МУК 4.1.3091-13
Измерение концентраций флуксапироксада в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование _Российской    Федерации_

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение концентраций флуксапироксада в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3091—13

Издание официальное

Москва • 2013

Федеральная служба по надзору в сфере зашиты прав потребителей и благополучия человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение концентраций флуксапироксада в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4Л.3091—13

ББК 51.21 И37

ИЗ7    Измерение концентраций флуксапироксада в воздухе ра

бочей зоны и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: Методические указания.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2013.—16 с.

ISBN 978—5—7508— 1222—6

1.    Разработаны ФБУН «Федеральный научный центр гигиены им. Ф. Ф. Эрисмана» Роспотребнадзора (Т. В. Юдина, Н. Е. Федорова,

В. Н. Волкова).

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 30 мая 2013 г. № 1).

3.    Утверждены Руководителем Федеральной службы но надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Глав там государственным санитарным врачом Российской Федерации Г. Г. Онищенко 29 июля 2013 г.

4.    Введены впервые.

ББК S1.21

Редактор Л. С. Кучурова Технический редактор Е. В. Ломанова

Подписано в печать 04.10.13 Формат 60x88/16    Печ.    л. 1,0

Тираж 200 экз.    Заказ    58

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 127994, Москва, Вадковский пср., л 18, стр. 5,7

Оригинал-макет подготовлен к пе'ши и тиражирован отделом издагельского обеспечения Федерального центра гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора 117105, Москва, Варшавское ш., 19а Отделение реализации, тел./факс (495)952-50-89

О Роспотребнадзор, 2013 С Федеральный центр гигиены и

эпидемиологии Роспотребнадзора, 2013

МУК 4.1.3091—13

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

Г. Г. Онищенко

29 июля 2013 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение концентраций флуксанироксада в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3091—13

Свидетельство об аттестации от 9.10.2012 №01.00282—2008/ 0141.09.10.12.

Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов массовой концентрации флуксапироксада в диапазонах 0,05— 0,5 мг/м³ и ОД—2,0 мкг/емьш соответственно.

Методические указания носят рекомендательный характер.

Название действующего вещества по ИСО: флуксапироксад.

Название действующего вещества по ИЮПАК: З-Дифторметил-1-метил-Ы-(3',4',5'-трифторбифенил-2-ил)-1Н-пиразол-4-карбоксамид.

Структурная формула:

3

Эмпирическая формула: C18H12F5N3O.

Молекулярная масса: 381,31.

Твердое порошкообразное вещество бежевого цвета без запаха. Температура плавления 156,8 °С. Давление паров 2,7х10“⁷мПа (при 25 °С). Растворимость в органических растворителях при 20 °С (в г/дм³): ацетон - 250; ацетонитрил > 100; дихлорметан > 100; метанол - 53,4; толуол - 20,0; этилацетат - 123,3. Растворимость в воде при 20 °С (в мг/дм³): 3,78. Флуксапироксад гидролитически стабилен при pH 4—9.

Краткая токсикологическая характеристика

Острая пероральная токсичность (LD50) для крыс > 2 000 мг/кг, острая дермальная токсичность (LD50) для крыс > 2 000 мг/кг; острая ингаляционная токсичность (LC50) для крыс > 5,1 мг/дм³.

Область применения

Флуксапироксад - системный фунгицид, относится к классу пира-золкарбоксамидов, рекомендуется для борьбы с комплексом болезней зерновых культур.

1. Погрешность измерений

Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью, не превышающей ±25 %, при доверительной вероятности 0,95.

2. Метод измерений

Измерения концентраций флуксапироксада выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на обращенной фазе с ультрафиолетовым детектором.

Концентрирование вещества из воздуха осуществляют на бумажный фильтр, экстракцию с фильтров выполняют ацетоном. Смыв с кожных покровов проводят этиловым спиртом.

Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 2 нг. Средняя полнота извлечения с фильтров - 96,71 %, с поверхности кожи - 86,76 %.

3. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы н материалы

3.1. Средства измерений Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором с переменной длиной волны Барометр-анероид с диапазоном измерения атмосферного давления 5—790 мм рт. ст.    ТУ 2504-1797—75

Весы аналитические, с пределом взвешивания 110 г и пределом допустимой погрешности 0,001 г ГОСТ Р 53228-08

МУК 4.1.3091—13

Гигрометр психометрический с диапазоном измерений относительной влажности от 30 до 90%

Колбы мерные 2-100-2 и 2-1000-2 Меры массы

Пипетки градуированные 2-го класса точности вместимостью 1,0; 2,0; 5,0; 10,0 см³ Пробоотборное устройство 2-канальное, с диапазонами расхода 0,2—1,0 дм³/мин и 5,0— 1,0 дм³/мин и пределом допустимой погрешности ± (5—7) %

Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2, цена деления 1 °С, пределы измерения 0—55 °С Цилиндры мерные 2-го класса точности вместимостью 500 и 1 000 см³

ТУ 25-11-1645—84 ГОСТ 1770-74 ГОСТ OIML R 111-1—09

ГОСТ 29227-91

ТУ 25-2021.003—88 ГОСТ 1770-74

Примечание. Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы

Флуксапироксад, аналитический стандарт с содержанием основного компонента 99,7 % Ацетон, осч

Ацетонитрил для хроматографии, хч

Вода для лабораторного анализа (бидистилли-

рованная или деионизованная)

Калий марганцово-кислый (перманганат калия), хч

Калий углекислый (карбонат калия, поташ), хч, прокаленный

Натрий углекислый (карбонат натрия), хч Спирт этиловый (этанол) ректификованный

Фосфор (V) оксид (фосфорный ангидрид, пеи-токсид фосфора), хч

ГОСТ 2603-79 ТУ -6-09-14.2167—84

ГОСТ Р 52501-05

ГОСТ 20490-75

ГОСТ 4221-76 ГОСТ 83-79 ГОСТ Р 51652-2000 или ГОСТ 18300-87

ТУ 6-09-4173—85

Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующих дополнительной очистки растворителей.

3.3. Вспомогательные устройства, материалы Аппарат для встряхивания    ТУ 64-1-2851—78

Баня водяная

5

МУК 4.1.3091—13

Бумага индикаторная универсальная Бумажные фильтры высокой плотности, обеззоленные (фильтры)

Бязь хлопчатобумажная белая Воронка Бюхнера

Воронки конусные диаметром 40—45 мм Груша резиновая Колба Бунзена

Колбы круглодонные для упаривания на шлифе вместимостью 150 сьг Линейки измерительные металлические Мембраны микропористые капроновые Набор для фильтрации растворителей через мембрану

Насос водоструйный Пинцет медицинский нержавеющий Ректификационная колонна с числом теоретических тарелок не менее 30 Ротационный вакуумный испаритель с мембранным насосом, обеспечивающим вакуум до 10 мбар Стаканы химические с носиком вместимостью 150 см³ Стекловата

Стеклянные емкости вместимостью 100 см³ с герметичной металлической крышкой Стеклянные палочки Установка для перегонки растворителей Фнльтродержатель Холодильник обратный Хроматографическая колонка стальная длиной 250 мм, внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная обращенно-фазным сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами С8, зернение 5 мкм Шприц для ввода образцов для жидкостного хроматографа вместимостью 50—100 мм³

ТУ 2642-001-05015242—07

ГОСТ 9147-80 ГОСТ 25336-82 ТУ 9398-005-0576-9082—03 ГОСТ 25336-82

ГОСТ 9737-93

ГОСТ 427-75

ТУ 9471 -002-10471723—03

ГОСТ 25336-82 ГОСТ 21241-89

ГОСТ 25336-82

Примечание. Допускается применение оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

6

МУК 4.1.3091—13

4. Требования безопасности

4.1.    При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007—76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ Р 12.1.019-09, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.

4.2.    Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313—03 и 2.2.5.2308—07. Организация обучения работников безопасности труда -по ГОСТ 12.0.004-90.

5. Требования к квалификации оператора

К выполнению измерений допускают специалиста, прошедшего обучение, освоившего методику, владеющего техникой, имеющего опыт работы на жидкостном хроматографе и подтвердившего соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по п. 13.

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

•    процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С и относительной влажности не более 80 %;

•    выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению измерений

Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ, кондиционирование хроматографической колонки, приготовление растворов для градуировки и внесения, установление градуировочной характеристики, подготовка фильтров и салфеток для отбора проб, отбор проб.

7. /. Очистка растворителей

7.1.1. Очистка ацетона

Ацетон перегоняют над небольшим количеством перманганата калия и прокаленным карбонатом калия (на 1 дм³ ацетона 10 г перманга-

7

МУК 4.1.3091—13

ната калия и 2 г карбоната калия) или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок не менее 30. Перегнанный растворитель хранят в темном месте (в емкости из темного стекла) не более 14 дней.

7.1.2. Очистка ацетонитрила

Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора (на 1 дм³ ацетонитрила 20 г пентоксида фосфора) не менее 1 ч, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия (на 1 дм³ ацетонитрила 10 г карбоната калия).

7.2. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ

В мерную колбу вместимостью 1 ООО см³ помещают 430 см³ биди-стиллированной или деионизованной воды, 570 см³ ацетонитрила, перемешивают, фильтруют через мембранный фильтр и дегазируют. Подвижную фазу хранят в темном месте (в емкости из темного стекла) не более 14 дней.

7.3. Кондиционирование хроматографической колонки

Промывают колонку подвижной фазой (приготовленной по п. 7.2) при скорости подачи растворителя 1,0см³/мин до установления стабильной базовой линии.

7.4. Приготовление градуировочных растворов и растворов внесения

7.4.1.    Исходный раствор флуксапироксада для градуировки (концентрация 100 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 0,0100 г флуксапироксада, растворяют в 50—60 см³ ацетонитрила, доводят ацетонитрилом до метки, тщательно перемешивают.

Раствор хранят в морозильной камере при температуре -18 °С в течение 3 месяцев.

Растворы № 1—5 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного раствора для градуировки.

7.4.2.    Раствор № 1 флуксапироксада для градуировки и внесения (концентрация 10мкг/см). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 10 см³ исходного раствора флуксапироксада с концентрацией 100 мкг/см³ (п. 7.4.1), разбавляют ацетонитрилом до метки.

Градуировочный раствор № I хранят в морозильной камере при температуре-18 °С в течение 3 месяцев.

Этот раствор используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения действующего вещества методом «внесено-

МУК 4.1.309)—13

найдено» и контроля качества результатов измерений методом «добавок».

7.4.3. Рабочие растворы № 2—5 флуксапироксада для градуировки (концентрация 0,1—1,0 мкг/см³). В 4 мерные колбы вместимостью 100 см³ помешают по 1,0; 2,0; 5,0 и 10,0 см³ градуировочного раствора № 1 с концентрацией 10 мкг/см³ (п. 7.4.2), доводят до метки подвижной фазой, приготовленной по п. 7.2, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы № 2—5 с концентрацией каждого компонента 0,1; 0,2; 0,5 и 1,0 мкг/см³ соответственно.

Рабочие растворы сразу после приготовления помещают в холодильник, где хранятся при температуре 4—6 °С не более 30 дней.

7.5. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика от концентрации флуксапироксада в растворе, устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 растворам для градуировки № 2—5.

В инжектор хромато]рафа вводят по 20 мм³ каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 7.5.1. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Устанавливают площади пиков действующего вещества, на основании которых строят градуировочную зависимость.

7.5.1. Условия хроматографирования

Измерения выполняют при следующих режимных параметрах.

Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором с переменной длиной волны.

Рабочая длина волны: 233 нм или 254* нм.

Хроматографическая колонка стальная длиной 250 мм, внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная обращенно-фазным сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами С8, зернение 5 мкм.

Температура колонки: комнатная.

Подвижная фаза: ацетонитрил-вода (60 : 40, по объему).

Скорость потока элюента: 1,0 см³/мин.

Объем вводимой пробы: 20 мм³.

Линейный диапазон детектирования: 2—20 нг.

* Хроматографирование пробы при 2 длинах волн увеличивает надежность идентификации вещества.

9