ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ СОЮЗА ССР

КОЖЕВЕННОЕ СЫРЬЕ

МЕТОД ГИСТОЛОГО-БАКТЕРИОСКОПИЧЕСКОГО КОНТРОЛЯ

ГОСТ 13106-67

Издание официальное

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ КОМИТЕТ СССР ПО СТАНДАРТАМ Москва

УДК 675.031.001.4 : 006.354    Группа    С79

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ СОЮЗА ССР

КОЖЕВЕННОЕ СЫРЬЕ

Метод гистолого-бактериоскопического контроля

Raw hide.

Histological and bacteriological control method ОКСТУ 9800

Утвержден Комитетом стандартов, мер и измерительных приборов при Совете Министров СССР 1 августа 1967 г. Срок введения установлен

с 01.01.68

Проверен в 1986 г. Постановлением Госстандарта от 27.06.86 № 1916

‘„рок действия продлен    до    01.01.92

Несоблюдение стандарта преследуется по закону

Настоящий стандарт распространяется на кожевенное сырье и устанавливает метод гистолого-бактериоскопического контроля кожевенного сырья мокросоленого и сухого консервирования.

Сущность метода гистолого-бактерископического контроля состоит в исследовании специально приготовленных срезов сырья под микроскопом и применяется при разногласиях в оценке качества кожевенного сырья.

Применение метода предусматривает в стандартах и технических условиях, устанавливающих технические требования на кожевенное сырье.

(Измененная редакция, Изм. № 1).

1. ОТБОР ПРОБЫ

1.1. Предъявленную партию кожевенного сырья для установления бактериальности разбивают на три группы:    нормальные,

подозрительные на пораженность и бактериальные шкуры, пораженные пороком, прелина.

Для установления степени бактериальности сырья с однородным поражением отбирают по две шкуры от каждой группы.

Пробу из отобранных шкур берут так, чтобы захватить участок пораженной ткани и прилегающий к нему нормальный участок.

(Измененная редакция, Изм. № 1)._

Издание официальное    Перепечатка воспрещена

* Переиздание (август 1988 г ) с Изменением А2 1, утвержденным в июне 1986 г. (ИУС 10—86).

© Издательство стандартов, 1988

С. 2 ГОСТ 13106-67

2. АППАРАТУРА, РЕАКТИВЫ И МАТЕРИАЛЫ

2.1.    Для проведения испытания должны применяться следующие аппаратура, материалы и реактивы:

микротом;

водяная баня или электрическая плитка; формалин 10 и 20%-ный по ГОСТ 1625-75; бура по ГОСТ 8429-77; соляная кислота по ГОСТ 3118-77; уксусная кислота по ГОСТ 61-75; полуторахлористое железо 30%-ное; ацетон по ГОСТ 2603-79; ксилол по ГОСТ 9949-76; карболксилол;

этиловый спирт по ГОСТ 5962-67; резорцин;

канадский бальзам;

фуксин;

эозин;

метиленовый голубой спиртовой раствор 1%-ный; вода дистиллированная по ГОСТ 6709-72. ¹

ГОСТ 13106—67 С. 3

рованной водой и добавляют четыре капли «синьки Мансона», т. е. созревшего раствора метиленового голубого с бурой (100 см¹ дистиллированной воды нагревают до 80°С, вносят 2 г буры, затем прибавляют 1 г метиленового голубого; один раз раствор должен вскипеть). Из чашек срезы переносят в свежеприготовленную смесь красок на 5—10 мин.

После окраски срезы промывают дистиллированной водой, дифференцируют быстрым погружением в подкисленной воде (1—2 капли уксусной кислоты на 10 см¹), ополаскивают и последовательно переносят в следующие смеси ацетоно-ксилола на 2—5 мин в каждую:

а)    смесь — 95 частей ацетона и 5 частей ксилола;

б)    смесь — 70 частей ацетона и 30 частей ксилола;

в)    смесь — 30 частей ацетона и 70 частей ксилола.

Затем срезы переносят в чистый ксилол на 1—2 мин (срезы должны упасть на дно). Окрашенные и обезвоженные срезы заключают в канадский бальзам под покровное стекло.

3.3.2. Окраску срезов эластиновых волокон производят орсеи-ном (кристаллическим) или по Вайгерту.

Для приготовления раствора орсеина 1 г вещества растворяют в 100 см¹ 96%-ного этилового спирта и к раствору приливают 1 см¹ химически чистой соляной кислоты.

Для окраски срезов по Вайгерту 2 г основного фуксина растворяют в 200 см¹ дистиллированной воды, прибавляют 4 г резорцина и кипятят в фарфоровой чашечке, помешивая стеклянной палочкой несколько минут, затем прибавляют 25 см¹ 30%-ного раствора полуторахлористого железа и кипятят еще 5—10 мин, помешивая палочкой. Затем раствору дают остыть и отфильтровывают его через влажный бумажный фильтр. Фильтрат выливают, а фильтр с осадком помещают в ту же фарфоровую чашку, в которой производилось кипячение краски, и заливают 200 см¹ 96 %-ного этилового спирта. Чашку помещают па водяную баню или лучше на электрическую плитку и кипятят 5—10 мин, помешивая стеклянной палочкой, пока весь осадок не сойдет с фильтра. Фильтр вынимают, спирт выпаривают в течение 5—10 мин, чашку с раствором покрывают стеклянной пластинкой и охлаждают. После охлаждения раствор фильтруют в измерительный цилиндр, доливают до 200 см¹ 96%-ным спиртом и прибавляют 4 см¹ 25%-ного раствора химически чистой соляной кислоты.

Микросрезы опускают в фуксин Вайгерта на 15—20 мин (в случае орсеина 30 мин) проводят через специальную батарею спиртов возрастающей крепости (80%-ный, 96%-ный, абсолютный спирт), карболксилол и ксилол, после чего срезы переносят на предметное стекло и заключают в канадский бальзам под покровное стекло.

4. ПРОВЕДЕНИЕ ИСПЫТАНИЙ

4.1.    Приготовленные срезы помещают на предметный столик микроскопа. Просмотр препарата вначале проводится при слабом увеличении (об.Х5Х&). Получив четкое изображение, препарат просматривают при большем увеличении (об.Х20Х40Х60), включая иммерсионную систему. При использовании иммерсионной системы просмотр проводят с искусственным освещением (осветитель ОИ-7 или ОИ-12).

4.2.    К бактериальным относят шкуры, имеющие в сосочковом или сетчатом слоях разрушение большинства волосяных сумок, которому сопутствует базофилия или разволокненность коллагеновых волокон (при наличии количества микробов 30—40 и больше в поле зрения).

Одним из показателей сильного разрушения ткани является также фрагментация и полное растворение эластиновых волокон.

4.3.    Шкуру с нарушенной структурой ткани, при отсутствии микробов, не считают бактериальной, а нарушение относят к прижизненным (чума свиней, чесоточный клещ, микрофиллярий и т. д.). В этом случае имеются признаки воспалительного процесса — значительное скопление клеточных элементов в участке воспаления, наполнение кровеносных сосудов кровью и расширение их. Если нарушения небактериального и неприжизненного характера, то они могут явиться результатом автолиза, сварен-ности или воздействия химических веществ.

Редактор Т И. Василенко Технический редактор Э. В Митяй Корректор Л В. Сницарчук

Сдано в наб. 03 10 88 Подп в печ 07 12 88 0,5 уел п л 0,5 уст кр отт 0,26 уч изд л

Тираж 5000 Цена 3 коп.

Ордена «Знак Почета» Издательство стандартов* 123840, Москва, ГСП, Новопресненский пер , д 3 Вильнюсская типография Издательства стандартов, ул Даряус и Гирено, 39 Зак 2723

Цена 3 коп.

Величина Единица Наименование Обозначение международное русское ОСНОВНЫ Е ЕДИНИ1 1Ы СИ [Длина метр ш М Масса килограмм КГ Время секунда S С Сила электрического тока ампер А А Термодинамическая температура кельвин К К Количество вещества моль mol моль Сила света кандела cd КД ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ ЕЛ [ИНИЦЫ СИ Плоский угол радиан rad рад Телесный угол стерадиан sr ср

ПРОИЗВОДНЫЕ ЕДИНИЦЫ СИ, ИМЕЮЩИЕ СПЕЦИАЛЬНЫЕ НАИМЕНОВАНИЯ

Величина Единица Выражение через основные и до-полнительные единицы СИ Наименова- ние Обозначение междуна родное русское Частота герц Hz Гц Сила ньютон N Н M КГ - С-2 Давление паскаль Ра Па М”1 ■ КГС*2 Энергия джоуль J Дж М 2 • К Г С-2 Мощность ватт W Вт м2 КГ-С“3 Количество электричества кулон С Кл с А Электрическое напряжение вольт V В м2 кг С-3-А-1 Электрическая емкость фарад F Ф м_2кг~' - с4 А2 Электрическое сопротивление ом и Ом м2 кг с~3 • А”2 Электрическая проводимость сименс S См м-Якг-'-с3 А2 Поток магнитной индукции себер Wb Вб м2 • кг - с-2 А~‘ Магнитная индукция тесла т Тл кг с--2 А-1 Индуктивность генри н Гн м2 кг с~2 * А'2 Световой поток люмен 1т лм КД • ср Освещенность люкс 1х лк м-2 • кд • ср Активность радионуклида беккерель Bq Бк С-' Поглощенная доза ионизирую грэй Gy Гр м2 - с-2 щего излучения Эквивалентная доза излучения зиверт Sv Зв м2 • с"2

1

ПОДГОТОВКА К ИСПЫТАНИЮ

3.1.    Фиксация материала

Из отобранной пробы вырезают не менее четырех кусочков размером 1X1 см* Кусочки освобождают от грязи и шерсти, фиксируют в растворе формалина, для чего подогревают в течение 5 мин в 10%-ном растворе формалина при 50°С, а затем переносят в 20%-ный раствор формалина и снова подогревают в течение 5 мин.

3.2.    Приготовление срезов

Перед приготовлением микросрезов кусочки промывают в проточной воде в течение 30 мин и режут на замораживающем микротоме на срезы толщиной 25—30 мк. Срезы делают в вертикальном и тангенциальном направлении. Тангенциальные срезы производят из трех слоев: сосочкового, сетчатого и подкожно-жировой клетчатки.

Срезы каждого слоя помещают в отдельную чашечку с дистиллированной водой.

3.3.    Окраска срезов

3.3.1. Для выявления состояния ткани и наличия микробов срезы окрашивают сначала метиленовым голубым с эозином.

Приготовляют свежую смесь равных частей 1%-ного спиртового раствора метиленового голубого и 1%-ного спиртового раствора эозина. Полученную смесь разбавляют в два раза дистилли-