Товары в корзине: 0 шт Оформить заказ
Стр. 1 

19 страниц

Cтандарт дополняет ИСO 17234-1 и устанавливает специальный метод для определения наличия в продукции некоторых азокрасителей, способных выделять 4-аминоазобензол.

 Скачать PDF

Идентичен ISO 17234-2:2011

Оглавление

1 Область применения

2 Нормативные ссылки

3 Общие положения

4 Принцип

5 Меры предосторожности

6 Аппаратура

7 Реактивы

8 Отбор проб

9 Проведение анализа

10 Оценка

11 Протокол испытания

Приложение А (справочное) Методы хроматографического анализа

Приложение В (справочное) Надежность метода

Приложение С (справочное) Руководство по оценке. Интерпретация результатов анализа

Приложение ДА (справочное) Сведения о соответствии ссылочных международных стандартов национальным стандартам Российской Федерации

Библиография

 

19 страниц

Дата введения01.07.2016
Добавлен в базу01.02.2017
Актуализация01.01.2019

Этот ГОСТ находится в:

Организации:

19.06.2015УтвержденФедеральное агентство по техническому регулированию и метрологии751-ст
ИзданСтандартинформ2016 г.
РазработанТК 412 Текстиль
РазработанОАО ВНИИС

Leather. Chemical tests for the determination of certain azo colorants in dyed leathers. Part 2. Method for determination of 4-aminoazobenzene

Стр. 1
стр. 1
Стр. 2
стр. 2
Стр. 3
стр. 3
Стр. 4
стр. 4
Стр. 5
стр. 5
Стр. 6
стр. 6
Стр. 7
стр. 7
Стр. 8
стр. 8
Стр. 9
стр. 9
Стр. 10
стр. 10
Стр. 11
стр. 11
Стр. 12
стр. 12
Стр. 13
стр. 13
Стр. 14
стр. 14
Стр. 15
стр. 15
Стр. 16
стр. 16
Стр. 17
стр. 17
Стр. 18
стр. 18
Стр. 19
стр. 19

ГОСТ Р исо

17234-2-

2015

ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО ПО ТЕХНИЧЕСКОМУ РЕГУЛИРОВАНИЮ И МЕТРОЛОГИИ

НАЦИОНАЛЬНЫЙ

СТАНДАРТ

РОССИЙСКОЙ

ФЕДЕРАЦИИ

КОЖА

Химические испытания для определения содержания некоторых азокрасителей в окрашенной коже

Часть 2

Метод определения содержания 4-аминоазобензола

ISO 17234-2:2011

Leather — Chemical tests for the determination of certain azo colorants in dyed leathers — Part 2: Determination of 4-aminoazobenzene (IDT)

Москва

Стандартинформ

2016

Предисловие

1    ПОДГОТОВЛЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК412 «Текстиль», Открытым акционерным обществом «Всероссийский научно-исследовательский институт сертификации» (ОАО «ВНИИС») на основе собственного аутентичного перевода на русский язык международного стандарта, указанного в пункте 4

2    ВНЕСЕН Управлением технического регулирования и стандартизации Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии

3    УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 19 июня 2015 г. №751-ст

4    Настоящий стандарт идентичен международному стандарту ИСО 17234-2:2011 «Кожа. Химические испытания для определения содержания некоторых азокрасителей в окрашенной коже. Часть 2. Определение содержания 4-аминоазобензола» (ISO 17234-2:2011 «Leather — Chemical tests for the determination of certain azo colorants in dyed leathers — Part 2: Determination of 4-aminoazobenzene»).

Наименование настоящего стандарта изменено относительно наименования указанного международного стандарта для приведения в соответствие с ГОСТ Р 1.5 (пункт 3.5).

При применении настоящего стандарта рекомендуется использовать вместо ссылочных международных стандартов соответствующие им национальные стандарты Российской Федерации, сведения о которых приведены в дополнительном приложении ДА

5    ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

Правила применения настоящего стандарта установлены в ГОСТ Р 1.0-2012 (раздел 8). Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном (по состоянию на 1 января текущего года) информационном указателе «Национальные стандарты», а официальный текст изменений и поправок — в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ближайшем выпуске ежемесячного информационного указателя «Национальные стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет (www.gost.ru)

©Стандартинформ, 2016

Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии

Реактив 1: 0,1 % NaN02 в HCI (с= 1 моль/л).

Реактив 2: 0,2 % а-нафтол в КОН (с= 1 моль/л).

А.6 Примеры хроматограмм и спектров


X—время; У—относительные единицы; 1 — внутренний стандарт; 2 — 4-аминоазобензол Рисунок А.1 — Хроматограмма общего ионного тока, 4-аминоазобензол, КГХ/МСД


Примеры хроматограмм и спектров показаны на рисунках А.1—А.4.

8

ГОСТ РИСО 17234-2—2015


уА

35000-

30000-

25000—


20000-


15000-

10000-

5000-


65

77


120



197


51


т*т


Aw


154 167


ГГ IT


214    237


273 285


Т


-f-rV


м м


315 332 346


Т


40    60    80    100    120    140    160    180    200    220    240    260    280    300    320    340


X— m/z; У—относительные единицы


Рисунок А.2 — КГХ/МСД 70 эВ-спектр и структура 4-аминоазобензола


2


X— мин; У — мЕОП (0,001 единицы оптической плотности); 1 — ФДМД А, сигнал =240; 2 — 4-аминоазобензол; 3 — ФДМД В,

сигнал = 380


Рисунок А.З —Хроматограмма 4-аминоазобензола, ВЭЖХ/ФДМД; детектирование при 240 и 380 нм


9



X — нм; У — мЕОП (0,001 единицы оптической плотности) Рисунок А.4 — ВЭЖХ/ФДМД-спектр 4-аминоазобензола


10


ГОСТ РИСО 17234-2—2015

Приложение В (справочное)

Надежность метода

Таблица В.1 касается межлабораторных испытаний, выполненных для определения содержания 4-амино-азобензола в коже

Таблица В.1 —Результаты межлабораторных испытаний. Определение концентрации образовавшегося 4-аминоазобензола в коже [1]

Параметр

Методика анализа

КГХ/МСД

ВЭЖХ

Число лабораторий-участниц

10

11

Число выбросов

2

2

Число лабораторий после исключения выбросов

8

9

Среднее значение х, мг/кг

81,9

91,2

Повторяемость г, мг/кг

21,4

27,1

Стандартное отклонение повторяемости sr, мг/кг

7,6

9,7

Воспроизводимость R, мг/кг

32,5

35,9

Стандартное отклонение воспроизводимости Sr, мг/кг

11,6

12,5

Данный официальный метод был разработан рабочей группой «Анализ запрещенных азокрасителей» германской BVL и оценен в межлабораторном испытании, в котором приняли участие 11 лабораторий.

a)    В отношении оценки повторяемости и воспроизводимости результатов межпабораторных испытаний (по круговой схеме) необходимо учесть следующее:

1)    межлабораторные испытания продемонстрировали, что отношение красителя к восстановителю и «возраст» восстановителя могут оказывать решающее влияние на количественный результат. Следовательно, рекомендуется выполнять восстановительное расщепление в строгом соответствии с условиями, изложенными в 9.2 (время, температура и количество);

2)    другим важным фактором является экстракция системы «жидкость — жидкость», например, разделение водной и органической фаз, чтобы предотвратить дальнейшую реакцию расщепления азогруппы 4-аминоазобензо-ла. Следовательно, настоятельно рекомендуется точно соблюдать условия, изложенные в 9.3.

b)    Пробу кожи для межлабораторных испытаний взяли от типового изделия, разрезали и смешали с неокрашенной кожей. Таким образом можно снизить гомогенность материала.

c)    Применение других подходящих внутренних стандартов может привести к более высокой повторяемости метода КГХ/МСД. Это условие, однако, не рассматривалось в оценке межлабораторных испытаний.

11

Приложение С (справочное)

Руководство по оценке. Интерпретация результатов анализа

Поскольку получение аминов в очень небольших количествах может привести к ложным положительным результатам, приложение XVII Регламента REACH 1907/2006 определяет предельное значение как 30 мг/кг материала пробы. Это значение применяется только в пробе материала, который является гомогенным по структуре и окрашиванию, а не к смешанной пробе гетерогенного состава.

Если обнаруженное количество 4-аминоазобензола превышает 30 мг/кг, можно предположить, что был использован определенный азокраситель. При концентрации ниже 30 мг/кгв настоящее время невозможно сделать авторитетное заявление об использовании определенных азокрасителей без получения дополнительной информации, такой, например, как тип и/или чистота использованных красителей или другого использованного сырья.

В этом контексте рекомендуется сообщать результаты анализа следующим образом:

В случае, когда концентрация образовавшегося 4-аминоазобензола не более 30 мг/кг:

«Согласно выполненному анализу азокрасителей, способных выделять 4-аминоазобензол в результате восстановительного расщепления их азогрупп(ы), в предложенном изделии обнаружено не было».

В случае, когда концентрация образовавшегося 4-аминоазобензола более 30 мг/кг:

«Согласно выполненному анализу предполагается, что предложенное изделие изготовлено или обработано с применением азокрасителей, запрещенных в соответствии с приложением XVII Регламента REACH 1907/2006».

12

Приложение ДА (справочное)

Сведения о соответствии ссылочных международных стандартов национальным стандартам Российской Федерации

Таблица ДА.1

Обозначение ссылочного международного стандарта

Степень соответствия

Обозначение и наименование соответствующего национального стандарта

ИСО 2418:2002

*

ИСО 4044:2008

*

* Соответствующий национальный стандарт отсутствует. До его утверждения рекомендуется использовать перевод на русский язык данного международного стандарта. Перевод данного международного стандарта находится в Федеральном информационном фонде технических регламентов и стандартов.

13

ГОСТ Р ИСО 17234-2-2015

Библиография

[1]    Amtliche Sammlung von Untersuchungsverfahren nach § 64 LFGB В 82.02-9:2006-09/BVL В 82.02-9:2006-09 Berichtigung 2008-04 — Nachweis der Verwendung von Azofarbstoffen, die 4-Aminoazobenzol freisetzen konnen

[2]    Регламент REACH: Regulation (EC) No. 1907/2006 of the European Parliament and of the Council concerning the Registration, Evaluation, Authorisation and Restriction of Chemicals (REACH), AnnexXVIl

14

УДК 675.046.12:006.354    ОКС    59.140.30

Ключевые слова: окрашенная кожа, азокраситель, 4-аминоазобензол, определение, принцип, процедура, оценка, протокол

15

Редактор И.В. Гоголь Технический редактор В.Н. Прусакова Корректор Л.С. Лысенко Компьютерная верстка А.Н. Золотаревой

Сдано в набор 22.03.2016. Подписано в печать 25.03.2016. Формат 60 х 84^. Гарнитура Ариал. Уел. печ. л. 2,32. Уч.-изд. л. 1,80. Тираж 34 экз. Зак. 867.

Издано и отпечатано во ФГУП «СТАНДАРТИНФОРМ», 123995 Москва, Гранатный пер., 4. www.gostinfo.ru    info@gostinfo.ru

ГОСТ Р ИСО 17234-2-2015

Содержание

1    Область применения...................................................1

2    Нормативные ссылки..................................................1

3    Общие положения....................................................1

4    Принцип...........................................................2

5    Меры предосторожности................................................2

6    Аппаратура.........................................................2

7    Реактивы..........................................................2

8    Отбор проб.........................................................3

9    Проведение анализа...................................................3

10    Оценка...........................................................4

11    Протокол испытания..................................................5

Приложение А (справочное)    Методы хроматографического анализа......................6

Приложение В (справочное)    Надежность метода.................................11

Приложение С (справочное)    Руководство по оценке. Интерпретация результатов анализа.......12

Приложение ДА (справочное) Сведения о соответствии ссылочных международных стандартов

национальным стандартам Российской Федерации.....................13

Библиография........................................................14

НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
КОЖА
Химические испытания для определения содержания некоторых азокрасителей
в окрашенной коже
Часть 2
Метод определения содержания 4-аминоазобензола

Leather. Chemical tests for the determination of certain azo colorants in dyed leathers.

Part 2. Method for determination of4-aminoazobenzene

Дата введения — 2016—07—01

1    Область применения

Настоящий стандарт дополняет ИСО 17234-1 и устанавливает специальный метод для определения наличия в продукции некоторых азокрасителей, способных выделять 4-аминоазобензол. Данный метод также позволяет обнаружить 4-аминоазобензол (краситель анилиновый желтый 1), уже присутствующий в качестве свободного амина в продукции, не прошедшей восстановительное расщепление.

Азокрасители, способные образовывать 4-аминоазобензол, генерируют в условиях, установленных ИСО 17234-1, для определения аминов, анилина и 1,4-фенилендиамина. Наличие красителей на основе 4-аминоазобензола невозможно надежно установить без дополнительной информации (например, химического состава использованного красителя) или без специальной методики.

Данным методом невозможно определить количественное содержание использованных азокрасителей, способных выделять в процессе восстановительного расщепления азогруппы (азогрупп) один или несколько других ароматических аминов, приведенных в приложении XVII к Регламенту ЕС 1907/2006 Европейского парламента и Совета о регистрации, оценке, разрешении и ограничении (запрещении) применения химических веществ [Council on the Registration, Evaluation, Authorisation and Restriction of Chemicals (Регламент REACH)], за исключением 4-аминоазобензола.

2    Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие международные стандарты:

ИСО 2418:2002 Кожа. Химические, физические и механические испытания и испытания на прочность. Определение местоположения образца (ISO 2418:2002 Leather — Chemical, physical and mechanical and fastness tests — Sampling location)

ИСО 4044:2008 Кожа. Химические испытания. Подготовка образцов для химических испытаний (ISO 4044:2008 Leather — Chemical tests — Preparation of chemical test samples)

3    Общие положения

Некоторые азокрасители способны выделять при восстановительном расщеплении азогрупп(ы) вещество 4-аминоазобензол, которое запрещено согласно приложению XVII к Регламенту REACH.

Таблица 1 —4-аминоазобензол, запрещенный Регламентом REACH 1907/2006 (приложение XVII)

Номер по CAS

Номер по указателю

Номер в ЕС

Вещество

22

60-09-3

611-008-00-4

200-453-6

4-аминоазобензол

Издание официальное

4    Принцип

После обезжиривания образец кожи обрабатывают дитионитом натрия в щелочном растворе при температуре 40 °С в закрытом сосуде. 4-аминоазобензол, выделяющийся в процессе восстановления, переводят в фазу mpem-бутилметилового эфира с помощью экстракции в системе «жидкость — жидкость». Аликвотное количество фазы mpem-бутилметилового эфира используют для анализа.

Обнаружение и определение 4-аминоазобензола выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии [ВЭЖХ (HPLC)] с использованием фотометрического детектора на диодной матрице [ФДМД (DAD)] или масс-селективного детектора [ВЭЖХ/МСД (HPLC/MSD)], методом капиллярной газовой хроматографии с помощью масс-селективного детектора [КПХ/МСД (GC/MSD)], или методом капиллярного электрофореза с помощью фотометрического детектора на диодной матрице [КЭ/ФДМД (СЕ/DAD)], или количественно методом тонкослойной хроматографии или высокоэффективной тонкослойной хроматографии [ТСХ, ВЭТСХ(Т1_С, HPTLC)].

Если 4-аминоазобензол обнаруживают одним хроматографическим методом, необходимо выполнить подтверждение, используя один или несколько альтернативных методов. Количественное определение аминов проводят методом ВЭЖХ/ ФДМД.

5    Меры предосторожности

5.1    Соединения 4-аминоазобензола относят к потенциальным канцерогенам для человека.

Работы с этими веществами и их утилизацию необходимо проводить в строгом соответствии с

национальными регламентами по здравоохранению и безопасности.

5.2    Пользователь несет ответственность за соблюдение безопасной и надежной техники обращения с материалами данного метода испытаний. Относительно конкретных подробностей, таких, например, как таблицы по безопасности материалов и другие рекомендации, необходимо проконсультироваться с изготовителями.

5.3    Рекомендуется следовать правилам надлежащей лабораторной практики. В любом из помещений лаборатории при работе с порошкообразными красителями и 4-аминоазобензолом необходимо пользоваться защитными очками, противопылевыми респираторами и одноразовыми перчатками.

5.4    Пользователи должны соблюдать требования национальных и местных правил техники безопасности.

6    Аппаратура

Стандартное лабораторное оборудование и, в частности, следующее.

6.1    Подходящий для реакции сосуд из термостойкого стекла с газонепроницаемой пробкой.

6.2    Нагреватель, создающий температуру (40 +2) °С.

6.3    Сепаратор со скоростью вращения более 3000 об/мин.

6.4    Ротационный вакуумный испаритель.

6.5    Пипетки требуемого размера или разные.

6.6    Ультразвуковая ванна не менее 160 Вт, с регулируемым нагревом.

6.7    Горизонтальный встряхиватель с достаточной частотой 5 с-1, длиной перемещения от 2 до

5 см.

6.8    Полипропиленовый или полиэтиленовый шприц объемом 2 мл.

6.9    Оборудование для следующих методов

6.9.1    Газовая хроматография (ГХ) с масс-селективным детектором (МСД).

6.9.2    Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) с градиентом элюирования и фотометрическим детектором на диодной матрице (ФДМД) или масс-селективным детектором (МСД).

6.9.3    Тонкослойная хроматография (ТСХ) или высокоэффективная тонкослойная хроматография (ВЭТСХ) с соответствующим детектированием.

6.9.4    Капиллярный электрофорез (КЭ) с детектором ФДМД.

Примечание — Описание оборудования приведено в приложении А.

7 Реактивы

Если нет иных указаний, применяют химические вещества аналитической чистоты.

2

ГОСТ РИСО 17234-2—2015

7.1    Гидроксид натрия.

7.2    Водный раствор дитионита натрия, р = 200 мг/мл1), свежеприготовленный, для использования непосредственно после выдерживания в течение 1 ч в закрытом сосуде.

7.3    Раствор гидроксида натрия, w= 2 %2\

7.4    н-гексан.

7.5    трет-бутилметиловыйэфир.

7.6    Хлорид натрия.

7.7    4-аминоазобензол, сверхчистый.

7.8    Внутренние стандарты для газовой хроматографии (ИС), например:

-    ИС 1: нафталин-б8 (CAS No.: 1146-65-2);

-    ИС 2:2,4,5-трихлоранилин (CAS No.: 636-30-6);

-    ИС 3: бензидин-б8 (CAS No.: 92890-63-6);

-    ИС4: антрацен-dl0 (CAS No.: 1719-06-8).

7.9    Стандартные растворы

7.9.1    Раствор внутреннего стандарта (ИС) в mpem-бутилметиловом эфире, р = 10,0 мкг/мл.

7.9.2    Градуировочный раствор 4-аминоазобензола для проверки методики эксперимента и приготовления градуировочных растворов 4-аминоазобензола в метаноле, р = 500 мкг/мл.

8    Отбор проб

Если возможно, проводят отбор проб в соответствии с ИСО 2418 и измельчают кожу в соответствии с ИСО 4044. Если отбор проб в соответствии с ИСО 2418 невозможен (например, в случае отбора кожи из готовых отделанных изделий, таких как обувь или одежда), в протоколе испытаний описывают процедуру отбора проб.

Все следы клея должны быть удалены механическим способом.

В случае кожаного лоскутного изделия с разноцветным рисунком различные цвета, по возможности, рассматривают отдельно. Для изделий, изготовленных из кожи различного качества, образцы кожи различного качества анализируют отдельно.

9    Проведение анализа

9.1    Обезжиривание

Обрабатывают кожу массой более 1,0 г, измельченную на кусочки (площадью 25 мм2), или измельченный образец кожи, помещая в закрытый сосуд вместимостью 50 мл (см. 6.1), порцией 20 мл н-гексана (см. 7.4), в ультразвуковой ванне (см. 6.6) при температуре (40 ±2) °С в течение 20 мин.

Декантируют слой н-гексана с образца кожи. Следует избегать потерь частиц кожи во время декантирования. Сразу после декантирования обрабатывают образец также, как до этого, порцией 20 мл н-гексана. Выпаривают остаток н-гексана из открытого сосуда в течение ночи или более длительного срока.

9.2    Восстановительное расщепление

Добавляют 9 мл раствора гидроксида натрия (см. 7.3) к образцу. Плотно закупоривают реакционный сосуд и энергично встряхивают. Все волокна кожаного материала следует смочить.

Затем с помощью шприца (см. 6.8) добавляют 1,0 мл водного раствора дитионита натрия (см. 7.2). Образец с восстановительным раствором энергично встряхивают и выдерживают при температуре (40 + 2) °С в течение точного интервала времени, 30 мин. Затем охлаждают до комнатной температуры (от20 °С до 25 °С) втечение 1 мин водой или, если необходимо, охлаждающей смесью льда, воды и соли.

9.3    Отделение и концентрирование 4-аминоазобензола

Добавляют 5 мл трет-бутилметилового эфира (см. 7.5) или 5 мл раствора внутреннего стандарта (см. 7.9.1) в реакционный раствор. После этого добавляют 7 г хлорида натрия (см. 7.6) и встряхивают смесь непрерывно в течение 45 мин, с частотой встряхивания f= 5 с1 (см. 6.7). Для полного разделения фаз смесь после встряхивания центрифугируют.

Задержка между охлаждением и встряхиванием рекомендуется не более 5 мин.

р — концентрация по массе (масса вещества на единицу массы смеси). w —процентная концентрация по массе (массовая доля).

3

Для последующего анализа переносят аликвотное количество фазы трет-бутилметилового эфира в подходящий сосуд, который немедленно закрывают. Выполняют обнаружение и определение 4-аминоазобензола хроматографическими методами, перечисленными в 6.9.

РЕКОМЕНДАЦИЯ — Для некоторых методов анализа может потребоваться концентрирование экстракта, полученного по 9.3, или перенос его в другой подходящий растворитель (например, метанол). Рекомендуется концентрировать экстрагированную фазу трет-бутилметилового эфира до примерно 1 мл (не досуха) в вакуумном ротационном испарителе при небольшом разрежении и температуре не более 50 °С. Затем удалить остаток растворителя очень осторожно, без вакуума, в слабом токе инертного газа.

Примечание 1 —Удаление растворителя (концентрирование в вакуумном ротационном испарителе, выпаривание досуха) может привести к значительным потерям 4-аминоазобензола, если выполнять процедуру без контроля.

Примечание 2 — Если возможно, стараются избежать замены растворителя, поскольку в процессе анализа значительные потери анализируемого вещества могут произойти за счет матричных эффектов.

9.4    Градуировочная смесь

Добавляют 5 мл трет-бутилметилового эфира (см. 7.5) или 5 мл раствора внутреннего стандарта (см. 7.9.1) к 100 мкл градуировочного раствора 4-аминоазобензола (см. 7.9.2). Эту смесь используют для калибровки, поскольку извлечение 4-аминоазобензола при разделении фаз с использованием данной методики составляет от 95 % до 100 %.

9.5    Проверка аналитической системы

Чтобы проверить методику, 100 мкл градуировочного раствора 4-аминоазобензола (см. 7.9.2) обрабатывают согласно 9.2 и 9.3. Степень извлечения 4-аминоазобензола должна быть не менее 60 %.

9.6    Хроматографический анализ

Обнаружение 4-аминоазобензола можно произвести с помощью хроматографических методов, перечисленных в 6.9. Можно использовать другие подтвержденные методы. Количественное определение 4-аминоазобензола выполняют с помощью метода ВЭЖХ/ ФДМД или КГХ/МСД; если используют газовую хроматографию, применяют соответствующие внутренние стандарты (см. 7.8).

10 Оценка

Количество 4-аминоазобензола обычно вычисляют с помощью компьютерной программы. Расчет можно осуществить вручную по площадям пиков.

10.1 Вычисление с помощью внутреннего стандарта

Концентрацию 4-аминоазобензола, иг, вычисляют как массовую долю, в миллиграммах на килограмм (мг/кг) образца, по следующей формуле:

иг=Рс

AsAISC v Ac'A/SS тЕ

гдерс— концентрация 4-аминоазобензола в градуировочном растворе, мкг/мл;

As — площадь пика 4-аминоазобензола в растворе образца, в единицах площади;

Ас — площадь пика 4-аминоазобензола в градуировочном растворе, в единицах площади;

A/ss — площадь пика внутреннего стандарта в растворе образца, в единицах площади1);

A/sc — площадь пика внутреннего стандарта в градуировочном растворе, в единицах площади1); V — объем образца согласно 9.3 (конечный объем образца), мл; здесь: 5 мл; тЕ — масса образца кожи, г.

10.2 Расчет без внутреннего стандарта

ле:


Концентрацию 4-аминоазобензола вычисляют как массовую долю иг, мг/кг, по следующей форму-

иг = Рс

As-У

1)

Ас-тЕ

Количественный анализ с помощью ГХ/МСД.

4

ГОСТ Р ИСО 17234-2-2015

где рс — концентрация 4-аминоазобензола в градуировочном растворе, в микрограммах на миллилитр (мкг/мл);

Л5 — площадь пика 4-аминоазобензола в растворе образца, в единицах площади;

Ас — площадь пика 4-аминоазобензола в градуировочном растворе, в единицах площади;

V — объем образца согласно 9.3 (конечный объем образца), мл; здесь: 5 мл; тЕ~ масса образца кожи, г.

10.3 Надежность метода

В отношении надежности метода см. приложение В.

11 Протокол испытания

Протокол испытания должен включать следующее:

a)    ссылку на настоящий стандарт;

b)    вид, происхождение и обозначение образца (составной образец, если применим);

c)    дату поступления образца и дату проведения анализа;

d)    процедуру отбора проб;

e)    примененные методы детектирования и количественного определения;

f)    результаты, сообщаемые как концентрация и предел обнаружения 4-аминоазобензола, в мг/кг. Следует быть внимательным в интерпретации результатов при получении значения 4-аминоазобензола менее 30 мг/кг (см. приложение С).

5

Приложение А (справочное)

Методы хроматографического анализа А.1 Предварительное замечание

Поскольку оснащение (см. 6.9) лабораторий может быть различным, для хроматографических анализов невозможно представить общие инструкции. Успешно испытываются и используются следующие параметры.

А.2 Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) (количественный метод)

А.2.1 Высокоэффективная жидкостная хроматография /фотометрический детектор с диодной матрицей (ВЭЖХ/ФДМД)

Элюент 1 ............................метанол;

Элюент 2 ............................ 0,575 г дигидрофосфата аммония + 0,7 г гидро

фосфата натрия в 1 ООО мл воды, уровень pH = 6,9;

Неподвижная фаза......................Zorbax SB-Phenyl®1) (5 мкм); (250 х4,6) мм;

Скорость потока........................от 0,7 до 1,0 мл/мин;

Градиент............................см. таблицу А.1;

Таблица А.1 — Программа градиента

Время, мин

Элюент1, %

Элюент 2, %

0

0

100

5

10

90

10

10

90

27

68

32

29

100

0


Температура колонки. . Вводимый объем пробы

Детектирование.....

Количественный анализ


30 °С;

10,0 мкл;

ФДМД, спектрограф; при 240, 280, 305 и 380 нм


А.2.2 Высокоэффективная жидкостная хроматография/масс-селективныйдетектор (ВЭЖХ/ФДМД/

МСД)

Элюент 1............................ацетонитрил;

Элюент 2............................ацетат аммония в 1000 мл воды, 5 ммоль, уро

вень pH = 3,0;

Неподвижная фаза......................Zorbax Eclipse XDB С182> (3,5 мкм); (50 х2,1) мм;

Скорость потока........................ 300 мкл/мин;

Градиент............................см. таблицу А.2;

Т а б л и ц а А.2 — Программа градиента

Время,

Элюент 1,

Элюент 2,

МИН

%

%

0

10

90

1,5

20

80

7,5

90

10

1}

' Zorbax SB-Phenyl® является примером подходящей продукции, имеющейся в продаже. Эта информация приведена исключительно для удобства пользователей настоящего стандарта и не указывает на предпочтение данного продукта со стороны ИСО.

Zorbax Eclipse XDB С18 является примером подходящей продукции, имеющейся в продаже. Эта информация приведена исключительно для удобства пользователей настоящего стандарта и не указывает на предпочтение данного продукта со стороны ИСО.

ГОСТ РИСО 17234-2—2015

Температура колонки.....................40 °С;

Вводимый объем.......................2,0 мкл;

Обнаружение..........................квадрупольная и/или масс-спектрометрическая

ионная ловушка, режим сканирования и/или МС детектирование МС-дочернего иона; ФДМД: в отношении длины волны см. А.2.1;

Газ-спрей............................азот(всосудах/генераторный);

Ионизация............................электрораспыление, положительное, по API,

фрагментор 120 В.

ZB-5-(Zebron)4 длина 30 м, внутренний диаметр 0,25 мм, толщина пленки 0,25 мкм; без деления;

250 °С; гелий;

50 °С (3 мин), от 50 °С до 280 °С (15 °С/мин), 280 °С (6 мин);

1,0 мкл, деление 1:15;

МС.

А.З Капиллярная газовая хроматография (КГХ/МСД) (количественный метод)

Капиллярная колонка. . . .

Система ввода........

Температура инжектора . .

Газ-носитель.........

Температурная программа

Вводимый объем......

А.4 Капиллярный электрофорез (КЭ/ФДМД) (количественный метод)

200 мкл раствора образца (см. 9.3) смешивают с 50 мкл HCI (с = 0,01 моль/л) и пропускают через мембранный фильтр (0,2 мкм). Этот раствор анализируют с помощью капиллярного зонального электрофореза.


Детектирование.......

Капилляр 1...........................56    см,    без покрытия, внутренний диаметр

50 мкм, с увеличенной толщиной светопоглощающего слоя;

(ПВС), внутренний диаметр 50 мкм, с увеличенной толщиной светопоглощающего слоя;


Капилляр 2...........................56    см,    покрытый поливиниловым спиртом

Буферный раствор......................фосфатный буферный раствор (с = 50 ммоль/л),

уровень pH = 2,5;

Температура колонки.....................25 °С;

Напряжение...........................30 кВ;

Время ввода..........................4    с;

Время продувки........................5 с;

Детектирование........................ФДМД 214,254 нм, спектрограф.

А.5 Тонкослойная хроматография (ТСХ) (количественный метод); ВЭТСХ или ТСХ только для полуколичественного подтверждения А.5.1

Пластины (ВЭТСХ): силикагель 60 с флуоресцентным индикатором F254, (20 х10)см.

Применяемый объем: (2—5) мкл, наносится в виде капли.

Подвижный растворитель 1: хлороформ/уксусная кислота (90 + 10) частей на объем.

А.5.2

Пластины (ТСХ): силикагель 60 с флуоресцентным индикатором F254, (20 х20)см.

Применяемый объем: 10,0 мкл, наносится в виде линии.

Подвижный растворитель 2: хлороформ/этилацетат/уксусная кислота (60 + 30+ 10) частей на объем. Подвижный растворитель 3: хлороформ /метанол (95 + 5) частей на объем.

Подвижные растворители 2 и 3: один за другим без просушивания пластин.

А.5.3

Детектирование: 1) ультрафиолетовая (УФ) лампа;

2) после последовательной обработки реактивами 1 и 2, время реакции приблизительно 5 мин.

1 )

' ZB-5-(Zebron) является примером подходящей продукции, имеющейся в продаже. Эта информация приведена исключительно для удобства пользователей данного документа и не указывает на предпочтение данного продукта со стороны ИСО.

7