ГОСКОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬШ С ВРЕДИТЕЛЯМ. БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ И СОРНЯКАМИ ПРИ МИНСЕЛЬХОЗЕ СССР
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЕ МИКРОКОДЕ ЧЕС ТЗ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ * КОРМАХ И ВНЕ&-НЕЙ СРЕДЕ
ЧАСТЬ ХЕ-я
Москва - 1983
ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬБЫ С ВРЕДИТЕЛЯМИ, БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ И СОРНЯКАМИ ПРИ МСХ СССР
МБТОДИЧВСКИВ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕС1В ПЕС1ИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ,КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ
ЧАСТЬ ХШ
Данные методики апробированы и рекомендованы в качвотва официальных группой экспертов при Гоокомиосии ло химическим оредотвам борьбы с вредителями,болезнями растений и сорняками
при МСХ СССР
Москва-1983
260-
6* Методические указания по определению метилмеркалто-фоса в воде,почве,винограде и зеленой массе хмеля ГЖХ и ТСХ. 67
7. Временные методические указания по определению о<$у-
нака методами ГЖХ и ТСХ в почЕе,растениях,воде водоемов. 76
8. Зременные методические указания по определению протио-фоса в растительном материале,почве и воде методами
ГКХ и ТСХ. 82
9. Временные методические указания по определению се-лекрона в растительной продукции,почве и воде ТСХ
и ГЖХ. 91
10. временны» методические указания по определению хлоро
фоса энзимно-хроматографическим методом в листьях болладоны и траве мяты перечной. 90
11. Методические указания по определению в зерне и про
дуктах его переработки ФОП.применяемых для обеззараживания зерна и зернохранилищ,хроматографическими методами. 105
АЗОТСОДЕРЖАЩИЕ ПЕСТИЦИД]
1. Методические указания по определению остаточных количеств пкрекса,диносеба,каратака,ДНОКа в воде,почве.
и растительном материале хроматографическими методами. цу
2. Временные методические указания по определению байгой*
методом ГЗКХ в молоке. 138
3. Временные методические указания по определению барнона в воде,почве,растениях методом ГЖХ.
- 261 -
4. Методические указания по определению кронетона
в воде,почве,корнеклубнеплодах и растительном материале ТСХ, *54
5. Временные методические указания по определению ридо-
кила методой хроматограмм в воде,почве,растительном материале, *50
6. Временные методические указания по определению ров-
роля методом ТСХ в поде,почве,томатах,картофеле,винограде, виноградном соке и ринэ. I6S
7. Временные методические указания ронилана в растительной продукции,почве и воде ТСХ и ГЖХ. 175
8. Временные методические указания по определению эвисех-
та в растительной продукции,почве и в воде ТСХ, 182
9. Временные методические указания по определению эти-
римала в растительной продукции,почве и воде ТСХ, 188
ПРОЧИЕ ПЕСТИЦИДЫ
I* Времонние методические указания по определению гора-нилбутирата методом ГИХ и ТСХ в почве,воде,корнеплодах и листьях сахарной свеклы. *^5
2. Временные методические указания по определению бром-
пропилата(неорона) в яблоках и цитрусовых методом газовой хроматографии. 206
3. Временные методические указания по определению иллокса-на в воде и печво методом ГП.
4. Временные методические указания по хроматографическому определению иэатрина в печво и воде. 217
5. Временные методические указания по определению омаЯта методами Г££Х и ТСХ в почве,в воде и растениях.
6. Методические указания по определению хлората магния в почве,воде,растениях(подсолнечнике,луке) и в воздухе полярографическим и хроматографическим (ТСХ) методами.
7. Временные методические указания по определению оста точных количеств некоторых аналогов ювенильного гор иона (алтосида.алтозара и п-<5ром*енилового эфира гераниола) в растениях картофеля и почве методами ТСХ и Ш.
Дополнения
Л- 71938 от 20Л«СЗгТирах 2000 экз. .заказ Н» шз Типография ВАСИ:ИЛ
Настоящие методические указания предназначены для
санитарно-эпидемиологических станций и научно-исслодова-телъских учреждений Минздрава СССР,а также ветеринарныхвагрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других Министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания,кормах и внешней среде.
Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качество официальных группой экспертов при Госкомиссни по химическим средствам борьбы с вредителями,болезнями растений и сорняками при ИЛ СССР.(Председатель группы экспертов - М.Д.Клисенко).
Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования саяэпидслу^бы ИМПиТМ им.Мар-нпновского Е.Я. и лабораторным советом при Главней санитарно-эпидемиологическом управления Кик здрава СССР.
УТВЕРЖДАЮ
Заместителе Главного Государственного санитарного врача СССР
А.И.Зайченко
22 октября 1931 г. * 2457-01
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНДЯ
по определению кроиотона в воде, почве, корнеклубнеплодах и растительном материале тонкослойной хроматографией.
I.Краткая характеристика препарата
1.1. Кронетон
1.2. - Метил - 0 - 2-(Этилтпометит) фенил карбамат
1.3. Структурная формула
Молекулярная масса 225.31
1.4. Хоко 1901; Байер.«Ф43; Этиофенкарб
1.5. Химически чистое вещество - беоцветние кристаллы. Растворимость в поде - 1,32 г/л, в толуоле, ксилоле, лрода-
ноле и хлористом метилене до .ООО г/л**. Выпускается в виде 50^-до-го э.к. и 10^-ных гранул. Препарат ух*еррдно опасен для теплокровных животных. ЛД^оАля крыс при оральном введении 608 иг/кг
2, Методика определения кронет^на
2.1, Основные потения
2.1.1, Принцип метода
У.етоц осноган на экотракции пестицида из анализируемых прод еггаиичеок'.т растворителем, очистке экстракта соляной кислотой а хроматографии в гоиком слое силикагсна или на пластинках "Силу КГ.
-155-
Проявление хроматограммы осуществляется после фоторазложения препарата в течение IO-I5 минут облучением УФ-светом. Затем производят опрыскивание проявляющим реагентом. В качестве подвижной фазы применили систему растворителей изооктана-ацетона в соотношении 1:1 (по объему).
Количественное определение производится путем сравнения интенсивности окраски и размера пятен пробы и стандартных растворов.
2.1.2. Метрологическая характеристика метода представлена в таблице.
2.1.3. Избирательность метода.
Метод специфичен, другие препараты в данных условиях хроматографирования определение не мешают.
2,2. Реактивы и растворы.
Хлороформ ТУ 6-09-4263-76 Ацетон, ч.д.а., ГОСТ 2603-79 Н-гексан, х.ч., МРТУ 6-09-2937-66 Изооктан, х.ч., ТУ-09-921-79 Калий йодистый, х.ч., ГОСТ 4232-74 Дифениламин, ч.д.а., МРТУ 46-09-57-62 Нитрат висмута, ч.д.а., ГОСТ 4110-75 Углерод четыреххлористый, х.ч., ГОСТ 20208-74 Соляная кислота, х.ч., ГОСТ 3118-74 Серная кяслота, х.ч., ГОСТ 4204-77 Железо треххлористое, х.ч., ГОСТ 4147-74 Натрий сернокислый, безводный, х.ч., ГОСТ 4166-76 Кальций сернокислый, ч.д.а., ГОСТ 3210-77 Пластинки "Силуфол ///-254"
Силикагель 4Л" (ЧССР)
Стандартны* раствор кронетони в хлороформе о содержанием 100 мкг/мл.
Проявляющие реагенты:
I. КелезоЙодидная комплексная соль по Стефану: к 3 мл 10^-ного раствора хлорида окисного железа добавляют I мл концентрированной соляной кислоты, 3 г Йодида калия и дистиллированную воду до 10 мл. Реактив не теряет своих свойств в течение нескольких месяцев при условии хранения его в хорошо закрытых склянках из темного стекла.
-156-
2. Реактив Драгендорфа в модификации А.С. Тищенко. Растворяют 1,5 г .нитрата висмута и 7,5 г йодида калия в 100 мл 2%-ноЪ серной кислоты.
3. Свежеприготовленный насыщенный раствор дифениламина в ацетоне.
2.3. Приборы и посуда,
Водоотруйный или масляный насос, ГОСТ I0396-75 Воронки химические
Делительные воронки ВД-3-500 ГОСТ 8613-75
Колс$ы конические со шли(№ми и пробками на 250 и 5.Х) мл
ГОСТ 10394-72
Колбы мерные на 100 мл ГОСТ 1770-74
Аппарат для встряхивания АВУ-I, ТУ 64-I-I03I-73
Ротационный вакуумный испаритель ИР-П, 'ГУ-25-11-917-74
Камера для хроматографирования
Камера для опрыскивания
Микропипетки 0,1 и 0,2 мл
Пульверизатор стеклянный
Лампа кварцевая ПРК-4 Шкаф сушильный Фильтры бумажные
2.. 4- Отбор проб
Отбор и хранение проб производят в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб", утвержденными Заместителем Главного Государственного санитарного врача СССР 2051-79 от 2i августа г1979 аи
2.5. Подготовка к определению
7.5. L. Приготовление пластинок
Стеклянные-пластинки размером 9 х 12 см тщательно моют 3,!> г силикагеля марки 1 5/40 ( iOCP) смешивают и ступке о 1,6 * сернокислого кальция, добавляют 30 мл дистиллированной алиц, хорошо переметивамг и' ра.шо;*ерно наносят на 5 пластипок. Су лат пластинки при комнатной температуре 17-1Р часов, затем в сущи льном шкафу 20 минут при 130-140еС и хранят в экоикатогр» ы»1 слоем осушителя.
-157-
2,6. Проведение определения
Вода. 200 мл воды помещают в делительную воронку. Крокетом экстрагируют тремя порциями хлороформа или четыреххлористым углеродом по 50 мл каждый раз в течение 5 минут. Объединенные экстракты фильтруют через слой безводного сернокислого натрия, отгоняют растворитель при температуре 40°С досуха и хроматог-фируют.
Картофель. 50 г чисто вымытого и измельченного картофеля помечают в колбу с притертой пробкой, заливают 75 мл изоокт&на, оставляют на ночь. Растворитель отфильтровывают через фильтр со слоем безводного сернокислого натрия, пробу трижды промывает иэооктаном порциями по 20 мл. Объединенный экстракт переносят в Колбу для отгонки растворителя, упаривают и хроматографируют.
Свекла, растительный материал и почва. Навеску (50г) измельченной свеклы или 25 г ботвы свеклы или картофеля, или 100 Г почвы помещают в коническую колбу с притертой пробкой, заливают 75-100 мл хлороформа или четыреххлористого углерода и оставляют на ночь. Фильтруют экстракты через складчатый фильтр оо слоем безводного сернокислого натрия. Колбу и фильтр триады Промывают по 20-25 мл растворителя. Растворитель упаривают досуха. Сухой остаток переносят в делительную воронку 50 мл 0,5 н НС , фильтруя через плотный бумажный фильтр. Затем в воронку приливают 25 мл хлороформа и встряхивают в течение.
5 минут. Операцию повторяют три раза. Хлороформенные экстракты-фильтруют через слой безводного сернокислого натрия, отгоняют До объема 0,2-0,3 мл и наносят на хроматографическую пластинку.
2.6.1. Условия хроматографирования
Экстракты с помощью пипетки наносят на пластинку с тонким слоем силимгеля, либо на пластинку "Силуфол1*, рядом наносят стандартный раствор кронетона а количестве 5-10 мкг. Хроматографируют в смеси изооктан-ацетон (1:1 по объему). После подъема фронта растворителей на 10 см , хроматографическую пластинку вынимают и проветривают в вытяжном шкафу 5-10 минут.Затем пластинку выдерживают в УФ-свете в течение 10-15 мичут. После хроматограммы на стеклянных пластинках обрабатывают проявляющим реактивом & I. На светло-желтом Фоне пластики проявляется яркое коричневое пятно кронетона с R.t * 0,50*'б,06.
-15*-
При опрыскивании пластинок реактивом Драгендо^ в месте локализации нестицида проявляются пятна красного цвета. Хроматограммы на пластинках "Сидуфол" обрызгивают до влажного состояния свежеприготовленным насыщенным раствором дифениламина в а ацетоне и подвергают опять ультрафиолетовому облучению на ID-15 минут. При наличии кронетона в анализируемой пробе проявляется пятно синего цвета, велячина/р^кото|Ыо равняется - 0,47 ±0,05.
2.6. Обработка результатов анализа
Количественное определение производят путем сравнения площади пятна пробы и того стандарта, площадь которого наиболее близка по величине к площади пятна пробы, лзмерекие площадей осуществляется с помощью промасленной миллиметровой бумаги, пропорциональная зависимость .4сжду площадью пятна и концентрацией препарата наблюдается до 10 мкг. При оолыиол. содержании препарата на пластинку наносят часть экстракта.
Содержание препарата в анализируемой пробе расчитывают по формуле :
Л- Si .
Т'уГ'
X - содержание пестицида в анализируемой цр«'бе, мг/кг, мг/л;
А - содержание препарата в стандартном раг.гворе, мкг; S* - площадь пятна стандартного раствора, мм*^.
$*jl - площадь пятна пробы, мм^;
Р - зео или объем пробы, взятой на анализ в г или мл.
3. Требования безопасности.
Соблюдать все тоеоования безопасности, рекоме«дсванные для работы с оргпнич* экими растворителями и со среднетоксяччыми пеотицндами.
При работе о кварцевой лампой необходимо пользоваться вето защитными очками.
4, Айе*;оцпч окис указания разработки
х,о%-хк $.0,£уотровик, ,ic.q.?x.kv Н. I. Золеннной,^.В.Кухин^овой-СЗИЧИВР, Ра*'чи*,Вороне«оо<ой обд.)
Таблица
Метрологическая характеристика метода определения кронетояа о покоям» тонкослойной хроматография. Диапазон определяемых концентраций 0,025 - С,3 м/л ми мг/кг.
Анализируемая ! Число параллель! Размах варияро-! Предел обнаруже-! Среднее эначе- ! Стандартное проба ! них определений! вання, % ! кия, мг/л, кг/кг! яие определения! отклонение,
! шт. ! ! ! * ! i
Вода |
5 |
15 |
0,025 |
90,0 |
6,4 |
Свекла |
5 |
22 |
0,2 |
85,0 |
9,6 |
Картофель |
5 |
20 |
0.2 |
87.0 |
8.4 |
Ботва |
с
W |
20 |
0,2 |
83,0 |
6,6 |
Почва |
5 |
I? |
0,1 |
84.0 |
6.7 |
-259-
ССДБРЖАНИЕ
Стр,
I
12
23
29
36
46
54 * 61
ХЛОРОРГАНлЧЕСКИБ ПЕСТИЦИДЫ
I.Временные методические указания указания по
определению ХОП (ДДТ,ДДЗ,ДДД, -ГХЦГ) в рыбе и рыбной продукции методом газожидкостной хроматографии.
2. Методические указали® по определению ХОП и сим-триазиновых пестицидов при их совместном присутствии в почве с помощью Г1Х*
3* Временные методические указания по определению остаточных количеств митрана в воде,сливах и
яблоках методом ТСХ.
ШЙОРОРГАНИЧВСКИВ ПЕСТИЦИДУ
1. Мотодические указания по определению афоса в воздухе рабочей зоны методами ГЬХ и ТСХ.
2, Временные методические указания по определению боя-стара в ботве и клубняах картофеля,листьях и стеблях хлопчатника,капусте,почве к водэ ТСХ и ГЗЕХ.
3* Методические указания по определению глифосата и его метаболита- аминометилфосфоновой кислоты методом хроматографии в воде,почве,растительном материале,
4. Мотодические указания по определению остаточных количеств дурсбана в воде,почве,лесной растительности
и биосредах методом ТСХ.
5. Временные методические указания по определению каун-тора в растениях сахарной свеклы и почве методом ТСХ,