Товары в корзине: 0 шт Оформить заказ
Стр. 1
 

8 страниц

244.00 ₽

Купить ГОСТ 28365-89 — официальный бумажный документ с голограммой и синими печатями. подробнее

Официально распространяем нормативную документацию с 1999 года. Пробиваем чеки, платим налоги, принимаем к оплате все законные формы платежей без дополнительных процентов. Наши клиенты защищены Законом. ООО "ЦНТИ Нормоконтроль".

Наши цены ниже, чем в других местах, потому что мы работаем напрямую с поставщиками документов.

Способы доставки

  • Срочная курьерская доставка (1-3 дня)
  • Курьерская доставка (7 дней)
  • Самовывоз из московского офиса
  • Почта РФ

Распространяется на химические реактивы и устанавливает метод проведения испытания, основанный на бумажной хроматографии

  Скачать PDF

Переиздание. Май 2008 г.

Оглавление

1 Общие указания

2 Сущность метода

3 Аппаратура и материалы

4 Подготовка к испытанию

5 Проведение испытаний

5.1 Хроматографирование

5.2 Сушка хроматограмм

5.3 Проявление хроматограмм

6 Обработка результатов испытаний

Приложение 1 Примеры оборудования для бумажной хроматографии и способов его использования

Приложение 2 Термины и определения

Приложение 3 Применение бумажной хроматографии

Показать даты введения Admin


МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ


РЕАКТИВЫ

МЕТОД БУМАЖНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ


Издание официальное



МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

ГОСТ

28365-89

РЕАКТИВЫ Метод бумажной хрома к» рафии

Reagents. Method of paper chromatography

МКС 71.040.30 ОКСТУ 2609

Дата введения 01.01.91

Настоящий стандарт распространяется на химические реактивы и устанавливает метод проведения испытания, основанный на бумажной хроматографии.

Термины, применяемые в стандарте, и их пояснения приведены в приложении 2. Рекомендуемые области применения метода приведены в приложении 3.

1. ОБЩИЕ УКАЗАНИЯ

1.1.    При проведении испытаний должны быть соблюдены требования ГОСТ 27025.

1.2.    В нормативно-технической документации на испытуемый реактив должны быть указаны следующие данные:

1.2.1.    Описание приготовлении испытуемого раствора.

1.2.2.    Предварительная обработка (при необходимости).

1.2.3.    Используемые растворители (или смесь).

1.2.4.    Применяемые реактивы и растворы.

1.2.5.    Способ хромато1рафировании.

1.2.6.    Тип хроматографической бумаги, необходимость предварительной пропитки бумаги, пропитывающие растворы, продолжительность сушки после пропитки (при необходимости).

1.2.7.    Время насыщения хроматографической камеры парами подвижной фазы.

1.2.8.    Объем испытуемого раствора, наносимый на бумагу.

1.2.9.    Температура, при которой проводят хроматографирование (при необходимости).

1.2.10.    Критерии окончания процесса хроматографирования.

1.2.11.    Способ проявления хроматограмм и реагенты для проявления (при необходимости).

1.2.12.    Способ оценки хроматограмм.

1.2.13.    Веществ;! сравнения, используемые для оценки (при необходимости).

1.2.14.    Аппаратура для количественной оценки разделенных компонентов (при необходимости).

2. СУЩНОСТЬ МЕТОДА

Метод заключается в разделении на хроматографической бумаге смеси веществ в потоке растворителя, основанном на различной скорости перемещения компонентов смеси.

3. АППАРАТУРА И МАТЕРИАЛЫ

3.1.    Камера (сосуд) хроматофафическая. закрытая герметичной крышкой.

3.2.    Лампа ультрафиолетовая для обнаружения веществ с использованием флуоресценции при длине волны от 254 до 366 нм.

3.3.    Микропинетка вместимостью 0,002—0.010 см-’ или микрошприц вместимостью не более 0.01 см3.

Издание официальное

3.4.    Пульверизатор для распыления проявителя.

Перепечатка воскрешена

€> Издательство стандартов. 1990 © СТАНДАРТИНФОРМ. 2008

ГОСТ 28365-89 С. 2

3.5.    Бумага хроматографическая.

3.6.    Денситометр.

3.7.    Устройство для сканирования пятен на бумаге.

4. ПОДГОТОВКА К ИСПЫТАНИЮ

4.1.    Подготовка хрома гографичсской бумаги

В зависимости от размеров хроматографической камеры из хроматографической бумаги вырезают полоски с ровной или зубчатой кромкой или кружки соответствующих размеров, на которых мягким карандашом обозначают пробу, систему растворителей, дату и линию старта с точками для нанесения пробы. Рекомендуемое расстояние между точками дш нанесения пробы 20—30 мм. расстояние от линии старта до кромки бумаги — 30 мм.

При необходимости перед испытанием бумагу обрабатывают специальным раствором и высушивают при комнатной температуре в вертикальном положении стартом вниз.

4.2.    В точки, отмеченные на линии старта, наносят с помощью калиброванной микропипетки или микрошприца 0.002—0.010 см3 испытуемого раствора, если в нормативно-технической документации на испытуемый реактив нет других указаний. При необходимости в точки на линии старта наносят таким же образом растворы веществ, соответствующих предполагаемым компонентам смеси, для идентификации и количественной оценки этих примесей. Допускается наносить пробу нс в виде точки, а чертой с применением микропипетки или капилляра. После нанесения пробы на непропитанную бумагу растворителю дают свободно испариться. Если проба не содержит летучих компонентов, а бумага не пропитана органической неподвижной фазой, испарение растворителя можно ускорить струей горячего воздуха. Бумагу с нанесенной пробои помешают в хроматографическую камеру (пропитанные бумаги помещают в камеру сразу после нанесения раствора пробы).

При круговой хроматографии пробы наносят на окружность, описанную на расстоянии нескольких сантиметров от центра хроматограммы.

5. ПРОВЕДЕНИЕ ИСПЫТАНИЙ

5.1.    Хроматографирование

Хроматографическое разделение веществ проводят в хроматографической камере, в замкнутой системе, насыщенной парами подвижной фазы, при температуре, указанной в нормативно-технической документации на испытуемый реактив, поместив эту фазу в чашку на дно камеры. Если в нормативно-технической документации на испытуемый реактив нет других указаний, хроматографирование заканчивают, когда фронт подвижной фазы достигнет определенного расстояния от старта, например 250 мм. Хроматографирование проводят одним из указанных ниже способов.

5.1.1.    Нисходящая хроматофафия

В камере для нисходящей хроматографии должен быть желобок или лодочка. Конец листа хроматофафнческой бумаги с нанесенными пробами, ближний клиник старта, дважды перегибают, помещают в желобок или лодочку, закрепляют стеклянной палочкой, как показано на черт. 5 приложения I. Затем в желобок помещают подвижную фазу.

5.1.2.    Восходящая хроматофафия

Хроматографическую бумагу подвешивают в хроматофафнческой камере так. чтобы ее нижний конец был пофужен в слой подвижной фазы на дне сосуда, как показано на черт. 4 приложения 1. а уровень подвижной фазы находился на 10 мм ниже линии старта.

5.1.3.    Горизонтальная хроматофафия

Испытания проводят, как показано на черт. 2 приложения 1.

5.1.4.    Круговая хроматофафия

При круговой хроматографии подвижну ю фазу помешают в середину хроматофаммы. откуда она передвигается к периферийной части, как показано на черт. 3 приложения I. В качестве хроматографической камеры допускается использовать две чашки Петри или эксикатор.

5.1.5.    Проточная хроматография

Если хроматофафируемыс вещества имеют в определенной системе низкие значения /L нижнюю кромку нисходящей хроматограммы делают зубчатой. Когда подвижная фаза достигнет конца хроматограммы, разделение продолжают так, чтобы элюирующий растворитель стекал по каплям на дно камеры.

5.1.6.    Повторная хроматография

С. 3 ГОСТ 28365-89

Метол, при котором но завершении первой) продвижения подвижной <|кгзы хроматограмму высушивают и хроматографирование повторяют (возможно несколько раз).

5.1.7. Многомерная хроматофафия

Метод, при котором по завершении первого продвижения подвижной фазы хроматограмму поворачивают (например, под углом 90°) и снова проводят хроматофафированис. Перед повторным хроматографированием испаряют подвижную фазу.

5.2.    Сушка хроматограмм

По окончании разделения хроматограмму вынимают из камеры и отмечают фронт мягким карандашом, после чего сушат при комнатной температуре в вертикальном положении, стартом вниз. Продолжительность сушки зависит от скорости испарения подвижной фазы и химической стабильности хроматографируемых веществ.

5.3.    Проявление хроматофамм

Проявление компонентов на хроматофамме проводят одним из способов, приведенных ниже.

5.3.1.    Физические методы

Визуально, при дневном свете, отмечают на хроматограмме положение пятен — цветных веществ. При наличии флуоресцирующих веществ проявление проводят в УФ-свете.

5.3.2.    Химические методы

Хроматофаммы проявляют жидкими и газообразными проявителями, используя реакцию имеющихся на хроматограмме соединений с подходящим реагентом-проявителем с образованием окрашенного или флуоресцирующего вещества. Жидкие проявители наносят пульверизатором или используют реагенты в аэрозольной упаковке, газообразные применяют, поместив хроматограмму в пары проявителя.

5.3.2.1.    Хроматограмму кладут горизонтально на лист фильтровальной бумаги или оставляют подвешенной на стеклянной палочке и опрыскивают как можно более мелкими каплями (туманом) проявителя всю площадь хроматофаммы вначале с одной, а потом с другой стороны.

5.3.2.2.    При проявлении газообразным проявителем хроматограмму подвешивают в камере, в которую помещен летучий реагент (например, кристаллы йода), или на дне которой проявитель получают химическим путем (например, оксиды азота получают путем добавления твердого нитрита натрия к раствору соляной кислоты).

5.3.3. Биологические методы

Хроматофаммы проявляют, используя биологическую активность хроматографируемых веществ.

6. ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ ИСПЫТАНИЙ

6.1. Качественная оценка хроматограммы заключается в определении положения пятна или полосы, которое характеризуется значением Rr

где а — расстояние от центра пятна пробы до стартовой линии, мм; b — расстояние от фронта растворителя до стартовой линии, мм. или значением /?,:

где с — расстояние от центр;! пятна веществ;! сравнения до стартовой линии, мм.

6.2.    Определение количеств;! искомою компонента в пробе проводят путем сравнения размеров и интенсивности окраски ею пятна с пятнами вещества сравнения, нанесенными на бумагу в интервале значений концентрации, указанных в нормативно-технической документации на испытуемый реактив, и обработанными в условиях испытания. Оценку проводят визуально или с помощью аппаратуры (например, денситометра, устройств;! для сканирования пятен компонентов на бумаге), или путем элюирования пятен и последующего фотометрического определения оптической плотности растворов.

6.3.    Хроматограммы хранят в условиях, препятствующих появлению взаимных оттисков хроматограмм (например, с прокладками из фильтровальной бумаги). Если характер пятен позволяет, то на хроматофаммы наносят слой быстросохнущего лака. В случае необходимости проводят зарисовку контура хроматофаммы иди фотофафирование.


ПРИЛОЖЕНИЕ I Справочное


ПРИМЕРЫ ОБОРУДОВАНИЯ ДЛЯ БУМАЖНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ И СПОСОБОВ ЕГО ИСПОЛЬЗОВАНИЯ


Камера для восходящей и нисходящей хромаiтрафим


Камера для три юн i а.н>нои хроматографии


Камера для круговой хроматограммы (две чашки Петри)




I — камера: 2— решетка из стеклянных пдточек: 3 — стеклянная наточка для прижатия конца хроматограммы: 4 — крышка: 5— хроматограмма: 6— растворитель



/ — бумажный фитиль; 2. 4— чашки Петри; 3— круговая хроматограмма; 5 — растворитель


Черт. I


Черт. 2


Черт. 3


Способы расположения хроматограммы при восходящей хроматографии


Способ вкладывания бумажной хроматограммы в желобок




/ — хроматограмма: 2— хроматографическая камера; 3— растворитель

Черт. 4



/-хроматограмма: 2- старт: * лянная палочка; 4— загнутая "• ,.IO(,KC для прижатия хроматограммы в *■'"

5 — желобок


Черт. 5


С. 5 ГОСТ 28365-89

ПРИЛОЖЕНИЕ 2 Справочное

ТЕРМИНЫ И ОПРЕДЕЛЕНИЯ

Термин

Пояснение

Бумажная хрома тофафи я

Физико-химический метод разделения на хроматографической бумаге смеси веществ между неподвижной фазой на носителе и подвижной фазой

Носитель

Неподвижная (стационарная) фаза Подвижная (мобильная) фаза

Хроматографическая бумага Фаза, закрепленная на носителе

Фаза, обеспечивающая перемещение разделяемых веществ по носителю с неподвижной фазой

Старт

Хроматографирование

Место, на которое натки гея испытуемая проба

Прохождение подвижной фазы через носитель с неподвижной фазой и нанесенной пробой

Нисходящая хроматография Восходящая хроматофафия Горизонтальная хроматофафия Круговая хроматофафия

Метол, при котором подвижная фаза движется вниз

Метол, при котором подвижная фаза движется вверх

Метол, при котором подвижная фаза движется гори юнтально

Метод, при котором подвижная фаза движется из середины крута к его окружности

Проточная хроматофафия

Метод, при котором продвижение подвижной фазы продолжается и посте достижения фронтом конца бумаги

Повторная хроматофафия

Метод, при котором но завершении первого продвижения подвижной фазы хроматофамму высушивают и хрома парафирование повторяют (иногда несколько раз)

Проявление

*/

Способ обнаружения веществ на хроматограмме

Величина, определяемая отношением расстояния от центр;» (концентрационного максимума) пятна или полосы до старта к расстоянию от фронта до старта

Величина, определяемая отношением расстояния от центра пятна или полосы испытуемого вещества до старта к расстоянию от центра пятна или полосы вещества сравнения до старта

Константа распределения (А'/>)

Отношение концентрации вещества в неподвижной фазе к концентрации вещества в подвижной фазе:

где At — концентрация вещества в неподвижной фазе;

Ат — концентрация вещества в подвижной фазе

ГОСТ 28365-89 С. 6

ПРИЛОЖЕНИЕ 3 Рекомендуемое

ПРИМЕНЕНИЕ БУМАЖНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

1.    Доказательство присутствия ожидаемого вещества или cm примеси, опенка хроматографической однородности, проводимая в сопоставлении с известным веществом сравнения.

2.    Идентификация вещества, подтверждение идентичности испытуемой) вещества с известным веществом.

При данных условиях для каждою соединения характерно определенное местонахождение на хроматограмме (R,) и определенное поведение при проявлении (окраска, флуоресценция). Идентификацию npoBo;urr непосредственным сравнением пятен известного и испытуемого вещества на одной хроматограмме или элюированием вещества из хроматограммы и последующей идентификацией, например измерением соответствующего спектра.

3.    Определение одного или более веществ в смеси, проводимое одним из следующих методов:

а)    субъективной оценкой хроматограммы (например, с помощью калибровочной хроматограммы);

б)    объективной оценкой хроматограммы;

в)    последующим определением некоторых компонентов физико-химическим методом (например, по элюировании вещества с хроматограммы его определяют спсктрофотомсгричсски).

4.    Установление структуры органических соединений. Сочетанием реакций рахтожения с хроматографи-чсской идентификацией продуктов этих реакций можно установить сфуктуру молекулы.

С. 7 ГОСТ 28365-89

информационный данные

1.    ВНЕСЕН Министерством химической промышленности СССР

2.    Постановлением Государственного комитета СССР но управлению качеством продукции и стандартам от 13.12.89 № 3708 стандарт Совета Экономической Взаимопомощи СТ СЭВ 6397—88 введен в действие непосредственно в качестве государственного стандарта СССР с 01.01.91

3.    ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

4.    ССЫЛОЧНЫЕ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИЕ ДОКУМЕНТЫ

(Хх> жачснис ИТЛ. на который лана ссылка

Номер пункта

ГОСТ 27025 - 86

1.1

5. ПЕРЕИЗДАНИЕ. Май 2008 г.