Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование _Российской    Федерации_

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств пестицидов в воде, почве, сельскохозяйственном сырье и пищевых продуктах

Сборник методических указаний по методам контроля МУК 4Л.2916— И; 4.1.2931—11; 4.1.2933—11; 4.1.2935—11

Издание официальное

Москва • 2011

Федеральная служба по надзору в сфере зашиты прав потребителей и благополучия человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств пестицидов в воде, почве, сельскохозяйственном сырье и пищевых продуктах

Сборник методических указаний по методам контроля МУК 4.1.2916—11; 4.1.2931—11;

4.1.2933—11; 4.1.2935—11

МУК 4.1.2935—11

7.1. Очистка органических растворителей

7.1.1. Ацетонитрил

Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора (на I дм³ ацетонитрила 20 г пентоксида фосфора) не менее 1 ч, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия (на 1 дм³ ацетонитрила 10 г карбоната калия).

7.1.2. Хлористый метилен

7.1.2.1.    Приготовление раствора натрия углекислого с массовой долей 5 %. Навеску (25 ± 0,1) г натрия углекислого помещают в мерную колбу вместимостью 500 см³, растворяют в бидистиллированной воде, доводят водой до метки, перемешивают.

7.1.2.2.    Очистка растворителя. Растворитель промывают последовательно 5 %-м водным раствором натрия углекислого, насыщенным раствором хлористого кальция, сушат над прокаленным карбонатом калия и перегоняют или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок не менее 30.

7.2. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ

7.2.1.    Приготовление раствора ортофосфорной кислоты с массовой долей 0,1 % (0,1 %-й раствор). В мерную колбу вместимостью 1 000 см³ помещают 250—300 м³ бидистиллированной воды, вносят 1 см³ ортофосфорной кислоты, доводят водой до метки, перемешивают.

7.2.2.    Приготовление подвижной фазы. В мерную колбу вместимостью I 000 см³ помещают 350 см³ ацетонитрила, вносят 650 см³ 0,1 %-го раствора ортофосфорной кислоты, перемешивают, фильтруют через мембранный фильтр.

7.3. Кондиционирование хроматографической колонки

Промывают колонку подвижной фазой (приготовленной по п. 7.2) при скорости подачи растворителя 0,8 см³/мин до установления стабильной базовой линии.

7.4. Приготовление градуировочных растворов

7.4.1. Исходный раствор этаметсульфурон-метила для градуировки (концентрация 100 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 0,0100 г этаметсульфурон-метила, растворяют в 50—60 см³ ацетонитрила, доводят ацетонитрилом до метки, тщательно перемешивают.

63

Раствор хранят в морозильной камере при температуре -18 °С в течение 3 месяцев.

Растворы № 1—5 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного раствора для градуировки.

7.4.2.    Раствор № 1 этамет судьфурон-мemiuia для градуировки и внесения (концентрация 10 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помешают 10 см³ исходного раствора этаметсульфурон-метила с концентрацией 100 мкг/см³ (п. 7.4.1), разбавляют ацетонитрилом до метки.

Градуировочный раствор № 1 хранят в морозильной камере при температуре -18 °С в течение месяца.

Этот раствор используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения действующего вещества методом «внесено-найдено».

7.4.3.    Рабочие растворы N9 2—5 этаметсульфурон-метила для градуировки (концентрация 0,05—0,5 мкг/см³). В 4 мерные колбы вместимостью 100 см³ помещают по 0,5; 1,0; 2,0 и 5,0 cm^j градуировочного раствора № I с концентрацией 10 мкг/см³ (п. 7.4.2), доводят до метки подвижной фазой, приготовленной по п. 7.2, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы № 2—5 с концентрацией этаметсульфурон-метила 0,05; 0,1; 0,2 и 0,5 мкг/см³ соответственно.

Рабочие растворы готовят непосредственно в день проведения анализа.

7.5. Установление градуировочной характеристики Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (мЕА • с) от концентрации этаметсульфурон-метила в растворе (мкг/см³), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 растворам для градуировки № 2—5.

В инжектор хроматографа вводят по 20 мм³ каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.3. Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Устанавливают площади пиков действующего вещества, на основании которых строят градуировочную зависимость.

Градуировочный график проверяют перед проведением измерения по анализу одного из градуировочных растворов. Если значение площади отличается более, чем на 11 % от данных, заложенных в градуировочную характеристику, ее строят заново, используя свежеприготовленные рабочие растворы для градуировки.

64

МУК 4.1.2935—11

7.6. Приготовление растворов ортофосфорной кислоты Для приготовления раствора ортофосфорной кислоты с молярной концентрацией 1 моль/дм³ (1 М раствор) в мерную колбу вместимостью 100 см³ помешают 6,9 см³ ортофосфорной кислоты, доводят водой до метки, тщательно перемешивают.

Для приготовления раствора ортофосфорной кислоты с молярной концентрацией 0,005 моль/дм³ (0,005 М раствор) в мерную колбу вместимостью 1 000 см³ помещают 5 см³ 1 М раствора ортофосфорной кислоты, доводят до метки водой, тщательно перемешивают.

7.7. Приготовление раствора уксусной кислоты с массовой долей 0,005 % (0,005 %-й раствор)

В мерную колбу вместимостью 100 см³ помешают 1,0 см³ ледяной уксусной кислоты, доводят водой до метки, тщательно перемешивают. Получают раствор уксусной кислоты с массовой долей 1,0 %.

Для приготовления 0,005 %-го раствора уксусной кислоты в мерную колбу вместимостью 500 см³ помещают 2,5 см³ раствора с массовой долей 1,0 %, доводят до метки водой, тщательно перемешивают.

7.8. Приготовление раствора гидроксида натрия с молярной концентрацией 1 моль/дм³ (1Мраствор)

В мерную колбу вместимостью 250 см³, содержащую 100—150 см³ бидистиллированной воды, помещают (10 ±0,1) г натрия гидроксида, доводят водой до метки, тщательно перемешивают.

7.9. Приготовление раствора натрия фосфорно-кислого двузамещенного с молярной концентрацией 0,1 моль/дм³ (0,1 Мраствор)

В мерную колбу вместимостью 1 000 см³ помещают (35,8 ±0,1) г двузамещенного фосфорно-кислого натрия (Na₂HP0₄ • 12Н₂0), растворяют в 700—800 см³ дистиллированной воды, доводят водой до метки, тщательно перемешивают.

7.10. Подготовка фосфатного буферного раствора (pH 10)

В мерную колбу вместимостью 1 000 см³ помещают (53,8 ±0,1) г двузамещенного фосфорно-кислого натрия (Na₂HP0₄ • 12Н₂0), растворяют в 700—800 см³ бидистиллированной воды, вносят 20 см³ 1 М раствора гидроксида натрия, доводят водой до метки, тщательно перемешивают.

65

Контролируют pH буферного раствора с помощью pH-метра, доводят значение до pH 10, применяя 1 М растворы едкого натра или орто-фосфорной кислоты.

7.11. Подготовка концентрирующих патронов С18 Sep Рак Classic и Vac бсс Патроны С18 Sep Рак Classic или Vac бсс устанавливают на аллонж с прямым отводом для вакуума*. Сверху в патрон С18 Sep Рак Classic устанавливают медицинский шприц объемом не менее 10 см³, используемый в качестве емкости для элюента.

Концентрирующие патроны промывают последовательно 10 см³ ацетонитрила, затем 15 см³ бидистиллированной воды. Процедуру проводят с использованием вакуума, скорость потока растворителей через патрон не должна превышать 5 см³/мин, при этом нельзя допускать высыхания поверхности патрона.

7.12. Проверка хроматографического поведения этаметсульфурон-метила на концентрирующем патроне С18 Sep Рак Classic В круглодонную колбу вместимостью 50 см³ помещают 0,1 см³ градуировочного раствора № 1 этаметсульфурон-метила с концентрацией 10 мкг/см³ (п. 7.4.2), растворитель упаривают досуха при температуре не выше 35 °С, остаток растворяют в 10 см³ буферного раствора с pH 10 (п. 7.10) и вносят на концентрирующий патрон, подготовленный по п. 7.11. Скорость прохождения раствора через патрон не должна превышать 2—3 кап./с. Элюат отбрасывают.

Промывают патрон 10 см³ 0,005 % уксусной кислоты (п. 7.7), затем 15 см³ смеси ацетонитрил—0,005 М ортофосфорная кислота (15: 85, по объему). Высушивают патрон пропусканием воздуха (с использованием вакуума) в течение 2 мин. Этаметсульфурон-метил элюируют с патрона 10 см³ ацетонитрила, собирая 2 порции элюата по 5 см³ каждая непосредственно в круглодонные колбы. Растворы в колбах упаривают досуха при температуре не выше 35 °С. Остаток в каждой колбе растворяют в 2 см³ подвижной фазы (приготовленной по п. 7.2) и анализируют содержание этаметсульфурон-метила по п. 9.3. При обнаружении вещества только в первой фракции элюирование этаметсульфурон-метила с патрона осуществляют 5 см³ ацетонитрила; при наличии его в обеих, объем элюента увеличивают до 10 см³.

В отсутствие специального аллонжа, жидкость продавливают через патрон с помощью шприца, скорость продавливания раствора не должна превышать 2—3 кап./с.

66

МУК 4.1.2935—11

Примечание: Проверку хроматографического поведения этаметсульфу-рон-метила следует проводить обязательно, поскольку профиль вымывания может изменяться при использовании новой партии патронов и растворителей.

8. Отбор и хранение проб

Отбор проб производится в соответствии с правилами, определенными ГОСТ: вода - Р 51592—2000 «Вода. Общие требования к отбору проб»; почва - 17.4.3.01—83 «Охрана природы. Почвы. Общие требования к отбору проб», 28168—89 «Почвы. Отбор проб» и «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов (№ 2051—79 от 21.08.79).

Отобранные пробы воды хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике не более суток. Почву подсушивают в темноте до постоянного веса и хранят в защищенном от света месте при комнатной температуре не более недели. Для длительного хранения образцы замораживают и хранят при температуре -18 °С. Перед анализом образцы воды фильтруют через неплотный бумажный фильтр, почвы - просеивают через сито с диаметром отверстий 1 мм.

9. Выполнение определения

9.1. Вода

Образец отфильтрованной воды объемом 100 см³ помещают в плоскодонную колбу вместимостью 250—300 см³ с пришлифованной пробкой, вносят 1,89 г натрия фосфорно-кислого двузамешенного 12-вод-ного, тщательно перемешивают.

Подготовленную пробу вносят на концентрирующий патрон CI8 Sep Рак Vac бсс, подготовленный по п. 7.11, со скоростью пропускания раствора 2—3 капУс используя разряжение, создаваемое водоструйным насосом. После нанесения пробы патрон промывают 10 см³ 0,005 % уксусной кислоты (п. 7.11), затем 15 см³ смеси ацетонитрил-0,005 М орто-фосфорная кислота (15 : 85. по объему), элюат отбрасывают. Вещество элюируют с патрона 10 см³ ацетонитрила, собирая элюат в круглодонную колбу для упаривания вместимостью 50 см³. Растворитель упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 35 °С досуха, остаток растворяют в I cm^j подвижной фазы, приготовленной по п. 7.2 и анализируют содержание этаметсульфурон-метила по п. 9.3.

9.2. Почва

9.2.1. Экстракция Образец воздушно-сухой почвы массой Юг помещают в плоскодонную колбу вместимостью 250—300 см³, вносят 100 см³ смеси ацетон-вода (9: 1, по объему) и экстрагируют 15 мин на ультразвуковой

бане.

Пробе дают отстояться, затем надосадочную жидкость фильтруют на воронке Бюхнера с помощью разряжения, создаваемого водоструйным насосом, через двойной фильтр «красная лента». Почвенный остаток повторно экстрагируют 50 см³ смеси ацетон-вода (9 : 1, по объему) на ультразвуковой бане в течение 15 мин, раствор фильтруют на воронке Бюхнера. Объединенный отфильтрованный экстракт переносят в колбу для упаривания на 250 см³ и упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 35 °С до водного остатка (объем 10—15 см³). Очищают перераспределением в системе несмеши-вающихся растворителей по п. 9.2.2, затем на концентрирующем патроне С18 Sep Рак Classic по п. 9.2.3.

9.2.2. Очистка экстракта перераспределением в системе несмешивающихся растворителей Водный остаток в колбе, полученный по п. 9.2.1 переносят в делительную воронку вместимостью 250 см³, добавляют 90 см³ 0,1 М раствора натрия фосфорно-кислого двузамещенного (п. 7.9), предварительно обмыв им колбу, в которой находилась проба, перемешивают, вносят в воронку 20 см³ хлористого метилена, интенсивно встряхивают в течение 2 мин, после полного разделения фаз нижний дихлорметановый слой отбрасывают. Водную фазу обрабатывают хлористым метиленом еще 2 раза, используя по 20 и 15 см³ растворителя, при встряхивании 1—2 мин. Нижний дихлорметановый слой отбрасывают.

Затем водную фазу подкисляют 1 М ортофосфорной кислотой до pH 3 (контроль по индикаторной бумаге), вносят 20 см³ насыщенного раствора хлористого натрия, перемешивают. Затем в воронку вносят 30 см³ дихлорметана, интенсивно встряхивают в течение I мин, после полного разделения фаз нижний дихлорметановый слой переносят в коническую колбу на 250—300 см³. Экстракцию этаметсульфурон-мети-ла повторяют еще дважды порциями дихлорметана объемом 30, затем 20 см³. Для обеспечения лучшего расслаивания проб, раствор переносят в центрифужный стакан и центрифугируют 5 мин при 3 000 об./мин. Объединенный дихлорметановый экстракт фильтруют через слой (около 2 см) безводного сульфата натрия, помещенный на бумажном фильтре в

68

ББК 51.21+51.23 060

060 Определение остаточных количеств пестицидов в воде, почве, сельскохозяйственном сырье и пищевых продуктах: Сборник методических указаний по методам контроля.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора,

20 И.—72 с.

ISBN 978—5—7508—1080—2

1.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере зашиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 2.06.2011 № 1).

2.    Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере зашиты прав потребителей и благополучия человека. Главным i-осудар-ствекным санитарным врачом Российской Федерации Г. Г. Онищенко 12 июля 2011 г.

3.    Введены в действие с момента утверждения.

4.    Введены впервые.

БВК 51.21+51.23

Редактор Н. Е. Акопова Технический редактор Е. В. Ломанова

Подписано в печать 15.12.11 Формат 60x88/16    Печ.    л.    4.5

Тйраж 200 экз.    Заказ    161

Федеральная служба по надзору в сфере зашиты прав потребителей и благополучия человека 127994, Москва, Вадковский пер., д 18, стр. 5, 7

Оригинал-макет подготовлен к печати и тиражирован отделом издательского обеспечения Федерально! о центра гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора 117105, Москва, Варшавское ш., 19а Отделение реализации, тел./факс 952-50-89

€> Роспотребнадзор, 2011 © Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2011

МУК 4.1.2916— 11; 4.1.2931—11; 4.1.2933—11; 4.1.2935— 11

Содержание

Определение остаточных количеств трициклазола в воде, почве, зеленой массе, зерне и соломе риса методом капиллярной

газожидкостной хроматографии: МУК 4.1.2916—11..........................................4

Определение остаточных количеств диметоморфа в воде, семенах и масле рапса методом капиллярной газожидкостной хроматографии:

МУК 4.1.2931—11 ................................................................................................21

Определение остаточных количеств биспирибака кислоты в воде, почве, зерне и соломе риса хроматографическими методами:

МУК 4.1.2933—11................................................................................................36

Определение остаточных количеств этаметсу л ьфу рои-метил а в воде и почве методом высокоэффективной жидкостной хроматографии:

МУК 4.1.2935—11 ................................................................................................57

3

МУК 4.1.2935—11

УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере зашиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

Г. Г. Онищенко

12 июля 2011 г.

Дата введения: с момента утверждения

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств этаметсульфурон-метила в воде и почве методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.2935—11

Свидетельство о метрологической аттестации № 0083.20.04.11 от 25.04.2011.

Настоящие методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовых концентраций этаметсульфурон-метила в воде и почве в диапазонах 0,0005—0,005 мг/дм³ и 0,01—-0,1 мг/кг, соответственно.

Этаметсульфурон-метил

2-[[[[(4-Этокси-6-метиламино-1,3,5-триазин-2-ил)амино]карбонш1]ам и-но]сульфонил]-бензойная кислота, метиловый эфир (IUPAC).

ОСН0СН3

c,₅h₁₈n₆o₆s.

Мол. масса 410,4.

Белое кристаллическое вещество. Температура плавления 194 °С. Давление паров 7,73 • 10"⁷ мПа (при 20 °С). Растворимость в органических растворителях при 20 °С (в г/дм³): ацетон - 1,6; ацетонитрил - 0,83;

57

МУК 4.1.2935—11

н-гексан - 0,005; дихлорметан - 3,9; метанол - 0,35; этанол - 0,17; этил-ацетат - 0,68. Растворимость в воде при 25 °С (в мг/дм³): 1,7 (pH 5), 50 (pH 7), 410 (pH 9). Гидролитическая стабильность зависит от pH: DT$o 41 день (pH 5), стабилен при pH 7 и pH 9. Константа диссоциации рК_а 4,6.

Краткая токсикологическая характеристика: Острая пероральная токсичность (LD₅₀) для крыс > 5 000 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD₅₀) для крыс > 2 000 мг/кг; острая ингаляционная токсичность (LC50) для крыс > 5,7 мг/дм³.

Область применения: Этаметсульфурон-метил - гербицид класса сульфонилмочевин, рекомендуется к применению на посевах озимого и ярового рапса, подсолнечника для подавления роста однолетних и многолетних двудольных сорняков.

1. Метрологические характеристики

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и её составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р = 0,95 не превышает значений, приведенных в табл. 1 для соответствующих диапазонов концентраций.

Таблица 1

Метрологические параметры

Анали зируе мый объект Диапазон опрсделяс-мых концен-траций, мг/дм3 (мг/кг) Показатель точности (граница относительной погрешности), %, Р = 0,95 Стандартное отклоне-ние повторяемости, ог, % Предел повторяемости, г, % Предел воспро изводи мости, /?,% по методу внесено-найдено граница расширенной неопределенности*, и Вода от 0,0005 до 0,005 вкл. 9,9 50 3,0 8 12 Почва от 0,01 до 0,1 вкл. 15,8 50 3,7 10 14

* U - граница расширенной неопределенности при коэффициенте охвата 2, в соответствии с ГОСТ 27384-2002 «Вода. Нормы погрешности измерений ло-казателей состава и свойств» и документом SANCO/10684/2009_

Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для всего диапазона измерений (я = 20) приведены в табл. 2.

МУК 4.1.2935—11

Воронки стеклянные конусные типа В-36-80 ХС и В-56-80 ХС Груша резиновая Колба Бунзена

Колбы конические (плоскодонные) с пришлифованной пробкой вместимостью 250—300 см³ Колбы круглодонные на шлифе (для упаривания) вместимостью 50, 150 и 250 см³ Мембранные фильтры микропористые, марки ММК, капроновые, диаметром 50 мм, размер пор 0,45 мкм

Набор для фильтрации растворителей через мембрану

Насос водоструйный вакуумный Патроны для твердофазной экстракции (картриджи) С18 Sep-Pak Vac бсс (500 mg),

WAT043395 (Waters, США)

Патроны для твердофазной экстракции (картриджи) С18 Sep-Pak Classic (360 mg),

WAT051940 (Waters, США)

Сито с диаметром отверстий 1 мм Стаканы химические, вместимостью 1 000 см³ Ректификационная колонна с числом теоретических тарелок не менее 30 Ротационный вакуумный испаритель В-169 фирмы Buchi, Швейцария Установка для перегонки растворителей Хроматографическая колонка стальная, длиной 150 мм, внутренним диаметром 4,6 мм, содержащая Eclipse XDB С18, зернение 5 мкм Центрифуга роторная, скорость вращения до 3 500 об./мин, с центрифужными стаканами объемом 100 см³

Шприц для ввода образцов для жидкостного хроматографа вместимостью 50—100 мм³ Шприц медицинский инъекционный одно-    ГОСТ 24861-91

кратного применения вместимостью 10 см³ (ИСО 7886—84)

Допускается применение другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

61

4. Требования безопасности

4.1.    При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007—76, требования по электробезопасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019-79, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостный хроматограф.

4.2.    Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004-91 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009-83. Содержание вредных веществ в воздухе на должно превышать ПДК (ОБУВ), установленных ГН 2.2.5.1313—03 и ГН 2.2.5.2308—07. Организация обучения работников безопасности труда -по ГОСТ 12.0.004-90.

5. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе, освоивших данную методику и подтвердивших экспериментально соответствие получаемых результатов нормативам контроля погрешности измерений по п. 13.

К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией «лаборант», имеющего опыт работы в химической лаборатории.

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

•    процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С и относительной влажности не более 80 %;

•    выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению измерений

Измерениям предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), приготовление градуировочных растворов, раствора внесения, подвижной фазы для ВЭЖХ, кондиционирование хроматографической колонки, установление градуировочной характеристики, приготовление растворов, концентрирующих патронов, проверка хроматографического поведения этаметсульфурон-метила на патроне С18 Sep Рак Classic.

62