МУК 4.1.3349-16
Измерение концентраций циазофамида в воздухе рабочей зоны, атмосферном воздухе населенных мест и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование _Российской    Федерации_

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение концентраций циазофамида в воздухе рабочей зоны, атмосферном воздухе населенных мест и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3349—16

Издание официальное

Москва • 2016

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение концентраций циазофамида в воздухе рабочей зоны, атмосферном воздухе населенных мест и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3349—16

7.5.3. Рабочие растворы № 2—7 циазофамида для градуировки (концентрация 0,025—1,0 мкг/см³). В 4 мерные колбы вместимостью 100 см³ помещают по 10,0; 5,0; 2,5 и 1,0 см* градуировочного раствора № 1 с концентрацией 10 мкг/см³ (п. 7.5.2), доводят до метки смесью растворителей, приготовленной по п. 7.4, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы № 2—5 с концентрацией циазофамида 1,0; 0,5; 0,25 и 0,1 мкг/см³ соответственно.

В две мерные колбы вместимостью 50 см³ помещают по 10,0 и 5,0 см³ градуировочного раствора № 3 с концентрацией 0,25 мкг/см³, доводят до метки смесью растворителей, приготовленной по п. 7.4, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы №6—7 с концентрацией циазофамида 0,05 и 0,025 мкг/см³ соответственно.

Рабочие растворы хранят в холодильнике при температуре 4—6 °С в течение 10 дней.

7.6. Установление градуировочной характеристики, условия хроматографирования

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (мЕА • с) от концентрации циазофамида в растворе (мкг/см³), устанавливают методом абсолютной калибровки по 6 растворам для градуировки № 2—7, приготовленным по п. 7.5.3.

В инжектор хроматографа вводят по 50 мм³ каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования, указанных ниже. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Устанавливают площади пиков циазофамида, на основании которых строят градуировочную зависимость.

Условия хроматографирования

Измерения выполняют при следующих режимных параметрах.

Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым (диодно-матричным) детектором с переменной длиной волны.

Хроматографическая колонка стальная, длиной 150 мм, внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная обращено-фазовым сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами С18, зернением 5 мкм.

Рабочая длина волны: 286 нм.

Температура колонки: 35 °С.

Скорость потока элюснта: 0,8 см³/мин.

Объем вводимой пробы: 50 мм³.

Подвижная фаза: ацетонитрил-0,5%-й раствор уксусной кислоты (60 : 40, по объему).

10

МУК 4.1.3349—16

Линейный диапазон детектирования: 1,25—50 нг.

7.7. Подготовка фильтров для отбора проб воздуха рабочей зоны

Диаметр бумажного фильтра высокой плотности должен соответствовать внутреннему диаметру фильтродержателя.

Фильтры последовательно по 3 раза промывают на воронке Бюхнера этанолом, затем ацетонитрилом порциями 25—30 см³, сушат с помощью разряжения, создаваемого водоструйным насосом, затем на воздухе при комнатной температуре. До использования фильтры хранят в герметично закрытой стеклянной таре.

7.8. Подготовка салфеток для проведения смыва

1.8.1.    Приготовление раствора натрия углекислого с массовой долей 5 % (5%-й раствор). Навеску (25 ± 0,1) г натрия углекислого помещают в мерную колбу вместимостью 500 см³, растворяют в деионизированной воде, доводят водой до метки, перемешивают.

7.8.2.    Подготовка салфеток для проведения смыва. Вырезают салфетки (лоскуты) из белой бязи размером 10 х 10 см, затем их последовательно обрабатывают 5%-м раствором углекислого натрия (при кипячении), водой до нейтральной реакции промывных вод, 2-кратно промывают этиловым спиртом, сушат на воздухе при комнатной температуре. До использования салфетки хранят в герметично закрытой стеклянной таре.

8. Отбор и условия хранения проб

8.1. Воздух рабочей зоны

Отбор проб осуществляют в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 «ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны» и Р 2.2.2006—05 (прилож. 9, обязательное) «Общие методические требования к организации и проведению контроля содержания вредных веществ в воздухе рабочей зоны», п. 2 «Контроль соответствия максимальным ПДК».

Воздух с объемным расходом 4—5 дм³/мин аспирируют через бумажный фильтр высокой плотности, помещенный в фильтродержатель.

Для измерения концентрации вещества на уровне предела обнаружения (0,02 мг/м³) необходимо отобрать 25 дм³ воздуха.

Срок хранения отобранных проб, помещенных в полиэтиленовые пакеты, в холодильнике (4—5 °С) -14 дней. Для длительного хранения пробы помещают в морозильную камеру при температуре (-18 ± 2) °С.

11

8.2. Атмосферный воздух Отбор проб осуществляют в соответствии с требованиями ГОСТ 17.2.4.02—81 «Охрана природы. Атмосфера. Общие требования к методам определения загрязняющих веществ».

Воздух с объемным расходом 2 дм³/мин аспирируют через две пробоотборные трубки, установленные параллельно. Экспонированные параллельно трубки объединяют в одну пробу.

Для измерения концентрации циазофамида на уровне предела обнаружения (0,001 мг/м³) необходимо отобрать 100 дм³ воздуха (объем аспирированного через каждую трубку воздуха 50 дм³).

Экспонированные трубки, герметизированные заглушками, помещают в полиэтиленовые пакеты. Срок хранения отобранных проб при комнатной температуре - 7 дней, в холодильнике (4—^5 °С) - 14 дней.

Для длительного хранения пробы помещают в морозильную камеру при температуре (—18 ± 2) °С.

8.3. Условия проведения смыва Смывы проводят в конце работы или после выполнения отдельных операций с открытых и закрытых спецодеждой или другими СИЗ участков тела (лоб, лицо, шея, грудь, предплечье, голень, кисти рук, включая межпальцевые промежутки).

До работы выбирают участок кожи, обрабатывают его для удаления загрязнений, фиксируют площадь (не менее 200 см²). При необходимости отбирают фоновые смывы.

Смыв выполняют способом обмыва фиксированного участка кожи этиловым спиртом, помещая 20 см³ в стеклянную емкостью с металлической крышкой. Тканевой салфеткой, смоченной растворителем, с помощью пинцета (индивидуально) обмывают этот участок сверху вниз. Операцию повторяют дважды.

Срок хранения отобранных проб смывов, помещенных в герметично закрытые емкости, в холодильнике (4—6 °С) - 14 дней.

Для длительного хранения пробы помещают в морозильную камеру при температуре (-18 ± 2) °С.

9. Выполнение измерений

9.1. Воздух рабочей зоны Экспонированный фильтр переносят в химический стакан вместимостью 150 см³, заливают 10 см³ ацетонитрила, помещают на встряхива-тель на 10 минут. Растворитель сливают, фильтр еще дважды обрабаты-

12

МУК 4 Л .3349—16

вают новыми порциями ацетонитрила объемом 10 см³, выдерживая на встряхивателе по 10 минут.

Объединенный экстракт переносят (через воронку) в мерный цилиндр вместимостью 50 см³, доводят объем до 50 см³ бидистиплирован-ной водой, тщательно перемешивают и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п. 7.6.

9.2. Атмосферный воздух Содержимое двух сорбционных трубок (сорбент и стекловату), экспонированных параллельно, переносят в пробирку вместимостью 10 см³, заливают 5 см³ ацетонитрила, помещают на ультразвуковую баню на 1 час. При подъеме температуры в бане в процессе экстракции выше 25 °С, в воду добавляют лед. Растворитель декантируют в круглодонную колбу вместимостью 25—50 см³, сорбент промывают новой порцией ацетонитрила объемом 5 см³, выдерживая на ультразвуковой бане 5 мин.

Объединенный экстракт переносят (через воронку) в круглодонную колбу, упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха.

Остаток растворяют в 4 см³ смеси ацетонитрил-вода (60 :40, по объему), тщательно перемешивают, фильтруют через мембранный фильтр и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п. 7.6.

9.3. Смывы с кожных покровов Пробу смыва сливают (через воронку) в колбу для упаривания, с помощью пинцета извлекают салфетку, помещают в конусную химическую воронку, установленную в муфту колбы для упаривания, тщательно отжимают и промывают этиловым спиртом дважды порциями по 10 см³, предварительно ополаскивая растворителем емкость, в которой находилась проба.

Объединенный раствор упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 40 °С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха. Остаток растворяют в 4 см³ смеси ацетонитрил-вода (подготовленной по п. 7.4) и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п. 7.6.

Пробу вводят в испаритель хроматографа не менее двух раз. Устанавливают площадь пика циазофамида, с помощью градуировочного графика определяют концентрацию циазофамида в хроматографируемом растворе.

13

Образцы, дающие пики большие, чем градуировочный раствор с концентрацией 1,0 мкг/см³, разбавляют смесью ацетонитрил-вода в объемном соотношении 60 : 40 (не более чем в 50 раз).

10. Обработка результатов анализа

10.1. Воздушная среда Концентрацию вещества в пробе воздуха (X), мг/м³, рассчитывают по формуле:

С - концентрация вещества в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см³;

W- объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см³;

К, - объем пробы воздуха, отобранный для анализа, приведенный к стандартным условиям (давление 760 мм рт. ст., температура 20 °С) при исследовании проб воздуха рабочей зоны и нормальным условиям (давление 760 мм рт. ст., температура 0 °С) - при исследовании проб атмосферного воздуха, дм³:

У _ R ■ Р • м/

'    273    +    Т    *

Т- температура воздуха при отборе проб (на входе в аспиратор), °С; Р - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт. ст.; и - расход воздуха при отборе пробы, дм³/мин; t - длительность отбора пробы, мин (при объединении двух экспонированных трубок, отобранных параллельно, время отбора удваивается);

R - коэффициент, равный 0,386 для воздуха рабочей зоны и 0,357 -для атмосферного воздуха.

10.2. Смывы с кожных покровов Концентрацию вещества в пробе смыва Х_у мкг/смыв, рассчитывают по формуле:

Х=С• fr, где

С - концентрация вещества в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см³;

W- объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см³.

14

МУК 4.1.3349—16

Примечание. Идентификация и расчет концентрации вещества в пробах могут быть проведены с помощью компьютерной программы обработки хроматографических данных, включенной в аналитическую систему.

11. Оформление результатов измерений

Результат количественного анализа представляют в виде: результат анализа X в мг/м³ или мкг/смыв (с указанием площади смыва в см²), характеристика погрешности 6% (таблица), Р = 0,95 или X ± Д мг/м³ (мкг/смыв, площадь смыва, см²), Р - 0,95, где

X- среднее арифметическое результатов определений, мг/м³ (мкг/смыв);

Д - граница абсолютной погрешности, мг/м³ (мкг/смыв):

8 - граница относительной погрешности методики (показатель точности по диапазону концентраций, таблица), %.

Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность.

Если содержание вещества менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:

«содержание циазофамида в пробе воздуха рабочей зоны - менее 0,05 мг/м³; в пробе атмосферного воздуха - менее 0,001 мг/м³, в пробе смыва - менее 0,1 мкг/смыв».

0,05 мг/м³; 0,001 мг/м³; 0,1 мкг/смыв - пределы обнаружения при отборе 25 дм³ воздуха рабочей зоны; при отборе 100 дм³ атмосферного воздуха; в пробе смыва (фиксированная площадь смыва, 200 см²) соответственно.

12. Контроль качества результатов измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-(1-6)—-02 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».

12.1. Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят в начале и по окончании каждой серии анализов.

При контроле стабильности градуировочной характеристики проводят измерения не менее двух образцов растворов для градуировки, содержание циазофамида в которых должно охватывать весь диапазон концентраций от 0,025 до 1,0 мкг/см³.

15

ББК 51.21 И37

ИЗ7    Измерение концентраций циазофамида в воздухе рабочей

зоны, атмосферном воздухе населенных мест и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: Методические указания.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2016.—18 с.

ISBN 978—5—7508—1516—6

1.    Разработаны сотрудниками ФБУН «Федеральный научный центр гигиены им. Ф. Ф. Эрисмана» Роспотребнадзора (Т. В. Юдина,

Н. Е. Федорова, Ж. А. Чистова).

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере зашиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 17 декабря 2015 г. Ха 2).

3.    Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А. Ю. Поповой 10 марта 2016 г.

4.    Введены впервые.

ББК 51.21

ISBN 978—5—7508—1516—6

© Роспотребнадзор, 2016 © Федеральный центр гигиены и

эпидемиологии Роспотребнадзора, 2016

Химически чистое вещество представляет собой кристаллический порошок белого цвета без запаха. Температура плавления: 153 °С. Давление паров - менее 0,0133 МПа (25 °С). Коэффициент распределения в системе н-октанол-вода lgP = 3,2 (20 °С). Растворимость в воде (мг/дм³, 20 °С): 0,114. Растворимость в органических растворителях (г/дм³, 20 °С): ацетон - 41,9; толуол - 5,3; гексан - 0,03; октанол - 0,25.

Агрегатное состояние в воздушной среде - аэрозоль и пары.

Краткая токсикологическая характеристика. Острая пероральная токсичность (LD₅₀) для крыс - более 5 000 мг/кг, острая дермальная токсичность (LD50) для крыс - более 2 000 мг/кг, острая ингаляционная токсичность (LK₅₀) для крыс - 5,5 мг/дм³ (4 часа).

Область применения. Циазофамид - системный фунгицид класса цианоимидазола, применяется против фитофтороза и др. заболеваний, вызываемых грибами рода Оомицетов на картофеле, томатах, огурцах; обладает высокой эффективностью против фениламид-устойчивых грибов.

1. Метрологические характеристики

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р = 0,95 не превышает значений, приведенных в таблице для соответствующих диапазонов концентраций.

Таблица

Значения характеристики погрешности, нормативов оперативного контроля точности, повторяемости, воспроизводимости

Анализи руемый объект Диапазон определяемых концентраций, мг/м , мкг/смыв Показатель точности (границы относительной погрешности, Р - 0,95), ±<5, % Показатель повторяемости (среднеквадратичное отклонение повторяемости), а, мг/м-5, мкг/смыв Предел повторяемости (значение допустимого расхождения между двумя результатами параллельных определений), г, мг/м3, мкг/смыв Предел воспроизводимости (значение допустимого расхождения между двумя результатами измерений, полученных в разных лабораториях), /?, мг/м3, мкг/смыв, (Р = 0,95) Воздух рабочей зоны 0,05—2,0 мг/м3 13 0,044 • X * 0,12 X 0,17 • X Атмосферный воздух 0,001—t 0,04 мг/м3 15 0,057 • X 0,16 X 0,22 • X Смывы с кожных покровов 0,1—4,0 мкг/смыв 14 0,070 • X 0,20 • X 0,28 • X * X - среднее значение массовой концентрации анализируемого компонента в пробе (мг/м\ мкг/смыв)

4

Примечание. Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы

Циазофамид, аналитический стандарт с содержанием основного вещества 99,6 % Ацетонитрил для хроматографии, хч Вода для лабораторного анализа (бидистилли-рованная или деионизованная)

Калий марганцовокислый (перманганат калия), хч

Калий углекислый (карбонат калия, поташ),

хч, прокаленный

Кислота уксусная ледяная, хч

Натрий углекислый (карбонат натрия), хч

Спирт этиловый (этанол) ректификованный

Фосфор (V) оксид (фосфорный ангидрид, пентоксид фосфора), хч

Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующих дополнительной очистки растворителей.

3.3. Вспомогательные устройства, материалы

Аппарат для встряхивания проб Баня водяная

Баня ультразвуковая с рабочей частотой 35 кГц Бумажные фильтры высокой плотности Бязь хлопчатобумажная белая Воронка Бюхнера

Воронки химические конусные диаметром 40—45 мм Груша резиновая Колба Бунзена

Колбы круглодонные на шлифе вместимостью

150 см³

Лед

Линейка измерительная

Мембраны микропористые капроновые,

диаметр пор 0,45 мкм

ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313—03 и ГН 2.2.5.2308—07. Организация обучения работников безопасности труда -по ГОСТ 12.0.004-90.

5. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе, освоивших данную методику и подтвердивших экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по п. 12.

К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией «лаборант», имеющего опыт работы в химической лаборатории.

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

-    процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С и относительной влажности не более 80 %;

-    выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению измерений

Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка ацетонитрила (при необходимости), подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ, кондиционирование хроматографической колонки, приготовление растворов для градуировки и внесения, растворов для экстракции, установление градуировочной характеристики, подготовка фильтров и салфеток для отбора проб, отбор проб.

7.1. Очистка ацетонитрила

Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора (на 1 дм³ ацетонитрила (20 ± 0,1) г пентоксида фосфора) не менее 1 часа, после чего перегоняют. Непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия (на 1 дм³ ацетонитрила (10 ± 0,1) г карбоната калия).

7.2. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ

7.2.1. Приготовление раствора уксусной кислоты с массовой долей 0,5 % (0,5%-й раствор). В мерную колбу вместимостью 1 000 см³ поме-

8

МУК 4.1.3349—16

щают 500 см³ бидистиллированной или деионизованной воды, вносят 1 см³ ледяной уксусной кислоты, доводят водой до метки, перемешивают.

7.2.2. Приготовление подвижной фазы. В мерную колбу вместимостью 1 ООО см³ помещают 600 см³ ацетонитрила, добавляют 400 см³ 0,5%-го раствора уксусной кислоты, перемешивают, фильтруют через мембранный фильтр и дегазируют.

Подвижную фазу хранят в темном месте (в емкости из темного стекла) не более 14 дней.

7.3.    Кондиционирование хроматографической колонки для ВЭЖХ

Промывают колонку подвижной фазой (приготовленной по п. 7.2)

при скорости подачи растворителя 0,8 см³/мин до установления стабильной базовой линии.

7.4.    Приготовление смеси ацетонитрил-вода (60: 40, по объему) для растворения проб и подготовки градуировочных растворов

В мерную колбу вместимостью 1 000 см³ помещают 600 см³ ацетонитрила, добавляют 400 см³ воды, перемешивают, фильтруют через мембранный фильтр и дегазируют.

Смесь хранят в темном месте (в емкости из темного стекла) не более 14 дней.

7.5. Приготовление градуировочных растворов

7.5.1.    Исходный раствор циазофамида для градуировки (концентрация 100 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 0,0100 г циазофамида растворяют в 50—60 см³ ацетонитрила, доводят ацетонитрилом до метки, тщательно перемешивают.

Раствор хранят в холодильнике при температуре 4—6 °С в течение месяца.

Растворы № 1—5 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного раствора для градуировки.

7.5.2.    Раствор М 1 циазофамида для градуировки и внесения (концентрация 10 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 10 см³ исходного раствора с концентрацией циазофамида 100 мкг/см³ (п. 7.5.1), разбавляют ацетонитрилом до метки.

Градуировочный раствор № 1 хранят в холодильнике при температуре 4—6 °С в течение месяца.

Этот раствор используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения действующего вещества методом «внесено-найдено», а также контроле качества результатов методом «добавок».

9