МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СОВЕТ ПО СТАНДАРТИЗАЦИИ, МЕТРОЛОГИИ И СЕРТИФИКАЦИИ
(МГС)
INTERSTATE COUNCIL FOR STANDARDIZATION, METROLOGY AND CERTIFICATION
(ISC)
МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ
СТАНДАРТ
СОРГОМетод определения содержания таннинов
(ISO 9648:1988, ЮТ)
|
Москва
Стандартинформ
2013 |
Предисловие
Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0-92 «Межгосударственная система стандартизации. Основные положения» и ГОСТ 1.2-2009 «Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, применения, обновления и отмены»
Сведения о стандарте
1 ПОДГОТОВЛЕН Государственным научным учреждением «Всероссийский научно-исследовательский институт зерна и продуктов его переработки» Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИИЗ Россельхозакадемии)
2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии
3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 7 июня 2013 г. № 43)
За принятие проголосовали: |
Краткое наименование страны по МК (ИСО 3166) 004—97 |
Код страны по МК (ИСО 3166) 004—97 |
Сокращенное наименование национального органа по стандартизации |
Армения |
AM |
Минэкономики Республики Армения |
Казахстан |
KZ |
Госстандарт Республики Казахстан |
Киргизия |
KG |
Кыргызстандарт |
Россия |
RU |
Росстандарт |
Таджикистан |
TJ |
Т аджикстандарт |
Узбекистан |
UZ |
Узстандарт |
|
4 Настоящий стандарт идентичен международному стандарту ISO 9648:88 Sorghum — Determination of tannin content (Сорго. Метод определения содержания таннинов).
Международный стандарт разработан подкомитетом ISO ТС 34/SC 4 «Зерновые» технического комитета по стандартизации ISO/TC 34 «Пищевые продукты» Международной организации по стандартизации (ISO).
Сведения о соответствии межгосударственных стандартов ссылочным международным стандартам приведены в дополнительном приложении ДА.
Перевод с английского языка (еп).
Официальный экземпляр международного стандарта, на основе которого подготовлен настоящий межгосударственный стандарт, имеется в Федеральном агентстве по техническому регулированию и метрологии Российской Федерации.
Степень соответствия — идентичная (IDT).
Настоящий стандарт подготовлен на основе применения ГОСТ Р 51227-99 (ИСО 9648—88)
5 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 28 июня 2013 г. № 299-ст межгосударственный стандарт ГОСТ ISO 9648-2013 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 июля 2014 г.
6 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ
Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном информационном указателе «Национальные стандарты», а текст изменений и поправок — в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет
© Стандартинформ, 2013
В Российской Федерации настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии
Редактор Л.В. Коретникова Технический редактор В.Н. Прусакова Корректор И.А. Королева Компьютерная верстка В.И. Гоищенко
Сдано в набор 28.10.2013. Подписано в печать 13.11.2013. Формат бОхв^/в. Гарнитура Ариал. Уел. печ. л. 1,40.
Уч.-изд. л. 0,70. Тираж 101 экз. Зак. 1332.
ФГУП «СТАНДАРТИНФОРМ», 123995 Москва, Гранатный пер., 4. www.gostinfo.ru info@gostinfo.ru Набрано во ФГУП «СТАНДАРТИНФОРМ» на ПЭВМ.
Отпечатано в филиале ФГУП «СТАНДАРТИНФОРМ» — тип. «Московский печатник», 105062 Москва, Лялин пер., 6.
ГОСТ ISO 9648-2013
Содержание
1 Область применения............................................1
2 Нормативные ссылки............................................1
3 Сущность метода..............................................1
4 Реактивы..................................................1
5 Аппаратура.................................................2
6 Отбор проб.................................................2
7 Подготовка пробы к анализу........................................2
8 Проведение анализа............................................2
9 Выражение результатов..........................................3
10 Прецизионность результатов анализа..................................3
11 Протокол испытаний............................................4
Приложение ДА (справочное) Сведения о соответствии межгосударственных стандартов ссылочным
международным стандартам...............................5
Библиография.................................................6
МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТСОРГОМетод определения содержания таннинов
Sorghum. Determination of tannin content
Дата введения1*—2014—07—01
1 Область применения
Настоящий стандарт устанавливает универсальный метод определения содержания таннинов в зерне сорго. Метод не является специфическим только для одного отдельного типа полифенолов. Вместе с тем, его эффективность подтверждена высокой отрицательной корреляцией, которая установлена в биологических опытах между энергией обмена веществ и результатами, полученными данным методом при использовании зерна сорго в качестве корма для кур.
2 Нормативные ссылки
В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на приведенные ниже стандарты. На момент опубликования действуют указанные издания. Все стандарты подвергают пересмотру, и заинтересованные стороны рассматривают возможность применения самых последних изданий нижеприведенных стандартов.
ISO 712:1985 Cereals and cereal products — Determination of moisture content (Routine reference method) (Зерновые и продукты из них. Определение содержания влаги (обычный контрольный метод))
ISO 950:1979 Cereals — Sampling (as grain) (Зерновые. Отбор проб (в зернах))
3 Сущность метода
Сущность метода состоит в экстрагировании таннинов диметилформамидом, центрифугировании и последующем их извлечении путем добавления аммоний-железо (III) цитрата и аммиака к аликвотной части верхнего слоя жидкости и в спектрофотометрическом измерении оптической плотности полученного экстракта при длине волны 525 нм. Определение содержания таннинов проводят по градуировочному графику, построенному по дубильной кислоте.
4 Реактивы
Все реактивы должны быть квалификации ч. д. а. Используют дистиллированную воду или воду, соответствующую по чистоте дистиллированной.
4.1 Дубильная кислота, раствор концентрации 2 г/дм3.
Поскольку качество дубильной кислоты оказывает определенное влияние на градуировочный график, то при сопоставлении результатов, полученных в разных лабораториях, рекомендуется использовать дубильную кислоту фирмы «Merck» (номер 773 по каталогу фирмы)1).
г’ Дату введения стандарта в действие на территории присоединившихся государств устанавливают их национальные органы по стандартизации.
2) Дубильная кислота фирмы «Merck» с каталожным номером 773 упомянута как пример коммерчески доступного препарата. Информация приведена для удобства пользователей настоящим стандартом и не накладывает обязательств использования данного продукта.
Издание официальное
Приготовленный раствор можно хранить одну неделю.
4.2 Аммиак, раствор NH3 концентрации 8,0 г/дм3.
4.3 Диметилформамид, раствор концентрации 75 % (по объему).
Помещают 75 см3 диметилформамида в мерную колбу вместимостью 100 см3. После охлаждения доводят до метки водой.
Внимание: Диметилформамид вреден для здоровья при вдыхании или контакте с кожей. Он также раздражает глаза.
4.4 Аммоний-железо (III) цитрат с содержанием железа от 17 % до 20 % (по массе), раствор концентрации 3,5 г/дм3, приготовленный за 24 ч до использования.
Поскольку содержание железа в аммоний-железо (III) цитрате оказывает влияние на результаты анализа, это следует обязательно учитывать.
5 Аппаратура
При анализе используют следующую аппаратуру.
5.1 Механическая дробилка, обеспечивающая получение частиц, полностью проходящих через сито (5.2).
5.2 Сито с отверстиями размером 0,5 мм.
5.3 Центрифуга с фактором разделения 3000 д.
5.4 Пробирки для центрифугирования вместимостью около 50 см3, с притертыми пробками, обеспечивающими герметичность закрывания.
5.5 Механическая мешалка с возвратно-поступательным движением или магнитная мешалка.
5.6 Механическая качалка для пробирок (типа Vortex).
5.7 Спектрофотометр с кюветами толщиной 10 мм, позволяющий проводить измерения при длине волны 525 нм.
5.8 Пипетки на 1, 5 и 20 см3.
5.9 Пипетки градуированные на 5 и 10 см3.
5.10 Пробирки размером 140 х 14 мм.
5.11 Колбы мерные вместимостью 20 см3.
6 Отбор проб
Отбор проб проводят в соответствии с ISO 950.
Зерно сорго, предназначенное для определения содержания таннинов, в высушенном виде можно хранить в течение 3 мес в защищенном от света месте.
7 Подготовка пробы к анализу
Из лабораторной пробы зерна сорго удаляют все посторонние примеси и измельчают зерно на механической дробилке (5.1) до получения частиц, полностью проходящих через сито (5.2). Продукт после измельчения тщательно перемешивают.
Так как таннины в измельченных продуктах быстрее окисляются, чем в целых, анализ рекомендуется проводить сразу же после измельчения.
Примечание — Измельченный продукт можно хранить в течение трех дней, если он защищен от света и высушен.
8 Проведение анализа8.1 Определение влажности анализируемой пробы зерна
Влажность анализируемой пробы зерна определяют по ISO 712.
8.2 Навеска для анализа
Навеску анализируемой пробы зерна (раздел 7) массой около 1 г взвешивают с точностью ±1 мг и помещают в пробирку для центрифугирования (5.4).
8.3 Метод определения
8.3.1 Пипеткой (5.8) отмеряют 20 см3 раствора диметилформамида (4.3) и переносят в пробирку для центрифугирования. Герметично закрывают пробирку пробкой и перемешивают в течение (60 ± 1) мин на мешалке (5.5). Затем центрифугируют в течение 10 мин при 3000 д. 1
8.3.2 Отбирают пипеткой (5.8) 1 см2 жидкости из верхнего слоя (8.3.1) и переносят ее в пробирку вместимостью 10 см2 (5.10). Последовательно добавляют пипеткой 6 см2 воды и 1 см2 раствора аммиака (4.2), затем встряхивают на механической качалке (5.6) в течение 10 с.
8.3.3 Отбирают пипеткой (5.8) 1 см2 жидкости из верхнего слоя (8.3.1) и переносят ее в пробирку вместимостью 10 см2 (5.10). Последовательно добавляют пипеткой 5 см2 воды и 1 см2 раствора аммоний-железо (III) цитрата (4.4), встряхивают в течение 10 с на механической качалке (5.6), затем добавляют пипеткой 1 см2 раствора аммиака (4.2) и снова встряхивают в течение 15 с на качалке (5.6).
8.3.4 Полученные в 8.3.2 и 8.3.3 растворы переносят в измерительные кюветы и через (10 + 1) мин после завершения операций по 8.3.2 и 8.3.3, измеряют на спектрофотометре (5.7) оптическую плотность раствора при длине волны 525 нм, используя в качестве контрольного раствора дистиллированную воду.
За результат определения принимают разницу между двумя значениями оптической плотности, полученными при измерении опытного и контрольного растворов.
8.4 Количество определений
Из одной анализируемой пробы отбирают две навески и проводят два определения.
8.5 Построение градуировочного графика
Строят градуировочный график в день измерений, как описано ниже:
a) готовят шесть мерных колб или пробирок вместимостью 20 см2 и градуированной пипеткой (5.9) помещают в них соответственно 0, 1,2, 3, 4 и 5 см2 раствора дубильной кислоты (4.1). Доводят до метки раствором диметилформамида (4.3). Полученная таким образом градуировочная шкала соответствует содержанию дубильной кислоты 0; 0,1; 0,2; 0,3; 0,4 и 0,5 мг/см2 соответственно;
b) в пробирки вместимостью 10 см2 (5.10) отмеряют пипеткой по 1 см2 каждого из этих растворов и последовательно добавляют пипеткой (5.8) по 5 см2 воды и 1 см2 раствора аммоний-железо (III) цитрата (4.4). Встряхивают в течение 10 с на качалке. Затем добавляют по 1 см2 раствора аммиака (4.2) и снова встряхивают в течение 15 с на качалке (5.6).
Полученные таким образом растворы переносят в измерительные кюветы и через (10 + 1) мин определяют на спектрофотометре оптическую плотность раствора при установленной длине волны 525 нм, используя в качестве контрольного раствора дистиллированную воду.
c) строят градуировочный график, откладывая значения оптической плотности на оси ординат, а соответствующие концентрации дубильной кислоты в миллиграммах на кубический сантиметр, в пределах градуировочной шкалы [перечисление а)], — на оси абсцисс.
Кривая не должна проходить через начало координат и ее не следует корректировать с учетом нуля в выбранной шкале концентраций.
9 Выражение результатов
Массовую долю таннинов X, %, (отношение массы дубильной кислоты к массе сухого вещества) вычисляют по формуле
Х = — 100
т 100-Н’
где с— концентрация дубильной кислоты, в анализируемом растворе по градуировочному графику, мг/см2 [8.5, перечисление с)]; т — масса навески, г (8.2);
Н— влажность анализируемой пробы, % (8.1).
За результат анализа принимают среднеарифметическое значение двух определений, при условии обеспечения допустимых норм расхождений по повторяемости, определяемых с помощью линейной интерполяции по таблице 1.
10 Прецизионность результатов анализа
Во Франции проведены межлабораторные испытания, в которых приняли участие девять лабораторий. Результаты восьми из них подвергнуты статистическому анализу. В каждой лаборатории проводилось по три измерения для одной и той же пробы. Результаты статистической обработки данных (по [1]) приведены в таблице 1.
Таблица 1 — Содержание дубильной кислоты, % на сухое вещество |
Параметры статистической обработки |
Сорт Ардженс |
Сорт НК 121 |
Сорт Султан |
Среднеарифметическое значение |
0,05 |
0,62 |
1,11 |
Среднеквадратическое отклонение повторяемости sr |
0,01 |
0,02 |
0,02 |
Коэффициент вариации повторяемости, % |
21 |
3,3 |
1,9 |
Повторяемость, 2,8 sr |
0,03 |
0,06 |
0,06 |
Среднеквадратическое отклонение воспроизводимости sR |
0,02 |
0,03 |
0,07 |
Коэффициент вариации воспроизводимости, % |
44 |
4,8 |
6,1 |
Воспроизводимость, 2,8 sR |
0,06 |
0,08 |
0,19 |
|
11 Протокол испытаний
В протоколе испытаний должны быть указаны использованный метод, изготовитель и каталожный номер использованной дубильной кислоты, а также полученные результаты. Должны быть отмечены все подробности проведения испытаний, не оговоренные в настоящем стандарте или считающиеся необязательными, а также все случайные факторы, которые могут оказать влияние на результаты.
Протокол испытаний должен включать всю информацию, необходимую для полной идентификации пробы. 3
Приложение ДА (справочное)
Сведения о соответствии межгосударственных стандартов ссылочным
международным стандартам
Таблица ДА.1 |
Обозначение и наименование ссылочного международного стандарта |
Степень
соответствия |
Обозначение и наименование межгосударственного стандарта |
ISO 712:1985 Cereals and cereal products — Determination of moisture content (Routine reference method) |
— |
* |
ISO 950:1979 Cereals — Sampling (as grain) |
— |
* |
* Соответствующий межгосударственный стандарт отсутствует. До его принятия рекомендуется использовать перевод на русский язык данного международного стандарта или гармонизированный с ним национальный (государственный) стандарт страны, на территории которой применяется настоящий стандарт. Информация о наличии перевода данного международного стандарта в национальном фонде стандартов или в ином месте, а также информация о действии на территории страны соответствующего национального (государственного) стандарта может быть приведена в национальных информационных данных, дополняющих настоящий стандарт. |
|
5
ГОСТ ISO 9648-2013
Библиография
[1] ISO 5725:1986 Precision of test methods; Determination of repeatability and reproducibility for a standard test method by inter-laboratory tests
6
УДК 633.174.001.4:006.354 МКС 67.060 ЮТ
Ключевые слова: сельскохозяйственные продукты, зерно сорго, химический анализ, таннины, содержание таннинов, градуировочный график, повторяемость, воспроизводимость результатов
7
1
2
3