Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование _Российской    Федерации_

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение концентраций темботриона в воздухе рабочей зоны, атмосферном воздухе населенных мест и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указании МУК 4.1.3443—17

Издание официальное

Москва *2017

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение концентраций темботриона в воздухе рабочей зоны, атмосферном воздухе населенных мест и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3443—17

темботриона в растворе, устанавливают методом абсолютной калибровки по 6 растворам для градуировки.

В инжектор хроматографа вводят по 20 мм³ каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования, указанных ниже. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Устанавливают площади пиков темботриона, на основании которых строят градуировочную зависимость.

7.6. Условия хроматографирования

Измерения выполняют при следующих режимных параметрах.

Жидкостный хроматограф с быстросканируюшим ультрафиолетовым детектором, снабженный термостатом колонки.

Хроматографическая колонка стальная длиной 250 мм, внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная обращено-фазовым сорбентом с привитыми алкильными группами для удерживания гидрофильных соединений, зернением 5 мкм.

Рабочая длина волны: 283 и 235 нм.

Температура колонки: 25 °С.

Подвижная фаза ацето нитрил-0,1%-я ортофосфорная кислота (60 : 40, по объему).

Скорость потока элюента: 0,8 смУмин.

Объем вводимой пробы: 20 мм³.

Линейный диапазон детектирования: 1,6—24 нг.

7.7. Подготовка фильтров для отбора проб воздуха

Диаметр фильтра должен соответствовать внутреннему диаметру фил ьтро держателя.

Фильтры последовательно по 3 раза промывают на воронке Бюхнера этанолом, затем ацетонитрилом порциями 25—30 см³, сушат с помощью разряжения, создаваемого водоструйным насосом, затем на воздухе при комнатной температуре. До использования фильтры хранят в герметично закрытой стеклянной таре.

7.8. Подготовка аифеток для проведения смыва

7.8.1.    Приготовление раствора натрия углекислого с массовой долей 5 % (5%-й раствор). Навеску (25 ± 0,1) г натрия углекислого помещают в мерную колбу вместимостью 500 см³, растворяют в деионизированной воде, доводят водой до метки, перемешивают.

7.8.2.    Подготовка салфеток для проведения смыва. Вырезают салфетки (лоскуты) из белой бязи размером 10 х 10 см, затем их последовательно обрабатывают 5%-м раствором углекислого натрия (при кипячении), водой до нейтральной реакции промывных вод, 2-кратно промывают этиловым спиртом, сушат на воздухе при комнатной темпера-

туре. До использования салфетки хранят в герметично закрытой стеклянной таре.

8. Отбор и условия хранения проб

8. /. Воздушная среда Отбор проб осуществляют в соответствии с требованиями ГОСТ 17.2.4.02—81 «ОПА. Общие требования к методам определения загрязняющих веществ в воздухе населенных мест», ГОСТ 12.1.005-88 «ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны» и Р 2.2.2006—05 (прилож. 9, обязательное) «Общие методические требования к организации и проведению контроля содержания вредных веществ в воздухе рабочей зоны», пункт 2 «Контроль соответствия максимальным ПДК».

Воздух с объемным расходом 2—5 дм³/мин аспирируют через бумажные фильтры высокой плотности. Для определения вещества на уровне нижнего предела количественного определения в воздухе рабочей зоны (0,1 мг/м³) необходимо отобрать 2 дм³ воздуха, нижнего предела количественного определения в атмосферном воздухе (0,0008 мг/м³) - 125 дм' воздуха. Экспонированные фильтры помещают в полиэтиленовые пакеты. Срок хранения экспонированных проб воздуха, помещенных в полиэтиленовые пакеты в холодильнике (при 4 °С), не более 15 дней.

Дзя длительного хранения пробы помещают в морозильную камеру при температуре -18 °С.

8.2. Смывы с кожных покровов Смывы проводят в конце работы или после выполнения отдельных операций с открытых и закрытых спецодеждой или другими СИЗ участков тела (лоб, лицо, шея, грудь, предплечье, голень, кисти рук, включая межпальцевые промежутки).

До работы выбирают участок кожи, обрабатывают его для удаления загрязнений, фиксируют площадь (не менее 200 см²). При необходимости отбирают фоновые смывы.

Смыв выполняют способом обмыва фиксированного участка кожи этиловым спиртом, помещая 20 см³ в стеклянную емкость с металлической крышкой. Тканевой салфеткой, смоченной растворителем, с помощью пинцета (индивидуально) обмывают этот участок сверху вниз. Операцию повторяют дважды.

Срок хранения экспонированных проб смывов, помешенных в герметично закрытые емкости в холодильнике (при 4 °С) не более 15 дней.

Для длительного хранения пробы помещают в морозильную камеру при температуре -18 °С.

9. Выполнение измерений

9.1.    Воздушная среда

Экспонированный фильтр переносят в химический стакан вместимостью 150 см³, заливают 10 см³ ацетона или ацетонитрила, помещают на встряхиватель на 10 мин. Растворитель сливают, фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями растворителя объемом 10 см³, выдерживая на встряхивателе по 5 мин.

Объединенный экстракт переносят (через воронку) в круглодонную колбу, упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 35 °С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха. Остаток растворяют в 2 см³ (воздух рабочей зоны) и в 1 см³ (атмосферный воздух) подвижной фазы, подготовленной по п. 7.2, тщательно перемешивают и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п. 7.6.

Пробу вводят в испаритель хроматографа не менее двух раз. Устанавливают площадь пика действующего вещества, с помощью градуировочного графика определяют концентрацию темботриона в хроматографируемом растворе.

9.2. Смывы с кожных покровов

Пробу смыва сливают (через воронку) в колбу для упаривания, с помощью пинцета извлекают салфетку, помешают в конусную химическую воронку, установленную в муфту колбы для упаривания, тщательно отжимают и промывают этиловым спиртом дважды порциями по 10 см³, предварительно ополаскивая растворителем емкость, в которой находилась проба.

Объединенный раствор упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха. Остаток растворяют в 2 см' подвижной фазы (подготовленной по п. 7.2) и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п. 7.6.

Пробу вводят в испаритель хроматографа не менее двух раз. Устанавливают площадь пика темботриона и с помощью градуировочного графика определяют концентрацию вещества в хроматографируемом растворе.

Образцы, дающие пики большие, чем градуировочный раствор с концентрацией 1,2 мкг/см³, разбавляют подвижной фазой (не более чем в 50 раз).

10. Обработка результатов анализа

10.1.    Воздушная среда

Концентрацию вещества в пробе воздуха (Х)_у мг/м³, рассчитывают по формуле:

С - концентрация темботриона в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной плошали хроматографического пика, мкг/см³;

W- объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см³;

V,-объем пробы воздуха, отобранный для анализа, приведенный к нормальным условиям (давление 760 мм рт. ст., температура 20 °С -воздух рабочей зоны, температура 0 °С - атмосферный воздух), дм³:

_ R P ut

“ 273 + Т ’

Г-температура воздуха при отборе проб (на входе в аспиратор), °С; Р - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт. ст.; и - расход воздуха при отборе пробы, дм³/мин;

/-длительность отбора пробы, мин;

R - коэффициент, равный 0,386 для воздуха рабочей зоны и 0.357 для атмосферного воздуха.

10.2. Смывы с кожных покровов Концентрацию вещества в пробе смыва X, мкг/смыв, рассчитывают по формуле:

Х= С • IV, где

С - концентрация вещества в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см³;

W- объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см³. Примечание. Идентификация и расчет концентрации вещества в пробах могут быть проведены с помощью компьютерной программы обработки хроматографических данных, включенной в аналитическую систему.

11. Оформление результатов измерений

Результат количественного анализа представляют в виде: результат анализа X в мг/м³ или мкг/смыв (с указанием площади смыва в см²), характеристика погрешности 8, % (табл. 2), Р = 0,95 или

X ± Д мг/м³ (мкг/смыв, площадь смыва, см²), Р = 0,95, где

X -■ среднее арифметическое результатов определений, мг/м³ (мкг/смыв);

Д - граница абсолютной погрешности, мг/м³ (мкг/смыв):

6 - граница относительной погрешности методики (показатель точности по диапазону концентраций, табл. I), %.

Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность.

Если содержание вещества менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:

«содержание темботриона в пробе воздуха рабочей зоны - менее 0, / мг/м³; в пробе атмосферного воздуха - менее 0,0008 мг/м³; в пробе смыва - менее 0,2 мкг/смыв»*.

* 0,1 мг/м³; 0,0008 мг/м³; 0,2 мкг/смыв - пределы обнаружения при отборе 2 дм³ воздуха рабочей зоны; при отборе 125 дм³ атмосферного воздуха; в пробе смыва (фиксированная площадь смыва, 200 см^) соответственно.

12. Контроль качества результатов измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-(1-6)—02 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».

12.1. Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят в начале и по окончании каждой серии анализов.

При контроле стабильности градуировочной характеристики проводят измерения не менее двух растворов для градуировки, содержание темботриона в которых должно охватывать весь диапазон концентраций от 0,08 до 1,2 мкг/см³.

Градуировочная характеристика считается стабильной, если для каждого из используемого для контроля градуировочного раствора сохраняется соотношение:

|ЛГ-С|.100

с

X - концентрация темботриона в пробе при контрольном измерении, мкг/см³;

С - известная концентрация градуировочного раствора темботриона, взятая для контроля стабильности градуировочной характеристики, мкг/см³;

В - норматив контроля погрешности градуировочной характеристики, % (В= 10 % при Р = 0,95).

Если величина расхождения (.А) превышает 10%, делают вывод о невозможности применения градуировочной характеристики для даль-

нейших измерений. В этом случае выясняют и устраняют причины нестабильности градуировочной характеристики и повторяют контроль ее стабильности с использованием других градуировочных растворов тем-богриона, предусмотренных МВИ. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики устанавливают ее заново согласно п. 7.5.

Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.

12.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.

Образцами для контроля являются реальные пробы воздушной среды и смывов с кожных покровов. Объем отобранных для контроля процедуры выполнения анализа проб воздуха и смывов с кожи должен соответствовать удвоенному объему, необходимому для проведения анализа по методике, фиксированная площадь смыва должна быть увеличена в 2 раза. После отбора проб экстракт с фильтра, а также пробу смыва делят на две равные части, первую из которых анализируют в точном соответствии с прописью методики и получают результат анализа исходной рабочей пробы - X. Во вторую часть делают добавку анализируемого компонента (величина добавки С₀ должна соответствовать 50—150% от содержания компонента в пробе, общая конценгра-цня не должна превышать верхнюю границу диапазона измерения) и анализируют в точном соответствии с прописью методики, получая результат анализа рабочей пробы с добавкой - X. Результаты анализа исходной рабочей пробы (X) и рабочей пробы с добавкой (А'’) получают в условиях повторяемости (один аналитик, использование одного набора мерной посуды, одной партии реактивов и т. д.).

Величина добавки С₍₎ должна удовлетворять условию:

с„ > Д,л + д , где

±Д_7Г(±Д_тГ) - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой), мг/м\ мкг/смыв.

Допустимо характеристику погрешности результатов анализа при внедрении методики в лаборатории устанавливать на основе выражения Д,= ± 0,84 Д с последующим уточнением по мере накопления информации, где Д- граница абсолютной погрешности, мг/м³, мкг/смыв:

$ - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, табл. 1), %.

Контроль проводят путем сравнения результата контрольной процедуры К_к с нормативом контроля К.

Результат контрольной процедуры К_к рассчитывают по формуле:

К_к= Х'~ X - С с, где

Х\ Х_у Со - среднее значение массовой концентрации анализируемого компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки соответственно (мг/м³, мкг/смыв).

Норматив оперативного контроля точности К рассчитывают по формуле:

К ^{=    Д}    ».JP

Проводят сопоставление результата контрольной процедуры (К_к) с нормативом контроля (К).

Если результат контрольной процедуры удовлетворяет условию

KI < А',    (1)

процедуру анализа признают удовлетворительной.

При невыполнении условия (1) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (1) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.

12.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости.

Расхождение между результатами измерений, выполненных в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), не должно превышать предела воспроизводимости (/?):

\Х, -Х₂\ < R, где    (2)

R - предел воспроизводимости (табл. 1), %.

R - 0,20 • X (воздушная среда);

R = 0,20 • X (смывы с кожи).

X = /г (X/ + Л%), где Л/, X} - результаты измерений в условиях воспроизводимости (разное время, разные операторы, разные лаборатории), мг/м³, мкг/смыв.

Если выполняется условие (2), то воспроизводимость измерений считается удовлетворительной.

При превышении норматива контроля воспроизводимости эксперимент повторяют, при повторном превышении указанного норматива выясняют причины и по возможности их устраняют.

ББК 51.23 И37

И37 Измерение концентраций темботриона в воздухе рабочей зоны, атмосферном воздухе населенных мест и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: Методические указания.—М.: Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, 2017.—16 с.

1.    Разработаны ФБУН «Федеральный научный центр гигиены им. Ф. Ф. Эрисмана» Роспотребнадзора (Н. Е. Федорова. Л. П. Мухина).

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере зашиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 22 декабря 2016 г. № 2).

3.    Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере зашиты прав потребителей и благополучия человека. Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А. Ю. Поповой 13 марта 2017 г.

4.    Введены впервые.

ББК 51.23

Ответственный за выпуск Н. В. Карташева

Редактор Л. С. Кучурова Компьютерная верстка Е. В. Ломановой

Подписано в печать 09.10.17 Формат 60x84/16    Псч. л. 1.0

Тираж! 25 экз.    Заказ

Федеральная служба по налзору в сфере запнпы прав потребителей и благополучия человека 127994, Москва, Вадковский пср., д. 18, стр. 5, 7

Оригинал-макет подготовлен к печати и тиражирован отделением издательского обеспечения отдела научно-методического обеспечения Федерального центра гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора 117105. Москва, Варшавское ш.. 19а Реализация печатных изданий, тел./факс: 8 (495) 952-50-89

£> Роспотребнадзор, 2017

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

А. Ю. Попова

13 марта 2017 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение концентраций темботриона в воздухе рабочей зоны, атмосферном воздухе населенных мест и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания _МУК    4.1.3443—17_

Свидетельство об аттестации № РОСС RU.0001.310430/0266.27.04.16.

Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения в воздухе рабочей зоны, атмосферном воздухе населенных мест и смывах с кожных покровов операторов массовой концентрации темботриона в диапазоне 0,2—2,0 мг/м³, 0,0008—0,008 мг/м³ и 0,2—

2,0 мкг/смыв соответственно.

Методические указания носят рекомендательный характер.

Темботрион

Химический класс - трикетонов

2-[2-хлоро-4-мезил-3-[(2,2,2-трифтороэтокси)метил]бензоил]-цик-логексан-1,3-дион (IUPAC)

Молекулярная масса: 440,82.

Бежевый порошок. Давление паров 1,1x10 ⁵ МПа (при 25 °С). Растворимость в органических растворителях (при 20 °С, г/дм³): ацетон - 600; хлористый метилен - 600; этилацетат 180,2; гексан - 47,6 мг/дм³. Растворимость в воде при 20 °С (г/дм³) - 0,22 (pH 4), 28,3 (pH 7), 29,7 (pH 9). Коэффициент распределения в системе н-октанол-вода при 20 «С (pH 7), KowlogP--l,l.

Краткая токсикологическая характеристика. Острая пероральная токсичность (LD50) для крыс > 2 000 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD50) для крыс > 2 000 мг/кг; острая ингаляционная токсичность (ЬС₅₀) для крыс > 5,03 мг/дм³.

Область применения. Темботрион - гербицид из класса трикето-нов, рекомендуется для уничтожения однолетних и многолетних злаковых и широколистных сорняков в посевах кукурузы.

1. Погрешность измерений

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для всего диапазона измерений (п - 20) приведены в табл. 2.

Таблица 1

Метрологические параметры

Анализи руемый объект Диапазон определяемых концентраций, мг/м , мкг/смыв Показатель точности (граница относительной погрешности). +0 %. Р = 0,95 1 Указатель повторяемости (среднеквадратичное отклонение повторяемости). ст„ % Показатель воспроизводимости (среднеквадратичное отклонение воспроизводимости). % 11 редел повторяемости (значение допустимого расхождения между двумя результатами параллельных оппс-дслении), г. % 11 редел воспроизводимости (значение допустимого расхождения между двумя результатами измерений, полученных в разных лабораториях). R, % Атмосферный воздух 0.0008— 0,008 21 5 7 14 20 Воздух рабочей зоны о 7 о 21 5 7 14 20 Смывы с кожных покровов 0,2—2,0 17 5 7 14 20

Таблица 2 Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата

Анализируемый объект Метрологические параметры, Р = 0,95, п = 20 предел обнаружения, мг/м3. м кг/см ы в диапазон определяемых концентраций. мг/м3, мкг/смыв полнота извлечения вещества, % стандартное отклонение. % доверительный интервал среднего результата. ±. % Атмосферный воздух 0,0008 0,0008—0.008 87.3 6,5 3,4 Воздух рабочей зоны 0,1 0,1—1,0 87,3 6.5 3,4 Смывы с кожных покровов 0.2 0,2—2.0 93,6 4.7 2.5

2. Метод измерений

Измерения концентраций темботриона выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на обращенной фазе с ультрафиолетовым детектором.

Концентрирование вещества из воздуха осуществляют на бумажные фильтры высокой плотности, экстракцию проводят ацетоном или ацетонитрилом. Смыв с кожных покровов проводят этиловым спиртом.

Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 2 нг. Средняя полнота извлечения с фильтров - 87,3 %, с поверхности кожи -93,6 %.

3. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы

3.1. Средства измерений Жидкостный хроматограф с быстроскани-рующим ультрафиолетовым детектором, снабженный термостатом колонки Барометр-анероид с диапазоном измерения атмосферного давления 5—790 мм рт. ст.

Весы лабораторные аналитические, наибольший предел взвешивания 120 г, предел допустимой погрешности 0,0001 г Гигрометр с диапазоном измерений относительной влажности от 30 до 90 %

Меры массы

Пробоотборное устройство 2-канапьное, с диапазонами расхода 0,2—1,0 дм³/мин и 5,0—

1,0 дм³/мин

Термометр лабораторный шкальный, пределы измерения -35 °С—+55 °С    ТУ 25-1102.055—83

Цилиндры мерные 2-го класса точности вместимостью 100, 500 и 1 000 см³    ГОСТ    1770—74

Примечание. Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы

Темботрион, аналитический стандарт с содержанием основного компонента 99,3 % Ацетонитрил для хроматографии, хч Ацетон, осч

Вода для лабораторного анализа (бидистил-лированная или деионизованная)

Кислота ортофосфорная, хч, 85 %

Калий углекислый (карбонат калия, поташ), хч. прокаленный

Калий марганцовокислый (перманганат калия), хч

Натрий углекислый (карбонат натрия), хч Спирт этиловый (этанол) ректификованный

Фосфор (V) оксид (фосфорный ангидрид, пентоксид фосфора), хч

Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующих дополнительной очистки растворителей.

Аппарат для встряхивания или орбитальный шейкер, диапазон регулировки оборотов 50— 200 об./мин, орбита до 10 мм Баня ультразвуковая с рабочей частотой 35 кГц Бумажные фильтры высокой плотности, обеззоленные (фильтры)

Бязь хлопчатобумажная белая Колбы конические круглодонные (для упаривания) на шлифе вместимостью 150 см³ Линейка измерительная

Мембраны микропористые капроновые, размер пор 0,45 мкм

Набор для фильтрации растворителей через мембрану

Насос водоструйный Пинцет медицинский нержавеющий Пробирки градуированные с пришлифованной пробкой

Ректификационная колонна с числом теоретических тарелок не менее 30 Стаканы химические с носиком вместимостью 150 см³

Стекловата Стеклянные палочки

Ротационный вакуумный испаритель с мембранным насосом, обеспечивающий вакуум до 10 мбар

Хроматографическая колонка стальная длиной 250 мм, внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная обращено-фазовым сорбентом с привитыми алкильными группами для удерживания гидрофильных соединений, зернением 5 мкм

Шприц для ввода образцов для жидкостного хроматографа вместимостью 50—100 мм³

Примечание. Допускается использование вспомогательных устройств и материалов с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1.    При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007-76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ Р 12.1.019-09, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.

4.2.    Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать Г1ДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313—03 и ГН 2.2.5.2308—07. Организация обучения работников безопасности груда -

5. Требования к квалификации операторов

Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист, имеющий опыт работы на жидкостном хроматографе, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений.

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

-    процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С и относительной влажности не более 80 %;

-    выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению измерений

Выполнению измерений предшествуют следующие операции: подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ, кондиционирование хроматографической колонки, приготовление растворов дня градуировки и внесения, установление градуировочной характеристики, подготовка фильтров и салфеток для отбора проб, отбор проб.

7. /. Очистка растворителей

7.1.1. Ацетонитрил

Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксн-дом фосфора (на 1 дм’’ ацетонитрила 20 г пентоксида фосфора) не менее 1 ч, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия (на 1 дм’ацетонитрила 10 г карбоната калия).

7.1.2. Ацетон

Ацетон перегоняют над небольшим количеством перманганата калия и прокаленным карбонатом калия или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок не менее 30.

7.2. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ

7.2.1. Приготовление раствора ортофосфорной кислоты с массовой долей 0,1% (0,1 %-й раствор). В мерную колбу вместимостью 1 000 см’ помешают 500 см³ бндистиллированной или деионизованной воды, 1 см ортофосфорной кислоты, перемешивают доводят до метки бидистиллированной или деионизованной водой и еще раз тщательно перемешивают.

7.2.2. Приготовление подвижной фазы. В мерную колбу вместимостью 1 ООО см³ помешают 600 см ацетонитрила и 400 см³ 0,1%-го раствора ортофосфорной кислоты, перемешивают, фильтруют и дегазируют.

Подвижную фазу хранят в темном месте (в емкости из темного стекла) не более 14 дней.

7.5. Кондиционирование хроматографической колонки для ВЭЖХ

Промывают колонку подвижной фазой (приготовленной по п. 7.2) при скорости подачи растворителя 0,8 см³/мин до установления стабильной базовой линии.

7.4. Приготовление градуировочных растворов и растворов внесения

7.4.1.    Исходный раствор темботриона для градуировки (концентрация 100мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают (0,01 ± 0,0001) г темботриона, растворяют в 50—60 см³ ацетонитрила, доводят ацетонитрилом до метки, тщательно перемешивают.

Раствор хранят в морозильной камере при температуре -18 °С в течение месяца.

7.4.2.    Рабочий раствор N9 1 темботриона для градуировки и внесения (концентрация 10,0мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 cm^j помещают 10,0 см³ исходного градуировочного раствора с концентрацией 100,0 мкг/см³ (п. 7.4.1), доводят до метки ацетонитрилом, тщательно перемешивают, получают рабочий растворы № 1 с концентрацией темботриона 10,0 мкг/см³.

Раствор хранят в морозильной камере при температуре -18 °С в течение месяца.

Этот раствор используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения действующего вещества методом «внесено-найдено» и контроля качества результатов измерений методом добавок.

7.4.3.    Рабочие растворы № 2—7 темботриона для градуировки (концентрация 0,08—1,2 мкг/см). В 5 мерных колб вместимостью 100 см³ и одну мерную колбу на 50 см³ помещают 0,8; 1,0; 2,0; 5; 10 см³ и 6 см³ (колба на 50 см³) рабочего раствора № 1 с концентрацией

10,0 мкг/см³ (п. 7.4.2), доводят до метки подвижной фазой, приготовленной по п. 7.2, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы №2—7 с концентрациями темботриона 0,08; 0,1; 0,2; 0,5; 1,0 и 1,2 мкг/см³.

Растворы хранят в холодильнике при температуре 4—6 °С не более 5 дней.

7.5. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую линейную (с угловым коэффициентом) зависимость площади пика от концентрации