Cтандарт дополняет ИСO 17234-1 и устанавливает специальный метод для определения наличия в продукции некоторых азокрасителей, способных выделять 4-аминоазобензол.
Идентичен ISO 17234-2:2011
1 Область применения
2 Нормативные ссылки
3 Общие положения
4 Принцип
5 Меры предосторожности
6 Аппаратура
7 Реактивы
8 Отбор проб
9 Проведение анализа
10 Оценка
11 Протокол испытания
Приложение А (справочное) Методы хроматографического анализа
Приложение В (справочное) Надежность метода
Приложение С (справочное) Руководство по оценке. Интерпретация результатов анализа
Приложение ДА (справочное) Сведения о соответствии ссылочных международных стандартов национальным стандартам Российской Федерации
Библиография
19 страниц
Дата введения | 01.07.2016 |
---|---|
Добавлен в базу | 01.02.2017 |
Актуализация | 01.01.2021 |
19.06.2015 | Утвержден | Федеральное агентство по техническому регулированию и метрологии | 751-ст |
---|---|---|---|
Разработан | ОАО ВНИИС | ||
Разработан | ТК 412 Текстиль | ||
Издан | Стандартинформ | 2016 г. |
Чтобы бесплатно скачать этот документ в формате PDF, поддержите наш сайт и нажмите кнопку:
ГОСТ Р исо
17234-2-
2015
ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО ПО ТЕХНИЧЕСКОМУ РЕГУЛИРОВАНИЮ И МЕТРОЛОГИИ
НАЦИОНАЛЬНЫЙ
СТАНДАРТ
РОССИЙСКОЙ
ФЕДЕРАЦИИ
ISO 17234-2:2011
Leather — Chemical tests for the determination of certain azo colorants in dyed leathers — Part 2: Determination of 4-aminoazobenzene (IDT)
Москва
Стандартинформ
2016
1 ПОДГОТОВЛЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК412 «Текстиль», Открытым акционерным обществом «Всероссийский научно-исследовательский институт сертификации» (ОАО «ВНИИС») на основе собственного аутентичного перевода на русский язык международного стандарта, указанного в пункте 4
2 ВНЕСЕН Управлением технического регулирования и стандартизации Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии
3 УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 19 июня 2015 г. №751-ст
4 Настоящий стандарт идентичен международному стандарту ИСО 17234-2:2011 «Кожа. Химические испытания для определения содержания некоторых азокрасителей в окрашенной коже. Часть 2. Определение содержания 4-аминоазобензола» (ISO 17234-2:2011 «Leather — Chemical tests for the determination of certain azo colorants in dyed leathers — Part 2: Determination of 4-aminoazobenzene»).
Наименование настоящего стандарта изменено относительно наименования указанного международного стандарта для приведения в соответствие с ГОСТ Р 1.5 (пункт 3.5).
При применении настоящего стандарта рекомендуется использовать вместо ссылочных международных стандартов соответствующие им национальные стандарты Российской Федерации, сведения о которых приведены в дополнительном приложении ДА
5 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ
Правила применения настоящего стандарта установлены в ГОСТ Р 1.0-2012 (раздел 8). Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном (по состоянию на 1 января текущего года) информационном указателе «Национальные стандарты», а официальный текст изменений и поправок — в ежемесячном информационном указателе «Национальные стандарты». В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ближайшем выпуске ежемесячного информационного указателя «Национальные стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет (www.gost.ru)
©Стандартинформ, 2016
Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии
Реактив 1: 0,1 % NaN02 в HCI (с= 1 моль/л).
Реактив 2: 0,2 % а-нафтол в КОН (с= 1 моль/л).
А.6 Примеры хроматограмм и спектров
X—время; У—относительные единицы; 1 — внутренний стандарт; 2 — 4-аминоазобензол Рисунок А.1 — Хроматограмма общего ионного тока, 4-аминоазобензол, КГХ/МСД
Примеры хроматограмм и спектров показаны на рисунках А.1—А.4.
8
уА
35000-
30000-
25000—
20000-
15000-
10000-
5000-
65
77
120
197
51
т*т
154 167
ГГ IT
214 237
273 285
Т
-f-rV
м м
315 332 346
Т
40 60 80 100 120 140 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340
X— m/z; У—относительные единицы
Рисунок А.2 — КГХ/МСД 70 эВ-спектр и структура 4-аминоазобензола |
2
X— мин; У — мЕОП (0,001 единицы оптической плотности); 1 — ФДМД А, сигнал =240; 2 — 4-аминоазобензол; 3 — ФДМД В, сигнал = 380 |
Рисунок А.З —Хроматограмма 4-аминоазобензола, ВЭЖХ/ФДМД; детектирование при 240 и 380 нм
9
X — нм; У — мЕОП (0,001 единицы оптической плотности) Рисунок А.4 — ВЭЖХ/ФДМД-спектр 4-аминоазобензола
10
ГОСТ РИСО 17234-2—2015
Надежность метода
Таблица В.1 касается межлабораторных испытаний, выполненных для определения содержания 4-амино-азобензола в коже
Таблица В.1 —Результаты межлабораторных испытаний. Определение концентрации образовавшегося 4-аминоазобензола в коже [1]
Параметр |
Методика анализа | |
КГХ/МСД |
ВЭЖХ | |
Число лабораторий-участниц |
10 |
11 |
Число выбросов |
2 |
2 |
Число лабораторий после исключения выбросов |
8 |
9 |
Среднее значение х, мг/кг |
81,9 |
91,2 |
Повторяемость г, мг/кг |
21,4 |
27,1 |
Стандартное отклонение повторяемости sr, мг/кг |
7,6 |
9,7 |
Воспроизводимость R, мг/кг |
32,5 |
35,9 |
Стандартное отклонение воспроизводимости Sr, мг/кг |
11,6 |
12,5 |
Данный официальный метод был разработан рабочей группой «Анализ запрещенных азокрасителей» германской BVL и оценен в межлабораторном испытании, в котором приняли участие 11 лабораторий.
a) В отношении оценки повторяемости и воспроизводимости результатов межпабораторных испытаний (по круговой схеме) необходимо учесть следующее:
1) межлабораторные испытания продемонстрировали, что отношение красителя к восстановителю и «возраст» восстановителя могут оказывать решающее влияние на количественный результат. Следовательно, рекомендуется выполнять восстановительное расщепление в строгом соответствии с условиями, изложенными в 9.2 (время, температура и количество);
2) другим важным фактором является экстракция системы «жидкость — жидкость», например, разделение водной и органической фаз, чтобы предотвратить дальнейшую реакцию расщепления азогруппы 4-аминоазобензо-ла. Следовательно, настоятельно рекомендуется точно соблюдать условия, изложенные в 9.3.
b) Пробу кожи для межлабораторных испытаний взяли от типового изделия, разрезали и смешали с неокрашенной кожей. Таким образом можно снизить гомогенность материала.
c) Применение других подходящих внутренних стандартов может привести к более высокой повторяемости метода КГХ/МСД. Это условие, однако, не рассматривалось в оценке межлабораторных испытаний.
11
Приложение С (справочное)
Руководство по оценке. Интерпретация результатов анализа
Поскольку получение аминов в очень небольших количествах может привести к ложным положительным результатам, приложение XVII Регламента REACH 1907/2006 определяет предельное значение как 30 мг/кг материала пробы. Это значение применяется только в пробе материала, который является гомогенным по структуре и окрашиванию, а не к смешанной пробе гетерогенного состава.
Если обнаруженное количество 4-аминоазобензола превышает 30 мг/кг, можно предположить, что был использован определенный азокраситель. При концентрации ниже 30 мг/кгв настоящее время невозможно сделать авторитетное заявление об использовании определенных азокрасителей без получения дополнительной информации, такой, например, как тип и/или чистота использованных красителей или другого использованного сырья.
В этом контексте рекомендуется сообщать результаты анализа следующим образом:
В случае, когда концентрация образовавшегося 4-аминоазобензола не более 30 мг/кг:
«Согласно выполненному анализу азокрасителей, способных выделять 4-аминоазобензол в результате восстановительного расщепления их азогрупп(ы), в предложенном изделии обнаружено не было».
В случае, когда концентрация образовавшегося 4-аминоазобензола более 30 мг/кг:
«Согласно выполненному анализу предполагается, что предложенное изделие изготовлено или обработано с применением азокрасителей, запрещенных в соответствии с приложением XVII Регламента REACH 1907/2006».
12
Приложение ДА (справочное)
Сведения о соответствии ссылочных международных стандартов национальным стандартам Российской Федерации
Таблица ДА.1 | ||||||||||||
|
13
Библиография
[1] Amtliche Sammlung von Untersuchungsverfahren nach § 64 LFGB В 82.02-9:2006-09/BVL В 82.02-9:2006-09 Berichtigung 2008-04 — Nachweis der Verwendung von Azofarbstoffen, die 4-Aminoazobenzol freisetzen konnen
[2] Регламент REACH: Regulation (EC) No. 1907/2006 of the European Parliament and of the Council concerning the Registration, Evaluation, Authorisation and Restriction of Chemicals (REACH), AnnexXVIl
14
УДК 675.046.12:006.354 ОКС 59.140.30
Ключевые слова: окрашенная кожа, азокраситель, 4-аминоазобензол, определение, принцип, процедура, оценка, протокол
15
Редактор И.В. Гоголь Технический редактор В.Н. Прусакова Корректор Л.С. Лысенко Компьютерная верстка А.Н. Золотаревой
Сдано в набор 22.03.2016. Подписано в печать 25.03.2016. Формат 60 х 84^. Гарнитура Ариал. Уел. печ. л. 2,32. Уч.-изд. л. 1,80. Тираж 34 экз. Зак. 867.
Издано и отпечатано во ФГУП «СТАНДАРТИНФОРМ», 123995 Москва, Гранатный пер., 4. www.gostinfo.ru info@gostinfo.ru
1 Область применения...................................................1
2 Нормативные ссылки..................................................1
3 Общие положения....................................................1
4 Принцип...........................................................2
5 Меры предосторожности................................................2
6 Аппаратура.........................................................2
7 Реактивы..........................................................2
8 Отбор проб.........................................................3
9 Проведение анализа...................................................3
10 Оценка...........................................................4
11 Протокол испытания..................................................5
Приложение А (справочное) Методы хроматографического анализа......................6
Приложение В (справочное) Надежность метода.................................11
Приложение С (справочное) Руководство по оценке. Интерпретация результатов анализа.......12
Приложение ДА (справочное) Сведения о соответствии ссылочных международных стандартов
национальным стандартам Российской Федерации.....................13
Библиография........................................................14
Leather. Chemical tests for the determination of certain azo colorants in dyed leathers.
Part 2. Method for determination of4-aminoazobenzene
Дата введения — 2016—07—01
Настоящий стандарт дополняет ИСО 17234-1 и устанавливает специальный метод для определения наличия в продукции некоторых азокрасителей, способных выделять 4-аминоазобензол. Данный метод также позволяет обнаружить 4-аминоазобензол (краситель анилиновый желтый 1), уже присутствующий в качестве свободного амина в продукции, не прошедшей восстановительное расщепление.
Азокрасители, способные образовывать 4-аминоазобензол, генерируют в условиях, установленных ИСО 17234-1, для определения аминов, анилина и 1,4-фенилендиамина. Наличие красителей на основе 4-аминоазобензола невозможно надежно установить без дополнительной информации (например, химического состава использованного красителя) или без специальной методики.
Данным методом невозможно определить количественное содержание использованных азокрасителей, способных выделять в процессе восстановительного расщепления азогруппы (азогрупп) один или несколько других ароматических аминов, приведенных в приложении XVII к Регламенту ЕС 1907/2006 Европейского парламента и Совета о регистрации, оценке, разрешении и ограничении (запрещении) применения химических веществ [Council on the Registration, Evaluation, Authorisation and Restriction of Chemicals (Регламент REACH)], за исключением 4-аминоазобензола.
В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие международные стандарты:
ИСО 2418:2002 Кожа. Химические, физические и механические испытания и испытания на прочность. Определение местоположения образца (ISO 2418:2002 Leather — Chemical, physical and mechanical and fastness tests — Sampling location)
ИСО 4044:2008 Кожа. Химические испытания. Подготовка образцов для химических испытаний (ISO 4044:2008 Leather — Chemical tests — Preparation of chemical test samples)
Некоторые азокрасители способны выделять при восстановительном расщеплении азогрупп(ы) вещество 4-аминоазобензол, которое запрещено согласно приложению XVII к Регламенту REACH.
Таблица 1 —4-аминоазобензол, запрещенный Регламентом REACH 1907/2006 (приложение XVII) | ||||||||||
| ||||||||||
Издание официальное |
После обезжиривания образец кожи обрабатывают дитионитом натрия в щелочном растворе при температуре 40 °С в закрытом сосуде. 4-аминоазобензол, выделяющийся в процессе восстановления, переводят в фазу mpem-бутилметилового эфира с помощью экстракции в системе «жидкость — жидкость». Аликвотное количество фазы mpem-бутилметилового эфира используют для анализа.
Обнаружение и определение 4-аминоазобензола выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии [ВЭЖХ (HPLC)] с использованием фотометрического детектора на диодной матрице [ФДМД (DAD)] или масс-селективного детектора [ВЭЖХ/МСД (HPLC/MSD)], методом капиллярной газовой хроматографии с помощью масс-селективного детектора [КПХ/МСД (GC/MSD)], или методом капиллярного электрофореза с помощью фотометрического детектора на диодной матрице [КЭ/ФДМД (СЕ/DAD)], или количественно методом тонкослойной хроматографии или высокоэффективной тонкослойной хроматографии [ТСХ, ВЭТСХ(Т1_С, HPTLC)].
Если 4-аминоазобензол обнаруживают одним хроматографическим методом, необходимо выполнить подтверждение, используя один или несколько альтернативных методов. Количественное определение аминов проводят методом ВЭЖХ/ ФДМД.
5.1 Соединения 4-аминоазобензола относят к потенциальным канцерогенам для человека.
Работы с этими веществами и их утилизацию необходимо проводить в строгом соответствии с
национальными регламентами по здравоохранению и безопасности.
5.2 Пользователь несет ответственность за соблюдение безопасной и надежной техники обращения с материалами данного метода испытаний. Относительно конкретных подробностей, таких, например, как таблицы по безопасности материалов и другие рекомендации, необходимо проконсультироваться с изготовителями.
5.3 Рекомендуется следовать правилам надлежащей лабораторной практики. В любом из помещений лаборатории при работе с порошкообразными красителями и 4-аминоазобензолом необходимо пользоваться защитными очками, противопылевыми респираторами и одноразовыми перчатками.
5.4 Пользователи должны соблюдать требования национальных и местных правил техники безопасности.
Стандартное лабораторное оборудование и, в частности, следующее.
6.1 Подходящий для реакции сосуд из термостойкого стекла с газонепроницаемой пробкой.
6.2 Нагреватель, создающий температуру (40 +2) °С.
6.3 Сепаратор со скоростью вращения более 3000 об/мин.
6.4 Ротационный вакуумный испаритель.
6.5 Пипетки требуемого размера или разные.
6.6 Ультразвуковая ванна не менее 160 Вт, с регулируемым нагревом.
6.7 Горизонтальный встряхиватель с достаточной частотой 5 с-1, длиной перемещения от 2 до
5 см.
6.8 Полипропиленовый или полиэтиленовый шприц объемом 2 мл.
6.9.1 Газовая хроматография (ГХ) с масс-селективным детектором (МСД).
6.9.2 Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) с градиентом элюирования и фотометрическим детектором на диодной матрице (ФДМД) или масс-селективным детектором (МСД).
6.9.3 Тонкослойная хроматография (ТСХ) или высокоэффективная тонкослойная хроматография (ВЭТСХ) с соответствующим детектированием.
6.9.4 Капиллярный электрофорез (КЭ) с детектором ФДМД.
Примечание — Описание оборудования приведено в приложении А.
Если нет иных указаний, применяют химические вещества аналитической чистоты.
2
7.1 Гидроксид натрия.
7.2 Водный раствор дитионита натрия, р = 200 мг/мл1), свежеприготовленный, для использования непосредственно после выдерживания в течение 1 ч в закрытом сосуде.
7.3 Раствор гидроксида натрия, w= 2 %2\
7.4 н-гексан.
7.5 трет-бутилметиловыйэфир.
7.6 Хлорид натрия.
7.7 4-аминоазобензол, сверхчистый.
7.8 Внутренние стандарты для газовой хроматографии (ИС), например:
- ИС 1: нафталин-б8 (CAS No.: 1146-65-2);
- ИС 2:2,4,5-трихлоранилин (CAS No.: 636-30-6);
- ИС 3: бензидин-б8 (CAS No.: 92890-63-6);
- ИС4: антрацен-dl0 (CAS No.: 1719-06-8).
7.9.1 Раствор внутреннего стандарта (ИС) в mpem-бутилметиловом эфире, р = 10,0 мкг/мл.
7.9.2 Градуировочный раствор 4-аминоазобензола для проверки методики эксперимента и приготовления градуировочных растворов 4-аминоазобензола в метаноле, р = 500 мкг/мл.
Если возможно, проводят отбор проб в соответствии с ИСО 2418 и измельчают кожу в соответствии с ИСО 4044. Если отбор проб в соответствии с ИСО 2418 невозможен (например, в случае отбора кожи из готовых отделанных изделий, таких как обувь или одежда), в протоколе испытаний описывают процедуру отбора проб.
Все следы клея должны быть удалены механическим способом.
В случае кожаного лоскутного изделия с разноцветным рисунком различные цвета, по возможности, рассматривают отдельно. Для изделий, изготовленных из кожи различного качества, образцы кожи различного качества анализируют отдельно.
Обрабатывают кожу массой более 1,0 г, измельченную на кусочки (площадью 25 мм2), или измельченный образец кожи, помещая в закрытый сосуд вместимостью 50 мл (см. 6.1), порцией 20 мл н-гексана (см. 7.4), в ультразвуковой ванне (см. 6.6) при температуре (40 ±2) °С в течение 20 мин.
Декантируют слой н-гексана с образца кожи. Следует избегать потерь частиц кожи во время декантирования. Сразу после декантирования обрабатывают образец также, как до этого, порцией 20 мл н-гексана. Выпаривают остаток н-гексана из открытого сосуда в течение ночи или более длительного срока.
Добавляют 9 мл раствора гидроксида натрия (см. 7.3) к образцу. Плотно закупоривают реакционный сосуд и энергично встряхивают. Все волокна кожаного материала следует смочить.
Затем с помощью шприца (см. 6.8) добавляют 1,0 мл водного раствора дитионита натрия (см. 7.2). Образец с восстановительным раствором энергично встряхивают и выдерживают при температуре (40 + 2) °С в течение точного интервала времени, 30 мин. Затем охлаждают до комнатной температуры (от20 °С до 25 °С) втечение 1 мин водой или, если необходимо, охлаждающей смесью льда, воды и соли.
Добавляют 5 мл трет-бутилметилового эфира (см. 7.5) или 5 мл раствора внутреннего стандарта (см. 7.9.1) в реакционный раствор. После этого добавляют 7 г хлорида натрия (см. 7.6) и встряхивают смесь непрерывно в течение 45 мин, с частотой встряхивания f= 5 с1 (см. 6.7). Для полного разделения фаз смесь после встряхивания центрифугируют.
Задержка между охлаждением и встряхиванием рекомендуется не более 5 мин.
р — концентрация по массе (масса вещества на единицу массы смеси). w —процентная концентрация по массе (массовая доля).
3
Для последующего анализа переносят аликвотное количество фазы трет-бутилметилового эфира в подходящий сосуд, который немедленно закрывают. Выполняют обнаружение и определение 4-аминоазобензола хроматографическими методами, перечисленными в 6.9.
РЕКОМЕНДАЦИЯ — Для некоторых методов анализа может потребоваться концентрирование экстракта, полученного по 9.3, или перенос его в другой подходящий растворитель (например, метанол). Рекомендуется концентрировать экстрагированную фазу трет-бутилметилового эфира до примерно 1 мл (не досуха) в вакуумном ротационном испарителе при небольшом разрежении и температуре не более 50 °С. Затем удалить остаток растворителя очень осторожно, без вакуума, в слабом токе инертного газа.
Примечание 1 —Удаление растворителя (концентрирование в вакуумном ротационном испарителе, выпаривание досуха) может привести к значительным потерям 4-аминоазобензола, если выполнять процедуру без контроля.
Примечание 2 — Если возможно, стараются избежать замены растворителя, поскольку в процессе анализа значительные потери анализируемого вещества могут произойти за счет матричных эффектов.
Добавляют 5 мл трет-бутилметилового эфира (см. 7.5) или 5 мл раствора внутреннего стандарта (см. 7.9.1) к 100 мкл градуировочного раствора 4-аминоазобензола (см. 7.9.2). Эту смесь используют для калибровки, поскольку извлечение 4-аминоазобензола при разделении фаз с использованием данной методики составляет от 95 % до 100 %.
Чтобы проверить методику, 100 мкл градуировочного раствора 4-аминоазобензола (см. 7.9.2) обрабатывают согласно 9.2 и 9.3. Степень извлечения 4-аминоазобензола должна быть не менее 60 %.
Обнаружение 4-аминоазобензола можно произвести с помощью хроматографических методов, перечисленных в 6.9. Можно использовать другие подтвержденные методы. Количественное определение 4-аминоазобензола выполняют с помощью метода ВЭЖХ/ ФДМД или КГХ/МСД; если используют газовую хроматографию, применяют соответствующие внутренние стандарты (см. 7.8).
Количество 4-аминоазобензола обычно вычисляют с помощью компьютерной программы. Расчет можно осуществить вручную по площадям пиков.
Концентрацию 4-аминоазобензола, иг, вычисляют как массовую долю, в миллиграммах на килограмм (мг/кг) образца, по следующей формуле:
иг=Рс
AsAISC v Ac'A/SS тЕ
гдерс— концентрация 4-аминоазобензола в градуировочном растворе, мкг/мл;
As — площадь пика 4-аминоазобензола в растворе образца, в единицах площади;
Ас — площадь пика 4-аминоазобензола в градуировочном растворе, в единицах площади;
A/ss — площадь пика внутреннего стандарта в растворе образца, в единицах площади1);
A/sc — площадь пика внутреннего стандарта в градуировочном растворе, в единицах площади1); V — объем образца согласно 9.3 (конечный объем образца), мл; здесь: 5 мл; тЕ — масса образца кожи, г.
ле:
Концентрацию 4-аминоазобензола вычисляют как массовую долю иг, мг/кг, по следующей форму-
иг = Рс
As-У
1)
Ас-тЕ’
Количественный анализ с помощью ГХ/МСД.
4
где рс — концентрация 4-аминоазобензола в градуировочном растворе, в микрограммах на миллилитр (мкг/мл);
Л5 — площадь пика 4-аминоазобензола в растворе образца, в единицах площади;
Ас — площадь пика 4-аминоазобензола в градуировочном растворе, в единицах площади;
V — объем образца согласно 9.3 (конечный объем образца), мл; здесь: 5 мл; тЕ~ масса образца кожи, г.
В отношении надежности метода см. приложение В.
Протокол испытания должен включать следующее:
a) ссылку на настоящий стандарт;
b) вид, происхождение и обозначение образца (составной образец, если применим);
c) дату поступления образца и дату проведения анализа;
d) процедуру отбора проб;
e) примененные методы детектирования и количественного определения;
f) результаты, сообщаемые как концентрация и предел обнаружения 4-аминоазобензола, в мг/кг. Следует быть внимательным в интерпретации результатов при получении значения 4-аминоазобензола менее 30 мг/кг (см. приложение С).
5
Приложение А (справочное)
Поскольку оснащение (см. 6.9) лабораторий может быть различным, для хроматографических анализов невозможно представить общие инструкции. Успешно испытываются и используются следующие параметры.
А.2 Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) (количественный метод)
А.2.1 Высокоэффективная жидкостная хроматография /фотометрический детектор с диодной матрицей (ВЭЖХ/ФДМД)
Элюент 1 ............................метанол;
Элюент 2 ............................ 0,575 г дигидрофосфата аммония + 0,7 г гидро
фосфата натрия в 1 ООО мл воды, уровень pH = 6,9;
Неподвижная фаза......................Zorbax SB-Phenyl®1) (5 мкм); (250 х4,6) мм;
Скорость потока........................от 0,7 до 1,0 мл/мин;
Градиент............................см. таблицу А.1;
Таблица А.1 — Программа градиента | ||||||||||||||||||
|
Температура колонки. . Вводимый объем пробы
Детектирование.....
Количественный анализ
30 °С;
10,0 мкл;
ФДМД, спектрограф; при 240, 280, 305 и 380 нм
А.2.2 Высокоэффективная жидкостная хроматография/масс-селективныйдетектор (ВЭЖХ/ФДМД/
МСД)
Элюент 1............................ацетонитрил;
Элюент 2............................ацетат аммония в 1000 мл воды, 5 ммоль, уро
вень pH = 3,0;
Неподвижная фаза......................Zorbax Eclipse XDB С182> (3,5 мкм); (50 х2,1) мм;
Скорость потока........................ 300 мкл/мин;
Градиент............................см. таблицу А.2;
Т а б л и ц а А.2 — Программа градиента | |||||||||||||||
|
1}
' Zorbax SB-Phenyl® является примером подходящей продукции, имеющейся в продаже. Эта информация приведена исключительно для удобства пользователей настоящего стандарта и не указывает на предпочтение данного продукта со стороны ИСО.
Zorbax Eclipse XDB С18 является примером подходящей продукции, имеющейся в продаже. Эта информация приведена исключительно для удобства пользователей настоящего стандарта и не указывает на предпочтение данного продукта со стороны ИСО.
ГОСТ РИСО 17234-2—2015
Температура колонки.....................40 °С;
Вводимый объем.......................2,0 мкл;
Обнаружение..........................квадрупольная и/или масс-спектрометрическая
ионная ловушка, режим сканирования и/или МС детектирование МС-дочернего иона; ФДМД: в отношении длины волны см. А.2.1;
Газ-спрей............................азот(всосудах/генераторный);
Ионизация............................электрораспыление, положительное, по API,
фрагментор 120 В.
ZB-5-(Zebron)4 длина 30 м, внутренний диаметр 0,25 мм, толщина пленки 0,25 мкм; без деления;
250 °С; гелий;
50 °С (3 мин), от 50 °С до 280 °С (15 °С/мин), 280 °С (6 мин);
1,0 мкл, деление 1:15;
МС.
А.З Капиллярная газовая хроматография (КГХ/МСД) (количественный метод)
Капиллярная колонка. . . .
Система ввода........
Температура инжектора . .
Газ-носитель.........
Температурная программа
Вводимый объем......
А.4 Капиллярный электрофорез (КЭ/ФДМД) (количественный метод)
200 мкл раствора образца (см. 9.3) смешивают с 50 мкл HCI (с = 0,01 моль/л) и пропускают через мембранный фильтр (0,2 мкм). Этот раствор анализируют с помощью капиллярного зонального электрофореза.
Детектирование.......
Капилляр 1...........................56 см, без покрытия, внутренний диаметр
50 мкм, с увеличенной толщиной светопоглощающего слоя;
(ПВС), внутренний диаметр 50 мкм, с увеличенной толщиной светопоглощающего слоя;
Капилляр 2...........................56 см, покрытый поливиниловым спиртом
Буферный раствор......................фосфатный буферный раствор (с = 50 ммоль/л),
уровень pH = 2,5;
Температура колонки.....................25 °С;
Напряжение...........................30 кВ;
Время ввода..........................4 с;
Время продувки........................5 с;
Детектирование........................ФДМД 214,254 нм, спектрограф.
А.5 Тонкослойная хроматография (ТСХ) (количественный метод); ВЭТСХ или ТСХ только для полуколичественного подтверждения А.5.1
Пластины (ВЭТСХ): силикагель 60 с флуоресцентным индикатором F254, (20 х10)см.
Применяемый объем: (2—5) мкл, наносится в виде капли.
Подвижный растворитель 1: хлороформ/уксусная кислота (90 + 10) частей на объем.
А.5.2
Пластины (ТСХ): силикагель 60 с флуоресцентным индикатором F254, (20 х20)см.
Применяемый объем: 10,0 мкл, наносится в виде линии.
Подвижный растворитель 2: хлороформ/этилацетат/уксусная кислота (60 + 30+ 10) частей на объем. Подвижный растворитель 3: хлороформ /метанол (95 + 5) частей на объем.
Подвижные растворители 2 и 3: один за другим без просушивания пластин.
А.5.3
Детектирование: 1) ультрафиолетовая (УФ) лампа;
2) после последовательной обработки реактивами 1 и 2, время реакции приблизительно 5 мин.
1 )
' ZB-5-(Zebron) является примером подходящей продукции, имеющейся в продаже. Эта информация приведена исключительно для удобства пользователей данного документа и не указывает на предпочтение данного продукта со стороны ИСО.
7