Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование _Российской    Федерации_

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств протиоконазола по его основному метаболиту протиоконазолу-дестио в картофеле методом капиллярной газожидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3496—17

Издание официальное

Москва • 2018

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств протиоконазола по его основному метаболиту протиоконазолу-дестио в картофеле методом капиллярной газожидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3496—17

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

-    процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С и относительной влажности не более 80 %;

-    выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению измерений

Измерениям предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), приготовление градуировочных растворов и раствора внесения, установление градуировочной характеристики, приготовление смесей растворителей для экстракции и очистки экстрактов на колонке с оксидом алюминия, подготовка колонки с оксидом алюминия для очистки экстракта, проверка хроматографического поведения протиоконазола-дестио на нем.

7.1. Очистка органических растворителей

7.1.1. Ацетон

Ацетон перегоняют над небольшим количеством перманганата калия и прокаленным карбонатом калия или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок не менее 30.

7.1.2. Хлористый метилен и этилацетат

7.1.2.1.    Приготовление раствора натрия углекислого с массовой долей 5 %. Навеску (25 ± 0,1) г натрия углекислого помещают в мерную колбу вместимостью 500 см³, растворяют в бидистиллированной воде, доводят водой до метки, перемешивают.

7.1.2.2.    Очистка растворителей. Каждый растворитель промывают последовательно 5%-м водным раствором натрия углекислого, насыщенным раствором хлористого кальция, сушат над прокаленным карбонатом калия и перегоняют или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок не менее 30. Раствор хранят в стеклянной посуде в течение 3 месяцев.

7.1.3. н-Гексан

Растворитель последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты до тех пор, пока она не перестанет окрашиваться в желтый цвет, затем водой до нейтральной реакции промывных вод, перегоняют над прокаленным карбонатом калия.

7.2. Приготовление градуировочных растворов и раствора внесения

7.2.1.    Исходный раствор протиоконазола-дестио для градуировки (концентрация 200 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают (0,02 ± 0,0001) г протиоконазола-дестио, растворяют в 50— 60 см³ ацетона, доводят им до метки, тщательно перемешивают.

Раствор хранят в морозильнике при температуре не выше -18 °С в течение 3 месяцев.

7.2.2.    Рабочий раствор Ms 1 протиоконазола-дестио для градуировки и внесения (концентрация 20 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100см^? помещают 10,0 см³ исходного раствора протиоконазола-дестио для градуировки с концентрацией 200,0 мкг/см³ (п. 7.2.1), доводят до метки ацетоном, тщательно перемешивают, получают рабочий раствор № 1 для градуировки и внесения с концентрацией протиоконазола-дестио 20,0 мкг/см*.

Градуировочный раствор № 1 хранят в морозильнике при температуре не выше -18 °С в течение 1 месяца.

7.2.3.    Рабочие растворы Ms 2—8 протиоконазола-дестио для градуировки и внесения (концентрация 0,05—2 мкг/см³). В 7 мерных колбах вместимостью 100 см³ помещают 0,25; 0,5; 1,0; 2,0 5,0; 7,5 и 10,0 см³ рабочего раствора № 1 протиоконазола-дестио для градуировки с концентрацией 20,0 мкг/см³ (п. 7.2.2), доводят до метки ацетоном, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы № 2■—8 для градуировки и внесения с концентрациями протиоконазола-дестио 0,05; 0,1; 0,2; 0,5, 1,0; 1,5 и 2,0 мкг/см³.

Растворы хранят в морозильнике при температуре не выше -18 °С в течение 1 недели.

Эти растворы используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения действующего вещества методом «вне-сено-найдено» и контроля качества результатов измерений методом «добавок».

7.3. Установление градуировочой характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую линейную (с угловым коэффициентом) зависимость площади пика от концентрации протиоконазола-дестио в растворе, устанавливают методом абсолютной калибровки по 5 растворам для градуировки (№ 3—7) при измерении по п. 9.4.1 и 4 растворам для градуировки (№ 1—4) при измерении по п. 9.4.2.

В испаритель хроматографа вводят по 1 мм³ каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по

п. 9.4. Осуществляют не менее 3 параллельных измерений. Устанавливают площади пиков протиоконазола-дестио.

7.4.    Приготовление смеси ацетон-вода для экстракции

Смесь ацетон-вода (объемное соотношение 80: 20). В мерную колбу вместимостью 1 ООО см³ помещают 800 см³ ацетона и 20 см³ воды, перемешивают.

7.5.    Приготовление смеси гексан-этилацетат (85:15) для очистки экстрактов на колонке с оксидом алюминия

Смесь гексан-этилацетат (объемное соотношение 85: 15). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 85 см³ гексана и 15 см^? этилацетата, перемешивают.

7.6. Приготовление смеси гексан-этилацетат (6 : 4) для очистки экстрактов на колонке с оксидом алюминия

Смесь гексан-этилацетат (объемное соотношение 6: 4). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 60 см³ гексана и 40 см³ этилацетата. перемешивают.

7.7. Подготовка колонки с оксидом алюминия для очистки экстракта

Нижнюю масть стеклянной колонки длиной 25 см, внутренним диаметром 10—12 мм уплотняют тампоном из стекловаты, выливают в колонку (при открытом кране) суспензию: 5 г оксида алюминия нейтрального 111 степени активности в 15 см³ смеси гексан-этилацетат (объемное соотношение 85 : 15), подготовленной по п. 7.6. Дают растворителю стечь до верхнего края сорбента, на который помещают слой безводного сульфата натрия высотой 1 см. Колонку промывают смесью гексан-этилацетат в объемном соотношении 85 : 15 порцией 20 см³, скорость прохождения растворителя - 1—2 кап./с. Колонка готова к работе.

7.8. Проверка хроматографического поведения протиоконазола-дестио на колонке с оксидом алюминия

В круглодонную колбу вместимостью 10 см³ помещают 0,2 см³ раствора № 1 протиоконазола-дестио с концентрацией 20 мкг/см³ (п. 7.2.2), упаривают досуха на ротационном испарителе при температуре водяной бани не выше 35 °С. Сухой остаток растворяют в 0,5 см³ этилацетата, помещая на ультразвуковую баню на 1 минуту, добавляют 2,5 см³ гексана, перемешивают, вновь помещают на ультразвуковую

баню на 1 минуту и наносят на колонку, подготовленную по п. 7.7. Колбу обмывают дважды этой же смесью растворителей, порциями по 3 см³, которые также наносят на колонку. Скорость прохождения растворителя через колонку - 1—2 кап./с. Промывают колонку 30 см³ смеси гексан-этилацетат в объемном соотношении 85 : 15, элюат отбрасывают.

Затем колонку промывают 40 см³ смеси гексан-этилацетат (6:4, по объему) со скоростью 1—2 кап./с. Фракционно (по 10 см³) собирают элюат, упаривают, остатки растворяют в 2 см³ ацетона, анализируют содержание протиоконазола-дестио по п. 9.4.

Фракции, содержащие протиоконазол-дестио, объединяют и вновь анализируют.

Примечание. Проверку хроматографического поведения протиоконазола-дестио следует проводить обязательно, поскольку профиль вымывания может изменяться при использовании новой партии сорбентов и растворителей.

$. Отбор и хранение проб

Отбор проб проводится в соответствии с правилами, определенными: ГОСТ 7176-85 «Картофель свежий продовольственный, заготовляемый и поставляемый, ТУ» и «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов» (№ 2051—79 от 21.08.79).

Отобранные пробы картофеля хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике в темноте не более 5 дней. Для длительного хранения образцы замораживают и хранят при температуре -18 °С. Перед анализом пробы измельчают с помощью гомогенизатора.

9. Выполнение определении

9.1. Экстракция

Образец измельченных клубней картофеля массой 20 г помещают в коническую колбу вместимостью 250 см³, добавляют смесь ацетон-вода (80 : 20, по объему) в количестве 100 см³ и помещают на аппарат для встряхивания на 30 минут. Пробе дают отстояться, затем надоса-дочную жидкость фильтруют на воронке Бюхнера с помощью разряжения, создаваемого водоструйным насосом, через двойной фильтр средней плотности. Экстракцию повторяют дважды, используя 70 см³ смеси ацетон-вода (80 : 20, по объему), выдерживая каждый раз по 2 мин на ультразвуковой бане и 20 мин на аппарате для встряхивания. Осадок на фильтре промывают 30 см³ той же смеси растворителей.

Объединенный отфильтрованный экстракт переносят в мерный цилиндр на 250 см³. Аликвоту (¹/₂ часть экстракта) помещают в колбу для упаривания на 150 см³, упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 35 °С до водного остатка (объем 15—25 см³) и подвергают очистке перераспределением в системе несмешивающихся растворителей по п. 9.2, затем на колонке с оксидом алюминия по п. 9.3.

9.2. Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей Водный остаток, полученный по п. 9.1, переносят в делительную воронку вместимостью 250 см³. Колбу дополнительно обмывают 50 см³ деионизованной воды, которую также переносят в воронку, вносят 10 см³ насыщенного раствора хлористого натрия, перемешивают, затем добавляют 50 см³ дихлорметана и интенсивно встряхивают в течение 5 мин. После полного разделения фаз нижний дихлорметановый слой фильтруют через слой безводного сульфата натрия (толщиной около 1 см), помещенный на бумажном фильтре в конусной воронке, в круглодонную колбу вместимостью 150 см³. Экстракцию вещества повторяют еще дважды порциями дихлорметана объемом 30 см³, встряхивая в течение 2 мин.

Безводный сульфат натрия, помещенный на фильтре, дополнительно промывают 10 см³ дихлорметана.

Для полного разделения фаз содержимое воронки должно отстояться 10—15 мин. Следы дихлорметана в водной фазе недопустимы, поскольку это снижает полноту извлечения вещества.

Объединенную органическую фазу, пропущенную через слой сульфата натрия, упаривают на ротационном испарителе при температуре не выше 35 °С досуха и подвергают дополнительной очистке на колонке с оксидом алюминия по п. 9.3.

9.3. Очистка экстракта на колонке с оксидом алюминия Остаток, полученный по п. 9.2, находящийся в круглодонной колбе, растворяют в 0,5 см³ этипацетата, вносят 2,5 см³ гексана и помещают на ультразвуковую баню на 60 с. Раствор наносят на колонку, подготовленную по п. 7.7.

Колбу обмывают дважды смесью гексан-этилацетат (85:15, по объему), приготовленной по п. 7.5.1, порциями по 3 см³, которые также наносят на колонку. Скорость прохождения растворителя через колонку - 1—2 кап./с.

Протиоконазол-дестио элюируют с колонки 40 см³ смеси гексан-этилацетат (6 : 4, по объему), приготовленной по п. 7.5.2, со скоростью 1—2 кап./с, собирая элюат в круглодонную колбу вместимостью 150 см³, раствор упаривают досуха при температуре не выше 35 °С. Сухой остаток растворяют в 0,5 см³ (при анализе ПЖХ с термоионным детектором) или в 2 см³ (при анализе ГЖХ с масс-спектрометрическим детектором) ацетона и анализируют содержание протиоконазола-дестио но п. 9.4.

Примечание. Объем элюата может быть изменен в соответствии с результатами проверки хроматографического поведения вещества на колонке по п. 7.8.

9.4. Условия хроматографирования

9.4.1. Газовый хроматограф, снабженный термоионным детектором (ТИД)

Хроматографическая капиллярная кварцевая колонка длиной 30 м, внутренним диаметром 0,32 мм, содержащая сорбент: 50 % - фенилпо-лисилоксан, 50 % - диметилполисилоксан (толщина пленки сорбента -0,5 мкм).

Температура детектора: 320 °С, испарителя: 270 °С.

Температура термостата колонки программированная. Начальная температура - 150 °С, выдержка 2 мин, нагрев колонки со скоростью 20 градусов в минуту' до температуры 230 °С, выдержка 2 мин, затем нагрев колонки со скоростью 20 градусов в минуту до температуры 270 °С.

Газ 1 (азот): давление 80кПа, скорость 36,518 см/с, поток 1,778 см³/мин.

Газ 2: деление потока 1 : 3; сброс 5.5 см³/мин.

Хроматографируемый объем: 1 мм³.

Линейный диапазон детектирования: 0,2—2,0 иг.

Образцы, дающие пики большие, чем градуировочный раствор протиоконазола-дестио с концентрацией 2,0 мкг/см³, разбавляют ацетоном, не более чем в 50 раз.

9.4.2. Газовый хроматограф с масс-селективным детектором (метод подтверждения)

Хроматографическая капиллярная кварцевая колонка длиной 30 м, внутренним диаметром 0,25 мм, содержащая сорбент: 5 % - фенилпо-

лисилоксан, 95 % - диметилполисилоксан (толщина пленки сорбента 0,25 мкм).

Температура детектора: квадруполь - 150 °С, источник - 230 °С; переходной камеры - 280 °С.

Температура испарителя: 275 °С.

Температура термостата колонки программированная. Начальная температура - 150 °С, выдержка 2 мин, нагрев колонки со скоростью 10 градусов в минуту до температуры 220 °С, выдержка 7 мин, нагрев колонки со скоростью 20 градусов в минуту до температуры 270 °С, выдержка 3 мин.

Газ 1 (гелий): поток в колонке 1,3 см³/мин.

Давление: 17,261 psi.

Средняя линейная скорость: 48,385 см/с.

Хроматографируемый объем: 1 мм³.

Режим регистрации индивидуальных ионов (SIM), m/z: 186 (количественный), 83,125.

Линейный диапазон детектирования: 0,05—0,5 нг.

Образцы, дающие пики большие, чем градуировочный раствор протиоконазола-дестио с концентрацией 0,5 мкг/см³, разбавляют ацетоном, не более чем в 50 раз.

10. Обработка результатов анализа

Содержание прогиоконазола-дестио в пробе (Х> мг/кг) рассчитывают по формуле:

„ A-VK

X =-,    где

т

X - содержание протиоконазола-дестио в пробе, мг/кг;

А - концентрация протиоконазола-дестио в растворе, найденная по градуировочной характеристике в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см³;

V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования,

см³;

К - коэффициент, учитывающий объем аликвоты экстракта. К-2;

т - масса образца, г.

При установлении уровня протиоконазола полученное значение содержания протиоконазола-дестио (X) умножают на 1,1.

11. Проверка приемлемости результатов параллельных определений

За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости:

Л/, Х₂ - результаты параллельных определений, мг/кг; г - значение предела повторяемости (табл. 1), при этом г = 2,8 а_г. При невыполнении условия выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.

12. Оформление результатов

Результат анализа представляют в виде:

(X ± А) или мг/кг при вероятности Р = 0,95, где

X — среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/кг,

Д - граница абсолютной погрешности, мг/кг:

д - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.

Если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:

«содержание протиоконазола-дестио в пробе менее 0,01 мг/кг*у>.

* 0,01 мг/кг - предел обнаружения протиоконазола-дестио в картофеле.

13. Контроль качества результатов измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-02 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».

13.1. Контроль стабильности градуировочной характеристики.

Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят в начале и по окончании каждой серии анализов.

При контроле стабильности градуировочной характеристики проводят измерения не менее двух образцов концентраций для градуировки, содержание протиоконазола-дестио в которых должно охватывать весь диапазон концентраций от 0,2 до 2,0 мкг/см³ (метод ГЖХ с термоионным детектором), 0,05—0,5 мкг/см³ (метод ГЖХ с масс-спектромет-рическим детектором).

Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого используемого для контроля градуировочного раствора сохраняется соотношение:

И_О.₁₀0<_В,где

X- концентрация протиоконазола-дестио в пробе при контрольном измерении, мкг/см³;

С - известная концентрация градуировочного раствора протиоконазола-дестио, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/см³;

В - норматив контроля погрешности градуировочной характеристики, % (равен 10 % при Р = 0,95).

Если величина расхождения (А) превышает 10 %, делают вывод о невозможности применения градуировочной характеристики для дальнейших измерений. В этом случае выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики и повторяют контроль ее стабильности с использованием других градуировочных растворов протиоконазола-дестио, предусмотренных МИ. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики устанавливают ее заново согласно п. 7.3.

Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.

13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом «добавок».

Величина добавки С_д должна удовлетворять условию:

+ ^Дл*'.где

±Д_д^ (±Д_д;Р,) - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно), мг/кг, при этом:

Л_л = ± 0,84 Д, где

А - граница абсолютной погрешности, мг/кг:

S - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.

Результат контроля процедуры К_к рассчитывают по формуле:

К_к=Х'-X-Со, где

X', X, С_д — среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по п. 11) содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки соответственно, мг/кг.

Норматив контроля К рассчитывают по формуле:

Проводят сопоставление результата контроля процедуры (К_к) с нормативом контроля (К).

Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию

\К_к\<К>    (2)

процедуру анализа признают удовлетворительной.

При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.

Расхождение между результатами измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), не должно превышать предела воспроизводимости (R):

Xj_y Х₂ - результаты измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), мг/кг;

R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.

ББК51.23

0-60

0-60 Определение остаточных количеств протиоконазола по его основному метаболиту протиоконазолу-дестио в картофеле методом капиллярной газожидкостной хроматографии: Методические указания.—М.: Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, 2018.—19 с.

ISBN 978-5-7508-1649-1

1.    Разработаны ФБУН «Федеральный научный центр гигиены им. Ф. Ф. Эрисмана» Роспотребнадзора (В. Н. Ракитский, Н. Е. Федорова, М. В. Ларькина, О. Е. Ьгорчснкова, С. К. Рогачева).

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 24 ноября 2017 г. № 1).

3.    Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А. Ю. Поповой 29 декабря 2017 г.

4.    Введены впервые.

ББК 51.23

ISBN 978-5-7508-1649-1

О Роспотребнадзор, 2018

Определение остаточных количеств протиоконазола по его основному метаболиту протиоконазолу-дестио в картофеле методом капиллярной газожидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3496—17

Редактор JL С. Кучурова Компьютерная верстка Е. В. Ломановой

Подписало в печать 07.11.18 Формат 60x88/16    Меч.    л.    1,25

Т ираж 150 эю.    Заказ    56

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 127994, Москва, Вадковсклй пер., д. 18, стр. 5,7

Оригинал-макет подготовлен к печати и тиражирован Федеральным центром гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора 117105, Москва, Варшавское ш., 19а Реализация печатных изданий, телефакс: 8 (495) 952-50-89

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека,

Г лавный государственный санитарный врач Российской Федерации

Л. Ю. Попова

29 декабря 2017 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств протиоконазола по его основному метаболиту протиоконазолу-дестио в картофеле методом капиллярной газожидкостной хроматографии

Методические указания _МУК    4    Л .3496—17_

Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода капиллярной газожидкостной хроматографии для измерения концентрации протиоконазола по его метаболиту протиоконазолу-дестио в картофеле в диапазоне 0,01—0,1 мг/кг.

Методические указания носят рекомендательный характер.

Протиоконазол

Химический класс: триазолы.

2-[(К$)-2-гидрокси-2-(1-хлорцикло1гропил)-3-(2-хлорфенил)про-пил]-2Н-1,2,4-триазол-3(4Н)-тион (IUPAC).

Структурная формула:

Эмпирическая формула: C14H15Q2N3OS.

Молекулярная масса: 344,3.

Белое или светло-бежевое твердое вещество без запаха. Температура плавления: 139,1—144,5 °С. Давление паров при 20 °С: « 4х 10"⁷ Па. Коэффициент распределения н-октанол/вода: K_ow logP = 4,16 (pH 4); 3,82 (pH 7) и 2,0 (pH 9). Растворимость (г/дм³) при 20 °С: ацетон - более 250, этипацетат - более 250, дихлорметан — 88, ацетонитрил - 69; растворимость в воде - 0,005 (pH 4); 0,3 (pH 8) и 2,0 (pH 9).

Вещество стабильно при хранении на воздухе, а также в кислой (DT₅₀= 120 дней) и щелочной (ОТ₅₀>1года) средах. В присутствии света в водных фотолитических условиях протиоконазол достаточно быстро деградирует с периодом полураспада 47,7 часа. Основным продуктом фотодеградации является протиоконазол-дестио, его содержание составляет до 56 %.

В почве в полевых условиях протиоконазол подвергается быстрой деградации, ДТ50 составляет 1,3—2,8 дня (в среднем 1,7 дня), ДТ90 -4,4—9,3 дня (в среднем 5,8 дня). Отмечена заметная сорбция протиоко-назола почвой. Основным почвенным метаболитом является протиоконазол-дестио. ДТ50 протиоконазола-дестио в почве в полевых условиях составляет 16,3—72,3 дня (в среднем 42 дня), ДТ90 - 54,1—>240 дней (в среднем 140 дней). Протиоконазол-дестио детектирован на пределе обнаружения (6 мкг/кг) в 10—20-сантиметровом слое. Максимальные его уровни наблюдались в период от 1 до 28 дней после применения, полное исчезновение (менее 6 мкг/кг) - после 55—240 дней.

Краткая токсикологическая характеристика. Острая пероральная токсичность (LD50) для крыс - более 6 200 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD50) для крыс - более 2 000 мг/кг; острая ингаляционная токсичность (LCjo) для крыс - более 4 990 мг/м³ воздуха.

Протиоконазол не оказывает раздражающего действия на кожу и слизистую оболочку глаз.

Основной метаболит протиокопазола: протиоконазол-дестио (SXX 0665)

а-( 1 -хлорциклопропил)-а-(2-хл орфенил)метил-1Н-1,2,4-триазол-1 этанол (IUPAC).

Структурная формула:

Эмпирическая формула: C14H15CI2N3O.

Молекулярная масса: 312,2.

Бесцветный порошок без запаха. Температура плавления: 108,5 °С. Давление паров при 20 °С: 2,7 х 1СГ⁷ Па. Коэффициент распределения н-октанол/вода:    logP = 3,04.

Растворимость (г/дм³) при 20 °С: гексан - 3, толуол - 84, ацетон -100, ацетонитрил - 43, дихлорметан - более 200, вода - 0,051. Стабилен в кислой и щелочной средах.

Область применения препарата. Протиоконазол - фунгицид системного действия из группы ингибиторов синтеза эргостерина. Вещество обладает защитным, искореняющим и лечебным действием.

1. Метрологические характеристики

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и её составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

Таблица 1

Значения характеристики погрешности, нормативов оперативного контроля точности, повторяемости, воспроизводимости

Анализи руемый объект Диапазон опреде ляемых концен траций, мг/кг Показатель точности (граница относительной погрешности), ±»,%, Р - 0,95 Показатель повторяемости (среднеквадратичное отклонение повторяемости), <Тп % Показатель вос-ироизво-димосги (среднеквадратичное отклонение воспроизводимости). Ok, % Предел повторяемости (значение допустимого расхождения между двумя результатами параллельных определении), гу % Предел воспроизводимости (значение допустимого расхождения между двумя результатами измерений, полученных в разных лабораториях), Ry %, (г = 0,95) Карто фель от 0,01 до 0,1 вкл. 50 1,5 2,1 4 6

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для всего диапазона измерений (и = 20) приведены в табл. 2.

Таблица 2

Анализи руемый объект Метрологические параметры, Р = 0,95, л = 20 предел обнару жения, мг/кг диапазон определяемых концентраций, мг/кг средняя полнота извлечения вещества, % стандартное отклонение, % доверительный интервал среднего результата, ±,% Картофель 0,01 0,01—0,1 84,7 2,3 1,2

2. Метод измерений

Метод основан на экстракции метаболита протиоконазола-дестио из образцов картофеля водным раствором ацетона, очистке экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей, а также на колонке с оксидом алюминия с последующим измерением содержания протиоконазола-дестио методом капиллярной газожидкостной хроматографии при программировании температуры с термоионным детектором (ТИД) и/ипи масс-селективным детектором. Контроль протиоконазола в образцах картофеля осуществляется по содержанию протиоконазола-дестио. Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

3. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы

3.1. Средства измерений Газовый хроматограф, снабженный термоионным детектором с пределом детектирования по азот}' в азобензоле 5 х КГ¹³ г/с, предназначенный для работы с капиллярной колонкой

Газовый хроматограф, снабженный масс-селективным детектором и автоматическим пробоотборником, предназначенный для работы с капиллярной колонкой Весы лабораторные аналитические, наибольший предел взвешивания 110 г, предел допустимой погрешности ± 0,1 мг

Весы лабораторные общего назначения с наибольшим пределом взвешивания до 420 г и пределом допустимой погрешности ±0,01 г Колбы мерные 2-го класса точности вместимостью 100,250 и 1 000 см³ Меры массы

Микрошприц вместимостью 10 мм³ Пипетки градуированные 2-го класса точности вместимостью 1,0; 2,0; 5,0 и 10 см³ Цилиндры мерные 2-го класса точности вместимостью 100 и 250 см³

Примечание. Допускается использование других средств измерений с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы

Протиоконазол, аналитический стандарт с содержанием основного компонента 96,5 % Азот газообразный (чистота 99,999 %) в баллонах ТУ 6-21-39—96 Ацетон, осч ГОСТ 2603-79 Гексан, осч Вода для лабораторного анализа (деионизо ТУ 6-09-06-657—84 ванная или бидистиллированная) Калий марганцовокислый (перманганат ГОСТ Р 52501-05 калия), хч Калий углекислый (карбонат калия), хч. ГОСТ 20490-75 прокаленный Кальций хлористый (хлорид кальция), хч. ГОСТ 4221-76 насыщенный водный раствор ГОСТ 450-77 Кислота серная (концентрированная), хч ГОСТ 4204-77 Метилен хлористый (дихлормстан), хч Натрий сернокислый (сульфат натрия) ГОСТ 12794-80 безводный, хч ГОСТ 4166-76 Натрий углекислый (карбонат), хч Натрий хлористый, хч, насыщенный водный ГОСТ 83-79 раствор Оксид алюминия нейтральный, 1 степени активности, для колоночной хроматографии (200—400 меш) ГОСТ 4233-77

Установка для перегонки растворителей Хроматографическая капиллярная кварцевая колонка длиной 30 м, внутренним диаметром 0,32 мм, содержащая сорбент: 50 % - фенил-полисилоксан и 50 % - диметилполисилоксан (толщина пленки сорбента 0,5 мкм)

Хроматографическая капиллярная кварцевая колонка длиной 30 м, внутренним диаметром 0,25 мм, содержащая сорбент: 5 % - фенилпо-лисилоксан и 95 % - диметилполисилоксан (толщина пленки сорбента 0,25 мкм)

Примечание. Допускается использование вспомогательных устройств и материалов с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1.    При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007-76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ Р 12.1.019-09, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.

4.2.    Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009— 83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313—03 и ГН 2.2.5.2308—07. Организация обучения работников безопасности труда-поГОСТ 12.0.004-15.

4.3.    При работе с газами, находящимися в баллонах под давлением до 15 МПа (150 кгс/см²), необходимо соблюдать федеральные нормы и правила в области промышленной безопасности «Правила промышленной безопасности опасных производственных объектов, на которых используется оборудование, работающее под избыточным давлением» (утв. приказом Ростехнадзора от 25.03.2014 № 116). Запрещается открывать вентиль баллона, нс установив в нем понижающий редуктор.

5. Требования к оператору

Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист, имеющий опыт работы на газовом хроматографе, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений.