Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование _Российской Федерации_
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Определение остаточных количеств тетраконазола в ягодах винограда и виноградном соке методом капиллярной газожидкостной хроматографии
Методические указания МУК 4.1.3211—14
Издание официальное
Москва • 2015
Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Определение остаточных количеств тетраконазола в ягодах винограда и виноградном соке методом капиллярной газожидкостной хроматографии
Методические указания МУК 4.1.3211—14
ББК51.23
062
062 Определение остаточных количеств тетраконазола в ягодах винограда и виноградном соке методом капиллярной газожидкостной хроматографии: Методические указания.—М.: Федеральный центр гиг иены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2015.— 19 с.
ISBN 978- -5—7508—1430—5
1. Разработаны Российским государственным аграрным университетом - МСХА им. К. А. Тимирязева, Учебно-научный консультационный центр «Агроэкология пестицидов и агрохимикатов» Минсельхоза России (В. А. Калинин, Т. С. Калинина).
2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 26 июня 2014 г. № 1).
3. Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А. Ю. Поповой 30 июля 2014 г.
4. Введены впервые.
ББК 51.23
ISBN 978—5—7508—1430—5
© Роспотребнадзор, 2015 © Федеральный центр гигиены и
эпидемиологии Росно1ребнадзора, 2015
МУК 4.1.3211—14
УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главный государственный санитарный врач Российской Федерации
А. Ю. Попова
30 июля 2014 г.
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Определение остаточных количеств тетраконазола в ягодах винограда и виноградном соке методом капиллярной газожидкостной хроматографии
Методические указания МУК 4.1.3211—14
Свидетельство о метрологической аттестации №01.00282-2008/ 0191.19.12.13 от 19.12.2013.
Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода капиллярной газожидкостной хроматографии для определения уровня остаточных количеств тетраконазола в ягодах винограда и виноградном соке в диапазоне 0,25—2,5 мг/кг. Методические указания носят рекомендательный характер.
Название действующего вещества по ИСО: тетраконазол.
Название действующего вещества по ИЮПАК: (Я5)-2-(2,4-дихлор-фснил)-3-( 1Н-1,2,4-триазол-1 -ил)пропил-1,1,2,2-те графгорэгиловый эфир.
Структурная формула:
Эмпирическая формула: C13H11CI2F4N3O. Молекулярная масса: 372,1. 1
Агрегатное состояние: вязкая жидкость.
Цвет, запах: бесцветная жидкость без запаха.
Плотность (при 20 °С): 1,432 г/см1.
Давление паров: 0,18 мПа.
Температура плавления: 6 °С.
Температура кипения: 240 °С (с разложением).
Коэффициент распределения октанол-вода (при 20 °С): Kow log Pow= = 3,56.
Растворимость в воде (мг/дм1, при pH 7 и 20 °С): 156.
Растворимость в органических растворителях (г/дм1, при 20 °С): метанол - более 52; этиловый спирт - 46,7; этилацетат - 42,2; 1,2-дихлорэтан - 41,7; ацетон - 40,3; ксилол 29,9; гексан - 2,4.
Тетраконазол разлагается в разбавленных водных растворах при pH 4—9. Стабилен на солнечном свету в водных растворах.
Краткая токсикологическая характеристика. Тетраконазол относится к веществам мало опасным по острой оральной (ЛД50 для крыс от
1 031 до 1 248 мг/кг) и дермальной токсичности (ЛД50 для крыс более
2 000 мг/кг) и к умеренно опасным веществам по ингаляционной токсичности (ЛК50 (4 ч) для крыс 3 660 мг/м1 воздуха).
Область применения. Тетраконазол - системный фунгицид широкого спектра действия с защитным, куративным и искореняющим действием. Абсорбируется корнями, листьями и стеблем, переносится акропс-тально во все части растения.
Применяется для борьбы с мучнистой росой, с бурой ржавчиной и различными пятнистостями листьев зерновых, с мучнистой росой и паршой яблонь, с мучнистой росой и пятнистостью листьев сахарной свеклы, с мучнистой росой виноградников и огурцов, с мучнистой росой и ржавчиной на овощных и декоративных культурах.
В России установлены следующие гигиенические нормативы: ДСД - 0,003 мг/кг массы человека; ПДК в воде водоемов - 0,01 мг/ дм1; ОДК в почве - 0,4 мг/кг; ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 0,6 мг/м1, в атмосферном воздухе - 0,003 мг/м1; МДУ в продукции (мг/кг): зерно хлебных злаков - 0,2, сахарная свекла - 0,05.
1. Погрешностьнзчерснии
При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций. 2
МУК 4.1.3211—14
Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (п = 20) приведены в табл. 2.
Таблица 1
Метрологические параметры для тетракопазола |
Анализируемый объект |
Диапазон определяемых концентраций, мг/кг |
Показатель точности (граница относительной погрешности) ± S, % Р=0,95 |
Стандартное отклонение повторяемости, <тп % |
Предел повторяемости, г, % |
Предел
воспро
изводи
мости,
Я, % I |
Ягоды
винограда |
0,2—2,5 вкл. |
25 |
5,71 |
15,87 |
22,22 |
Виноградный
сок |
0,25—2,5 вкл. |
25 |
7,05 |
19,60 |
27,44 |
|
Таблица 2 |
Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для тетракопазола |
Анализируемый объект |
Метрологические параметры, Р = 0,95, п - 20 |
11рсдсл обнаружения, мг/кг |
Диапазон определяемых концентраций, мг/кг |
Полнота
извлечения
вещества
% |
Стандартное отклонение S, % |
Доверительный интервал среднего результата
4% |
Ягоды вино-1рада |
0,25 |
0,25—2,5 |
83,80 |
3,56 |
1,40 |
Виноградный сок |
0,25 |
0,25—2,5 |
85,14 |
4,60 |
1,83 |
|
2. Метод измерений
Метод основан на определении тетраконазола методом газожидкостной хроматографии (ГЖХ) с использованием капиллярной колонки с детектором но захвату электронов после его экстракции из образцов органическим растворителем, очистки экстракта перераспределением между двумя несмешивающимися фазами и на колонках с флоризилом.
Идентификация веществ проводится по времени удерживания, а количественное определение - методом абсолютной калибровки.
В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Специфичность обеспечивается подбором колонки и условий программирования. 3
3. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы
3.1. Средства измерений Весы аналитические класса точности по ГОСТ Р 53228-08 - специальный (I), с наибольшим пределом взвешивания до 110 г и дискретностью 0,0001 г Весы лабораторные общего назначения класса точности по ГОСТ Р 53228-08 - средний (III) с наибольшим пределом взвешивания до 600 г и пределом допустимой погрешности ± 0,038 г Колбы мерные на 10, 25, 50, 100, 500 и
1 000 см3 ГОСТ 1770-74
Микрошприц объемом 10 мм3 со шкалой деления 0,1 мм3 и погрешностью измерения вытесняемого объема ± 1 %
Пипетки мерные на 1,0; 2,0; 5,0 см3 ГОСТ 29227-91
Хроматографическая система, включающая:
- хроматограф газовый с детектором посюянной скорости рекомбинации ионов ^Ni с пределом детектирования по Линдану 4 * 10*14 г/см3 и приспособлениями для капиллярной колонки;
- компьютерное программное обеспечение, контролирующее работу всего прибора, обеспечивающее сбор и хранение всех хромато-]рамм в процессе проведения хроматографического анализа, обеспечивающее обработку результатов измерений, вывод и расчет хроматограмм и количественный анализ
Цилиндры мерные на 10, 25 и 50 см3 ГОСТ 1770-74
Примечание. Допускается использование средств измерений с аналогии ными или лучшими характеристиками.
3.2. Реактивы Тетраконазол, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества не менее 96,5 % С AS 112281-77-3
Азот, осч ГОСТ 9293-74
Ацетон, осч ТУ 6-09-3513—86
МУК 4.1.3211—14
Ацетонитрил, осч, УФ-200 нм Вода дистиллированная и (или) бидистиллированная (вола дистиллированная, перегнанная повторно в стеклянной емкости) Гелий, очищенный n-Гексан, хч
Калий марганцово-кислый, чда Метилен хлористый, хч Натрий серно-кислый, безводный, хч Натрий хлористый, хч
Флоризил (магния силикат, 99 %, CAS 1343-88-0) для колоночной хроматографии, зернение 60/100 меш.
Примечание. Допускается использование реактивов с аналогичными или лучшими характеристиками.
3.3. Вспомогательные устройства и материалы Аппарат для встряхивания проб с возвратно-нос гу нательным направлением колебаний, с максимальной загрузкой 10 кг, с амплитудой колебаний 30 мм и скоростью от 10 до 300 колебаний в минуту
Нанки полипропиленовые с крышками для экстракции вместимостью 250 см3 Вата медицинская гигроскопическая
хлопковая нестерильная ГОСТ 5556-81
Воронки делительные на 250 см3 ГОСТ 25336-82
Воронки лабораторные, стеклянные I ОСТ 25336—82
Испаритель ротационный вакуумный с ручным подъемником, с диагональным конденсором и объемом испарительной колбы от 50 до 3 000 см3, с изменяемой скоростью вращения штока испарителя от 5 до 240 об./мин, с водяной баней с антикоррозионным покрытием объемом 5 дм3 и с диапазоном темперагур от 20 до 100°С
Колбы конические плоскодонные на 100,250 и 1 000 см3 ГОСТ 25336-82
Колбы круглодонные со шлифом (концентраторы) на 100,250 и 4 000 см3 ТС ТУ 92-891.029—91 4
Колонка хроматографическая капиллярная из кварцевого стекла, с внутренний диаметром 0,25 мм, длиной 30 м и толщиной пленки 0,25 мкм
Насос диафрагменный, химически стойкий на 100 %, с мощностью электропривода 245 Вт, предельным вакуумом 100 мбар/абс., с избыточным давлением 1 бар и скоростью откачки 34 дм3/мин
Стаканы стеклянные, термостойкие объемом 100—2 000 см3 ГОСТ 25336—82
Установка для перегонки растворителей с круглодонной колбой объемом 4 000 см3 и приемной конической колбой объемом 1 000 см3 Фильтры обеззоленные нейтральные, быстро фильтрующие, диаметром 11 см, зольность одного фильтра 0,00072 г ТУ 6-09-1678 —86
Примечание. Допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.
4. Требования безопасности
4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007—76, требования элсктробезопасности при работе с электроустановками но ГОСТ 12.1.019-09, а также требования, изложенные в технической документации на газовый хроматограф.
4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 90 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313—03 «Предельно допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны». Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004—90.
5. Требования к квалификации операторов
К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются специалисты, имеющие опыт работы в химической лаборатории, прошедшие обучение и владеющие техникой проведения анализа, освоившие метол анализа в процессе тренировки и уложившиеся в нормативы контроля при проведении процедуры контроля погрешности анализа.
МУК 4.1.3211—14
6. Условия измерений
При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
- процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С, относительной влажности не более 80 % и нормальном атмосферном давлении;
- выполнение измерений на жидкостном хромакирафе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.
7. Подготовка к выполнению измерений
Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка растворителей (при необходимости), приготовление растворов, кондиционирование хроматографической колонки, подготовка колонок с флоризилом для очистки экстракта, проверка хроматографического поведения вещества на колонках с флоризилом, установление градуировочной характеристики.
7.1. Подготовка органических растворителей
7. /. /. Очистка ацетонитрила
Ацетонитрил, содержащий воду, предварительно осушают, добавляя в него гранулированный безводный хлористый кальций из расчета не менее 100 г/дм3. Выдерживают его над осушителем в течение 5—6 ч. Затем ацетонитрил сливают с осушителя в круглодонную колбу со шлифом объемом 4 ООО см3 аппарата для перегонки растворителей.
Ацетонитрил перегоняют при температуре 81,5 °С, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 81,5 °С, отбрасывают.
7.1.2. Очистка ацетона
Ацетон помещают в круглодонную колбу со шлифом объемом 4 ООО см3 от аппарата для перегонки растворителей, добавляют к нему марганцово-кислый калий из расчета 1 г/дм3.
Ацетон перегоняют при температуре 56,2 °С, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 56,2 °С, отбрасывают.
7.1.3. Приготовление бидистиллированной воды
Дистиллят помещают в круглодонную колбу со шлифом объемом 4 ООО см3 от аппарата для перегонки растворителей, добавляют к нему марганцово-кислый калий из расчета 1 г/дм3 и кипятят в течение 6 ч.
Собирают фракции, отогнанные при температуре 100,0 °С, а фракции, отогнанные при температуре ниже и выше 100,0 °С, отбрасывают. 5
1
2
3
4
5