ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО ПО ТЕХНИЧЕСКОМУ РЕГУЛИРОВАНИЮ И МЕТРОЛОГИИ

НАЦИОНАЛЬНЫЙ

СТАНДАРТ

РОССИЙСКОЙ

ФЕДЕРАЦИИ

ПЕКТИН.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Метод экспресс-идентификации пектинов

Издание официальное

Москва Стандарти нформ 2011

Предисловие

Цели и принципы стандартизации в Российской Федерации установлены Федеральным законом от 27 декабря 2002 г. № 184-ФЗ «О техническом регулировании», а правила применения национальных стандартов Российской Федерации — ГОСТ Р 1.0-2004 «Стандартизация в Российской Федерации. Основные положения»

Сведения о стандарте

1    РАЗРАБОТАН Государственным образовательным учреждением высшего профессионального образования «Московский государственный университет пищевых производств» Министерства образования и науки Российской Федерации (ГОУ ВПО «МГУПП»)

2    ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 154 «Пищевые добавки и ароматизаторы»

3    УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 30 ноября 2010 г. № 703-ст

4    ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодно издаваемом информационном указателе «Национальные стандарты», а текст изменений и поправок — в ежемесячно издаваемых информационных указателях «Национальные стандарты». В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячно издаваемом информационном указателе «Национальные стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет

© Стандартинформ, 2011

Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии

НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ПЕКТИН.

ИДЕНТИФИКАЦИЯ

Метод экспресс-идентификации пектинов

Pectin. Identification. Method of the express-identification of pectins

Дата введения — 2012—01—01

1    Область применения

Настоящий стандарт распространяется на пищевую добавку пектин (Е440) (далее по тексту — пектин), применяемый в производстве пищевых и непищевых продуктов, и устанавливает качественный метод экспресс-идентификации пектинов.

2    Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:

ГОСТ Р 8.563-96 Государственная система обеспечения единства измерений. Методики (методы) измерений

ГОСТ Р 51806-2001 Пектин. Термины и определения

ГОСТ 12.1.005-88 Система стандартов безопасности труда. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны

ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности

ГОСТ 12.1.010-76 Система стандартов безопасности труда. Взрывобезопасность. Общие требования

ГОСТ 12.1.018-93 Система стандартов безопасности труда. Пожаровзрывобезопасность статического электричества. Общие требования

ГОСТ 12.1.019-2009 Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты

ГОСТ 450-77 Кальций хлористый технический. Технические условия

ГОСТ 1770-74 (ИСО 1042—83, ИСО 4788—80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия

ГОСТ 3118-77 Реактивы. Кислота соляная. Технические условия ГОСТ 4328-77 Реактивы. Натрия гидроокись. Технические условия ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия

ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

Примечание — При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодно издаваемому информационному указателю «Национальные стандарты», который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по соответствующим ежемесячно издаваемым информационным указателям, опубликованным в текущем году. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

Издание официальное

3    Термины и определения

В настоящем стандарте применены термины и определения по ГОСТ Р 51806.

4    Сущность метода

Метод основан на деэтерификации анализируемой пробы в щелочной среде, с ее последующим ферментативным гидролизом и фотометрическим измерением продуктов гидролиза при 235 нм.

Увеличение разницы между значениями оптической плотности раствора пробы в начале и конце ферментативного гидролиза более чем на 0,023 единицы позволяет идентифицировать пробу как пектин.

5    Средства измерений, оборудование, реактивы, стандартные вещества, растворы, посуда

Весы лабораторные с пределом допускаемой абсолютной погрешности однократного взвешивания + 0,1 г.

Дозаторы калиброванные автоматические или пипетки стеклянные калиброванные с подходящим интервалом дозирования.

Спектрофотометр или фотометр с шириной спектральной полосы не более 10 нм и допустимой абсолютной погрешностью измерений оптической плотности не более 1 %, позволяющий проводить измерения при 235 нм.

Кюветы из кварцевого стекла рабочей длиной 10 мм. pH-метр с погрешностью измерения не более 0,05 pH.

Колбы мерные по ГОСТ 1770, исполнения 2, вместимостью 100 иЮОО см³.

Стакан по ГОСТ 25336 типа В, исполнения 1, вместимостью 100 см³.

2-Пропанол, х. ч.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Натрия гидроокись по ГОСТ 4328.

Кислота соляная по ГОСТ 3118.

Трис(гидроксиметил)аминометан, х. ч.

Кальций хлористый по ГОСТ 450.

Препарат пектатлиазы.

Допускается применение других средств измерений с метрологическими характеристиками, вспомогательного оборудования с техническими характеристиками, а также реактивов по качеству, не хуже вышеуказанных.

6    Подготовка к проведению анализа

6.1    При подготовке и проведении анализа должны быть соблюдены следующие условия:

температура окружающей среды............от    10    °С до 25 °С;

относительная влажность воздуха...........от    40    % до 70 %.

6.2    Приготовление раствора гидроокиси натрия молярной концентрации c(NaOH) = 0,5 моль/дм³

20,005 г сухой гидроокиси натрия растворяют в 500 см³ дистиллированной воды в мерной колбе вместимостью 1000 см³, затем объем раствора в колбе доводят до метки дистиллированной водой. Срок хранения раствора — не более 1 мес.

6.3    Приготовление раствора соляной кислоты молярной концентрации с(НС1) = 0,5 моль/дм³

В мерную колбу вместимостью 1000 см³ вносят 41,2 см³ (или 49,02 г) концентрированной соляной кислоты, добавляют 500 см³ дистиллированной воды, тщательно перемешивают, доводят объем раствора в мерной колбе до метки.

Срок хранения раствора — не более 1 мес.

6.4    Приготовление раствора соляной кислоты молярной концентрации с(НС1) = 1,0 моль/дм³

В мерную колбу вместимостью 1000 см³ вносят 82,4 см³ (или 98,04 г) концентрированной соляной кислоты. Добавляют 500 см³ дистиллированной воды, тщательно перемешивают и доводят объем раствора в мерной колбе до метки.

Срок хранения раствора — не более 6 мес. ¹

ГОСТ Р 54067-2010

6.5    Приготовление буферного раствора активной кислотностью pH 7,0

6,055 г сухого трис(гидроксиметил)аминометана и 0,147 г кальция хлористого растворяют в 500 см² дистиллированной воды в мерной колбе вместимостью 1000 см². После растворения реактивов pH раствора доводят до значения 7,0 при помощи добавления раствора соляной кислоты молярной концентрацией c(HCI) = 1,0 моль/дм² по 6.3. После корректировки pH доводят объем буферного раствора в мерной колбе дистиллированной водой до метки.

Срок хранения раствора — не более 1 мес.

6.6    Приготовление раствора пектатлиазы

0,5 г препарата пектатлиазы растворяют в стакане вместимостью 100 см² в 50 см² буферного раствора по 6.4. Раствор пектатлиазы готовят непосредственно перед проведением испытания.

7 Проведение анализа

7.1    Проведение деэтерификации пробы в щелочной среде

0,05 г анализируемой пробы вносят в мерную колбу вместимостью 100 см². Поверхность пробы равномерно увлажняют 2-пропанолом. В колбу добавляют 50 см² дистиллированной воды. Тщательно перемешивают содержимое энергичным встряхиванием. С помощью раствора гидроокиси натрия молярной концентрации c(NaOH) = 0,5 моль/дм² по 6.1 доводят pH раствора в колбе до значения 12,0. Тщательно перемешивают содержимое колбы и оставляют для завершения реакции деэтерификации на 15 мин при комнатной температуре. Затем объем раствора в колбе доводят до метки дистиллированной водой.

7.2    Для проведения анализа в три кюветы из кварцевого стекла дозируют реактивы в соответствии со схемой, приведенной в таблице 1.

Таблица 1 в см

Наименование Раствор Объем Дистиллированная Раствор кюветы буферный пробы вода пектатлиазы « КОНТрОЛЬфермент^ 0,5 1,0 1,0 — « КОНТрОЛ ЬПр0ба^ 0,5 — 1,5 0,5 «Проба» 0,5 1,0 0,5 0,5

Общий объем инкубационной смеси в каждой кювете составляет 2,5 см². После добавления в кюветы всех реактивов содержимое перемешивают стеклянными палочками и измеряют в каждой кювете при 235 нм на спектрофотометре (фотометре) начальное значение оптической плотности смеси Л₀. Оставляют кюветы на 10 мин при комнатной температуре.

Проводят измерение при 235 нм на спектрофотометре (фотометре) конечного значения оптической плотности Л₁₀ смеси в каждой кювете.

8 Обработка результатов измерений

8.1 Расчет общего начального значения оптической плотности, Л_0об_Щ, рассчитывают по формуле

Л) общ ⁼ Л) пр " (А) к. ф ⁺ Л) К. п)’    (1)

—    начальное значение оптической плотности смеси в кювете «Проба»;

—    начальное значение оптической плотности смеси в кювете «Контроль_{фермент}»;

—    начальное значение оптической плотности смеси в кювете «Контроль_проба».

Расчет общего конечного значения оптической плотности, Л_10общ, рассчитывают по формуле

^10 общ " ^АЮ пр " Ию к. ф ⁺ АЮ к. п)’    (2)

где Л_{10 пр} — конечное значение оптической плотности смеси в кювете «Проба»;

Лю _к ф — конечное значение оптической плотности смеси в кювете «Контроль_{фермент}»;

Л_{10к п} — конечное значение оптической плотности смеси в кювете «Контроль_проба».

8.3 Расчет разницы между общими значениями начальной и конечной оптической

плотности

Разницу ДА, между общими значениями начальной А_{0 общ} и конечной А_{10 общ} оптической плотности рассчитывают по формуле

ДА - А_{10 общ} — А_{0 общ}.    (3)

Значение разницы оптических плотностей ДА должно составлять более 0,023 ед. Если значение ДА <0,023 ед., испытуемая проба не является пектином.

9 Требования безопасности

При проведении анализа следует соблюдать:

-    требования электробезопасности — в соответствии с ГОСТ 12.1.019;

-    требования пожаровзрывобезопасности статического электричества — в соответствии с ГОСТ 12.1.018;

-    требования взрывобезопасности — в соответствии с ГОСТ 12.1.010;

-    требования безопасности при работе с чистыми веществами, установленные для работ с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами, — по ГОСТ 12.1.007.

Контроль за содержанием вредных веществ в воздухе рабочей зоны следует проводить в соответствии с ГОСТ 12.1.005.

К проведению анализов допускаются лица, имеющие квалификацию не ниже среднего технического образования, владеющие навыками проведения анализов и изучившие инструкции по эксплуатации используемой аппаратуры. ³

УДК 664.863.292:006.354    ОКС 67.080.01    Н99    ОКСТУ    9709

Ключевые слова: пектин, идентификация, метод экспресс-идентификации пектина, качественное определение пектина ⁴

Редактор М.Е. Никулина Технический редактор Н.С. Гоишанова Корректор В.Е. Нестерова Компьютерная верстка В.И. Гоищенко

Сдано в набор 26.09.2011. Подписано в печать 18.10.2011. Формат бОхвД¹/^ Гарнитура Ариал. Уел. печ. л. 0,93.

Уч.-изд. л. 0,53. Тираж 191 экз. Зак. 972.

1

2

3

4

ФГУП «СТАНДАРТИНФОРМ», 123995 Москва, Гранатный пер., 4. www.gostinfo.ru info@gostinfo.ru Набрано во ФГУП «СТАНДАРТИНФОРМ» на ПЭВМ.

Отпечатано в филиале ФГУП «СТАНДАРТИНФОРМ» — тип. «Московский печатник», 105062 Москва, Лялин пер., 6.