МУК 4.1.3100-13
Определение остаточных количеств бифеназата и D 3598 в воде, почве, яблоках и яблочном соке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

I осударст венное санитарно-эпидемиологическое нормирование _Российской    Федерации_

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств бифеназата и D 3598 в воде, почве, яблоках и яблочном соке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3100—13

Издание официальное

Москва * 2014

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств бифеназата и D 3598 в воде, почве, яблоках и яблочном соке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3100—13

ББК 51.21+51.23

060

060 Определение остаточных количеств бифеназата и D 3598 в воде, почве, яблоках и яблочном соке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: Методические указания.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2014.—28 с.

ISBN 978-5—7508—1237-0

1.    Разработаны Российским государственным аграрным университетом -МСХА им. К. А. Тимирязева, Учебно-научный консультационный центр «Агроэкология пестицидов и агрохимикатов» Минсельхоза России (В. А. Калинин,

Е. В. Довгилевич. А. В. Довгилевич, Н. В. Устименко).

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере зашиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 30 мая 2013 г. №1).

3.    Утверждены руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г. Г. Онищенко 8 августа 2013 г.

4.    Введены в действие с момента утверждения.

5.    Введены впервые.

ББК 51.21+51.23

Редактор Н. В. Кожока Технический редактор Е. В. Ломанова

Подписано в печать 23.01.14 Формат 60x88/16    Печ. л.    1,75

Т ираж 200 экз.    Заказ    5

Федеральная служба по надзору в сфере зашиты прав потребителей и благополучия человека 127994, Москва, Вадковский пер., я 18, сгр. 5,7

Оригинал-макет подготовлен к печати и тиражирован отделом издательского обеспечения Федерального центра гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора 117105, Москва, Варшавское ш., 19а Отделение реализации, тел./факс 8(495)952-50-89

С Роспотребнадзор, 2014 С Федеральный центр гигиены и

эпидемиологии Роспотребнадзора, 2014

МУК 4.1.3100—13

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

Г. Г. Онищенко

8 августа 2013 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств бифеназага и D 3598 в воде, почве, яблоках и яблочном соке методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3100—13

Свидетельство о метрологической аттестации от 4.10.2012 № 01.00282-2008/0133.04.10.12.

Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовых концентраций бифеназата и D 3598 в воде в диапазоне 0,005—0,05 мг/дм³ и в почве в диапазоне 0,01—0,1 мг/кг, а также уровня их остаточных количеств в яблоках и яблочном соке в диапазоне 0,01—0,1 мг/кг.

Методические указания носят рекомендательный характер.

Название действующего вещества по ИСО: бифеназат.

Название действующего вещества по ИЮПАК: Изопропил 3-(4-метоксибифенил-3-ил)карбазат.

Структурная формула:

NHNH-COOCH(CH₃)₂

ОЧ>^снз

Эмпирическая формула: C17H20N2O3.

Молекулярная масса: 300,4.

Агрегатное состояние: кристаллическое вещество.

Цвет, запах: белый, без запаха.

Давление паров: 1 х 10“² мРа (25 °С).

Коэффициент распределения октанол-вода. log 3,4 (25 °С, pH 7).

Температура плавления: 123—125 °С.

Растворимость в воде (мг/дм³, при 20 °С): 2,06.

Растворимость в органических растворителях (г/дм³, 20 °С): этил-ацетат - 102; ацетонитрил - 95,6; метанол - 44,7; толуол - 24,0; н-гексан -0,232.

Бифеназат стабилен не более 1 года при температуре 20 °С и относительной влажности 50 %.

Подвергается гидролизу (при 25 °С): DT₅₀ составляет 9—10 дней (pH 4); 5,4 дня (pH 5); 0,8 дня (pH 7), 0,08 дня (pH 9) и фотолизу (25 °С, pH 5): DTso составляет 17 ч.

Бифеназат - основание с рКа - 12,94 (23 °С).

Основной метаболит бифеназата - D 3598.

Ы-(4-метоксибифенил-3-ил)диазенкарбоновой кислоты изопропиловый эфир.

Эмпирическая формула: С|7Н_|8Ы₂0з.

Молекулярная масса: 298,3.

Другие физико-химические свойства D 3598 не представлены.

Краткая токсикологическая характеристика. Бифеназат относится к мало опасным веществам по острой пероральной (ЛДю для крыс составляет более 5 000 мг/кг) и дермальной (ЛД50 для крыс составляет более 2 000 мг/кг) токсичности, но к умеренно опасным по ингаляционной токсичности (ЛК₅₀ для крыс (4 ч) - более 4 400 мг/м³ воздуха). Вызывает слабое покраснение кожи и глаз у кроликов, раздражает кожу и слизистую оболочку глаз. Не является мутагеном. Не обладает тератогенной активностью для крыс и кроликов, не является канцерогеном для крыс и мышей.

Обчасть применения. Бифеназат - несистемный акарицид с контактным действием и продолжительным последействием, рекомендуется к применению для борьбы с насекомыми на стадии яиц и личинок на

N N -СООСН(СН₃)₂

4

МУК 4.1.3100—13

плодовых деревьях (яблони, груши, цитрусовые), орехах, овощах, декоративных культурах, хлопке и кукурузе.

В России для бифеназата установлены следующие гигиенические нормативы: ВДСД - 0,01 мг/кг массы человека; ВМДУ для импортной продукции (мг/кг): хлопок (семена) - 0,3; изюм, перец сладкий, плодовые косточковые, клубника - 2,0; овощи со съедобными плодами, тыквенные, томат - 0,5; виноград, плодовые семечковые - 0,7; хмель сухой - 20,0; перец Чили - 3,0; орехи - 0,2; мясо млекопитающих (кроме морских), молочный жир - 0,05; молоко, птица (мясо, субпродукты) - 0,01; мята - 40,0; яйца, субпродукты (млекопитающих) - 0,001; миндаль в шелухе - 10,0.

1. Погрешность измерений

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р - 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. I и 2 для соответствующих диапазонов концентраций.

Полнота извлечения веществ, стандартное отклонение, доверительные интервалы среднего результата для полного диапазона концентраций (гг = 20) приведены в табл. 3 и 4.

Таблица 1

Метрологические параметры для бифеназата

Анали

зируе

мый

объект

Диапазон определяемых концентраций, мг/кг (мг/дм³)

Показатель точности (граница относительной погрешности), ±8, %,/> = 0.95

Стандартное отклонение повторяемости, а_г, %

Предел

повто

ряемос

ти,

г,%

Предел

воспро

изводи

мости.

R.%

Норматив оперативного контроля точности. К. мг/кг (мг/дм*) (/> = 0.95. т ** 2)

Вода

0,005-0,01 вкл.

40

2,36

6,56

9,19

0.47 • А'*

0,01—0,05 вкл.

30

1,50

4,17

5,84

0.36 А'*

Почва

0,01—0,1 вкл.

50

1,53

4,25

5,96

0,59 А'*

Яблоки

0,01—0,1 вкл.

50

4,26

11,84

16,58

0.59 X'

Яблочный сок

0,01—0,1 вкл.

50

2,19

6,09

8,52

0.59 • .V’

* X - среднее значение массовой концентрации бифеназата в пробе (мг/дм. мг/кг)

5

Таблица 2

Метрологические параметры для D 3S98 (в виде бифеназата)

Анали

зируе

мый

объект

Диапазон определяемых концентраций, мг/кг (мг/дм³)

Показатель точности (граница относительной погрешности), ±<5, %, Я = 0,95

Стандартное отклонение повторяемости, *„%

Предел

повто

ряемо

сти,

Гу %

Предел

воспро

изводи

мости,

R,%

Норматив оперативного контроля точности, к, мг/кг (мг/дм³) (Р = 0,95, m “ 2)

Вода

0,005—0.01 вкл.

40

1.48

4,11

5,76

0,47 • X⁹

0,01—0,05 вкл.

30

0,94

2,61

3,66

0,36-**

Почва

0,01—0,1 вкл.

50

1,97

5,48

7,67

0,59 • X *

Яблоки

0,01—0,1 вкл.

50

1,65

4,59

6,42

0,59 - ЛГ*

Яблочный сок

0,01—0,1 вкл.

50

2,35

6,53

9,15

0,59 • X*

* X - среднее значение массовой концентрации D 3598 (в виде бифеназата) в пробе (мг/дм³, мг/кг)_____ _

Таблица 3

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднег о результата для бифеназата

Анализи

руемый

объект

Метрологические параметры, Р = 0,95, п~ 20

Предел обнаружения, мг/кг (мг/дм³)

Диапазон определяемых концентраций, мг/кг

Среднее значение определения, %

Стандартное отклонение, 5, %

Доверительный интервал среднего результата, ±, %

Вода

0,005

0,005—0,05

89,49

2,18

0,91

Почва

0,01

0,01-0,1

74,75

2,14

0,75

Яблоки

0,01

0,01—0,1

81,94

3,99

1.53

Яблочный

сок

0,01

0,01—0,1

85,91

1,99

0,80

6

Таблица 4

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для D 3598 (в виде бифеназата)

Анализируемый объект

Метрологические параметры, Р = 0,95, п = 20

Предел

обнаруже

ния,

мг/кг

Диапазон определяемых концентраций, мг/кг

Среднее значение определения, %

Стандартное отклонение,

5, %

Доверительный интервал среднего результата. ±. %

Вода

0,005

0,005—0,05

90,88

1,90

0.81

Почва

0,01

0,01—0,1

73,75

1,99

0.69

Яблоки

0,01

0,01—0,1

84,89

1,98

0.79

Яблочный

сок

0,01

0,01—0,1

85,82

1,74

0.70

2. Метод измерений

Метод основан на определении бифеназата и D 3598 с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на обращенной фазе с использованием ультрафиолетового детектора после его экстракции из образцов органическим растворителем, очистки экстракта перераспределением между двумя несмешивающимися фазами и на концентрирующих патронах № 1 и 2. D 3598 определяют в виде бифеназата после восстановления его аскорбиновой кислотой.

Идентификация веществ проводится по времени удерживания, а количественное определение - методом абсолютной калибровки.

В предлагаемых условиях анализа метод специфичен. Специфичность обеспечивается подбором состава подвижной фазы и выбором колонок различной полярности.

3. Средства измерений, реактивы, вспомогательные устройства и материалы

3.1. Средства измерений Весы аналитические класса точности - специальный (I), с наибольшим пределом взвешивания до 110 г и дискретностью 0,0001 г    ГОСТ Р 53228-08

Весы лабораторные общего назначения класса точности - средний (III) с наибольшим пределом

7

МУК 4.1.3100—13

взвешивания до 600 г и пределом допустимой

погрешности ± 0,038 г    ГОСТ    Р 53228—08

Колбы мерные на 10,25, 50,100,500 и 1 000 см³ ГОСТ 1770-74

Микрошприц объемом 100 мм³ со шкалой

деления 0,001 см³ и погрешностью менее 1 %

от номинального объема

Пипетки мерные на 1,0; 2,0; 5,0 см³    ГОСТ 29227-91

рН-метр/милливольтметр с диапазоном измерения 0... 14 pH; ± 1 999 мВ Хроматографическая система, включающая:

-    хроматограф жидкостный, снабженный термостатом для колонок с диапазоном температур от 15 до 80 °С, с ультрафиолетовым детектором с изменяемой длиной волны и чувствительностью не ниже 0,005 единиц адсорбции на шкалу;

-    компьютерное программное обеспечение, контролирующее работу всего прибора, обеспечивающее сбор и хранение всех хроматограмм в процессе проведения хроматографического анализа, обеспечивающее обработку результатов измерений, вывод и расчет хроматограмм и количественный анализ

Цилиндры мерные на 10,25 и 50 см³    ГОСТ 1770-74

Примечание. Допускается использование средств измерений с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы Бифеназат, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества не менее 99,8 %

D 3598, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества не менее 99,95 %

Ацетон, осч

Ацетонитрил, осч, УФ-200 нм Вода дистиллированная и (или) бидистиллиро-ванная (вода дистиллированная, перегнанная повторно в стеклянной емкости)

Гелий, очищенный n-Гексан, хч

Калий марганцово-кислый, чда Кальций хлористый, ч

ТУ 6-09-3513—86 ТУ 6-09-2167—84

ГОСТ 6709-72 ТУ 51-940—80 ТУ 6-09-3818—89 ГОСТ 20490-75 ТУ 6-09-4711—81

8

МУК 4.1.3100—13

Кислота аскорбиновая Кислота уксусная, ледяная Концентрирующие патроны для твердофазной экстракции с гидрофобным сорбентом с размером частиц 63—200 мкм с привитыми гексадсцильны-ми (С 16) группами (объем - 1 см³, масса сорбента - 0,6 г) (патрон № 1)

Концентрирующие патроны для твердофазной экстракции со слабоосновньгм сорбентом с размером частиц 63—200 мкм с привитыми аминогруппами (объем - 1 см³, масса сорбента - 0,6 г) (патрон № 2)

Натрий сернокислый, безводный, хч Натрий хлористый, хч Полиэтиленгликоль 400, CAS 25322-68-3 Эфир диэтиловый

ФС 42-2668—95 ГОСТ 61-75

ТУ 4215-002-05451931—94

ТУ 4215-002-05451931 —94 ГОСТ 4166-76.

ГОСТ 4233-77.

ФС 42-3643—98

Примечание. Допускается использование реактивов с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.3. Вспомогательные устройства и материалы. Алонж прямой с отводом для вакуума (АО-14/23) для работы с концентрирующими патронами ГОСТ 25336-82 Аппарат для встряхивания проб с возвратнопоступательным направлением колебаний, с максимальной загрузкой 10 кг, с амплитудой колебаний 30 мм и скоростью от 10 до 300 колебаний в минуту

Банки полипропиленовые с крышками для экстракции вместимостью 250 см³ Ванна ультразвуковая с потребляемой мощностью 140 Вт, рабочей частотой 50 Гц, рабочим объемом 4,5 дм³

Вата медицинская гигроскопическая хлопковая нестерильная    ГОСТ 5556-81

Воронки делительные на 250 см³    ГОСТ 25336-82

Воронки лабораторные стеклянные    ГОСТ 25336-82

Испаритель ротационный вакуумный с ручным подъемником, с диагональным конденсором и объемом испарительной колбы от 50 до 3 000 см³, с изменяемой скоростью вращения штока

9