ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬБЫ С ВРЕДИТЕЛЯМИ БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ И СОРНЯКАМИ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

по определению микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде

Данные методики апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии, болезнями растений и сорняками

67

УТВЕВДАЮ Заместитель Главного Государственного санитарного врача СССР

А.И.Зайченко "27 " апреля 1984 г»

Ъ 3026-84_

ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ НИТРОХЛОРА В ЛУКЕ, КАРТОФЕЛЕ, СВЕШ Я ПОЧВЕ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ

(Дополнение н Ш 1539-76 от -20.12*76 г)

I. Краткая характеристика препарата

Нятрохлор “ предвсходовый гербицид, запрещенный к применению в овльоком хозяйстве СССР. Действующее начало препарата 2_с4-дихлор-фенил-4-нитрофенйловай зфир.

^С12^Н7^С12^Г/03 Мол. масса 284,1

Синонимы - нитрофен, Nip _f F\A/~925, ТОК-Е-25.

В чистом виде светложедтыа кристаллы с Т вл 70-71°С, давление паров spa 40°С 8 ЛО~^ им рт.ст. Хороно растворим в гексане, бензоле, ацетоне, хуже в спиртах. Растворимость в воде при 20°С 0,7-1,2 мг/л* ЛД^ нитро хлора для крыс Э050400 аг/ку для кроликов 1600+420 мг/к Остаточные количества нятрохлора во всех продуктах не допускаются* ЙДК в почве не установлена*

2. Методика определения нитрохлора в луке, картофеле, свекле и почве газожидкостной хроматографией

2.1. Основные положения

2.1*1. Принцип метода

Метод основан на извлечения аитрохлора из исследуемого объекта ацетоном, очистке экстракта микросублимацией в вакууме и определения газожидкостной хроматографией •

2*1*2* Метрлогичеокая характеристика метода

Диапазон измеряемых кокцентрацийг лук, картофель, свекла 0,01*2,0 мг/ю% почва 0,03*6,0 мг/кг.

Предел обнаружения Ow3>tr- в 2 вшд хроматогрфкрдгемого объема*

Предел обнаружения: в луке» картофеле, свекле 0,01 мг/кг^ почве 0,03 мг/кг.

Среднее значение апредел ения стандартных количеств нктрохлора 3 при /1*15:

в лука, картофеле, свекле 77,9?, в почве 77,35*

Стандартное отклонение $ при п ^mS5 : дук^ картофель, авекла +8,0?, почва +7,#*

Доверительный интервал среднего ври рт0,?5 и /7*5: лук, к артефель, овекла 77,9+11,3?; почва 77*3+6,9?*

йизмах варьирования Д, : лук, картофель, овекла 70,0-100?; почва 7°»0-69,5?#

2*1*3* Избирательность метода

Метод селективен* Хдорорг&ннческие веотнциды, в том числе изомеры ГХЦГ, гептахлор, к ель тан, пп'ДДТ и его метаболиты определения не мешает*

2*2* Реактивы и материалы.

Ацетон, ГОСТ 2603-79, чда, овежеперегнонный*

Гексан, ТУ 6-09-3375-78, чда» свежеперегнанный. д/- ^ л    кт££    лс    _хч>    безводный*

Хрома тон /7-/1YV -НГЦЪЗ¹ (0,125-0,160 мм).

Жидкая фаза - подидиэтиленгликодь сукцинат (НДЭГС), ТУ 641-15*68. Хром атокЛ/-супер (0,16-0,20 ми) о % $ Е~30.

Стандартные раствор а нитрохлора а гексане о сод ерш кием ЗрО юсг/мл (раствор А) и I мкг/мл (расалор Б)*

|дя приготовления раствора А в мерну® шдбу емкость® XGG мл помещает навеску китрхлора (Ф мг), лапту» на аналитических весах о точность» +0,0002г. Навеску растворяет ж В) мл гексана и доводят до метки тем же растворителем* Для приготовления раствора Б, ш раствора А пипеткой

отбирают I мл раствора С®0 мкг), переносят в мерную колбу емкостью ЮО мл и-доводят до метки тем же растворителем*

Растворы А и Б стабильны при хранении в холодильнике, при условии исключен ия испарения растворителя в течение одного года*

2*3. Приборы» аппаратура и посуда

Хроматограф Цвет-Юб или аналогичный прибор о детектором по аахвату электронов (ДЭЗ).

Хрмато графические колонки стеклянные» длиной 200 см и 120 см при внутреннем диаметре 3,5 мм.

Нотационный вакуумный испаритель с набором колб^ТУ 25-II-0I7-76 Механический встряхиватель* ТУ 64-I-I08I-75 Колбы конические, ГОСТ Ю394-72, на 500 и 250 мл*

&>лбы плоскодонные, ГОСТ 10394-72, на 500 и 250 мл*

Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, на Ю0 мл.

Пипетки, ГОСТ 1770-74, на 10 и I мл*

Микросублиматор.

Воронки делительные, ГОСТ 10054-75, на I мл.

Пробирки с притертыми пробками, ГОСТ 1770-74, на Ю мл.

Эксикатор, ГОСТ 637J-73*

Микро шприц на Ю Мкл, _тип мш-Ю,ТУ 5Е2-855-024 Фарфоровая чашка.

Почвенное сито.

2*4* Подготовка к определению

Приготовление носителя^ ЦДЭГС*_ В круглодонную колбу емкостью 500 мл помещают-навеску ПДЗГС (1г), взвешенную на аналитических весах о точностью jO,02 г, растворяют ее в 200 мл хлороформа. В полученный раствор при непрерывном плавном помешивании постепенно насылают 49 г xpoMaTOHa/V^i^-/7/W’ (0,125U), 16Э мм). По объему раствора должно быть не менее, чем в два раза больше насшного объема сорбента. С помощью ротационного вакуумного испарителя* при слабом нагревании водяной бани» удаляют растворитель* После того, как носитель при вращении колбы начинает легко осыпаться со стенок колбы, его переносят в фарфоровую чашку и выдерживают в сушильном шкафу при температуре 60-70°С в течение одного часа* После охлаждения в эксикаторе н еже ль переносят в темную склянку с плотной пробкой.

Приготовление колонок. Для заполнения колонки носителем, в ее выходной конец вставляют тампон из термостойкой ваты, затем этим же концом колонку подсоединяют к линии вакуума# Колонку заполняют при слабом вакууме, " засасывая” в колонку подготовленный вышеуказанный способом или готовый товарный носитель. Периодически заполненную часть колонки уплотняют постукиванием резиновым вакуумным шлангом* После равномерного уплотнения насадки,колонку отсоединяют от вакуумной линии, входной конец ее закрывают ташоном из термостойкой ваты и подсоединяют колонку к испарителю хроматографа, без подсоединения к детектору.Колонку кондиционируют при скорости азота 75 мл/мин сначала в режиме программирования температуры от 50 до 210°С со скоростью нагрева *t°С/мин , а затем в изотермическом режиме при 210°С в течение Ю час.После завершения кондиционирования, колонку подсоединяют к детектору, и общую подготовку прибора проводят согласно инструкции*

2.5. Отбор проб.

Отбор проб проводят в соответствии с "Унифицированными правилам*

отбора проб сельскохоззй^^нной продукции, продуктов питания и объектов окружающей средыЧзпределения микроколкчеств пестицидов? утвержденные Минздравом СССР 21 августа 1979г.й2051-79

2.6.    Подготовка проб к анализу

1ук шинкуют, а картофель и свеклу измельчают с помощь» ножа до кусочков с размерами граней 0,Э-0,5см.Для анализа отбирают 25г средней пробы. Воэдушно-сухую почву в естественно-влажном состоянии просеивают от камней и прочих инородных оредметов через почвенное сито.Ддя анализа отбирают 10 г. почвы.

2.7.    Проведение определения

Лук,картофель .свекла._Навеску аналиэируюяой пробы (25г) помешают

в плоскодонную колбу емкость» 500мл, заливают 75мл ацетона и экстрагируют нитрохлор с помощью механического встряхивания колбы з течение ЭОмин.Экстракт фильтруют в делительную воронку емкостью 1л.

Экстракцию нптрсхлорг. ацетоном, порциями по 50мл. повторяют еще два раза. К объединенному ацетоновому экстракту добавляют 350 мл дистиллированной воды, около Юг хлористого натри* и нитгохлор экстрагируют три раза гексан ом, порциями по 50кл;^1^ доенный гексановый экстракт сушат над безводным сульфатом натрй^тГйл&труют через пористый фильтр в круглодо иную колбу на 250мл и с пошощью ротационного вакуумного испарителя концентрируй i* раствор до объема л-Эми. Остаток кодячесХвешШ с помощью Знл ацетона переносят в питрьч сублиматера,и на горячей водяной бане кз патрона полностью удаляют растворитель.Латгец сублиматора в верхней частя гапчра слегка смазывает вакуумной смазкой и плотно вставляют в патрон сублиматора*

К сублиматору подключают холодную воду, вакуум и проводят сублимацию на кипящей водяной бане при давлении 0,3 - 0,4 мм рт.ст. в течения 20 мин* После окончания сублмации, от сублиматора отсоединяют вакуум» осторожно вынимают палец сублиматора из патрона, избегая соприкосновения его со шлифом, смазанным смазкой* Иитрохлор смывают с пальца сублиматора Юмл ацетона в мерную пробирку емкостью Юмл* В хроматограф вводят 2мкл полученного раствора*

Почва*Навеску анализируемой почвы ( Юг) помещают в коническую колбу на 250мл_? тщательно увлажняют при помощи пипетки 2 -Змл дистиллированной воды, и нитрохлор экстрагируют трижды гексаном, порциями по 50 мл. При каждой экстракции колбу встряхивают на механическом встряхивателе в течение 30 мин, а затем раствор фильтруют в плоскодонную колбу емкостью 250мл. С помощью ротационного вакуумного испарителя раствор концентрируют до объема 1-2мл* Остаток количественно^при помощи ацетона, переносят в патрон сублиматора* Далее проводят все операции описанные выше.

_Условия_ хР®^м^'^г2.^гЕ^а^^иЕ!?1^а!1^и2. _

Хроматограф Цвет-106 с ДЭЗ*

Скорость протяжки ленты самописца 0,33 см/мин*

Рабочая шкала электрометра 5.Ю~^А*

Скорость азота 80мл/мин

Насадка колонки

Длина колонки,см Внутрен^_Аи^е_т|,ш ТемператзФ^Хдюлонки,

испарителя^

термостата ¹ детектора^ ^

Время удерживания:

нитрохлора

пп*ДДЕ

пп*ДДД

пп’ДДТ Динейный диапоэон опре-

деления,нг

В хроматограф вводят 2мкл раствора рабочей пробы или стандартного раствора.

2*8. Обработка результатов анализа

Количественное определение проводят методом абсолютной калибровки» по градуировочному графику*

Содержание нитрохлора в анализируемой пробе/в мг/кг вычисляют по формуле;

JC Г JtWL-HfL* кг/кг где;

“ ^А

°рп - количество нитрохлора, найденное в рабочей пробе ш> гр«дуир~ точному графику 1/а - объем аликвоты*вводимой а хроматографумкл ( 2м*л);

'IT' - объем рабочего раствора,мл(10мл);

А - навеска анализируемо*» пробы,г.

Если при введении в хроматограф подучаете* слишком большие пики иди происходит ” накаливание", к рабочему раствору пипеткой добавляет известное количество гексана и анализируют более разбавленный раствор* Для построения градуировочного графика в хроматограф последова -тельно вводят по 2 мкл, в трех повторностях, стандартные растворы нитрохлора в гексане с содержанием 0,051 0*IJ 0,2; 0,7; 1,0 мкг/ши Для приготовления серии стандартных растворв в прбирки емкостью 10мд вносят*пипеткой¹ 0,5;1;2;5;7 мд стандартного раствора Б, а затем в каждую пробирку последовательно добавляют пипеткой 9*5; 9J

8; 5; 3 мд гексана* Пробирки закрывает притертой пробкой к вс содержимое тщательно перемешивает* Серию стандартных растворов готов* каждый раз при пострении иди прварко градуировочного графика*

Прверку градуирвочного графика осущесталявт ежемесячно или при изменении условий хроматографирвання.

3. Требования безопасности Соблюдать правила безопасности, принятые для работы с легковоспламеняющимися жидкостями*

Вреиещше методические укааанйя разработав JT*8UTe вино кой, Н₀®₀й$®ёгков©й в® Во ©союзном НШ тадаесяях средств заняты рас те-*-шйй е? опытным еаводом_я f* ^эе&в©