Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование _Российской Федерации_
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Определение остаточных количеств индоксакарба в зеленой массе, зерне и масле кукурузы, в семенах и масле подсолнечника, в зеленой массе и корнеплодах сахарной свеклы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
Методические указания МУК 4.1.3206—14
Издание официальное
Москва *2015
Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Определение остаточных количеств индоксакарба в зеленой массе, зерне и масле кукурузы, в семенах и масле подсолнечника, в зеленой массе и корнеплодах сахарной свеклы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
Методические указания МУК 4.1.3206—14
ББК 51.23 0-62
0-62 Определение остаточных количеств индоксакарба в зеленой массе, зерне и масле кукурузы, в семенах и масле подсолнечника, в зеленой массе и корнеплодах сахарной свеклы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: Методические указания.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2015.—27 с.
ISBN 978—5—7508—1408—4
1. Разработаны Российским государственным аграрным университетом - МСХА им. К. А. Тимирязева. Учебно-научный консультационный центр «Агроэкология пестицидов и агрохимикатов» Минсельхоза России (В. А. Калинин, Е. В. Довгилевич, А. В. Довгилсвич, Е. Н. Тестова).
2. Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 26 июня 2014 г. № 1).
3. Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации А. Ю. Поповой 30 июля 2014 г.
4. Введены впервые.
ББК 51.23
ISBN 978—5—7508—1408—4
© Роспотребнадзор, 2015 О Федеральный центр гигиены н
эпидемиологии Роспотребнадзора, 2015
МУК 4.1.3206—14
УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главный государственный санитарный врач Российской Федерации
А. Ю. Попова
30 июля 2014 г.
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Определение остаточных количеств индоксакарба в зеленой массе, зерне и масле кукурузы, в семенах и масле подсолнечника, в зеленой массе и корнеплодах сахарной свеклы методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
Методические указания МУК 4.1.3206—14
Свидетельство о метрологической аттестации №01.00282-2008/ 0168.27.05.13 от 27.05.2013.
Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения уровня остаточных количеств индоксакарба в зеленой массе кукурузы в диапазоне 0,1—1,0 мг/кг, в зерне и масле кукурузы в диапазоне 0,01—0,10 мг/кг, в семенах и масле подсолнечника в диапазоне 0,02—0,20 мг/кг, а также в корнеплодах сахарной свеклы в диапазоне 0,05—0,50 мг/кг и в зеленой массе сахарной свеклы в диапазоне 0,5— 5,0 мг/кг.
Методические указания носят рекомендательный характер.
Название действующего вещества по ИСО: индоксакарб.
Название действующего вещества по ИЮ ПАК: Memn(5)-jV-[7-хлоро-2,3,4а,5-тетрагидро-4а-(метоксикарбонил)индено[1Д-е] [1,3,4] окса-диазин-2-илкарбонил]-4'-(трифторметокси) карбанилат.
Структурная формула:
3
МУК 4.1.3206—14
Эмпирическая формула: C22H17CIF3N3O7.
Молекулярная масса: 527,8.
Агрегатное состояние: порошок.
Цвет, запах: белого цвета.
Давление паров: 2,5 х 10“3 мПа (25 °С).
Коэффициент распределения октанол/вода (при 25 °С): KoW logP = 4,65.
Температура плавления: 88,1 °С.
Растворимость в воде (мг/дм3,25 °С): 0,2.
Растворимость в органических растворителях (г/дм3, при 25 °С): ацетон - более 250; ацетонитрил - 139; метанол - 103; н-октанол - 14,5.
Гидролитически стоек в кислой и нейтральной среде с ДТ50 более 30 дней (pH 5), 38 дней (pH 7), но быстро разрушается в щелочном растворе ДТ50 1 день (при pH 9).
В почве индоксакарб умеренно персистентен, в аэробных условиях ДТ5о от 3 до 23 дней, в анаэробных условиях ДТ50 186 дней. В илистой почве ДТ5о 17 дней.
Краткая токсикологическая характеристика. Индоксакарб относится к умеренно опасным веществам по острой пероральной (ЛД50 для крыс от 268 до 1 732 мг/кг) и по ингаляционной токсичности (ЛК50 для крыс (4 ч) более 2 000 мг/м3) и к мало опасным веществам по дермальной токсичности (ЛД50 для кроликов более 5 000 мг/кг). Не раздражает слизистую глаз и кожу кроликов.
Область применения. Индоксакарб - инсектицид из класса оксадиа-зинов контактного и кишечного действия, блокирует натриевые каналы нервных волокон активным S-изомером. Насекомые прекращают питаться, у них нарушается координация, наступает паралич и затем смерть.
Применяется для борьбы с широким спектром различных бабочек на хлопчатнике, овощных культурах и в фруктовых садах при нормах расхода 12,5—125,0 г/га.
4
МУК 4.1.3206—14
Проходит регистрационные испытания в России в качестве инсектицида для борьбы с вредителями яблоневых садов и виноградников с нормой расхода 0,4—0,5 л/га и пятью обработками за сезон.
В России установлены следующие гигиенические нормативы:
ДСД - 0,01 мг/кг массы человека;
ОДК в почве - 0,9 мг/кг;
ПДК в воде водоемов - 0,015 мг/дм3;
ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 0,3 мг/м3;
ОБУВ в атмосферном воздухе - 0,005 мг/м3;
МДУ в продукции (мг/кг): яблоки - 0,5; томаты - 0,5; семена и масло рапса - 0,05; лук - 2,0.
МДУ в импортируемой продукции (мг/кг): семена и масло подсолнечника - 0,05; зерно и масло кукурузы - 0,02; корнеплоды сахарной свеклы-0,1.
1. Погрешность измерения
При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р - 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций.
Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (п = 20) приведены в табл. 2.
Таблица 1
Метрологические параметры для индоксакарба |
Анализи
руемый
объект |
Диапазон определяемых концентраций, мг/кг |
Показатель точности (граница относительной погрешности) ± 5, % Р ” 0,95 |
Стандартное отклонение повторяемости,
*»% |
Предел
повто
ряемости,
г,% |
Предел воспроизводимости. Л, % |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
Зеленая масса кукурузы |
0,1—1,0 вкл. |
25 |
1,69 |
4,70 |
6,58 |
Зерно кукурузы |
0,01—0,1 вкл. |
50 |
1,72 |
4,78 |
6,70 |
Масло кукурузы |
0,01—0,1 вкл. |
50 |
1,42 |
3,95 |
5,53 |
|
Продолжение табл. 1 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
Семена под-солнечника |
0,02—0,04 вкл. |
50 |
1,34 |
3,73 |
5,22 |
0,1—0,2 вкл. |
25 |
1,50 |
4,17 |
5,84 |
Масло под-солнечника |
0,02—0,04 вкл. |
50 |
1,39 |
3,86 |
5,41 |
0,1—0,2 вкл. |
25 |
2,46 |
6,84 |
9,57 |
Корнеплоды
сахарной
свеклы |
0,05—0,1 вкл. |
50 |
1,70 |
4,73 |
6,62 |
0,2—0,5 вкл. |
25 |
0,95 |
2,64 |
3,70 |
Зеленая мае-са сахарной свеклы |
0,50—1,0 вкл. |
25 |
1,54 |
4,28 |
5,99 |
2,0—5,0 вкл. |
25 |
1,78 |
4,95 |
6,93 |
|
Таблица 2 |
Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для индоксакарба |
Анализируемый
объект |
Метрологические параметры, Р = 0,95, л = 20 |
Предел
обнару
жения,
мг/кг |
Диапазон определяемых концентраций, мг/кг |
Полнота
извлечения
вещества,
% |
Стандартное отклонение, S, % |
Доверительный интервал среднего результата, ±, % |
Зеленая масса кукурузы |
0,10 |
0,1—1,0 |
74,52 |
2,76 |
0,96 |
Зерно кукурузы |
0,01 |
0,01—0,1 |
76,59 |
6,53 |
2,34 |
Масло кукурузы |
0,01 |
0,01—0,1 |
84,95 |
2,63 |
1,05 |
Семена подсолнечника |
0,02 |
0,02—0,2 |
74,73 |
4,60 |
1,61 |
Масло подсолнечника |
0,02 |
0,02—0,2 |
74,01 |
4,79 |
1,66 |
Корнеплоды сахарной свеклы |
0,05 |
0,05—0,5 |
90,77 |
1,31 |
0,56 |
Зеленая масса сахарной свеклы |
0,5 |
0,5-5,0 |
73,40 |
2,31 |
0,80 |
|
2. Метод измерений
Метод основан на определении индоксакарба с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с использованием ультрафиолетового диодно-матричного детектора после его экстракции
МУК 4.1.3206—14
из образцов органическим растворителем, очистки экстракта перераспределением между двумя несмешивающимися фазами, на колонках с окисью алюминия, на концентрирующих патронах № 1 и на колонках с флорозилом.
Идентификация веществ проводится по времени удерживания, а количественное определение - методом абсолютной калибровки.
В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Специфичность обеспечивается подбором состава подвижной фазы и выбором колонок различной полярности.
3. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы
3.1. Средства измерении Весы аналитические класса точности по ГОСТ Р 53228—08 - специальный (I), с наибольшим пределом взвешивания до 110 г и дискретностью 0,0001 г
Весы лабораторные общего назначения класса точности по ГОСТ Р 53228-08 - средний (III) с наибольшим пределом взвешивания до 600 г и пределом допустимой погрешности ± 0,038 г Колбы мерные на 10,25,50,100, 500 и 1 000 см3 ГОСТ 1770-74 Пипетки мерные на 1,0; 2,0; 5,0 см3 ГОСТ 29227-91
рН-метр/милливольтметр с диапазоном измерения 0... 14 pH; ± 1 999 мВ Хроматографическая система, включающая:
- хроматограф жидкостной с диодно-матричным детектором, снабженный термостатом для колонок с диапазоном температур от 15 до
80 °С и стандартным автосамплером с дозирующим объемом от 0,1 до 100 мм3 для автоматического ввода пробы в хроматографическую систему;
- компьютерное программное обеспечение, контролирующее работу всего прибора, обеспечивающее сбор и хранение всех хроматограмм в процессе проведения хроматографического анализа, обеспечивающее обработ-
7
ку результатов измерений, вывод и расчет
хроматограмм и количественный анализ
Цилиндры мерные на 10,25 и 50 см3 ГОСТ 1770—74
Примечание. Допускается использование средств измерений с аналогичными или лучшими характеристиками.
3.2. Реактивы
С AS 144171-61-9 ТУ 6-09-3916—75 ТУ 6-09-2167—84 ГОСТ 6709-72
Индоксакарб, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества не менее 99,6 % Алюминий окись для хроматографии, чистый Ацетонитрил, осч, УФ-200 нм Вода дистиллированная и (или) бидистиллированная (вода дистиллированная, перегнанная повторно в стеклянной емкости) Гелий, очищенный n-Гексан, хч
Калий марганцово-кислый, чда Кальций хлористый, чистый Концентрирующие патроны для твердофазной экстракции с щдрофобным сорбентом с размером частиц 63—200 мкм с привитыми гексаде-цильными (С 16) группами (объем - 1 см3, масса сорбента - 0,6 г) (патрон № 1)
Натрий серно-кислый, безводный, хч Натрий хлористый, хч Флоризил (магния силикат, 99 %) для колоночной хроматографии, зернение 60/100 меш.
Примечание. Допускается использование реактивов с аналогичными или лучшими характеристиками.
3.3. Вспомогательные устройства и материалы
Алонж прямой с отводом для вакуума для работы с концентрирующими патронами ГОСТ 25336-82
Аппарат для встряхивания проб с возвратнопоступательным направлением колебаний, с максимальной загрузкой 10 кг, с амплитудой колебаний 30 мм и скоростью от 10 до 300 колебаний в минуту
МУК 4.1.3206—14
Банки полипропиленовые с крышками для экстракции вместимостью 250 см3 Ванна ультразвуковая с потребляемой мощностью 140 Вт, рабочей частотой 50 Гц, рабочим объемом 4,5 дм3
Вата медицинская гигроскопическая хлопковая нестерильная
Воронки делительные на 250 см3 Воронки лабораторные, стеклянные Испаритель ротационный вакуумный с ручным подъемником, с диагональным конденсором и объемом испарительной колбы от 50 до 3 000 см3, с изменяемой скоростью вращения штока испарителя от 5 до 240 об./мин, с водяной баней с антикоррозионным покрытием объемом 5 дм3 и с диапазоном температур от 20 до 100 °С Колбы конические плоскодонные на 100, 250 и 1 000 см3
Колбы круглодонные со шлифом (концентра-торы) на 100,250 см3 и 4 000 см3 ТС Колонка хроматографическая стальная, длиной 150 мм, с внутренним диаметром 4,6 мм, зернением 3,5 мкм, заполненная сорбентом с привитыми полярными группами С18 Насос диафрагменный, химически стойкий на 100 %, с мощностью электропривода 245 Вт, предельным вакуумом 100 мбар/абс, с избыточным давлением 1 бар и скоростью откачки 34 дм3/мин
Предколонка хроматографическая стальная, длиной 12,5 мм, внутренним диаметром 2,1 мм, зернением 5 мкм, заполненная сорбентом с привитыми полярными группами С8 Стаканы стеклянные, термостойкие, объемом 100—500 см3
Установка для перегонки растворителей с круглодонной колбой объемом 4 000 см3 и приемной конической колбой объемом 1 000 см3