МУК 4.1.3077-13
Измерение концентраций бифеназата в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование _Российской    Федерации_

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение концентраций бифеназата в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3077—13

Издание официальное

Москва • 2013

Федеральная служба по надзору в сфере зашиты прав потребителей и благополучия человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение концентраций бифеназата в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.3077—13

ББК 51.21 И37

И37 Измерение концентраций бифеназата в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: Методические указания. -М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2013.—18 с.

ISBN 978--5—7508—1208—О

1.    Разработаны ФБУН «Федеральный научный центр гигиены им. Ф. Ф. Эрисмана» Роспотребнадзора (Т. В. Юдина, Н. Е. Федорова, В. Н. Волкова, Л. П. Мухина).

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по напору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 30 мая 2013 г. № 1).

3.    Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г. Г. Онищенко 24 июля 2013 г.

4.    Введены впервые.

ББК 51.21

ISBN 978—5—7508—1208—0

€> Роспотребнадзор, 2013 © Федеральный центр гигиены и

эпидемиологии Роспотребмапора, 2013

МУК 4.1.3077—13

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

Г. Г. Онищенко

24 июля 2013 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение концентраций бифеназата в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указании МУК 4.1.3077—13

Свидетельство об аттестации от 5.032013 №01.00282—2008/0158.05.03.13.

Настоящие методические указания устанавливают порядок применения метода высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов массовой концентрации бифеназата в диапазонах 0,05—1,0 мг/м³ и 0,3—6,0 мкг/смыв соответственно.

Методические указания носят рекомендательный характер.

Название действующего вещества по ИСО: бифеназат.

Название действующего вещества по ИЮПАК: Изопропил 3-(4-ме-токсибифенил-3-ил)карбазат.

Струкэурная формула:

NHNH-COOCH(CH₃)₂

Эмпирическая формула: C17H20N2O3.

Молекулярная масса: 300,4.

Белое кристаллическое вещество без запаха. Температура плавления 123—125 °С. Давление паров 3,8 • 10^* мПа (25 °С). Растворимость в

3

органических растворителях (г/дм³, 20 °С): этилацетат - 102; ацетонитрил - 95,6; метанол - 44,7; толуол - 24,0; н-гексан - 0,232. Растворимость в воде при 20 °С - 2,06 мг/дм³. Коэффициент распределения в системе н-октанол-вода log К** =3,4 (25 °С, pH 7).

Бифеназат стабилен более 1 года при температуре 20 °С и относительной влажности 50%. Подвергается гидролизу (при 25 °С): DT₅₀ составляет 9—10 дней (pH 4); 5,4 дня (pH 5); 0,8 дня (pH 7), 0,08 дня (pH 9), и фотолизу (25 °С, pH 5): DT₅₀ составляет 17 ч. Бифеназат - основание с рКа- 12,94 (23 °С).

Агрегатное состояние в воздушной среде - аэрозоль.

Область применения

Бифеназат - несистемный акарицид класса бифен ил гидразина с контактным действием и продолжительным последействием, рекомендуется к применению для борьбы с насекомыми на стадии яиц и личинок на плодовых деревьях (яблони, фуши, цитрусовые), орехах, овошах, декоративных культурах, хлопке и кукурузе.

1. Погрешность измерений

Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью, не превышающей ± 25 %, при доверительной вероятности 0,95.

2. Метод измерений

Измерения концентраций бифеназата выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на обращенной фазе с ультрафиолетовым детектором.

Концентрирование вещества из воздуха осуществляют на бумажный фильтр высокой плотности, экстракцию с фильтров выполняют смесью ацетонитрила с 1,25 %-м раствором уксусной кислоты в присутствии аскорбиновой кислоты для предотвращения окисления соединения. Смыв с кожных покровов проводят этанолом. Для концентрирования проб смывов использованы патроны для твердофазной экстракции.

Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 2,5 нг. Средняя полнота извлечения с фильтров - 96 %, с поверхности кожи -84,2 %.

3. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы

3.1. Средства измерений

Жидкостный хроматограф с быстроскани-рующим ультрафиолетовым детектором.

4

МУК 4.1.3077- 13

снабженный дегазатором, автоматическим пробоотборником и термостатом колонки Барометр-анероид с диапазоном измерения атмосферного давления 5—790 мм рт. ст.

Весы лабораторные аналитические, наибольший предел взвешивания ПО г, предел допустимой погрешности ± 0,2 мг Колбы мерные 2-100-2, 2-500-5 и 2-1000-2 Меры массы

Пинетки градуированные 2-го класса точности вместимостью 1,0; 2,0; 5,0; 10 см³ Пробирки градуированные вместимостью 5 см³ на шлифе

Пробоотборное устройство 2-канальнос, с диапазоном расхода 0,2—1,0 дм³/мин и 1.0 -5,0 лм³/мин

Термометр лабораторный, пределы измерения -35—55 °С

Цилиндры мерные 2-го класса точности вместимостью 50, 100, 500 и 1 000 см³ Гигрометр с диапазоном измерений относительной влажности от 30 до 90 %

ТУ 2504-1799—75

ГОСТ Р 53228-08 ГОСТ 1770-74 rOCTOlMLR 111-1—09

ГОСТ 29227-91

ГОСТ 1770-74

ТУ 25-1102.055—83 ГОСТ 1770-74 ТУ 25-11-1645- 84

Примечание. Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы

Бифеназат, аналитический стандарт с содержанием основного компонента 99,8 %

Ацетонитрил для хроматографии, хч

Вода для лабораторного анализа (бидистилли-

рованная или деионизованная)

Калий марганцово-кислый (перманганат калия), хч

Калий углекислый (карбонат калия, поташ),

хч, прокаленный

Кислота уксусная ледяная, хч

Натрий углекислый (карбонат натрия), хч

Спирт этиловый (этанол) ректификованный

ТУ-6-09-14.2167—84

ГОСТ Р 52501-2005 Г ОСТ 20490-75

ГОСТ 4221-76 ГОСТ 6552-80 ГОСТ 83-79 ГОСТ Р 51652-2000 или ГОСТ 18300-87

Фосфор (V) оксид (фосфорный ангидрид,

пентоксид фосфора), хч    ТУ    6-09-4173—85

Примечание. Допускается использование реактивов с более высокой квалификацией, не требующих дополнительной очистки растворителей.

5

3.3. Вспомогательные устройства, материалы Аллонж прямой с отводом для вакуума (для работы с концентрирующими матронами)

Баня водяная

Баня ультразвуковая с рабочей частотой 35 кГц Бумажные фильтры высокой плотности Бязь хлопчатобумажная белая Воронка Бюхнера

Воронки конусные диаметром 40—45 мм Груша резиновая Колба Бунзена

Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 150 см³

Колбы конические вместимостью 50 см³, на шлифе

Линейка измерительная Мембраны микропористые капроновые, размер пор 0,45 мкм

Набор для фильтрации растворителей через мембрану

Насос водоструйный

Патроны концентрирующие для твердофазной экстракции, 360 мг гидрофобного сорбента с привитыми монофункциональными полярными группами С18

Пинцет медицинский нержавеющий Пробирка со шлифом вместимостью 5 или 10 см³ Стаканы химические с носиком, вместимостью 150 см³ Стекловата

Стеклянные емкости вместимостью 100 см³ с герметичной металлической крышкой Стеклянные палочки

Ректификационная колонна с числом теоретических тарелок не менее 30 Ротационный вакуумный испаритель с мембранным насосом, обеспечивающим вакуум до 10 мбар Установка для перегонки растворителей Ф ил ьтродержател ь Холодильник обратный

ТУ 46-22-603—75

ТУ 2642-001 -05015242—07

ГОСТ 9147-80 ГОСТ 25336-82 ТУ 9398-005-0576-908 ГОСТ 25336-82

ГОСТ 25336-82

ГОСТ 25336-82 ГОСТ 427-75

ТУ 9471 -002-10471723—03

ГОСТ 25336-82

ГОСТ 21241-89 ГОСТ 25336 82

ГОСТ 25336-82

6

МУК 4.1.3077—13

Хроматографическая колонка стальная, длиной 150 мм, внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная обращенно-фазным сорбентом с привитыми монофункциональными полярными группами С18, зернением 5 мкм Шприц для ввода образцов для жидкостного хроматографа вместимостью 50—100 мм³ Шприц медицинский инъекционный однократного применения вместимостью 10 см³    ГОСТ 24861 —91

(ИСО 7886-84)

Примечание. Допускается использование вспомогательных средств измерений, устройств и материалов с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1.    При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007—76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ Р 12.1.019-09, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.

4.2.    Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313—03 и 2.2.5.2308—07. Организация обучения работников безопасности труда -по ГОСТ 12.0.004-90.

5. Требования к квалификации оператора

К выполнению измерений допускают специалиста, прошедшего обучение, освоившего методику, владеющего техникой, имеющего опыт работы на жидкостном хроматографе, и подтвердившего соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по п. 12.

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

• процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С и относительной влажности нс более 80 %;

7

• выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению измерений

Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка ацетонитрила (при необходимости), подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ, смеси растворителей для экстракции и приготовления градуировочных растворов, смеси растворителей для элюирования вещества с патронов концентрирующих, кондиционирование хроматографической колонки, приготовление растворов для градуировки и внесения, установление градуировочной хара1стеристики, подготовка фильтров и салфеток для отбора проб, отбор проб.

7. /. Очистка ацетонитрила

Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора (на 1 дм³ ацетонитрила 20 г пентоксида фосфора) не менее 1 ч. после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия (на 1 дм³ ацетонитрила 10 г карбоната калия).

7.2. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ

7.2.1.    Приготовление раствора уксусной кислоты с массовой долей 1,25% (1,25 %-й раствор). В мерную колбу вместимостью 1 000 см³ помещают 500 cm^j бидистиллированной или деионизованной воды, вносят 12,5 см³ ледяной уксусной кислоты, доводят водой до метки, перемешивают.

7.2.2.    Приготовление подвижной фазы. В мерную колбу вместимостью 1 000 см³ помещают 600 см³ ацетонитрила, добавляют 400 см³ 1,25 %-го раствора уксусной кислоты, перемешивают, фильтруют через мембранный фильтр и дегазируют.

Подвижную фазу хранят в темном месте (в емкости из темного стекла) не более 14 дней.

7.3. Кондиционирование хроматографической колонки для ВЭЖХ

Промывают колонку подвижной фазой (приготовленной по п. 7.2) при скорости подачи растворителя 0,8 см³/мин до установления стабильной базовой линии.

8

МУК 4.1.3077—13

7.4. Приготовление смеси растворителей для экстракции вещества с фильтров и приготовления градуировочных растворов

В мерную колбу вместимостью 1 ООО см³ помещают 1 ООО см³ подвижной фазы, приготовленной по п. 7.2, вносят 1,0 г аскорбиновой кислоты, перемешивают до полного растворения кислоты, фильтруют через мембранный фильтр. Срок хранения смеси не более суток.

7.5. Приготовление градуировочных растворов

7.5.1.    Исходный раствор бифеназата для градуировки (концентрация 100 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 0,01 г бифеназата и растворяют в 50—60 см³ ацетонитрила, доводят ацетонитрилом до метки, тщательно перемешивают.

Раствор хранят в морозильной камере при температуре ниже -18 °С в течение 14 дней.

Растворы № 1—5 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного раствора для градуировки.

7.5.2.    Раствор № I бифеназата для градуировки и внесения (концентрация 10 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 10 см³ исходного раствора с концентрацией бифеназата 10 мкг/см³ (п. 7.5.1), разбавляют ацетонитрилом до метки.

Градуировочный раствор № 1 хранят в морозильной камере при температуре ниже -18 °С в течение 14 дней.

Этот раствор используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения действующего вещества методом «внессно-найдено» и контроле качества результатов измерений методом «добавок».

7.5.3.    Рабочие растворы № 2—5 бифеназата для градуировки (концентрации 0,05—1,0 мкг/см³). В 5 мерных колб вместимостью 100 см³ помещают по 0,5; 1,0; 2,0; 5,0 и 10,0 см³ градуировочного раствора № 1 с концентрацией 10 мкг/см³ (п. 7.5.2), доводят до метки смесью растворителей, приготовленной по п. 7.4, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы № 2—5 с концентрацией бифеназата 0,05; 0,1; 0,2; 0,5 и 1,0 мкг/см³ соответственно.

Рабочие растворы хранят в холодильнике при температуре 4—6 °С нс более 14 дней.

7.6. Установление градуировочной характеристики, условия хроматографирования

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика от концентрации бифеназата в растворе, устанавливают ме-

9