Товары в корзине: 0 шт Оформить заказ
Стр. 1
 

19 страниц

396.00 ₽

Купить официальный бумажный документ с голограммой и синими печатями. подробнее

Официально распространяем нормативную документацию с 1999 года. Пробиваем чеки, платим налоги, принимаем к оплате все законные формы платежей без дополнительных процентов. Наши клиенты защищены Законом. ООО "ЦНТИ Нормоконтроль".

Наши цены ниже, чем в других местах, потому что мы работаем напрямую с поставщиками документов.

Способы доставки

  • Срочная курьерская доставка (1-3 дня)
  • Курьерская доставка (7 дней)
  • Самовывоз из московского офиса
  • Почта РФ

Распространяется на гонадотропные гормоны - гонадотропный гормон сыворотки крови жеребых кобыл, фолликулостимулирующий гормон и лютеинизирующий гормон - стандарты, предназначенные для определения гормональной активности гонадотропных гормонов, используемых для лечения некоторых форм бесплодия у сельскохозяйственных животных и пушных зверей, а также стимуляции супер-овуляции у коров-доноров эмбрионов и повышения плодовитости у свиноматок

Показать даты введения Admin

Страница 1

ГОСТ Р 50667-94

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТЛНДЛ!-! 1>(Х.( П1К.КОИ ФЕДЕРАЦИИ тм-|"1 hiii—ИМИНИШ1 -к'.чапс- ага—— ■ — и

ГОРМОНЫ ГОНАДОТРОПНЫЕ

ОБЩИЕ ТЕХНИЧЕСКИЕ УСЛОВИЯ

Издание офипиалыюе

ГОС.«. ГА ИД АНТ l-ot ГНИ Москва

Страница 2

ГОСТ Р .SOfv67-»4

Предисловие

1    РАЗРАБОТАН Всероссийским государственным научно-исследо-■ательсккм институтом кошроля. стандарт танин и ссртнфика-иии ветеринарных препаратов (ВГНКИ) с участием епсциачнс* той Всероссийского раучно-исслсдовагедьско'о-нистнт; га ж;нгл-ноиодства (ВИЖ), Всероссийского научпо'исслсдсиате.и-с.чого института ра »::е.-еи:гя и ••ргсшки сельскохозяйственных я'чиот-нмх (ВМИИРГЖ), Всероссийского научно-нсслеловательско.о вргсрниррного института н.ио:огин, фармакологии и гсрлшгн

' (ВНКВИПФ н Т)

ВНЕСЕН Депаи».»!«'Ч''<»м ветеринарии .Министерств <е*ы*с?о xu'nf.4i»:i РрссчЛс:.ой Федерации

2    ПРЧКЯ I И Г» 15 Г Л £ У- В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Госсган-j',c*.p:a России Л 133 о» 27.04.94

3    ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

!&• И да?с.и.ств1‘ стандартов. »‘Ч‘ *

Насюотмй »    ir    '.*вжгт    Гыт).    м    ,г>к*т1.:о ка* «ютипш® г«гяр*.

TnpaA.u('ou,'.:t и    ft|>or«г^iicu п иач.-си* о' ип:1Саи«ого и 10а:ш« f -г l'i«P

иии Госодмларта Ропии

II

Страница 3

ГОСТ ? 50667-94

Г О Л К Р Ж Л М И К

1    0«>.1ЙСТ>. прмченсяия

2    I (ормятиинчс ссылки ...    •    .

Л Общие H-xini'H'CKiic трсЛовзнии

1 Гпобивания ticionacuociii .* Нрлппла прномкн

(i ЛЬмоды испытаний.....

7 Трат иортщмннние и хранение.....

* Гарантии лпимотм* -Hullio/Ki .nif Л

111

'2 1*1

Страница 4

ГОСТ Р 50667—W

государственный стандарт российской федерации

ГОРМОНЫ ГОНАДОТРОПНЫЕ Общие технические условия

Honadot'opic Нйггаопет. Spcctf;citioiw

Дата введения 1994 «И -01

1    ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Настоящий стандарт распространяется на гоняла гропние гор-моны — гонадотропный гормон сыпоропчи кропи жеребых гобмл (ГСЖК), фодликулостпмулирующий гормгл (ФСГ) и лхненшпи-рующнй гормон (ЛГ) — стандарты, предназначенные дли определения гормональной активности гонадотропных гормонов, используемых для лечения некоторых форм бесплодия у слтьско'озянсг-венных животных н пушных зверей, а так/:е стиму ляпни сунор-ог.улянн» у коров-донороп эмбрионов и аоиынк-иан нлодшшгоа а ; евниома.ок.

2    НОРМАТИВНЫЕ ССЫЛКИ

В настоящем стандарте нспользопяпы ссылка на следующие стандарты и технические условия:

ГОСТ 4233-77 Нагрнй хлористый. Технические условия ГОСТ G709—72 Воча дистиллированная. Технические условия ГОСТ 7625-86 Бумага этикеточная. Технические условия ГОСТ 9284-75 Стекла предметные для микропрспаратов. Технические условия

ГОСТ 12301-81 Коробки из картона, бумаги п комбинированных материалов. Общие технические условия

ГОСТ 13357-87 Ящики дощатые для кондитерских изделий. Технические условия

ГОСТ 14192-77 Маркировка грузов

ГОСТ 18300-87 Спирт этиловый ректификованный технический. Технические условия

И)даиме официальное ?•

1

Страница 5

ГОСТ Р «№67-94

ГОСТ 18510 -87 Бумага писчая. Технические условия ГОСТ 21241-89 Пинцеты медицинские. Общие технические требования и методы испытаний

ГОСТ 22967-90 Шприцы медицинские инъекционные многократного применения. Общие технические требования и методы испытаний

ГОСТ 240(31 -89 Препараты биологические сухие. Метод определения влажности

ГОСТ 24104-88 Весы лабораторные общего назначения и образцовые. Общие технические условия

ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ 25377-82 Иглы инъекционные многократного применения. Технические условия

ГОСТ 28085-89 Препараты биологические. Метод бактериологического контроля стерильности

ОСТ 64—009—86 Колпачки н прокладки алюминиевые к флаконам и бутылкам для лекарственных средств, крови и кровезаменителей

ТУ 38.006—108—90 Пробка АБ резиновая ТУ 38.106—293—78 Пробка резиновая для укупорки эндокринных и других лекарственных препаратов

ТУ 38.106—416—82 Пробка резиновая для лнофнлнзацин биологических препаратов

ТУ 46—21—936—74 Сыворотка крови лошадей ТУ 64—2—10—87 Флаконы из трубки стеклянной для лекарственных средств

ТУ 64 -3—218—85 Гонадотропин хорионический для ветеринарии

3 ОБЩИЕ ТЕХНИЧЕСКИЕ ТРЕБОВАНИЯ

3.1    Гонадотропные гормоны — стандарты, полученные из сыворотки крови жеребых кобыл (ГСКЖ). гипофизов свиней — фол-ликулостнмулнрующий (ФСГ). передней доли гипофизов крупного рогатого скота — лютеиннзируюший (ЛГ), должны соответствовать требованиям настоящего стандарта и изготовляться но технологическим инструкциям, утвержденным в установленном порядке.

3.2    Спок годности лнофнльно высушенных гонадотропных стандартов (ГСЖК. ФСГ и ЛГ) — 3 года с момента изготовления при температуре хранении 2— !0Т..

3.3. Характеристика

33 1 Гока икание томоны {ГСЖК. ФСГ и ЛП — стандарты JiO фнчико-хнчичо»'*!)/    '■ о/и и i^.-r:.v ;.'*г »1 и лпм :о \л :;м

С(ютвотсгвоиат|«    :• нормам. ,к.'«Ч1(ым н таблице I.

2

Страница 6

ГОСТ Р 50667

Таблица I

Н«им<-и<ю<мис ио«аЭ*Т«ДЯ

Характерно**» я И1>5*м

ГСЖК

♦CI

лг

Внешний вид

Сухая аморфная масса

Цвет

Белый или се

Белый пли

серовато-жел-

ровато-белый

тый

Наличие механических при

11с допускается

месей

Растворимость

Растворяется полностью п дистиллированной

Массовая доля влаги. 1Ь, иг более Стерильность Безвредность Лкафилактогеииость

воде или физиологическом растворе в течение 1—2 мни. образуя прозрачный раствор светло-желтого цвета

4    I    4

Должен быть стерильным Должен быть безвредным Не должен вызывать анафилактогениой реакции у сенсибилизированных морских свинок


1400

500

2.1-3.)


500


1000


Активность гормональная во флаконе, не менее: м.е. (мышиная единица)

ИЕ (интернациональная единица)

Соотношение ФСГ/ЛГ п ус-лонных единицах


3.4 Упаковка

3.4.1.    Гонадотропный гормон (вместе с наполнителем) фасуют по 2 см3 во флаконы из нейрального стекла вместимостью 5 ем-1 но ТУ 64—2—10 н.ш по ТУ G-I—0709—10, укупоривают стериль-ньгх«и пробками по ТУ М.106—41£ или по ТУ 38.106 — 293 и обкатывают алюминиевыми колпачками по ОСТ 64—009.

Погрешность фасовки должна составлять -'-5%.

3.4.2.    На каждый флакон наклеивают этикетку из бумаги по ГОСТ 7625 или ГОСТ 18510 или несмываемой краской по стеклу наносят надпись с указанием: наименования предприятия-изготовителя, наименования препарата, номера серии, гормональной активности препарата в мышиных единицах (м.е.). интернациональных единицах (ИЕ).даты изготовления (месяц, год), срока годности.

3.4.3 Флаконы с препаратом укладывают п картонные коробки с наличием гнезд или перегородок по ГОСТ 12301, обеспечивающих целостность препарата (стандарта).

з

Страница 7

ГОСТ Р 50667 -94

В каждую коробку с гонадотропным гормоном вкладывают наставление по применению препарата .

На каждую коробку наклеивают этикетку с указанием: наименования предприятия-изготовителя, наименования препарата, обозначения «Стандарт», количества флаконов в коробке, даты изготовления {месяц, год), срока годности, условий хранения, гормональной активности препарата во флаконе в мышиных единицах (м.е.) и интернациональных единицах (ИЕ.) номера серии, номера контроля, обозначения настоящего стандарта.

3.4.4 Коробки с гонадотропным гормоном упаковывают в дощатые ящики по ГОСТ 13357 массой брутто не более 20 кг, которые при соблюдении условий транспортирования должны обеспечивать сохранность и целостность флаконов с препаратом.

Внутрь каждого ящика вкладывают контрольный лист с указанием: наименования препарата и его количества, номера серии, даты упаковки, фамилии или номера упаковщика.

3.5. .Маркировка

.3.5.1 На каждое грузовое место наносят транспортную маркировку по ГОСТ 14192 с указанием манипуляционных знаков: «Осторожно, хрупкое?», «Боится нагрева» и предупредительную, надпись «Биопрепараты»».

.Маркировка, характеризующая данные об улаконанной продукции, должна содержать следующие обозначения: наименование предприятия-изготовителя, наименование препарата, его количество в ящике, срок годности, дату изготовления, условия хранения, номер серии, обозначение настоящего стандарта.

3.5.2 Совмещение транспортной маркировки и маркировки, характеризующей данные об упакованной продукции, на одной стороне транспортной тары не допускается.

4 ТРЕБОВАНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ

4.1    Гормоны гонадотропные относятся к группе Б.

4.2    Требования безопасности, производственной санитарии и санитарно-противоэпидемического режима выполяются в соответствии с «Правилами техники безопасности, пронзводстпенной санитарии и санитарно-ир"от>:воэпндсмического режима для предприятий по производству бактерийных и вирусных препаратов», утвержденными Минздравом СССР 30 августа 1979 г., н «Правилами безопасности, производственной санитарии, охранно-карантинного н ветеринарно-санитарного режимов на предприятиях биологической промышленности», утвержденными Главным управлением ветеринарии I'ocaiponpoMa СССР 14 июля 1989 г.

4

Страница 8

ГОСТ Р 50667-94

5    ПРАВИЛА ПРИЕМКИ

5.1    Гонадотропные гормоны принимают сериями.

Под серией понимают любо.; количество гонадотропного препарата (ГСЖК, ФСГ или ЛГ), полученное за один технологический цикл и оформленное одним документом о качестве (паспорт).

5.2    Каждая серия гонадотропных стандартов (ГСЖК. ФСГ, ЛГ) должна быть принята контролером предприятия-изготовителя.

5.3    Для контроля качества гонадогропного гормона составляют выборку из упаковочных единиц, отобранных в разных местах серии. в количестве, определяемом по формуле п=0,4У N. где»— отобранное для испытания препарата количество упаковочных единиц (объем выборки), Л( — количество упаковочных единиц в серии. 0,4 -г- постоянный коэффициент выборки. Из выборки методом случайного отбора берут 20 флаконов.

5.4    При получении неудовлетворительных результатов испытаний хотя бы по одному показателю по нему проводят повторные испытания на удвоенном количестве флаконов с препаратом.

Результаты повторных испытаний распространяют па всю серию.

При получении неудовлетворительных результатов повторной проверки испытуемую серию бракуют.

5.5    По требованию потребителя проверку качества стандарта гонадотропных препаратов проводит комиссионно на предприятии-изготовителе Всероссийский государственный научно-исследовательский институт контроля, стандартизации к сертификации ветеринарных препаратов (ВГНКИ).

6    МЕТОДЫ ИСПЫТАНИИ

6-1 Метод отбора проб

6.1.1 Из проб, отобранных по 3.3, 10 флаконов используют для испытания, а остальные 10 флаконов хранят н архиве предприятия-изготовителя в течение 3,5 лет.

6.2    Для определения внешнего вида, цвета, наличия или отсутствия механической примеси флаконы с препаратом подвергают визуальному осмотру. Одновременно проверяют прочность упаковки (укупорки).

6.3    Растворимость стандартов гонадотропных препаратов определяют путем добавления в 2 флакона ко 10 см3 физиологического раствора или дистиллированной волы.

6.4    Определение массовой доли влаги

Определение массовой доли влаги проводят по ГОСТ 24061.

5

Страница 9

ГОСТ Р 50667-94

65 Определение стерильности

Стерильность гормона определяют по ГОСТ 28085.

6.6    Определение безвредности

6.6.1    Аппаратура, материалы, реактивы

Шприцы вместимостью I и 10 см3 по ГОСТ '22967.

Иглы инъекционные по ГОСТ 25377.

Натрий хлористый по ГОСТ 4233.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Мыши белые массой 18—20 г.

Свинки морские массой 350—400 г.

6 6.2 Проведение испытаний

Содержимое двух флаконов растворяют в 10 см» стерильного физиологическою раствора. Пяти клинически здоровым морским свинкам живой массой 300-400 г подкожно а область паха вводит по-1,0—1,5 см5 раствора препарата и по 0,5 см3 раствора препарата пяти здоровым белым мышам массой 18—20 г подкожно в область спины. Наблюдение за животными ведут в течение 10 сут.

6.6.3 Обработка результатов

Все подопытные животные должны оставаться клинически здоровыми и течение 10 сут. При гибели одной морской свинки или мыши проверку препаратов повторяют на удвоенном количестве животных При гибели хотя бы одного животного в повторном опыте препарат бракуют.

6.7    Проверка на анафнлактогеггиость

6.7.1    Аппаратура, материалы, реактивы

Шприцы вместимостью 1 и 2 см1 по ГОСТ 22967.

Иглы инъекционные но ГОСТ 25377.

Натрий хлористый по ГОСТ 4233.

Спирг этиловый технический по ГОСТ 18300

Вода дистиллированная но ГОСТ 6709.

Сыворотка крови лошадей по ТУ 4й—2i—936.

Свинки морские мчссой 300-400 г.

6.7.2    Проведение испытания

Для сенсибилизации шести морским свинкам однократно mu-кожно вводят 0,15—0,20 см3 сыворотки крови лошадей. Через 14—21 сут трем морским свинкам (опытная группа) виутрисер-дечпо вводят 1.5—2.0 см* предварительно растворенного в 10 ем3 физиологического ряотпора гонадотропного гормона ГСЖК, ФСГ или Л Г Оставшимся трем морским свинкам (контрольная группа) внутрисердсчно вводят 1.5--2.0 cv3 сыворотки крови лошадей.

6 7 3 Обработка результатов

Наблюдения за животными обеих групп ведут п течение I г. Как правило, морские свинки контрольной группы гибнут от ана-f.

Страница 10

ГОСТ Р 50667-9*

фмлаксического шока или у них проявляется сильная аллергическая реакция (парез конечностей, непроизвольное мочеиспускание, боковое положение, учащенное дыхание).

Анафнлаксическая реакция у сенсибилизированных морских свинок опытной группы должна отсутствовать.

При проявлении анафилакенческих реакций у животных опытной группы серию го-чадотролного гормона считают анафилаки»-генной и бракуют.

6.8 Определение гормональной активности гонадотропного стандарта — ГСЖК в мышиных единицах (м.е./см3) и гонадотропного стандарта — ГСЖК. ФСГ и Л Г в интернациональных едиии-

ц9 х

6.8.1    Определение гормональной активности стандарта ГСЖК в мышиных единицах (м.е.1см3)

6.8.1.1    Аппаратура, материалы, реактивы

Весы торсионные.

Весы лабораторные с наибольшим пределом взвешнваилм 200 г второго класса точности по ГОСТ 24104.

Шприцы вместимостью 1 см* по ГОС"£ 22967

Иглы инъекционные по ГОСТ 25377.

Пинцеты медицинские по ГОСТ 21241.

Натрий хлористый, но ГОСТ 4233.

Раствор физиологический.

Вола дистиллированная по ГОСТ 6709.

Мыши белые —самки массой 7,0—9,0 г в возрасте 17—21 су г

6.8.1.2    Подготовка к испытанию

Содержание флакона растворяют в 10 см3 стерильного физиологического раствора. Из полученного раствора делают разведения стерильным физиологическим раствором 1:23. 1.27, 1:31. которые соответствуют гормональной активности 120; НО; 160 мышиных единиц в 1 см' (м.е./см3).

(•8.1.3 Проведение испытания

На каждое разведение берут пять белых мышей, которым подкожно в область спины вводят по 0.2 см3 испытуемого раствора гонадотропного стандарта. Пяти белым мышам препарат не вводят (контрольная группа). Через 76 ч мышей усыпляют, вскрывают брюшную полость, извлекают матку с яичниками, тщательно очищают от соединительной и жировой ткани и взвешивают нп торсионных весах. Исследования проводят в 3-кратной повторности.

6.8.1.4 Обработка результатов

Реакцию считают положительной при увеличении массы матки с яичниками не менее чем в два рача по отношению к контроль

7

Страница 11

ГОСТ Р 50вв7—94

ной группе при разведении стандарта 1 :27 (140 м.е./см3) и отрицательной при разведении I :23 или 1:31.

Учитывая разведение стандарта в 10 см3 физиологического раствора, полученные результаты испытаний умножают на 10. Гормональная активность должна быть не менее 1400 мышиных единиц, (м.е.) во флаконе.

6.8.2 Определение гормональной активности стандарта — ГСЖК и ФСГ о интернациональных единицах (ИЕ)

6.8.2.1    Аппаратура, материалы, реактивы

Весы торсионные.

Весы лабораторные второго класса точности с пределом взвешивания до 200 г по ГОСТ 24104

Пинцеты медицинские по ГОСТ 21241.

Ножницы медицинские.

Колбы стеклянные вместимостью 50, 100, 250 см3 по ГОСТ • 25336.

Шприцы вместимостью 1 и 2 см1 по ГОСТ 22967.

Пииетк'и вместимостью 5 и 10 см3.

Натрий хлористый по ГОСТ 4233, изотонический раствор.

Эфир серный (наркозный) по ГФ-Х.

Чашкн Петри по ГОСТ 25336.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Международный стандарт гонадотропного гормона сыворотки крови жеребых кобыл — ГСЖК или национальные стандарты ГСЖК (Россия, Германия, США, Франция. Голландия) с активностью 10(4} НЕ во флаконе.

Гонадотропин лориомичоский (ХГ) по ТУ 64—3—218—85.

Крысы белые—самки массой 40—45 г в возрасте 18—21 сут.

6.8.2.2    Подготовка-к испытанию

Приготовление раствора гонадотропина хорионического (ХГ)

Дна флакона по 1000 ПД хорионического гонадотропина раст-поряют в 25 см3 стерильного физиологического раствора до получения раствора препарата с активностью 80 ЕД/ем3. который используют для приготовления рабочих растворов хорионического гонадотропина дли обработки 50 крыс.

Приготовление раствора стандарта

Рабочий раствор (10 И Е/см1) готовят разведением одного флакона < 1 ОСЮ ИЕ) международного стандарта или национальных стандартов по 6 8.2.1 в 100 см' сгерилыюго физиологического раствора.

Далее разведение рабочего раствора стандарта до необходимой концентрации гормона для введения инфантильным самкам крыс готовят, как указано в таблице 2. ь

Страница 12

ГОСТ Р 50667-И

Таблица 2

Ра шг.сгииг иепмгуеиог» а(1ела|»Т41,

ст*идл»->

Пр«дпол.1га-

DKIHB-«ОС1». по фл*ним«. НЬ

До>а ва

животное.

актяпнекть

ИЕ<м»

Объем, см’

1>*йоиего

(ia«Tncpu

»1*еп»р*та.

criHAi.pl»

гежк. *г.г

pa6irw»o р.ктиора ХГ |хири<»«и«*-скаго гпн*-яопхмши»)

фШПОЛОгИ-

<«*oro

рЯГТЯОрИ

»Kr-*rr:iii,-

32.2 28,Ю

I-с разаеде-име

400

2.8

7.0

2.8

7.0

5.0

5.0

2-е разледс-

500

2,8

Z8

5.0

32.2

«м

7.0

7.0

5,u

58,0

3-е развеле-

600

2.8

2.8

3.0

32,2

мне

Т.0

7.0

5.0

28L0

Стамдирг

1000

2.8

2.8

fi.n

32,2

7.0

7.11

5.0

28.0

Приготовление раствора испытуемого стандарта.

Содержание флакона (или ампулы) испытуемого стандарта разводят в 50 см3 стерильного физиологического раствора (10 ИЕ/см5).

Рабочие растворы получают разведением 0,83; 1,0 и 1,25 см1 исходного раствора стерильным физиологическим раствором до 10 смя.

Рабочие растворы испытуемого стандарта применяют для введении инфантильным самкам белых крыс no схеме, приведенной в таблице 2.

6 8.2.3 Проведение испытании

Каждую дозу проверяемого препарата стандарта (А) по отношению к известному стандарту (В) испытывают на 10 инфантильных самках белых крыс. Животным два раза в день с интервалом 7 ч в течение 4 сут вводят подкожно в область спины 0,350 (малая доза —    /?') н 0.875 НЕ (большая доза—Д7. II") гона

дотропного гормона сыпороткн крови жеребых кобыл — ГСЖК или ФСГ и 5,0 ЕЯ гонадотропина хорионического, содержащихся в 0.5 см3 изотонического раствора

Па пятые сутки крыс усыпляют, взвешивают массу тела с точностно до 0,5 г, вскрывают брюшную полость, извлекают оба яичника и тщательно освобождают от жировой и соединительной ткани, пс допуская нарушения целостности фолликула и нодеыха-

9

Страница 13

ГОСТ Р 50867-94

кия янчннков. Оба очищенных яичника взвешивают на торсионных весах с точностью до 0,5 мг.

6,8.24 Обработка результатов

Расчет значений Л и В Для расчета используют полученные средние значения массы яичников н массы тела в каждой группе.

. в    масса яичников крмсм

•Я, в<\ . п)~--I'*'.

масса тела крысы

Расчет критерия Для этого выборку всех значений для малой и большой доз испытуемого и известного стандарта (А1 и В\ А2 и В7) упорядочивают но рашаи. при этом минимальное и максимальное значения {Л и В) получают наименьшие ранги. Если число наблюдений нечетное, то среднее наблюдение не получзет никакого ранга, а если четное — оно получает наииысшнй ранг.

Для каждой выборки (состоящей из данных, полученных при расчете действия одной дозы испытуемого и известного стандарта) определяется сумма ранговых чисел Ип и Ис (где Ип — сумма ранговых чисел испытуемого стандарта. Ис — сумма ранговых чисел известного стандарта при применении одной дозы).

Принадлежность данных к одной общей совокупности, критерий (Z), рассчитывают по формуле

у 2>7-А/"(^"+Ср-|-1)Н = ,/—    П*    '

V п" (П"+с°+\) ——

!де И — меньшая сумма рангов;

/7" —число животных в соответствующей группе при обработке определенной дозой испытуемого стандарта;

С" — число животных п соответствующей группе при обработке определенной дозой стандарта;

П'' — число животных в соответствующей группе при обрабогке определенной дозой известного стандарта.

При всех значениях критерия (£=1,96), независимо от знака, считается, что число выборки принадлежит к одной гормональной •актипиости испытуемого стандарта (Л„) и рассчитывается по формуле

<М(Лу .4' -В- В')

А.шИА знти off——--

b А‘ Л'+В'—В'

где ИЛ — предполагаемая гормональная активность испытуемого стандарта в I флаконе (ИЕ);

40

Страница 14

ГОСТ Р 50667-94

/V—среднее арифметическое значении отношения массы яичников к массе тела крыс в группе с малой дозой испытуемого стандарта; Аг — среднее арифметическое значений отношения массы яичников •с массе тела крыс в группе с большой дозой известного стандарта; В —среднее арифметическое значений отношения массы яичников к массе тела крыс в группе с малой дозой испытуемого стандарта; Д* — среднее арифметическое значений отношения массы яи'жиков к массе тело крыс в группе с большой дозой из пест кого стандарта; 0.1 — логпрнфм отношения между дозами (log).

В случае, когда экспериментальные выборки испытуемого стандарта и известного стандарта не принадлежат К одной совокупности. когда нет разницы в реакции яичников на малую и большую дозу вводимого стандарта, опыт повторяют. При получении аналогичных результатов в повторном опыте проводят новое определение при изменении предполагаемой активности испытуемо* гг стандарта.

6.Й.2.5 Обработка результатов

Реакцию считают положительной, если по каждой дозе испытуемого и известного стандартов выборки Л1 (1.../1> и £'(!.../?), А>{\...п) и Дг(1...п) принадлежат к одной совокупности (2 = 1,%).

Средние величины А1, А2 и В1, В: по группам с дозой соответственно 2,8 и 7,0 ИЕ не должны превышать значений /1* и В"

Средняя расчетная величина гормональной активности испытуемого стандарта по трем исследованиям должна составлять не менее 90 и не более 110% предполагаемой активности (ИА).

Гормональную активность выражают в интернациональных единицах во флаконе.

6.9. Определение лютен лидирующей активности стандарта

6.9.1 Аппаратура, материалы, реактивы

Микроскоп бинокулярный стереоскопический МБС-9 (или другой аналогичный по своей разрешающей способности микроскоп).

Пипетки вместимостью 1.0. 5,0 и 10,0 см5.

Колбы стеклянные вместимостью 50. 100 и 250 см3 по ГОСТ 25336.

Стекла предметные для микропрепаратоп по ГОСТ 9284.

Ножницы медицинские.

Пинцеты медицинские по ГОСТ 212*11.

Шприцы вместимости) 1 ом1 но ГОСТ 229<>7.

Флаконы вместрчоиъю *v’ по ТУ Г»4 —?—И)

ПроЛкч резинозис по Т\ ЗгЧН*; I0K.

Лейкопластырь,

ft

Страница 15

ГОСТ Р 51)вв7—»4

Натрий хлористый по ГОСТ ‘1233.

Стандарт лютеипизирующего гормона в интернациональных единицах (США или Голландия), в дальнейшем можно использовать отечественный стандарт; препарат ГСЖК.

6.9.2    Подготовки к испытанию

6.9.2. f Приготовление растпора препарата Г'СЖК

Один или два флакона' ГСЖК с обшей активностью 2500 м.с. см* растворяют а 50 см* стерильного физиологического раствора, который используют в последующем в качестве исходно-ю раствора (50 м.е./см3).

Для приготовления 10 см* рабочего раствора, содержащего 3 м.е. п 0.2 см*, необходимо 3 см* исходного раствора с активностью 15 ч.е./см* разбавить до 10 см3 стерильным физиологическим раствором.

Исходный раствор ГСЖК разливают по 3*с»*я во флаконы, закрывают резиновыми пробками и хранят при температуре минус 20 С » течение 1 мес.

Рабочий раствор ГСЖК готовят непосредственно перед vno-цн'1'wHHeM

G.9.2.2 Приготовление рабочего раствора испытуемого стандарта

Содержимое ампулы (J000 НЕ ■чотеиннэируюшего гормона) растворяют до 10 см3 стерильным филнологичссхнм растровом, который используют з качество исходного раствора (100 ИЕ/см3)

Д ля приготовления рабочего раствора с активностью 10 ИЕ/см* необходимо 0.6 см3 исходного раствора разбавить до 0.6 см3 стерильным изотоническим раствором.

Из рабочего раствора делают разведения стерильным физиологическим раствором 1:14, 1:6,5, 1:4, 1:2,75 и 1:2, которые соответствуют гормональной активности в 0,3 см3 раствора — 0.2, 0.4. 0.6. ОД 1,0 МП — вводимого одному животному в соответствии е таблицей 3.

6 9.2.3 Приготовление раствора стандарта

Рабочий раствор (10 НЕ) готовят из исходного раствора стандарта (100 ИЕ см*) путем разведения исходного раствора 1:9.

В последующем из рабочего раствора готовят ряд разведений для введения мышам, как указано в таблице 3.

6.9.3    Проведение испытания

На каждое разведение испытуемого и известного стандарта берут пять мышей, которым подкожно в область спины вводят 3 м.е. ГСЖК в объеме 0.2 см3 стерильного физиологического раствора Контрольным пяти мышкам вводят ГСЖК в той же дозе. 12

Страница 16

ГОСТ Р 50667-04

Таблица 3

Рдзиохепае 1.ам,1А[1ы

Актимость ИС ч 0.3 cv1

ОЛЪСМ IMlknrra l>ifr.Kj|u стаи дирм. им*

ОВъеч <те^няы101го Фи икпишиесхш ч>

2.8 2.6 2.4 •> •>

2.0

1с разведение

2-е    *

3-е    »

1-е »

5-е »

0.2

04

0.6

0.8

1.0

0.2

0.4

0.6

П.8

1.0

Через 48 ч мышам опытной группы по,;кож;:о в опасть спн:«ы вводят по 0.3 см3 раствора испытуемого стандарта из каждого разведения.

Пяти мышкам контрольной группы препарат не пводят.

Через 16“ 18 ч мышей усыпляют, покрывают брюшную полость, извлекают матку с яичниками и помешают п раогяиутом положения между двумя предметными пеклами, которые о*сда~ |’яют r'i краям полоской лейкопластыря.

Гормональную активность испытуемого стандарта проверяют в соответствии со схемой, приведенной в приложении Л. Реакцию учитывают под микроскопом при увеличении 1X40.

0.0.4 Обработка результатов

Реакцию считают положительной, когда \ грех из пяти самок мышей при наибольшем разведелни испытуемого стандарта по отношению к известному стандарту происходи! овуляция и в ям-нулообразном расширении обнаружена одна или более яйцеклеток.

Гормональную активность выражают в интернациональных единицах (ML) во флаконе.

Гормональная активность испытуемого ста;|дар!а по отношению к известному стандарт должна быть в пределах ~0,4 ИЕ.

При отклонении гормональной активности испытуемого стандарта по отношению к известному, выходящем за пределы • 0,4 И0, проводят дополнительные исследования не менее чем в двухкратной повторности, уменьшая или увеличивая предполагаемую активность испытуемого стандарта.

Отклонения гормональной активности испытуемого стандарта по отношению к известному не должны превышать 10%

6.10. О п редел ей не соотношения фол л и к у л о с ти* м у л и р у ю щ с г о и лютеинизируюшего гормонов в испытуемом ГСЖК

6.10.1 Соотношение ФСГ/ЛГ в испытуемом стандарте устанавливают делением общей активности, определяемой по 6.8, на лю-

13

Страница 17

ГОСТ Р 5(1667-94

теннизирующую активность, определяемую по 6.9 Например, общая гормональная активность составляет 2500 ИЕ. а активность иютеиннзнрующего гормона — 1000 НЕ; следовательно, соотношение ФСГ7ЛГ в испытуемом стандарте соответствует 2.5:1. которое выражается в условных единицах (у.с.).

7 ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ И ХРАНЕНИЕ

7.1    Стандарты гонадотропных препаратов хранят на предпрня-1и<ин»гоговнтеле и в организации потребителе н сухом закрытом темном месте, в коробках заводской упаковки при температуре

(2—lOj'C.

7.2    Транспортируют стандарты (ГСЖК, ФСГ или ЛГ) всеми видами транспорта в соответствии с правилами перевозок скоропортящихся грузов и багажа, действующими на данном виде транспорта.

S ГАРАНТИИ ИЗГОТОВИТЕЛЯ

8.1    Изготовитель гарантирует соответствие качества гонздо-гролных гормонов требованиям настоящего стандарта при соблюдении условий хранения и транспортирования.

8.2    Гарантийный срок хранения гормонов -• 3 года со дня изготовления.

14

Страница 18

ГОСТ Р 50в67—(М


приложите, а


I

3

л

а

и

о

О

ь

5

X


I

■С

I.


сJ % К/ *-о

0

Ь.

1

2

>.

о.


| I

?4

С ГО

0.3

N

сч

CW

о

1 1

еч

*1

со

о

г г

го

1

с со

о

! ■ 1

- . v ж

-г . , *

*-Дг

£ clw!2

с§нО о £ г: v 73 £ «

2 £Ll«


I 1 !


о

г

во

г

X

п

*2

о

X

л

ч

3

б

*

о.

с

к.

г

&

«>


£ £ Л и

- 3-

г2

ж


о

г

» £

*1 и £

U. .*;


Si Л*


о 5 л ->* §2 “ с

Is

г 2

зг


b Л

5*

i' с

^ i


Л

я


2 2 < - с К •-

•*5°а


М *г <0 со о ci = с о —'


о .еч—'©есс T* "wo^cc -C2 J^.


в

«


5 <

4* —

S

&=г


= 5

S 2

:*

*> ?


Si

хг


сз


*4

О

«сто?

ас v -

= 1 С

U|iW-fO«0 и 2 di cf с£ w © —■ — 5 и


о ^ с* CC • • * • w с с coo

| ! • +-Н

r* rfeb '* <*? • • • • • ccccc

■ -J-4-H

С* г* e*5 ?Г«*Г • • • * • С с с с с

•t+v+T

С2 "С Л го со с со’ос

• + .+И

."?• О ^ Г?“

К • • • »

с о с с о

1 +Н-++


•Hvri-

!-H4v

-Н-+++?

J

:++++!

_

1' :*++5

’ г


>i

v

«

ci _

e-5


u

а

*■•

c.^

5 2-

и

.i г


*

а:

а

-

а


3

H _

&2 f— 3


13

Страница 19

ГОСТ Р 5lHi67—94

УДК 636.0S5.3 : 00C.35 J    Р31

Ключевые слова: юрмоиы гонадотропные, характеристика, упа* ковка, маркировка, требование безопасности, приемка, методы испытаний. транспортирование, хранение, гарантии изготовителя

ОКП 93 5813

Ргдекгмр Т. И Василенко 7vxuii'rt.4hiili ролок гор В. II. И руса коп»

Кор .ж юр М. С. Кабаииоаа

» .uiu.    -1 ntfop    »2иб<11    Поя*, п не*. 2*Уел. i»i л.    1.10. Уел    кр.-art. I !в.

V*, -Нал .1. |.)1/. :||||> '.40    ЭК.1. С t >70

'V».':«8Д    ПС ЮГ I»    1|»А>1-*ПЬСЮ «Л ИД.11; О».    I07D76,    КО.МЛ,. i.hio    ||и)>, II.

Тип.    «Часкклсчи* испить*. AVoiKtii. Л*лии «С||    6    3ttC I8j