Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование _Российской    Федерации_

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение остаточного содержания глюфосината аммония и его метаболита 3-метилфосфино-пропионовой кислоты в семенах и масле сои методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемным масс-спекгрометрическим детектированием

Методические указания МУК 4Л .3449—17

Издание официальное

Москва • 2017

Федеральная служба по надзору в сфере зашиты прав потребителей и благополучия человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение остаточного содержания глюфосината аммония и его метаболита 3-метилфосфино-пропионовой кислоты в семенах и масле сои методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемным масс-спектрометрическим детектированием

Методические указания МУК 4.1.3449—17

ся менять емкости для хранения элюентов с целью избежать повышения содержания ионов натрия.

7.2. Приготовление растворов

7.2.1.    Приготовление водного раствора лимоннокислого аммония (концентрация 1 моль/дм). В мерную колбу вместимостью 50 см³ помещают навеску (12,16 ± 0,01) г лимоннокислого аммония, добавляют 30—35 см³ деионизированной воды, перемешивают до полного растворения (при необходимости - с помощью ультразвуковой бани), раствор охлаждают до комнатной температуры, доводят объем водой до метки, перемешивают. Срок хранения - 3 месяца при температуре 4—8 °С.

7.2.2.    Приготовление подвижной фазы для ВЭЖХ - элюент В. В мерную колбу вместимостью 500 см³ помещают 300—350 см³ деионизированной воды, вносят 500 мм³ раствора лимоннокислого аммония с молярной концентрацией 1 моль/дм³ (п. 7.2.1), доводят объем до метки, перемешивают, профильтровывают через мембранный фильтр. Срок хранения -2 недели.

7.2.3.    Приготовление раствора тетрабората натрия (концентрация 0,1 моль/дм³). В мерную колбу вместимостью 200 см³ помещают (7,62 ±0,01) г десятиводного тетрабората натрия, добавляют 160— 180 см³ деионизированной воды, перемешивают до полного растворения (при необходимости - с помощью ультразвуковой бани), охлаждают, доводят водой до метки, перемешивают, отфильтровывают через мембранный фильтр. Срок хранения - 1 месяц.

7.2.4.    Приготовление раствора гидроксида натрия (концентрация 0,03 моль/дм⁵). В мерную колбу вместимостью 200 см³ помещают (0,24 ± 0,01) г гидроксида натрия, добавляют 160—180 см³ деионизированной воды, перемешивают до полного растворения (при необходимости - с помощью ультразвуковой бани), охлаждают, доводят объем водой до метки, перемешивают, отфильтровывают через мембранный фильтр. Раствор хранят в герметичной посуде при комнатной температуре. Срок хранения - 1 месяц.

7.2.5.    Приготовление смеси растворителей вода метанол для приготовления исходного градуировочного раствора ГФА (объемное соотношение 2:1). В коническую колбу вместимостью 50 см³ с помощью мерного цилиндра последовательно приливают 20 см³ деионизированной воды и 10 см³ метанола. Перемешивают и охлаждают до комнатной температуры. Смесь готовят непосредственно перед приготовлением градуировочного раствора ГФА.

7.2.6. Приготовление раствора для экстракции (смесь муравьиная кислота-метанол, объемное соотношение 1 : 100). В мерную колбу вместимостью 1 ООО см³ наливают 300—400 см³ метанола. Добавляют 10 см³ муравьиной кислоты. Объем доводят до метки, перемешивают. Раствор хранят в герметичной посуде при комнатной температуре. Срок хранения - 3 месяца.

7.3. Кондиционирование, промывка и консервация колонок для ВЭЖХ

7.3.1. Кондиционирование колонок для ВЭЖХ

Кондиционирование хроматографических колонок проводят после длительного хранения и после продолжительной работы (100—200 последовательных вводов).

7.3.1.1.    Колонки промывают раствором гидроксида натрия с молярной концентрацией 0,03 моль/дм³ со скоростью подачи раствора 0,2 см³/мин в течение 60—90 минут.

7.3.1.2.    Колонки промывают элюентом А (деионизированной водой) со скоростью подачи подвижной фазы 0,2 см³/мин в течение 45— 60 минут.

7.3.1.3.    Устанавливают колонки в хроматографическую систему и запускают ее на полный режим градиента по п. 9.2. Проводят 3—4 последовательных ввода градуировочных растворов.

ВНИМАНИЕ! При выполнении операций 7.3.1.1 и 73.1.2 поток элюентов не должен поступать в масс-спектрометр.

7.3.2. Промывка колонок

Промывку проводят при загрязнении колонки и предколонки, выражающемся в поднятии давления в начале анализа свыше 1 600psi (110 bar).

7.3.2.1.    Колонки промывают обратным током деионизированной водой (элюент А) со скоростью подачи подвижной фазы 0,1— 0,15 см³/мин в течение 60—90 минут. В процессе промывания колонки и предколонки постоянно контролируют давление.

7.3.2.2.    Колонки промывают обратным током метанолом (либо ацетонитрилом) со скоростью подачи растворителя 0,2 см³/мин в течение 60 минут.

7.3.2.3.    Колонки промывают обратным током деионизированной водой (элюент А) со скоростью подачи подвижной фазы 0,2 см³/мин в течение 45—60 минут.

7.3.2.4.    Устанавливают колонки в хроматофафическую систему и запускают ее на полный режим фадиента по п. 9.2. Проводят 1—2 последовательных ввода фадуировочных растворов или метанола.

ВНИМАНИЕ! При выполнении операций 7.3.2.1, 7.3.2.2 и 7.3.2.3 поток элюентов не должен поступать в масс-спектрометр.

7.3.3. Консервация колонок

Консервацию колонок проводят при остановке работы на продолжительный период времени (более двух недель).

7.3.3.1.    Колонку и предколонку промывают обратным током деионизированной водой со скоростью подачи подвижной фазы 0,1— 0,15 см³/мин в течение 60—90 минут. В процессе промывки контролируют давление.

7.3.3.2.    Колонки промывают обратным током метанолом (либо ацетонитрилом) со скоростью подачи растворителя 0,2 см³/мин в течение 60 минут.

7.3.3.3.    Колонки промывают деионизированной водой со скоростью подачи 0,2 см³/мин в течение 45—60 минут.

7.3.3.4.    Колонку и предколонку промывают раствором тетрабората натрия с молярной концентрацией 0,1 моль/дм³ со скоростью подачи раствора 0,2 см³/мин в течение 45—60 минут.

7.3.3.5.    Колонку и предколонку хранят под раствором тетрабората натрия с молярной концешрацией 0,1 моль/дм³.

Примечание. Условия 7.3.3.4 и 7.3.3.5 относятся только к конкретному виду колонок, указанному в п. 3.3. В случае использования аналогов, консервацию колонки и предколонки проводят с учетом рекомендаций фирмы-производителя.

ВНИМАНИЕ! При проведении операций по консервации колонок поток элюентов не должен поступать в масс-спектрометр.

7.4. Приготовление градуировочных растворов

7.4.1. Приготовление исходных растворов

7.4.1.1.    Основной раствор ГФЛ (концентрация 1 000 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 25 см³ помещают (0,025 ± 0,001) г ГФА, добавляют 15—20 см³ смеси вода-метанол (п. 7.2.5), перемешивают и доводят объем до метки этим же растворителем, вновь перемешивают. Раствор хранят в холодильнике при температуре (4—6) °С в течение 3 месяцев.

7.4.1.2.    Основной раствор МФПК (концентрация 100 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 50 см³ помещают (0,005 ± 0,001) г МФПК, добавляют 30—40 см³ ацетонитрила, перемешивают (при необходимости - с помощью ультразвуковой бани), охлаждают, доводят до метки

этим же растворителем, вновь перемешивают. Раствор хранят в холодильнике при температуре (4—6) °С в течение 3 месяцев.

7.4.2. Приготовление градуировочных растворов

7.4.2.1.    Исходный раствор № 1 (концентрация 10 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 10 см³ помещают 0,1 см³ ГФА (п. 7.4.1.1) и 1 см³ раствора МФПК (п. 7.4.1.2). Разбавляют до метки раствором для экстракции (п. 7.2.6), перемешивают. Раствор хранят в холодильнике при температуре (4—6) °С не более одного месяца.

7.4.2.2.    Исходный раствор № 2 (концентрация I мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 5 см³ помещают 0,5 см³ раствора № 1 (п. 7.4.2.1). Доводят до метки раствором для экстракции (п. 7.2.6), перемешивают. Раствор хранят в холодильнике при температуре 4—6 °С не более одной недели.

7.4.2.3.    Рабочие растворы № 3—8 для градуировки (концентрация каждого вещества по 0,01—0,5 мкг/см¹). В 4 мерные колбы вместимостью 5 см³ помещают по 0,05 см³, 0,125 см³, 0,25 см³ и 0,5 см³ исходного раствора № 2 (п. 7.4.2.2), доводят до метки раствором для экстракции (п. 7.2.6), тщательно перемешивают, получают рабочие растворы № 3— 6 с концентрацией ГФА и МФПК по 0,01; 0,025; 0,05 и 0,1 мкг/см³ соответственно.

В 2 мерные колбы вместимостью 5 см³ помещают 0,1 см³ и 0,25 см³ исходного раствора № I (п. 7.4.2.1), доводят до метки раствором для экстракции (п. 7.2.6), тщательно перемешивают, получают градуировочные растворы №7 и 8 концентрацией ФГЛ и МФПК по 0,2 мкг/см³ и 0,5 мкг/см³ соответственно.

Градуировочные растворы № 3—8 готовят непосредственно перед использованием.

7.5. Установка градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику по каждому анализу, выражающую зависимость площади пика (УЕИ • с) от массовой концентрации ГФА и МФПК в растворе (мкг/см³), устанавливают методом абсолютной градуировки по 6 градуировочным растворам № 3—8 (п. 7.4.2.3).

В инжектор хроматографа вводят 10 мм³ каждого градуировочного раствора № 3—8 и анализируют в условиях хромато!рафирования по п. 9.2. Осуществляют не менее 2 параллельных измерений. По полученным данным строят градуировочную характеристику.

8. Отбор и хранение проб

Отбор проб проводят в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов» (№2051—79 от 21.08.79) и правилами, определенными ГОСТ 17109-88 «Соя. Требования при заготовках и поставках».

Семена подсушивают в темноте до постоянного веса и хранят в тканевых мешочках в сухом, защищенном от света месте при комнатной температуре нс более 6 месяцев. Пробы масла (помещенные в стеклянные флаконы) хранят в холодильнике в течение 3 месяцев. Для длительного хранения измельченные пробы зерна (аналитические образцы массой 20 г) замораживают и хранят при температуре -18 °С.

9. Выполнение определения

9.1. Экстракция ГФЛ и МФПК

Образец измельченной пробы массой 5 г помещают в центрифужную пробирку вместимостью 50 см³, добавляют 10 см³ раствора для экстракции (п. 7.2.6), интенсивно встряхивают (до полного смачивания пробы), помещают на аппарат для встряхивания на 60 минут. Далее пробирки с пробами помещают в центрифугу и центрифугируют 5 минут при 3 000 об./мин. Отбирают надосадочную жидкость, фильтруют и анализируют на содержание ГФА и МФПК по п. 9.2.

9.2. Условия хроматографирования

Измерения проводят при следующих режимных параметрах хроматографической системы.

Жидкостный хроматограф, состоящий из дегазатора, автосампле-ра, бинарного насоса, термостата, совмещенный с масс-спектрометри-ческой системой - тройной квадруполь (ВЭЖХ-МС/МС).

Разделительная ионообменная хроматографическая колонка стальная, заполненная анионообменной смолой длиной 250 мм, внутренним диаметром 2,0 мм.

Ионообменная предколонка стальная, заполненная анионообменной смолой, длиной 50 мм, внутренним диаметром 2,0 мм.

Температура колонок: 40 °С.

Режим элюирования - градиентный.

Элюент А: вода деионизированная.

Элюент В: 1 мМоль водный раствор трехзамещенного цитрата аммония по п. 7.2.2.

Градиент: Таблица 3

% А Поток, см3/мин Время, мин 100 0,25 0 0 0,25 10 0 0,25 20 Гоо 0,25 20,1 100 0,25 30

Объем вводимой пробы: 10 мм³.

Ориентировочное время удерживания: ГФА - 3,2 мин;

МФПК-11,1 мин.

Условия детектирования:

Детектор: квадрупольный тандемный масс-спектрометр.

Тип ионизации: Элсктроспрей - отрицательный режим.

Тип сканирования: Множественный мониторинг реакций (ММР).

Масс-спекрометрические (МС/МС) параметры для определения ГФА и его метаболита МФПК:

Соединение    ММР - переходы, масса/заряд

ГФА    180/63, 180/85,180/95

МФПК    151/63,    151/107,    151/133

Каждый экстракт хроматографируют дважды.

Устанавливают площади ников вещества (УЕИ • с), находят среднее значение, с помощью градуировочной характеристики, определяют концентрацию ГФА и МФПК в хроматографируемом растворе.

Экстракты образцов, при анализе которых площадь пиков больше, чем площадь пика градуировочного раствора № 8 с концентрацией 0,5 мкг/см³, разбавляют раствором для экстракции по п. 7.2.6, но не более чем в 10 раз.

10. Обработка результатов анализа

Для обработки результатов хроматографического анализа используют программу сбора и обработки хроматографической информации прибора.

Содержание глюфосинат аммония в пробах семян и масла сои с учетом его основного метаболита 3-метилфосфино-пропионовой кислоты в эквиваленте действующего вещества (Х_у мг/кг) рассчитывают по формуле:

_v (А + 1,303- £)• У К 100

X =-----,    где

т • е

А, В - концентрации глюфосинат аммония и 3-метилфосфино-пропионовой кислоты соответственно, найденные по градуировочным графикам в соответствии с величинами площадей хроматографических пиков, мкг/см³;

К- объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см³;

т - масса анализируемого образца, г;

К - коэффициент разведения пробы (п. 9.2);

е - полнота извлечения, учитывающая все процедуры подготовки пробы (табл. 2).

11. Проверка приемлемости результатов параллельных определений

За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, если выполняется условие приемлемости

X_h Х₂ - результаты параллельных определений массовой доли ГФА (МФПК), млн'¹ (мг/кг);

г - значение предела повторяемости, % (табл. 1).

Если условие (2) не выполняется, выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и повторяют выполнение измерений в соответствии с требованиями методики измерений.

12. Оформление результатов

Результат анализа представляют в виде:

X±0,01-6* X, при Р = 0,95, где

X - среднее арифметическое значение результатов п определений, признанных приемлемыми, млн'¹ (мг/кг);

±5 - границы относительной погрешности измерений, % (табл. 1).

В случае если полученный результат измерений менее нижней границы диапазона измерений, то результат анализа представляют в виде:

«массовая доля глюфосината аммония (МФПК) менее 0,02 мг/кг».

13. Контроль качества результатов измерений

13.1.    Контроль стабильности градуировочной характеристики.

Контроль стабильности градуировки по каждому из анализируемых компонентов проводят перед каждой серией измерений, анализируя три свежеприготовленных градуировочных раствора № 3, 5, 7 (0,01 мкг/см³; 0,05 мкг/см³; 0,2 мкг/см³), а также при смене реактивов или изменении условий анализа.

Для контроля стабильности используют вновь приготовленные градуировочные растворы с массовой концентрацией анализируемых компонентов в начале, середине и в конце диапазона измерений, которые анализируют в точном соответствии с методикой.

Градуировочную характеристику считают стабильной, если для каждого контрольного образца выполняется условие:

^100<*,„.где    (3)

S_ulXf, S,_p - значение площади пика ГФА и МФПК в образце для контроля, измеренное и найденное по градуировочной характеристике соответственно, УЕИ • с;

Кг_Р - норматив контроля, К_гр = 0,5 • б;

±5 - границы относительной погрешности, % (табл. 1).

Если условие стабильности не выполняется только для одного образца, то повторно анализируют этот образец для исключения результата, содержащего грубую ошибку.

Если градуировка нестабильна, выясняют причины нестабильности и повторяют контроль стабильности с использованием других образцов для градуировки, предусмотренных методикой. При повторном обнаружении нестабильности градуировки прибор градуируют заново.

13.2.    Внутрилабораторный оперативный конгроль.

Контроль качества результатов измерений в лаборатории при реализации методики проводят по ГОСТ Р ИСО 5725-6-02 («Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений»), используя контроль стабильности среднеквадратического (стандартного) отклонения повторяемости по п. 6.2.2 ГОСТ Р ИСО 5725-6-02 и показателя правильности по п. 6.2.4 ГОСТ Р ИСО 5725-6-02. Проверку стабильности выполняют с применением контрольных карт Шухарта.

Периодичность контроля стабильности результатов выполнения измерений регламентируют в руководстве по качеству лаборатории.

Рекомендуется устанавливать контролируемый период так, чтобы количество результатов контрольных измерений было от 20 до 30.

При неудовлетворительных результатах контроля, например, при превышении предела действия или регулярном превышении предела предупреждения, выясняют причины этих отклонений, в том числе проводят смену реактивов, проверяют работу оператора.

13.3. Проверка приемлемости результатов измерений.

Проверку приемлемости результатов измерений в условиях воспроизводимости проводят:

а)    при возникновении спорных ситуаций между двумя лабораториями;

б)    при проверке совместимости результатов измерений, полученных при сличительных испытаниях (при проведении аккредитации лабораторий и инспекционного контроля).

Для проведения проверки приемлемости результатов измерений в условиям воспроизводимости каждая лаборатория использует пробы, оставленные на хранение.

Приемлемость результатов измерений, полученных в двух лабораториях, оценивают сравнением разности этих результатов с критической разностью CDo,95 по формуле:

C_cpiy С_ср2 - средние значения массовой доли ГФЛ (МФПК), полученные в первой и второй лабораториях, млн"¹ (мг/кг);

CDoys - значение критической разности, % (табл. 1).

Если критическая разность не превышена, то приемлемы оба результата измерений, проводимых двумя лабораториями, и в качестве окончательного результата используют их среднеарифметическое значение. Если критическая разность превышена, то выполняют процедуры, изложенные в ГОСТ Р ИСО 5725-6-02 (п. 5.3.3).

При разногласиях руководствуются ГОСТ Р ИСО 5725-6-02 (п. 5.3.4).

Измерение остаточного содержания глюфосината аммония и его метаболита 3-метилфосфино-пропионовой кислоты в семенах и масле сои методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемным масс-спектрометрическим детектированием

Методические указания МУК 4.1.3449—17

Редактор Л. С. Кучурова Компьютерная верстка Е. В. Ломановой

Подписано в печать 15.12.17 Формат 60x88/16    Печ.    л. 1.25

Тираж 125 эю.    Заказ    76

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав позребитслсй и благополучия человека 127994. Москва, Вадковский пер., д. 18, стр. 5, 7

Оригинал-макет подготовлен к печати и тиражирован Федеральным центром гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора 117105. Москва, Варшавское ш., 19а Реализация печатных изданий, тел./факс: 8 (495) 952-50-89

ББК 51.23 И37

ИЗ7    Измерение остаточного содержания глюфосината аммо

ния и его метаболита 3-метилфосфино-гтропионовой кислоты в семенах и масле сои методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемным масс-спектрометрическим детектированием: Методические указания.—М.: Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, 2017.—18 с.

ISBN 978—5—7508—1579— 1

1.    Разработаны сотрудниками ФГБУ «Федеральный центр оценки безопасности и качества зерна и продуктов его переработки» (В. Л. Сухова, Н. И. Добрева, С. Д. Добрев).

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 22 декабря 2016 г. № 2).

3.    Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А. Ю. Поповой 14 марта 2017 г.

4.    Введены впервые.

ББК 51.23

ISBN 978—5—7508—1579—1

© Роспотребнадзор, 2017

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

А. Ю. Попова

14 марта 2017 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение остаточного содержания глюфосината аммония и его метаболита 3-метилфосфино-пропионовой кислоты в семенах и масле сои методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемным масс-спектрометрическим детектированием

Методические указания _МУК 4.1.3449—17_

Свидетельство об аттестации № 01.00225/205-8-16.

Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемным масс-спектрометрическим детектированием (ВЭЖХ-МС/МС) для определения массовой доли глюфосината аммония и его основного метаболита 3-мстилфосфино-пропионовой кислоты в семенах и масле сои в диапазоне измерений 0,02—6 мг/кг.

Методические указания носят рекомендательный характер.

Глюфосинат аммония (ГФА)

Аммоний ОЬ-гомоаланин-4-ил-(метил)-фосфинат

С₅Н_|5Ы₂04Р

Молекулярная масса: 198,16.

Кристаллический порошок со слабым специфическим запахом. Температура плавления: 215 °С. Давление паров при 20 °С: менее 0,1 МПа. Растворимость (г/дм³) при 20 °С: вода - 1 370; ацетон - 0,16;

этанол - 0,65; этилацетат - 0,14; толуол - 0,14; гексан - 0,2. Вещество стабильно при нормальных условиях хранения, в умеренно кислых и щелочных средах. Коэффициент распределения н-октанол/вода K_ow logP <0,1.

Краткая токсикологическая характеристика. Острая пероральная токсичность (LD₅o) для крыс составляет 1 620—2 000 млн"¹ (мг/кг); острая ингаляционная токсичность (LC₅₀) для крыс - 1,26—2,9 мг/м³ воздуха (аэрозоль). LC₅₀ для рыб - 710 мг/дм³ (96 ч).

Глюфосинат аммония не обладает тератогенным, канцерогенным и мутагенным действием. Он нетоксичен для водорослей, дафний, дождевых червей, пчел, птиц и диких животных.

Область применения препарата. Глюфосинат аммоний - неселективный контактный гербицид с ограниченной системностью, передвигающийся только внутри обработанных листьев. В процессе поступления в растение вещество диссоциирует и в клетках присутствует только глюфосинат свободная кислота. Гербицид используется для уничтожения однолетних и многолетних широколистных и злаковых сорняков в парах, посадках плодовых и цитрусовых культур, ягодных кустарниках и виноградниках путем направленного опрыскивания в период активного роста сорных растений, а также на овощных культурах при довсходовом применении препарата. Применяется в России в качестве десиканта на посевах гороха, подсолнечника, сои, рапса, люцерны и льна-долгунца при норме расхода от 0,15 до 0,35 кг д.в./га.

Глюфосинат аммоний в воде и растениях подвергается разрушению, в результате чего образуется 3-метилфосфино-пропионовая кислота.

3-метилфосфино-пропионовая кислота (МФПК)

С4Н9О4Р

Молекулярная масса: 152,09.

Белый кристаллический порошок. Температура плавления: 288— 291 °С. Растворим в воде и метаноле.

МДУ глюфосината аммония в РФ согласно ГН 1.2.3111—13: плодовые семечковые и косточковые, ягоды и другие мелкие фрукты (кроме смородины), цитрусовые, виноград, морковь - 0,2; картофель - 0,5; подсолнечник (семена), рапс (зерно) - 5,0; гречиха, просо, зерно хлебных злаков - 0,4; растительные масла (кроме нерафинированных рапсо-

вого и подсолнечного масла) - 0,4; зернобобовые - 3,0; миндаль неочищенный, смородина (черная, красная и белая) - 0,5*>**; спаржа, тропические и субтропические фрукты (кроме бананов), корн-салат, яйца, мясо млекопитающих (кроме морских животных), лук-репка, сахарная свекла, мясо птицы, нерафинированные рапсовое и подсолнечное масло - 0,05****; бананы - 0,2*'**; субпродукты пищевых млекопитающих и птицы, кукуруза, древесные орехи - 0,1*»**; молоко - 0,02*>**.

(*,**) - ВМДУ для импортируемой продукции.

1. Метрологические характеристики

При соблюдении всех регламентированных условий и проведении анализа в точном соответствии с данной методикой значение погрешности (и ее составляющих) результатов измерений не превышает значений, приведенных в табл. 1.

Таблица 1

Анализи руемый объект Диапазон измерений массовой доли, млн", (мг/кг) Показатель точности (границы относительной погрешности), ±6, % при Р - 0,95 Показатель повторяемости (относительное средне-квадра-гическое отклонение повторяемости), о„ % Показатель воспроизводимости (относительное срсднеква-дратичес-кое отклонение воспроизводимости), cfR, % Предел повторя емости, г> %, Р = 0,95, п = 2 Критическая разность для результатов анализа, полученных в двух лабораториях, CDq.95, % (п, = п2=2) ГФА Семена сои От 0,020 до 0,5 вкл. 35 7 11 19 27 Св. 0,5 до 6 вкл. 20 4 6 11 15 Масло сои От 0,020 до 0,5 вкл. 40 10 15 28 37 Св. 0.5 до 6 вкл. 22 5 8 14 20 МФПК Семена сои От 0,020 до 0,5 вкл. 30 5 8 14 20 Св. 0,5 до 6 вкл. 21 4 6 11 15 Масло сои От 0,020 до 0,5 вкл. 30 5 8 14 20 Св. 0,50 до 6 вкл. 18 3 5 8 13

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для всего диапазона измерений (п - 20) приведены в табл. 2.

Таблица 2

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата Метрологические параметры, Р = 0,95, п 20

Анализи руемый объект предел обнаружения, мг/кг диапазон определяемых концентраций, мг/кг средняя полнота извлечения, % стандартное отклонение. % доверительный интервал среднего результата, % ГФА Семена сои 0,02 От 0,020 до 0,5 вкл. 67,1 6,8 ±2,9 Св. 0,5 до 6 вкл. 68,4 3,9 ±1,5 Масло сои 0,02 От 0,020 до 0,5 вкл. 69,3 9,6 ±3,6 Св. 0,5 до 6 вкл. 76,0 4,5 ± 1,8 МФПК Семена сои 0,02 От 0,020 до 0,5 вкл. 76,0 6,8 ±2,9 Св. 0,5 до 6 вкл. 78,9 3,9 ± 1,5 Масло сои 0,02 От 0,020 до 0,5 вкл. 78,9 9,6 ±3,6 Св. 0,5 до 6 вкл. 79,7 4,5 ±1,8

2. Метод измерений

Методика основана на определении ГФА и его метаболита МФПК с помощью ионообменной высокоэффективной жидкостной хроматографии с тандемным масс-спектрометричсским квадропульным детектором (ВЭЖХ-МС/МС) после экстракции веществ из анализируемых образцов подкисленным метанолом и очистке экстрактов от механических примесей.

Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

3. Средства измерений, вспомогательные устройства,

реактивы и материалам

3.1. Средства измерении Система жидкостной хроматографии, оснащенная насосом с возможностью градиентного элюирования и масс-спектрометрическим детектором (тройной квадруполь)

Весы лабораторные аналитические, наибольший предел взвешивания 110 г, предел допустимой погрешности ± 0,2 мг Весы лабораторные общего назначения с наибольшим пределом взвешивания до 820 г и пределом допустимой погрешности ±0,01 г Колбы мерные вместимостью 2-5-2, 2-10-2,2-25-2,2-200-2, 2-500-2,2-1000-2 Пипетки градуированные 2-го класса точности вместимостью 1-1-2-0,1; 1-1-2-0,5; 1-1-2-1; 1-1-2-2; 1-2-2-5; 1-2-2-10 Пробирки градуированные с пришлифованной пробкой вместимостью П-2-5-0,1; П-2-10-0,2 Цилиндры мерные 2-го класса точности вместимостью 1-25,1-50, 1-100, 1-500, 1-1000 Дозаторы лабораторные одноканальные переменного объема: 0,5—10 мм³, 10—100 мм³, 100—1 000 мм³, 1—10 см³

Примечание. Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы

Глюфосинат аммоний, аналитический стандарт с содержанием основного компонента 99,2 % 3-мстилфосфино-пропионовая кислота, аналитический стандарт с содержанием основного компонента 97,9 %

Аммоний лимоннокислый, трехзамещенный Ацетонитрил для хроматографии, осч Бура техническая, марка А (натрия тетраборат, десятиводный)

Вода для лабораторного анализа (бидистип-лированная, деионизованная)

Кислота муравьиная, хч Метанол для хроматографии, хч Натрия гидроксид, хч

Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией.

4. Требования безопасности

4.1.    При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007-76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ Р 12.1.019-09, а также требования, изложенные в технической документации на систему жидкостной хроматографии.

4.2.    Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОС!' 12.1.004—91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313—03 и ГН 2.2.5.2308—07. Организация обучения работников безопасности труда -по ГОСТ 12.0.004-90.

5. Требования к квалификации оператора

Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист, имеющий опыт работы на жидкостном хроматографе с тандемным масс-спектрометрическим детектированием, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений.

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

-    процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С и относительной влажности не более 80 %;

-    выполнение измерений на системе жидкостной хроматографии с тандемным масс-спсктрометрическим детектированием проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению измерений

Измерениям предшествуют следующие операции: подготовка, приготовление градуировочных растворов, подвижной фазы для ВЭЖХ, кондиционирование хроматографической колонки, установление градуировочной характеристики, приготовление смесей растворителей для экстракции.

7.1. Подготовка посуды

Перед анализом посуду обрабатывают деионизированной водой не менее двух раз и сушат при температуре (200 ± 10) °С. Не рскомендует-