УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

А. Ю. Попова

23 июля 2014 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение массовой концентрации 3-хинолинкарбоиоваи кислота, 1-цикдопропил-6-фтор-1,4-дигидро-8-метокси-7-[(4а5,7а5)-октагидро-6Н-пирроло|3,4-Ь|пиридин-6-ил]-4-оксо-, моногидрохлорнда (моксифлоксинина гидрохлорид) в воздухе рабочей зоны методом спектрофотометрии

Методические указания МУК 4.1.3179—14

Свидетельство о государственной метрологической аттестации №01.00225/205-24-13.

1. Назначение и область применения

Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода спектрофотометрии для измерения массовой концентрации моксифлоксаиина гидрохлорида в воздухе рабочей зоны в диапазоне массовых концентраций 0,25—1,50 мг/м³.

Методические указания по измерению массовой концентрации моксифлоксаиина гидрохлорида в воздухе рабочей зоны методом спектрофотометрии предназначены для использования в санитарно-гигиенических, экологических, лечебных и научных организациях, осуществляющих деятельность в области профпатолопга и экологии человека.

Методические указания носят рекомендательный характер.

2. Характеристика вещества

2,1. Физико-химические свойства Моксифлоксацина гидрохлорид Структурная формула:

о о

Эмпирическая формула: C21H24FN3O4 HCI.

Молекулярная масса 370,38.

Регистрационный номер CAS: 151096-С9-2.

Моксифлоксацина гидрохлорид - светло-желтый или желтый кристаллический порошок, умеренно растворим в воде, малорастворим в этаноле 96 %, практически нерастворим в ацетоне.

Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль.

2.2. Токсикологическая характеристика

Моксифлоксацина гидрохлорид - антибактериальный препарат группы фторхинолонов, умеренно опасен при введении в желудок, малотоксичен при внутрибрюшинном введении, оказывает слабое раздражающее действие на кожу, проявляет слабую функциональную кумулятивную активность.

Ориентировочный безопасный уровень воздействия (ОБУВ) моксифлоксацина гидрохлорида в воздухе рабочей зоны 0,5 мг/м³.

3. Метрологические характеристики

При соблюдении всех регламентных условий и проведении анализа в точном соответствии с прописью методика обеспечивает выполнение измерений массовых концентраций моксифлоксацина гидрохлорида с метрологическими характеристиками, не превышающими значений, представленных в табл. 1 (при доверительной вероятности Т = 0,95).

13. Контроль результатов измерений

13.I. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости

Проверку приемлемости результатов измерений в условиях воспроизводимости проводят:

а)    при возникновении спорных ситуаций между двумя лабораториями:

б)    при проверке совместимости результатов измерений, полученных при сличительных испытаниях {при проведении аккредитации лабораторий и инспекционного контроля).

Для проведения проверки приемлемости результатов измерений в условиях воспроизводимости каждая лаборатория использует пробы, оставленные на хранение.

11риемлемость результатов измерений, полученных в двух лабораториях, оценивают сравнением разности этих результатов с критической разностью CDo.oj по формуле:

<CD_{0 W}, где

Сср!г С_ср2 - средние значения массовой концентрации моксифлскса-цика гидрохлорида, полученные в первой и второй лабораториях, мг/м³;

СД,_И - значение критической разности, % (табл. 1).

Если критическая разность не превышена, то приемлемы оба результата измерений, проводимых двумя лабораториями, и в качестве окончательного результата используют их среднеарифметическое значение. Если критическая разность превышена, то выполняют процедуры, изложенные в ГОСТ Р ИСО 5725-6-02 {п. 5.3.3).

При разногласиях руководствуются ГОСТ Р ИСО 5725-6-02 (п. 5.3.4).

13.2. Контроль качества результатов измерений при реализации методики в лаборатории Контроль качества результатов измерений в лаборатории при реализации методики осуществляют по ГОСТ Р ИСО 5725-6-02, используя контроль стабильности среднеквадратического (стандартного) отклонения повторяемости по п. 6.2.2 ГОСТ Р ИСО 5725-6-02 и показателя правильности по п. 6.2.4 ГОСТ Р ИСО 5725-6 —02.

Рекомендуется устанавливать контролируемый период так, чтобы количество результатов контрольных измерений было от 20 до 30.

При неудовлетворительных результатах контроля, например, при превышении предела действия или регулярном превышении предела предупреждения выясняют причины этих отклонений, в том числе проводят смену реактивов, проверяют работу оператора.

Разработаны сотрудниками ГБОУ ВПО РНИМУ им. Н. И. Пирогова Минздрава России ({Иванов Н. Г.Ь, ОАО «ВНЦ БАВ» (Голубева М. И., Крымова Л. И.) и ЗАО «Алгама» (Сергеюк Н. П.).

Таблица 1 Метрологические параметры

Диапазон измерений массовой концентрации моксифлоксацина гидрохлорида, мг/м3 Показатель точности (границы относительной погрешности), ± 6, %, при Р = 0,95 Показатель повторяемости (относительное средиеквад-ратическое отклонение повторяемости), ог,% Показатель воспроизводимости (относительное срсднсквадра-тическос отклонение воспроизводимости), 0*,% Предел повторяемости, г, %, Р = 0,95, я = 2 Критическая разность для результатов анализа, полученных в двух лабораториях, СПо.от» % (л,» л,» 2) От 0,25 до 1,5 вкл. 25 5 8 14 20

4. Метод измерений

Измерение массовой концентрации моксифлоксацина гидрохлорида выполняют методом спектрофотометрии.

Метод определения основан на способности растворов моксифлоксацина гидрохлорида в воде поглощать УФ-излучение.

Измерение производят при длине волны 292 нм.

Отбор проб проводят с концентрированием на фильтры аналитические аэрозольные.

Нижний предел измерения содержания моксифлоксацина гидро-хлорида в анализируемом объеме пробы - 20 мкг.

Нижний предел измерения массовой концентрации моксифлоксацина гидрохлорида в воздухе - 0,25 мг/м³ (при отборе 80 дм³ воздуха).

Метод специфичен в условиях производства таблеток с использованием моксифлоксацина в качестве активной субстанции. Определению не мешают вспомогательные вещества, входящие в состав лекарственной формы (таблетки): целлюлоза микрокристаллическая, кальция гидрофосфат (кальция гидрофосфат безводный), кроскармеллоэа натрия (карбоксиметилцеллюлоза натрия), поаидон К30 (поливинилпирроли-дон)| магния стеарат.

5. Средства измерении, реактивы, вспомогательные устройства н материалы

5.7. Средства измерений Спектрофотометр. Диапазон измерений (54 ООО—11 ООО) см^-1, воспроизводимость волновых чисел (± 1,5) %

Весы лабораторные 2-го класса точности, с наибольшим пределом взвешивания 200 г, диапазон взвешивания по шкале 1—100 мг, цена деления шкалы 1 мг, погрешность взвешивания по шкале ± 0,15 мг Набор гирь

Аспирационное устройство двухканальное с диапазоном расхода 2,0—20,0 дм³/м>ш н пределом допусгимой погрешности ± 5 %

Колбы мерные 2-50-2,2-100-2 Пипетки I-1-2-1, М-2-5, 1-1-2-10 Пробирки мерные с пришлифованными пробками Секундомер

Примечание. Допускается использование средств измерений с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

5.2. Реактивы Моксифлоксаиина гидрохлорид с содержанием основного вещества не менее 98 % в соответствии с ФС 000130-200911

Вода дистиллированная    ГОСТ 6709-72

Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией.

5.3. Вспомогательные устройства и материалы Аналитические аэрозольные фильтры гидрофильные на основе ацетилцеллюлозы с площадью рабочей поверхности 10 см² (фильтры) ТУ 95-1892—89 Фильтродержатели    ТУ 95.72.05—77

Фильтры бумажные обеззоленные средней плот-мости (фильтры бумажные)

Бкжсы стеклянные Палочки стеклянные Воронки химические

Кюветы кварцевые с толщиной оптического слоя 10 мм

Дистиллятор    ГОСТ    Р    50444

Шкаф суш ильный    ТУ 61 -1 -721 —79

Примечание. Допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

6. Требования безопасности

6.1.    При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работы с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.007-76, ГОСТ 12.1.005-88 с изменением 1.

6.2.    При проведении анализов горючих и вредных веществ должны соблюдаться требования противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004—91. Должны быть в наличии средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-90. Необходимо провести обучение работающих правилам безопасности труда согласно ГОСТ 12.0.004-90.

6.3.    При выполнении измерений с использованием спектрофотометра соблюдают правила элсктробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019—09 и инструкцией по эксплуатации прибора.

6.4.    Помещение лаборатории должно быть оборудовано приточновытяжной вентиляцией. Содержание вредных веществ в воздухе рабочей зоны не должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313—03 и ГН 2.2.5.2308—07.

7. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений и обработке их результатов допускается специалист, имеющий высшее образование, опыт работы в химической лаборатории, прошедший обучение и владеющий техникой спектрофотометрическою анализа, освоивший метод анализа и уложившийся в нормативы оперативного контроля при проведении процедур контроля погрешности анализа.

8. Условии измерений

8.1.    Процессы приготовления растворов и подготовку проб к анализу проводят в следующих условиях:

-    температура воздуха (20 ± 5) °С;

-    атмосферное давление (84—106) кПа;

-    относительная влажность воздуха не более 80 %.

8.2.    Выполнение измерений на спектрофотометре проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

9. Подготовка к выполнению измерений

Перед выполнением измерений проводят следующие работы: подготовка посуды, приготовление растворов, подготовка спектрофотометра, установление градуировочной характеристики, контроль стабильности градуировочной характеристики, отбор проб воздуха.

9.1. Подготовка посуды

Стеклянную посуду несколько раз промывают водопроводной водой , заливают хромовой смесью и выдерживают 1 ч. После этого посулу извлекают из хромовой смеси, ополаскивают несколько раз водопроводной водой, затем дистиллированной водой и сушат в сушильном шкафу. Чистую посуду хранят в закрытом виде.

9.2. Приготовление растворов

9.2.1.    Основной стандартный раствор моксифлоксацина гидрохлорида с концентрацией 500 м кг/см³    готовят растворением

(0,05000 ± 0,00015) г моксифлоксацина гидрохлорида в воде дистиллированной в мерной колбе вместимостью 100 см³.

Раствор устойчив в течение месяца при хранении в холодильнике.

9.2.2.    Рабочий стандартный раствор моксифлоксацина гидрохлорида № 1 с концентрацией 200 мкг/см³ готовят разбавлением 20 см³ основного стандартного раствора моксифлоксацина гидрохлорида водой дистиллированной в мерной колбе вместимостью 50 см⁵.

Раствор устойчив в течение двух недель при хранении в холодильнике.

9.3. Подготовка прибора Подготовку спектрофотометра проводят в соответствии с руководством по его эксплуатации.

9.4. Установление градуировочной характеристики Г радуировочную характеристику, выражающую зависимость оптической плотности раствора от массы моксифлоксацина гидрохлорида, устанавливают по шести сериям измерений по семи концентрациям вещества в каждой серии (табл. 2).

Таблица 2

Растворы для установления градуировочной характеристики при определении моксифлоксацина гидрохлорида

Номер градуиро вочного раствора Объем основного стандартного раствора моксифлоксацина гидрохлорида с массовой концентрацией 500 мкг/см3, см3 Объем рабочего стандартного раствора мок-сифлоксацила гидрохлорида № 1 с массовой концентрацией 200 мкг/см3, см3 Содержание моксифлоксациня гидрохлорида в градуировочном растворе, мкг 1 0,00 0,00 0,0 2 0,00 0,10 2С,0 3 0,00 0,15 30,0 4 0,00 0,20 40,0 5 0,00 0,30 60,0 6 h 0,16 0,00 80,0 7 0,20 0,00 100,0 8 0,24 0,00 120,0

Градуировочные растворы устойчивы в течение суток.

На фильтры, помещенные в бюксы, пипеткой вместимостью 1 см³ наносят основной стандаргный раствор моксифлоксацина гидрохлорида с массовой концентрацией 500 мкг/см³ или рабочий стандартный раствор моксифлоксацина гидрохлорида № 1 _с массовой концентрацией 200 мкг/см³ в соответствии с табл. 2. Для добавления воды дистиллированной используют пипетку вместимостью 5 см³. Фильтры подсушивают при комнатной температуре, приливают по 5 см³ воды дистиллированной и оставляют на 15 мин, периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения вещества. Затем фильтр тщательно отжимают, растворы сливают в пробирки мерные вместимостью 10 см³. Фильтры повторно обрабатывают 5 см³ воды дистиллированной, оставляют на 15 мин, периодически помешивая стеклянной палочкой, затем

тщательно отжимают и удаляют. Раствори объединяют и доводят водой дистиллированной объем до 10 см³.

Оптическую плотность полученных градуировочных растворов измеряют в кювете с толщиной поглощающего слоя 10 мм при длине волны 292 нм по отношению к раствору сравнения, не содержащему определяемого вещества (табл. 2, раствор № I).

Строят градуировочную характеристику: на ось ординат наносят средние значения оптических плотностей градуировочных растворов, на ось абсцисс - соответствующие им величины содержания моксифлокса-цина гидрохлорида (мкг).

9.5. Контроль стабильности градуировочной характеристики Контроль стабильности градуировочной характеристики проводят не реже 1 раза в квартал, а также при смене реактивов и изменении условий анализа (после ремонта и поверки прибора). Один раз в год ipa-дуировочную характеристику устанавливают заново.

Для контроля стабильности готовят три градуировочных раствора по л. 9.4 (в начале, середине и конце диапазона измерений) и анализируют в точном соответствии с прописью методики.

Градуировочную характеристику считают стабильной, если дпя каждого контрольного образца выполняется условие:

Ай*. А* - значение оптической плотности моксифлоксацина гидрохлорида в образце для контроля, измеренное и найденное по градуировочной характеристике соответственно;

K_v - норматив контроля, К# = 0,5 • 5, где ± б- границы относительной погрешности, % (табл. 1).

Если условие стабильности не выполняется только для одного образца, то выполняют повторное измерение этого образца с целью исключения результата, содержащего грубую ошибку.

Если градуировочная характеристика не стабильна, выясняют причины нестабильности и повторяют контроль стабильности с использованием других образцов для установления градуировочной характеристики, предусмотренных методикой. При повторном обнаружении нестабильности градуировочной характеристики еб устанавливают заново.

P.d Отбор проб воздуха

Отбор проб проводят с учетом требований ГОСТ 12.1.005-88 с изменением 1 «ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны» и руководства Р 2.2.2006—05 (прилож. 9) «Общие методические требования к организации и проведению контроля содержания вредных веществ в воздухе рабочей зоны», раздел 2 «Контроль соответствия максимальным ПДК».

Одновременно отбирают две параллельные пробы.

Возду х с объемным расходом 10 дм³/мин аспирируют через фильтр, помещенный в фмльтродержатель, снабженный металлической сеткой. Для измерения ‘Л ОБУВ моксифлоксацина гидрохлорида необходимо отобрать не менее 80 дм³ воздуха в течение 8 мин.

Отобранные пробы могут храниться в бюксах а течение трех дней.

10. Выполнение измерения

Фильтр с отобранной пробой переносят в бюкс и заливают 5,0 см³ воды дистиллированной. Оставляют на 15 мин, периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения вещества. Затем фильтр отжимают, раствор сливают в другой бюкс. Фильтр повторно заливают 5,0 см³ воды дистиллированной, оставляют на 15 мин, периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения вещества, затем тщательно отжимают и удаляют. Оба раствора последовательно фильтруют на химической воронке через фильтр бумажный в мерную пробирку вместимостью 10 см³, доводят до метки водой дистиллированной и далее анализ проводят аналогично градуировочным растворам.

Оптическую плотность получаемых анализируемых растворов измеряют в кювете с толщиной поглощающего слоя 10 мм при длине волны 292 нм по отношению к раствору сравнения, используя чистый фильтр. Раствор сравнения необходимо предварительно профильтровать через фильтр бумажный.

Количественное определение содержания моксифлоксацина гидрохлорида (мкг) в анализируемом объеме раствора пробы проводят по предварительно построенной градуировочной характеристике.

Примечание. Фильтрование растворов анализируемых проб проводится для удаления нерастворимых в воде вспомогательных веществ, входящих в состав таблеток, содержащих моксифлоксацина гидрохлорид.

11. Вычисление результатов измерений

Массовую концентрацию моксифлоксацина гидрохлорида в воздухе рабочей зоны С, мг/м³, вычисляют по формуле:

(2)

а - содержание моксифлоксацина гидрохлорида в анализируемом объеме раствора пробы, найденное по градуировочной характеристике, мкг;

- объем воздуха, отобранный для анализа (дм³), приведенный к стандартным условиям (прилож. 1).

За результат измерений принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, если выполняется условие приемлемости:

<С,+С₂)

С/, С} — результаты параллельных определений массовой концентрации моксифлоксацина гидрохлорида в воздухе, мг/м³; г - значение предела повторяемости, % (табл. 1).

Если условие не выполняется, выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и повторяют выполнение измерений в соответствии с требованиями методики измерений.

12. Оформление результатов измерения Результат количественного химического анализа представляют в виде:

С ± 0.01 • 6-С, при/*= 0,95, где

С - среднее арифметическое значение результатов п определений, признанных приемлемыми, мг/м³,

±6-границы относительной погрешности измерений, % (табл. 1). Если полученный результат измерений ниже нижней (выше верхней) 1рашшы диапазона измерений, то производят следующую запись в журнале: «массовая концентрация моксифлоксацина гидрохлорида менее 0.25 мг/м¹ (более 1,25 мг/м¹)*.