Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование Российской Федерации

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств крезоксим-метила в семенах и масле подсолнечника методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3290-15

Издание официальное

Москва *2015

Федеральная служба по надзору в сфере зашиты прав потребителей и благополучия человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств крезоксим-метила в семенах и масле подсолнечника методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3290-15

ББК 51.23 062

062 Определение остаточных количеств крезоксим-метила в семенах и масле подсолнечника методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: Методические указания.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2015.—16 с.

ISBN 978—5—7508—1409— 1

1.    Разработаны сотрудниками ФГБНУ «Всероссийский НИИ зашиты растений* (В. И. Долженко, А. С. Комарова В. В. Человечкова), ООО «Ишювациониый центр зашиты растений* (И. А. Цибульская, Т. Д. Черменская).

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере зашиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 22 мая 2015 г. N? 1).

3.    Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере зашиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А. Ю. Поповой 28 июля 2015 г.

4.    Введены впервые.

ББК 51.23

© Роспотребнадзор, 2015 © Федеральный центр гигиены

и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2015

МУК 4.1.3290-15

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

А. Ю. Попова

28 июля 2015 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств крезоксим-метила в семенах и масле подсолнечника методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3290-15

Свидетельство об аттестации № 01.5.04.193/01.00043/2015

Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения остаточных количеств крезоксим-метила в семенах и масле подсолнечника в диапазоне 0,01—0,1 мг/кг.

Методические указания носят рекомендательный характер.

Крезоксим-метил.

(Е)-метил-2-метоксиимино-2-{2-(о-толилокси-метил)фе-нил}ацетат (IUPAC).

О

с,,н„мо₄.

Молекулярная масса 313,4.

3

Химически чистое вещество представляет собой белое кристаллическое вещество со слабым запахом.

Температура плавления: 97,2-101,7 *С.

Давление пара при 20 "С: 2,3 х 10"³ мПа.

Растворимость (в г/дм³ при 20 °С): вода - 0,002; гептан — 1,7; толуол — 111, дихлорметан - 939, метанол — 14,9; ацетон — 217, этилацетат— 123.

Стабильность к гидролизу при 20 °С: DT*, 34 дня (pH 7), 7 часов (pH 9). В биологически активных почвах в аэробных условиях крсзоксим-метил быстро разрушается: DT_W менее 3 дней.

Краткая токсикологическая характеристика

Острая пероральная токсичность LD_W для крыс более 5 000 мг/кг, острая дермальная токсичность LD_W для крыс превышает 2 000 мг/кг. Не оказывает раздражающего действия на кожу и слизистую оболочку глаз кролика, не обладает мутагенными и сенсибилизирующими свойствами. Не токсичен для пчел, дождевых червей, полезных насекомых и птиц.

Область применения препарата

Синтетический фунгицид из класса стробилуринов, являющихся продуцентами гриба Strobilurus tenacellus. Вещество эффективно против широкого круга грибных патогенов хлебных злаков, овощных, кормовых, технических и плодовых культур. Обладает защитным, лечебным и искореняющим действием.

В России для крезоксим-мстила в подсолнечнике гигиенические нормативы не установлены.

1. Погрешность измерений

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1, для соответствующих диапазонов концентраций.

4

МУК 4.1.3290-15

Таблица 1 Метрологические параметры

Анали зируемый объект Диапазон определяемых , концентраций, мг/кг (мг/м, мг/дм) Показатель точности*1 (границы относительной погрешности), ±б, %, при Р = 0,95 Показатель повторяемости (относительное средне-квадратическое отклонение повторяемости), 5„ % Показатель воспроизводимости (относительное среднеквадратическое отклонение воспроизводимости), 6*, % Предел повторяемости (значение допустимого расхождения между двумя результатами параллельных определений), г, % Предел воспроизводимости (значение допустимого расхождения между двумя результатами измерений, полученных в разных лабораториях). К, %, Р = 0,95 Семена от 0,01 до 0,1 22 6 10 17 28 Масло от 0.01 до 0,1 22 6 10 17 28 ** соответствует расширенной неопределенности при коэффициенте охвата к = 2.

Таблица 2 Полнота извлечения, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата

Анали зируемый объект Метрологические параметры, Р ■ 0,95, п “ 20 Предел количественного определения, мг/кг(мг/м, мг/дм) Диапазон определяемых концентраций, мг/кг(мг/м, мг/дм) Полнота извлечения вещества, % Стан дартное отклонение, % Доверительный интервал среднего результата, ±, % Семена 0,01 0,01-0,1 93.0 2,25 3,16 Масло 0,01 0,01-0,1 93.8 3,05 4,27

2. Метод измерений

Метод основан на определении крезоксим-метила методом высокоэффективной жидкостной хромагограыии (ВЭЖХ) с использованием УФ-детектора после его экстракции из образцов ацетонитрилом, очистки в системе нссмешивающихся растворителей и очистки на патронах для твердофазной экстракции.

5

Идентификация крезоксим-метила проводится по времени удерживания, количественное определение - методом абсолютной калибровки.

Избирательность метола обеспечивается сочетанием условий подготовки проб и хроматографирования.

3. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы

3.1. Средства измерений

Ультраэффективный жидкостный хроматограф с быстросканирующим УФ-дстсктором, снабженный дегазатором, автоматическим пробоотборником и термостатом колонки Весы аналитические с пределом взвешивания до 210 г и пределом допустимой погрешности 0,2 мг    ГОСТ    Р 53228—08

Весы технические с пределом взвешивания до 400 г и допустимой погрешностью 0,1 г    ГОСТ    Р 53228—08

Колбы мерные на 10, 100 и 250 см'    ГОСТ 23932-90

Микродозаторы одноканальные переменного объема от 200 до 1000 мм' и от 1 до 5 см'

Цилиндры мерные на 50 и 100 см'    ГОСТ    23932—90

Примечание. Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы

Ацетонитрил для ВЭЖХ

Вода для лабораторного анализа (би-дистиллированная, деионизованная) н-Гексан, хч

Кислота ортофосфорная, хч Крезоксим-метил с содержанием основного вещества 98,3 %

МУК 4.1.3290-15

Подвижная фаза для ВЭЖХ: смесь ацетонитрила и 0,005 М ортофосфорной кислоты в соотношении 45 : 55 Смесь Jvfe 1: гексан-этилацетат в соотношении 4 : 1 по объему

Этилаиетат, хч    ГОСТ    1138—84

Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующих дополнительной очистки растворителей.

3.3. Вспомогательные устройства и материалы

Аналитическая колонка, заполненная сорбентом с привитой фазой, включающей гидрофильную карбаматную группу в цепи С18, (100x2,1) мм,

1,7 мкм

Вакуумный манипулятор для работы с патронами для твердофазной экстракции

Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 10, 25 см³ Колбы плоскодонные на шлифе вместимостью 100 см³

Патроны, заполненные гидрофильным слабокислотным сорбентом на основе силикагеля

Пробирки полипропиленовые центрифужные с крышками объемом 50 см³ Ротационный вакуумный испаритель с мембранным насосом, с пределом вакуума до 10 мбар

Центрифуга с максимальной рабочей частотой вращения 4000 об./мин Устройство перемешивающее (50—200 колебаний в мин)

Фильтры бумажные быстрой фильтрации

Примечание. Допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

7

4. Требования безопасности

4.1.    При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами поГОСТ 12.1.007-76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019-09, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.

4.2.    Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией, соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313-03 и 2.2.5.2308-07.

Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004-90.

5. Требования к квалификации операторов

Измерения в соответствии с настоящей методикой может выполнять специалист-химик, имеющий опыт работы методом высокоэффективной жидкостной хроматофафии, ознакомленный с руководством по эксплуатации хроматофафа, освоивший данную методику и подтвердивший экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по п. 13.

6. Условия измерений

При выполнении измерений выполняют следующие условия:

•    процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) *С и относительной влажности не более 80 %;

•    выполнение измерений на жидкостном хроматофафе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к определению

7.1. Кондиционирование колонки

Перед началом анализа аналитическую колонку кондиционируют в потоке подвижной фазы (0,1 —0,2 см³/мин) до стабилизации нулевой линии.

8

МУК 4.1.3290-15

7.2. Кондиционирование патронов для твердофазной экстракции

Два патрона соединяют последовательно и промывают 5 см³ смеси 1, затем 5 см³ гексана.

7.3. Приготовление растворов

7.3.1.    0,005 Мраствор ортофосфорной кислоты: (0,5 ± 0,01) г 98 %-й ортофосфорной кислоты помещают в мерную колбу объемом 1 дм³, растворяют в бидистиллированной воде и доводят объем до метки.

7.3.2.    Для приготовления подвижной фазы смешивают ацетонитрил с 0,005 М раствором ортофосфорной кислоты в соотношении 45 : 55 по объёму, используя мерные цилиндры.

7.3.3.    Для приготовления ацетонитрила, насыщенного гексаном, в делительной воронке смешивают ацетонитрил и гексан в соотношении 5:1, встряхивают в течение 2 мин, после разделения слоев нижний ацетонитрильный слой готов к использованию.

7.4. Приготовление основного и градуировочных растворов

7.4.1.    Основной раствор с концентрацией 0,5 мг/см³: точную навеску крезоксим-метила (50 ± 0,5 мг) помещают в мерную колбу вместимостью 100 см³, растворяют в ацетонитриле и доводят объем до метки ацетонитрилом.

7.4.2.    Приготовление градуировочных растворов

Градуировочные растворы с концентрациями крезоксим-

метила 0,1; 0,2; 0,5; 1,0; 2,0 мкг/см³ готовят методом последовательного разбавления по объему, используя раствор подвижной фазы.

7.4.2.1.    Раствор № 1 с концентрацией 2,0 мкг/см³: в мерную колбу вместимостью 100 см³ вносят 0,4 см³ основного раствора и доводят до метки подвижной фазой.

7.4.2.2.    Раствор № 2 с концентрацией 1,0 мкг/см³: в мерную колбу вместимостью 100 см³ вносят 0,2 см³ основного раствора и доводят до метки подвижной фазой.

7.4.2.3.    Раствор № 3 с концентрацией 0,5 мкг/см³: в мерную колбу вместимостью 10 см³ помещают 5,0 см³ раствора № 2 и доводят объем до метки подвижной фазой.

9