014

-    разрешающая способность, М/ДМ, (на уровне 10 % от максимальной интенсивности пика m/z 44). не менее-95;

-    СКО выходного сигнала - (¹³C/^1?C), %о, не более:

при использовании двойной системы напуска газа - 0.01. при использовании анализатора элементного состава -0.1.

Образцы сравнения, предоставляемые МАГАТЭ:

-    IAEA-CH-6 «Sucrose» (сахароза) Ns 506. знамение показателя 6¹³c_vpce согласно спецификации на образец сравнения;

-    NBS22 «ОН» (масло) № 427, значение показателя о¹³ C_Vpdb согласно спецификации на образец сравнения.

Пипетки градуированные 1-1-1-1,1-1-1-2, 1-2-1-25 по ГОСТ 29227.

Колба К-1-50-14/23 ТС по ГОСТ 25336 Колба П-1-50-14/23 ТС по ГОСТ 25336.

Колба П-1-500-29/32 ТС по ГОСТ 25336.

Колба П-1-250-29/32 ТС по ГОСТ 25336.

Колба Кн-1-2000-29/32 ТС по ГОСТ 25336.

Колба Кн-1-250-29/32 ТС по ГОСТ 25336 Холодильник ХШ -1-400-14/23-14/23 ТС по ГОСТ 25336.

Холодильник типа ХТП 1-200-14/23 ХС по ГОСТ 25336

Термометр лабораторный стеклянный 1-го класса со взаимозаменяемыми конусами по ГОСТ 28498. диапазоном измерений температуры от 0 °С до 100 °С. ценой деления шкалы 0.5 °С.

Колбонагреватель по документу, действующему на территории государства, принявшего стандарт.

Дефлегматор 150-14/23-14/23 по ГОСТ 25336.

Насадка Н1-14/23-14/23-14/23 ТС по ГОСТ 25336.

Каплеуловитель КО 29/32-14/23-100 ХС по ГОСТ 25336.

Переход П-1-19/26-14/23 ТС по ГОСТ 25336.

Аллонж АО-14/23-14/23-50 ТС по ГОСТ 25336.

Аллонж АИО -14/23-14/23-50 ТС ГОСТ 25336.

Затвор 3B-29/32 ТС по ГОСТ 25336.

Цилиндр 1-250-1 по ГОСТ 1770.

Пипетка 1-1-25 по ГОСТ 29169.

Капсулы для жидких проб.

Пинцет.

Микрошприц.

Диоксид углерода газообразный и жидкий (о. с. ч.). объемной долей двуокиси углерода не менее 99.995 % по ГОСТ 8050. Применяют в качестве рабочего образца сравнения.

Кислород газообразный (о. с. ч.), объемной долей кислорода не менее 99.995 % по ГОСТ 5583. Гелий газообразный высокой чистоты, объемной долей гелия не менее 99.9999 % по документу, действующему на территории государства, принявшего стандарт.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Дрожжи винные сухие.

Допускается применение других средств измерений, вспомогательного оборудования с аналогичными метрологическими и техническими характеристиками, а также посуды, реактивов и материалов. по качеству не хуже вышеуказанных.

6    Отбор проб

Отбор проб вина и виноградного сусла - по ГОСТ 31730.

Отбор проб виноградного концентрированного сусла и виноградного концентрированного ректификованного сусла - по ГОСТ 26313.

7    Подготовка к выполнению измерений

7.1    Прибор подготавливают к работе в соответствии с инструкцией по его эксплуатации.

7.2    Устанавливают следующие рабочие параметры:

-    температура печи элементного анализатора. °С - 1000;

-    поток газа носителя (Не) от баллона на универсальный интерфейс под давлением. Па -

3 10⁵;

-    поток газа носителя (Не) от универсального интерфейса на масс-спектрометр под давлением.

Па-1.1-10⁹;

3

• поток кислорода (О?) от баллона на элементный анализатор под давлением, кПа - 200;

- объем инжекции, см³ - 0.001.

7.3    Устанавливают характеристику изотопного состава рабочего образца сравнения диоксида углерода сравнением его с образцами сравнения, предоставленными МАГАТЭ, в соответствии с инструкцией к изотопному масс-спектрометру. Полученное значение 6 Ссог сохраняется в памяти компьютера и используется как эталонное.

Значение 6 ’Ссог проверяют при проведении контрольного теста. Контрольный тест проводят один раз в день перед началом измерений. Отклонение о¹³Ссо: от установленного ранее значения не должно превышать 0.5 %о для десяти последовательных измерений.

7.4    Подготовка анализируемой пробы вина для анализа спиртов

7 4,1 В колбу вместимостью 50 см помещают 25 см³ анализируемой пробы и проводят экстракцию этанола при температуре от 78.0 °С до 78.5 °С, собирая не менее 98 % дистиллята из пробы (см. приложение А. рисунок А.1). Установка, используемая для экстракции этанола, не должна приводить к фракционированию изотопов углерода в получаемой пробе.

7.5    Подготовка анализируемой пробы вина для анализа сахаров

7.5.1    В перегонную колбу вместимостью 500 см³ помещают 250 см анализируемой пробы и отгоняют дистиллят, собирая 120-150 см дистиллята. Анализируемую пробу в процессе перегонки нагревают равномерно. Приемной колбой служит колба вместимостью не менее 200 см³

7.5.2    Оставшуюся в перегонной колбе часть анализируемой пробы помещают в коническую колбу вместимостью 250 см³ с притертым шлифом, добавляют 1 г сухих дрожжей и закрывают затвором с притертым шлифом типа ЗВ (см. 5.1). Брожение проводят при температуре 18 С - 22 °С.

Окончание брожения определяют визуально по следующим признакам: окончание выделения пузырьков диоксида углерода, окончание пенообразования, уплотнение дрожжевого осадка на дне колбы и осветление содержимого колбы.

7.5.3    После окончания брожения проводят экстракцию этанола в соответствии с 7.4.1. Полученный экстракт этанола используют для дальнейших измерений.

7.6    Подготовка анализируемой пробы сусла для анализа сахаров

7.6.1    Подготовку анализируемой пробы виноградного сусла проводят следующим образом: 1000 см³ виноградного сусла помещают в коническую колбу вместимостью 2000 см⁵, добавляют 1 г сухих дрожжей и закрывают затвором с притертым шлифом типа ЗВ (см. 5.1). Брожение проводят при температуре 18 "С - 22 °С. Окончание брожения определяют визуально по следующим признакам: окончание выделения пузырьков диоксида углерода, окончание пенообразования. уплотнение дрожжевого осадка на дне колбы и осветление содержимого колбы.

7.6.1.1    После окончания брожения проводят экстракцию этанола в соответствии с 7.4.1. Полученный экстракт этанола используют для дальнейших измерений.

7.6.2 Подготовку анализируемой пробы виноградного концентрированного сусла и/или виноградного концентрированного ректификованного сусла проводят следующим образом: 250 см³ виноградного концентрированного сусла и/или виноградного концентрированного ректификованного сусла мерным цилиндром помещают в коническую колбу вместимостью 2000 см³, доводят объем раствора до 1000 см дистиллированной водой, вносят 1 г сухих дрожжей и закрывают затвором с притертым шлифом типа ЗВ (см. 5.1). Брожение проводят при температуре 18 °С - 22 °С. Окончание брожения определяют визуально по следующим признакам: окончание выделения пузырьков диоксида углерода. окончание пенообразования. уплотнение дрожжевого осадка на дне колбы и осветление содержимого колбы.

Для восстановления виноградного концентрированного сусла и виноградного концентрированного ректификованного сусла используют свежеприготовленный бидистиллят, освобожденный от диоксида углерода.

7.6.2.1    После окончания брожения проводят экстракцию этанола в соответствии с 7.4.1. Полученный экстракт этанола используют для дальнейших определений.

8 Выполнение измерений

Капсулу во избежание загрязнений берут пинцетом. Затем в капсулу с помощью микропипетки вводят необходимый объем анализируемой пробы этанола, полученной по 7.4.1 или 7.6.1.1, или 7.6.2.1. Обьем анализируемой пробы вычисляют, исходя из чувствительности прибора. Закрывают капсулу с помощью пинцета (каждая капсула должна быть закрыта герметично, в противном случае ее выбрасывают). Подготавливают три капсулы для каждой пробы. Капсулы помещают в диск авто-самплера элементного анализатора, каждая капсула идентифицируется порядковым номером. В начале и в конце каждой серии анализируемых проб размещают капсулы с рабочими образцами сравнения.

4

ГОСТ 32710-2014

Капсулы с подготовленными анализируемыми пробами устанавливают в барабан автосампле-ра. который последовательно подает пробы в элементный анализатор. Диоксид углерода после сжигания каждой анализируемой пробы поступает в масс-спектрометр. Компьютер, соединенный с прибором. регистрирует интенсивность пика - ионный ток и рассчитывает значения 6'"'Cvpce ^в промилле. %0. для каждой анализируемой пробы.

Выполняют три параллельных измерения анализируемых проб.

9 Обработка результатов измерений

9.1    Характеристики изотопного состава углерода o''Cvpce в диоксиде углерода, полученном при сжигании пробы в элементном анализаторе, вычисляют в %©. используя формулу (2). включенную в программное обеспечение масс-спектрометра

b'³Cvpm = ^(R"'- ~ ^R * ■ 1000.    (2)

Ryi

где Агре*, и R_3T - соответственно изотопные отношения ³С/ С пробы и образца сравнения.

9.2    За результат измерений принимают среднеарифметическое результатов трех параллельных определений, если выполняется условие приемлемости

3|8'^,С_то-8'³С-„.||00_,_|> (б^,3С, +б¹³С₂ + 8'³С₃)    °'⁹⁵

где    ,    Ь'*С_шт    - максимальное и минимальное значения из полученных трех

результатов параллельных измерений отношения изотопов спиртов и сахаров, промилле. %о;

8^,3С,, 5^,3С₂, 8^,3С з - результаты параллельных определений отношения изотопов спиртов и сахаров, промилле. %©: значение критического диапазона спиртов и сахаров. %.

Расхождение между тремя параллельными измерениями (в процентах от среднего значения), выполненными в одной лаборатории, не должно превышать предела повторяемости (сходимости) CRovi, приведенного в таблице 1. при вероятности Р- 0.95.

При соблюдении этого условия за окончательный результат измерения принимают среднеарифметическое значение трех параллельных определений 6¹³Сср, округленное до второго десятичного знака.

Таблица 1- Метрологические характеристики

Диапазон измерений отношения изотопов, £13Cvpc6. промилле, %о	Показатель точности(границы относительной погрешности) ±6. %. при Р = 0.95	Показатель повторяемости (относительное среднеквадратическое отклонение повторяемости). о„%	Показатель воспроизводимости (относительное среднеквадратическое отклонение воспроизводимости), о*%	Значение критического диапазона. ель.*. %. п = 3 при Р = 0,95
Спиртов - от минус 35,0 до минус 10.0 включ.	0.8	0.2	0.3	0.7
Сахаров -от минус 30,0 до минус 10.0 включ.	1.0	0.3	0.4	1.0

9.3 Если условие (3) не выполняется, получают еще один результат в полном соответствии с данной методикой измерений. За результат измерений принимают среднеарифметическое значение результатов четырех определений, если выполняется условие

ГОСТ 32710-2014

a_r - показатель повторяемости (см. таблицу 1), %; п - количество выполняемых измерений, п = 2.

Если критическая разность не превышена, то приемлемы оба результата измерений, проведенных двумя лабораториями, и в качестве окончательного результата используют их среднеарифметическое значение.

11 Контроль качества результатов измерений при реализации метода в лаборатории

Контроль качества результатов измерений в лаборатории при реализации методики осуществляют. используя контроль стабильности среднеквадратического (стандартного) отклонения промежуточной прецизионности. Проверку стабильности осуществляют с применением контрольных карт Шу-харта.

Периодичность контроля стабильности результатов выполняемых измерений регламентируют в Руководстве по качеству лаборатории.

Рекомендуется устанавливать контролируемый период так. чтобы количество результатов контрольных измерений было от 20 до 30.

При неудовлетворительных результатах контроля, например, при превышении предела действия или регулярном превышении предела предупреждения, выясняют причины этих отклонений, в том числе проводят смену реактивов, проверяют работу оператора.

12 Требования безопасности

12.1    Требования безопасности должны соответствовать положениям, изложенным в руководстве по эксплуатации масс-спектрометра.

12.2    При выполнении анализов соблюдают требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007 и ГОСТ 12.4.103.

12.3    Помещение, в котором проводят измерения, должно быть оборудовано общей проточновытяжной вентиляцией по ГОСТ 12.4.021.

12.4    Запрещается включать в сеть и работать на масс-спектрометре без заземления. Недопустимо использование для заземления нулевой фазы электропитания.

12.5    Электробезопасность при работе с электроустановками - по ГОСТ 12.2.007.0 и нормативным документам, действующим на территории государства, принявшего стандарт.

12.6    Организация обучения работающих безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.

12.7    Помещение лаборатории должно соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009.

12.8    Содержание вредных веществ в воздухе рабочей зоны не должно превышать норм, установленных ГОСТ 12.1.005.

12.9    При использовании сжатых газов соблюдают требования безопасности по ГОСТ 12.2.085.

7

Приложение А (обязательное)

Установка для экстракции этанола

А.1 Установка для экстракции этанола приведена на рисунке А.1.

1 - колбонагреватель, 2- колба К-1-50-14/23 ТС по ГОСТ 25336, 3 - дефлегматор 150-14/23-14/23 ТС по ГОСТ 25336, 4 - насадка Н1-14/23-14/23-14/23 ТС по ГОСТ 25336, 5-термометр лабораторный стеклянный с взаимозаменяемым шлифованным конусом 14/23, 6 - холодильник ХПТ-1-200-14/23 ХС по ГОСТ 25336, 7- аллонж АИО-14/23-14/23-50 ТС по ГОСТ 25336, 8- колба П-1 -50-14/23 ТС по ГОСТ 25336, 9 - отводной патрубок (на соединительном элементе типа алонж).

Рисунок А.1

8