государственный стандарт российской федерации
мясо ПТИЦЫ, СУБПРОДУКТЫ И ПОЛУФАБРИКАТЫ ПТИЧЬИ
МЕТОДЫ ВЫЯВЛЕНИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОЛИЧЕСТВА
Staphylococcus aureus
Издание официальное
ГОССТАНДАРТ РОССИИ М о с к я а
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
МЯСО ПТИЦЫ. СУБПРОДУКТЫ И ПОЛУФАБРИКАТЫ ПТИЧЬИ
Методы выявления и определения количества
Staphylococcus aureus
Poultry meat, edible offal, ready-to-cook products Methods for detection and quantity determination of Staphylococcus aureus
ОКСТУ 9209
Дата введения 01.01.94
Настоящий стандарт распространяется на предназначенные для реализации и промышленной переработки:
мясо птицы в виде потрошеных, полупотрошеных и потрошеных с комплектом потрохов и шеей тушек, частей, полученных при их разделке, а также обваленное и измельченное; субпродукты и полуфабрикаты птичьи.
Стандарт устанавливает методы выявления Staphylococcus aureus и определения их количества.
Метод выявления S. aureus основан на высеве определенного количества продукта или смывов с его поверхности и (или) их разведений на элективные питательные среды с повышенным содержанием хлорида натрия или с добавлением хлорида лития и подтверждении принадлежности выросших микроорганизмов к S. aureus по реакции коагулирования плазмы крови кролика.
Метод определения количества посевом в агаризованную среду предназначен для проб, содержащих в 1 г более 150 КОЁ или в 1 см3 более 15 КОЕ S. aureus.
Метод определения количества S. aureus посевом в жидкие питательные среды основан на методе наиболее вероятного числа (НВЧ) и предназначен для проб, содержащих в 1 г продукта менее 150 КОЕ, но в 10 г более 3 КОЕ или в 1 см3 смыва менее 15 КОЕ, но в 100 см3 смыва более 3 КОЕ.
Издание официальное
© Издательство стандартов, 1993
Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен без разрешения Госстандарта России
I. МЕТОДЫ ОТБОРА ПРОБ И ПОДГОТОВКА К ИССЛЕДОВАНИЯМ —
по ГОСТ Р 50396.0
2. ПРОВЕДЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Выявление S aureus
2.1.1. Из продукта или его смывов в солевой бульон по ГОСТ Р 50396.0 н. 2.4.31 проводят посев из исходного разведения или последующих 10-кратных разведений в соотношении к питательной среде 1 :9. При этом при выделении S. aureus из 1 г продукта используют 10 см3 его первого разведения. Посевы инкубируют при температуре (37±1)°С в течение 18—24 ч, затем пересевают поверхностным методом на одну из агаризованиых сред: агар Байрд-Паркер, яично-желточный солевой агар, яично-желточный азидный агар по ГОСТ Р 50396.0 пп. 2.4.32—2.4.34.
2.1.2. Посевы на агаризованиых средах просматривают после 18—24 ч инкубирования при температуре (37±1)°С.
На среде Байрд-Паркер S. aureus растут в виде черных блестящих выпуклых колоний диаметром 1 —1,5 мм, окруженных зоной лецнтиназной активности в виде просветления среды шириной 1—3 мм вокруг колоний.
На яично-желточном солевом, агаре и на яично-желточном азидном агаре колонии S. aureus белого и различного оттенка желтого цвета обычно с образованием вокруг колоний зоны лецитиназ-ной активности.
2.1.3. Для подтверждения принадлежности обнаруженных колоний к S. aureus не менее чем из 5 колоний готовят мазки с окраской по Граму по ГОСТ 10444.3. При мнкроскопировашш устанавливают колонии с мелкими собранными в гроздья грамполо-жительными кокками. Из 5 колоний стафилококков проводят пересев на скошенный питательный агар по ГОСТ Р 50396.0 пп. 2.4.1;
2.4.4. Посевы термостатнруют при температуре (37±1)°С в течение 18—24 ч. Проверяют по мазкам, окрашенным по Граму, чистоту культуры выделенных стафилококков на скошенном агаре.
2.1.4. Выделенные чистые культуры стафилококков проверяют на способность коагулировать плазму крови кролика.
Для этого разведенную плазму крови кролика по ГОСТ Р 50396.0 и. 2.3.24 разливают по 0,5 см3 в стерильные пробирки. В нее вносят по петле анализируемых культур, оставляя одну пробирку с разведенной плазмой крови, не засеянной в качестве контроля. Внесенную культуру тщательно перемешивают и инкубируют при температуре (37±1)°С в течение 3—6 ч. Если через 6 ч коагуляции плазмы не произошло, то пробирки оставляют при температуре (30±0,5)°С на 24 ч. При отсутствии свертывания плазмы или появлении отдельных нитей через 24 ч исследуемую культуру стафилококков относят к коагулазоотринателыюй.