ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ГОСТ Р 51277-99 (ИСО 9648-88)
СОРГОМетод определения содержания таннинов
Издание официальное
ГОССТАНДАРТ РОССИИ Москва
Предисловие
1 РАЗРАБОТАН Всероссийским научно-исследовательским институтом зерна и продуктов его переработки (ВНИИЗ)
ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК 2 «Зерно, продукты его переработки и маслосемена*
2 ПРИНЯТ И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Госстандарта России от 13 мая 1999 г. № 162
3 Настоящий стандарт, кроме раздела 2, представляет собой аутентичный текст ИСО 9648:1988 «Сорго. Определение содержания таннинов»
4 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ
© ИПК Издательство стандартов, 1999
Настоящий стандарт нс может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения Госстандарта России
II
ГОСТ P 51277-99 (ИСО 9648-88)
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
СОРГО
Метод определения содержания таннинов
Sorghum.
Determination of tannin content
Дета введения 2000—01—01
1 Область применения
Настоящий стандарт устанавливает универсальный метод определения содержания таннинов в юр нс сорго
Метод нс является специфическим только для одного отдельного типа полифенолов. Его эффективность подтверждена высокой отрицательной корреляцией, которая наблюдается между энергией обмена веществ, установленной н биологических опытах при использовании зерна сорго в качестве корма для кур, и результатами, полученными данным методом.
2 Нормативные ссылки
В настоящем стандарте использованы ссылки на следующие стандарты.
ГОСТ 1770-74 Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Технические условия
ГОСГ 25336—82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры
ГОСТ 29227-91 (ИСО 835-1—81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные Часть 1. Обшив требования
ГОСТ 29143-91 (ИСО 712—85) Зерно и зернопродукты. Определение влажности (рабочий контрольный метод)
ГОСТ Р 50436-92 (ИСО 950—79) Зерновые. Отбор проб зерна
3 Сущность метода
Сущность метода состоит в экстрагировании таннинов димстилформамидом, центрифугировании и последующем их извлечении путем добавления аммоний-железо (III) цитрата и аммиака к аликвотной части верхнего слоя жидкости и в спсктрофотомстричсском измерении оптической плотности полученного раствора при длине волны в 525 нм. Определение содержания таннинов проводят по градуировочному графику, построенному по дубильной кислоте.
4 Реактивы
Все реактивы должны бьггь квалификации чистый для анализа чд.а. Используют дистиллированную воду или волу, соответствующую по чистоте дистиллированной.
Издание официальное
4.1 Дубильная кислота, раствор концентрации 2 г/дм'.
Поскольку качество дубильной кислоты оказывает определенное влияние на градуировочным график, то при сопоставлении результатов, полученных в розных лабораториях, рекомендуется использовать дубильную кислоту' фирмы «Merck» (номер 773 по фирменному каталогу)*.
Приготовленный раствор можно хранить одну неделю.
4.2 Аммиак, раствор NH3 концентрации 8,0 г/дм*.
4.3 Д и мстил форма мнд, раствор концентрации 75 % (по объему).
Помешают 75 см3 дн метил форма мида в мерную колбу емкостью 100 см3. Разбавляют водой и после охлаждения доводят до метки.
Внимание: Димстилформамид вреден для здоровья при вдыхании или контакте с кожей.
Он также раздражает глаза.
4.4 Аммоний-железо (III) цитрат с содержанием железа от 17 до 20 % (по массе), раствор концентрации 3,5 г/дм\ приготовленный за 24 ч до использования.
Поскольку содержание желез;» в аммоний-железо (III) цитрате оказывает влияние на результаты анализа, то это следует обязательно учитывать.
5 Аппаратура
При анализе используют следующую аппаратуру.
5.1 Механическая дробилка, обеспечивающая получение частиц, полностью проходящих через сито (5.2).
5.2 Сито с отверстиями размером 0,5 мм.
5.3 Центрифуга с фактором разделения 3000 (приблизительно 3000 g).
5.4 Пробирки для центрифугирования емкостью около 50 см3, с притертыми пробками, обеспечивающими герметичность закрывания
5.5 Механическая мешалка с возвратно-поступательным движением или магнитная мешалка.
5.6 Механическая качалка для пробирок (типа «Vortex*).
5.7 Спектрофотометр с кюветами толщиной 10 мм, позволяющий проводить измерения при длине волны в 525 нм.
5.8 Пипетки 1, 5 и 20 см3 по ГОСТ 29227.
5.9 Пипетки градуированные 5 и 10 см- по ГОСТ 29227.
5.10 Пробирки типа П1 по ГОСТ 25336.
5.11 Колбы мерные 20 см3 по ГОСТ 1770.
6 Отбор проб
Отбор проб проводят в соответствии с ГОСТ Р 50436.
"Зерно сорго, предназначенное для определения содержания таннинов, в высушенном виде можно хранить в течение 3 мсс в защищенном от свет.» месте.
7 Подготовка пробы к анализу
Из лабораторной пробы зерна сорго удаляют все посторонние примеси и измельчают зерно на механической дробилке (5.1) до получения частиц, полностью проходящих через сито (5.2). Продукт после измельчения тщательно перемешивают.
Так как таннины в измельченных продуктах быстро окисляются, анализ рекомендуется проводить сразу же после измельчения.
П р и мсчонис — Измельченный продукт можно хранить в течение 3 дней, сети он защищен от света и высушен.
"Дубильная кислота фирмы «Merck* с каталожным номс|юм 773 упомянута как пример коммерчески доступного препарата. Информация приведена ,и»я удобств;» пользования настоящим стандартом и нс должна рассм;гфиа.»т:я как [кклама упомянутого продукта.
8.1 Определение влажности анализируемой пробы зерна
Влажность анализируемой пробы зерна определяют но ГОСТ 291.43.
8.2 Навеска для анализа
Берут навеску анализируемой пробы зерна (раздел 7) массой около I г. взвешивают с rion>cui-ностью ±1 мг и помешают в пробирку для центрифугирования (5.4).
8.3 Проведение анализа
8.3.1 Пипеткой (5.8) отмеряют 20 см' раствора димстилформамнда (4.3) в пробирку для центрифугирования. Герметично закрывают пробирку пробкой и перемешивают в течение (60±1) мин на мешалке (5.5). Затем центрифугируют в течение 10 мин при 3000 g.
8.3.2 Отбирают пипеткой (5.8) I см3 жидкости из верхнего слоя (8.3.1) и переносят ее в пробирку (5.10). Последовательно туда же добавляют пипеткой 6 см1 воды и I ем' раствора аммиака (4.2), а затем встряхивают на качалке (5.6) в течение 10 с.
8.3.3 Отбирают пипеткой (5.8) 1 см' жидкости из верхнею слоя (8.3.1) и переносят ее в пробирку (5.10) Последовательно туда же добавляют пипеткой 5 ем3 поды и 1 см3 раствора аммоний-железо (111) цитрата (4.4), встряхивают в течение 10 с на качалке (5.6), затем добавляют пипеткой I см' раствора аммиака (4.2) и снова встряхивают в течение 15 с на качалке (5.6).
8.3.4 Полученные в 8.3.2 и 8.3.3 растворы переносят в измерительные кюветы и через (10±1) мин после завершения операций по 8.3.2 и 8.3.3 измеряют на спектрофотометре (5.7) оптическую плотность раствора при длине волны 525 нм, используя в качестве контрольного раствора дистиллированную поду.
За результат определения принимают разницу между двумя значениями оптической плотности, полученными при измерении.
8.4 Количество определений
Из одной анализируемой пробы отбирают две навески и проводят два определения.
8.5 Построение градуировочного графика
Строит градуировочный график в день измерений, как описано ниже;
а) готовят шесть мерных колб емкостью по 20 см ’ и градуированной пипеткой (5.9) помещают в них. соответственно 0, 1, 2, 3, 4 и 5 см' раствора дубильной кислоты (4.1). Доводят до метки раствором димстилформамнда (4.3). Полученная таким образом калибровочная шкала соответствует содержанию дубильной кислоты 0; 0,1; 0.2; 0,3; 0.4 и 0,5 мг/с.м1;
б) в пробирки (5.10) отмеряют пипеткой по 1 ем’ каждого из этих растворов и последовательно добавляют пипеткой (5.8) по 5 см' воды и I см' раствора аммоний-железо (III) цитрата (4.4). Встряхивают в течение 10 с на качалке. Затем добавляют no I см’ раствора аммиака (4.2) и снов;» встряхивают в течение 15 с на качалке (5.6).
Полученные таким образом растворы переносят в измерительные кюветы и через (10±1) мин оп|>сдсляют на спскт|юфотомстрс оптическую плотность раствора при длине волны 525 нм. используя в качестве коптильного раствора дистиллированную воду.
в) строят градуировочный график, откладывая значения поглощения на ординате, а соответствующие концентрации дубильной кислоты в миллиграммах на кубический сантиметр (в пределах кадиб|ювочнои шкапы) — на абсциссе.
Кривая нс должна проходить через начало координат и ее нс следует корректировать е учетом нуля в выбранной шкхзс концентрации.
9 Обработка результатов анализа
Массовую долютаннинов X. %. (отношение массы дубильной кислоты к массе сухого вещества) определяют по формуле
у _ 2 с* 100 т * 100 - Н '
где с — концентрация дубильной кислоты, найденная для испытываемого раствора по градуировочному графику, мг/см3 (8.5в); т— масса навески, г (8.2);
Н — влажность анализируемой пробы (8.1).
3
За результат анализа принимают среднее арифметическое значение двух определений, при условии обеспечения допустимых норм расхождении по сходимости, определяемых е помощью линейной интерполяции по таблице !.
Таблица I — Процентное содержание дубильной кислоты на сухое вещество |
Проба |
Сорт Арлжевс |
Сорт НК 121 |
Сорт Султан |
Среднее арифметическое значение |
0,05 |
0,62 |
1,11 |
Среднее квадратичное отклонение сходимости (.v,) |
0,01 |
0,02 |
0,02 |
1
, Коэффициент вариации сходимости, % |
21 |
3,3 |
1.9 |
1
Сходимость id) |
0,03 |
0,06
. - . |
0,06 |
1 Среднее квадратичное отклонение восирош-1 воли мости (л2) |
0,02 |
0.03 |
0,07
I |
Коэффициент вариации воспроизводимости, % |
44 |
4.8 |
6,1 |
Воспроизводимость < П) |
0,06 |
0,08 |
. |
|
10 Сходимость, воспроизводимость анализов
Во Франции проведены межлабораторные испытания, в которых приняли участие девять лабораторий. Результаты восьми из них подвергнуты статистическому анализу. В каждой лаборатории проводилось по три измерения для одной и той же пробы. Результаты статистической обработки данных приведены в па блице I.
11 Отчет о результатах анализа
В отчете о результатах анализа должны быть указаны использованный метод, изготовитель и каталожный номер использованной дубильной кислоты, а также полученные результаты. Должны быть отмечены вес оперативные детали, нс огово|>енные в настоящем стандарте или считающиеся необязательными, а также нес случайные факторы, которые могут оказать влияние на результаты.
Отчет должен включать всю информацию, необходимую для полной идентификации пробы.
4
УДК 633.174.001.4:006.354 ОКС 65.020.20 С19 ОКСТУ 9109
Ключевые слова: продукты сельскохозяйственные, зерно сорго, анализ химический, таннины, содержание таннинов, градуировочный график
5
Редактор Т.П. Шаши на Технический редактор В.И. Прусакова Корректор РА. Мемтова Компьютерная верстка С.В. Рябовой
Изд. лиц. № 021007 от 10.08.95. Сдано в набор 19.05.99. Подписано в печать 08.07.99. Усл.печл. 0.93. Уч.-издл. 0,63.
Тираж 333 экз. С 3286. Зак. 555.
ИНК Издательство стандартов. 107076. Москва, Колодезный пор., 14.
Набрано в Издательстве на ПЭВМ Филиал ИПК Издательство стандартов — тип. “Московский печатник", Москва. Лялин мер.. 6
Г Lip № 080102