Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование _Российской    Федерации_

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение концентраций пиноксадена в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.2463—09

Издание официальное

Москва • 2009

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

4.2. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ, БИОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение концентраций пиноксадена в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.2463—09

МУК 4.1.2463—09

7.5.1. Условия хроматографирования. Измерения выполняют при следующих режимных параметрах.

Жидкостный хроматограф «Perkin Elmer» (США) с ультрафиолетовым детектором.

Хроматографическая колонка стальная, длиной 250 мм, внутренним диаметром 2,0 мм, содержащая Spherisorb® S5 ODS 2, зернением 5 мкм.

Температура колонки: комнатная.

Подвижная фаза: метанол - вода-муравьиная кислота (75 : 25 : 0,1, по объему).

Скорость потока элюента: 0,3 см³/мин.

Рабочая длина волны: 254 нм.

Объем вводимой пробы: 20 мм³.

Ориентировочное время выхода пиноксадена: 7,7—8,0 мин.

Линейный диапазон детектирования: 1—20 нг.

7.6. Подготовка фильтров для отбора проб воздуха

Диаметр бумажного фильтра «синяя лента» должен соответствовать внутреннему диаметру фильтродержателя.

Фильтры последовательно по 3 раза промывают на воронке Бюхнера этанолом порциями 25—30 см³, сушат с помощью разряжения, создаваемого водоструйным насосом, затем на воздухе при комнатной температуре. До использования фильтры хранят в герметично закрытой стеклянной таре.

7,7. Подготовка салфеток для проведения смыва

Вырезают салфетки (лоскуты) из белой бязи размером 10 х 10 см, последовательно обрабатывают их 5 %-м раствором углекислого натрия (при кипячении), водой до нейтральной реакции промывных вод, двухкратно промывают этиловым спиртом, сушат на воздухе при комнатной температуре. До использования салфетки хранят в герметично закрытой стеклянной таре.

8. Отбор и хранение проб воздуха

Отбор проб проводят в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 «ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны». Воздух с объемным расходом 1—4дм³/мин ас-пирируют через бумажный фильтр «синяя лента», помещенный в фильтродержатель.

Для измерения концентрации пиноксадена на уровне предела обнаружения (0,1 мг/м³) необходимо отобрать 2,5 дм³ воздуха, 0,5 ОБУВ для воздуха рабочей зоны - 0,5 дм³ воздуха. Срок хранения отобранных

МУК 4.1.2463-4)9

проб, помещенных в полиэтиленовые пакеты, в морозильной камере при температуре -18 °С - 30 дней.

9. Условия проведения смыва

Смывы проводят в конце работы или после выполнения отдельных операций с открытых и закрытых спецодеждой или другими СИЗ участков тела (лоб, лицо, шея, грудь, предплечье, голень, кисти рук, включая межпальцевые промежутки).

До работы выбирают участок кожи, обрабатывают его с целью удаления загрязнений, фиксируют площадь (не менее 200 см²). При необходимости отбирают фоновые смывы.

Смыв проводят способом обмыва фиксированного участка кожи этиловым спиртом, помещая 20 см³ в стеклянную емкостью с металлической крышкой. Тканевой салфеткой, смоченной растворителем, с помощью пинцета (индивидуально) обмывают кожный покров сверху вниз. Операцию повторяют дважды.

Срок хранения отобранных проб смывов, помещенных в герметично закрытые емкости, в морозильной камере при температуре -18 °С -30 дней.

10. Выполнение измерений

10.1, Воздушная среда Экспонированный фильтр переносят в химический стакан вместимостью ] 50 см³, заливают 20 см³ этилового спирта, помещают на встря-хивагель на 10 мин. Растворитель сливают, фильтр обрабатывают новыми порциями этилового спирта объемом 10 см³ еще дважды, выдерживая на встряхивателе по 10 мин.

Объединенный экстракт упаривают в 1рушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 30 °С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха. К остатку добавляют 1 см³ метанола, выдерживают 1 мин на ультразвуковой бане, добавляют 4 см³ смеси растворителей (подготовленной по п. 7.1), снова выдерживают на ультразвуковой бане и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п. 7.5.1.

10,2. Смывы с кожных покровов Пробу смыва сливают (через воронку) в колбу для упаривания, с помощью пинцета извлекают салфетку, помещают в конусную химическую воронку, установленную в муфту колбы для упаривания, тщательно отжимают и промывают этиловым спиртом дважды порциями по

11

10 см³? предварительно ополаскивая растворителем емкость, в которой находилась проба.

Объединенный раствор упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани не выше 30 °С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха. Остаток последовательно растворяют в 1 см³ метанола и 1 см³ смеси растворителей (подготовленной по п. 7.1), выдерживая по 1 мин на ультразвуковой бане, и анализируют при условиях хроматографирования, указанных в п. 7.5Л.

Пробу вводят в испаритель хроматографа не менее двух раз. Устанавливают площадь пика действующего вещества, с помощью градуировочного графика определяют концентрацию пиноксадена в хроматографируемом растворе.

Образцы, дающие пики, большие, чем градуировочный раствор с концентрацией 1,0 мкг/см³, разбавляют подвижной фазой (не более чем в 50 раз).

Перед анализом опытных образцов проводят хроматографирование холостых (контрольных) проб - экстрактов неэкспонированного фильтра и салфетки.

11. Обработка результатов анализа

ILL Воздушная среда

Концентрацию пиноксадена в пробе воздуха X, мг/м³, рассчитывают’ но формуле:

W

X ~Сх —, где

К

С - концентрация пиноксадена в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см³;

W- объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см³;

V_{ - объем пробы воздуха, отобранный для анализа, приведенный к стандартным условиям (давление 760 мм рт. ст., температура 20 °С), дм³.

МУК 4.1.2463—09

t - длительность отбора пробы, мин.

За результат анализа (X) принимается среднее арифметическое ре-

— (X +Х )

зультатов двух параллельных определений Х₁ и Х₂ (X - -————),

расхождение между которыми не превышает значений норматива оперативного контроля сходимости (с/):

\X_x-X₂\±d,

X

^d=d°^mH х loo ’^мг/м3’^где

d~ норматив оперативного контроля сходимости, мг/м³;

d_mH ~ норматив оперативного контроля сходимости, % (равен 15%).

1L2. Смывы с кожных покровов Концентрацию пиноксадена в пробе смыва X, мкг/смыв, рассчитывают по формуле:

Х = С х w, где

С - концентрация пиноксадена в хроматографируемом растворе, найденная по градуировочному графику в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см³;

W- объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см³;

Примечание: Идентификация и расчет концентрации пиноксадена в пробах могут быть проведены с помощью компьютерной программы обработки хроматографических данных, включенной в аналитическую систему.

12. Оформление результатов измерений

Результат количественного анализа представляют в виде:

Результат анализа X в мг/м³ или мкг/смыв (с указанием площади смыва в см²), характеристика погрешности S, % (± 25 %), Р ~ 0,95 или

X ± Д мг/м³ (мкг/смыв, площадь смыва, см²), Р = 0,95, где А - абсолютная погрешность,

д - ft У— мг/м³ (мкг/смыв).

100

Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность.

13

Бели содержание вещества менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:

«содержание пиноксадена в пробе воздуха рабочей зоны - менее 0,1 мг/м³; смыва -менее 0,1 мкг/смыв»*

* - 0,1 мг/м³; 0,1 мкг/смыв - пределы обнаружения при отборе 2,5 дм³ воздуха рабочей зоны; в пробе смыва (фиксированная площадь смыва, 200 см²) соответственно.

13. Контроль погрешности измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ ИСО 5725-1-6. 2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений».

14. Разработчики

Юдина Т. В., Федорова Н. Е., Волкова В. Н., Горячева Л. В. (ФГУН «Федеральный научный центр гигиены им. Ф. Ф. Эрисмана Роспотребнадзора»).

14

Измерение концентраций пиноксадена в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.2463—09

Технический редактор А. В. Терентьева

Подписано в печать 18.12.09 Формат 60x88/16    Печ.    л.    1,0

Тираж 200 экз.

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 127994, Москва, Вадковский пер., д. 18, стр. 5, 7

Оригинал-макет подготовлен к печати и тиражирован отделом издательского обеспечения Федерального центра гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора 117105, Москва, Варшавское ш., 19а Отделение реализации, тел./факс 952-50-89

ББК 51.21 И37

ИЗ 7    Измерение концентраций пиноксадена в воздухе рабочей

зоны и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: Методические указания.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2009.—14 с.

]. Разработаны Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (авторы Юдина Т. В., Федорова Н. Е., Волкова В. Н., Горячева Л. В.).

2.    Рекомендованы к утверждению Комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол от 25 декабря 2008 г. № 3).

3.    Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г .Г. Онищенко 2 февраля 2009 г.

4.    Введены в действие с 2 февраля 2009 г.

5.    Введены впервые.

ББК 51,21

€> Роспотребнадзор, 2009 С) Федеральный центр гигиены и

эпидемиологии Роспотребнадзора, 2009

МУК 4.1 .2463—09

Содержание

Измерение концентраций пиноксадена в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии..................................................................................4

1.    Погрешность измерений.........................................................................................5

2.    Метод измерений.............. 5

3.    Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и

материалы................................................................................................................6

ЗЛ. Средства измерений........................................................................................6

3.2.    Реактивы...........................................................................................................6

3.3.    Вспомогательные устройства,    материалы.....................................................6

4.    Требования безопасности................................................................ 7

5.    Требования к квалификации операторов..............................................................8

6.    Условия измерений.................................................................................................8

7.    Подготовка к выполнению измерений..................................................................8

7.1.    Подготовка смеси растворителей для приготовления градуировочных

растворов и проб.....................................................................................................8

7.2.    Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ........................................... 8

7.3.    Кондиционирование хроматографической колонки.....................................8

7.4.    Приготовление градуировочных растворов и растворов внесения.............9

7.5.    Установление градуировочной характеристики................................... 9

7.6.    Подготовка фильтров для отбора проб воздуха..........................................10

7.7.    Подготовка салфеток    для проведения смыва..............................................10

8.    Отбор и хранение проб воздуха...........................................................................10

9.    Условия проведения смыва..................................................................................11

10.    Выполнение измерений......................................................................................11

10.1.    Воздушная среда..........................................................................................11

10.2.    Смывы с кожных покровов.........................................................................11

11.    Обработка результатов анализа.........................................................................12

ИЛ. Воздушная среда..........................................................................................12

11.2.    Смывы с кожных покровов..........................................................................13

12.    Оформление результатов измерений.................................................................13

13.    Контроль погрешности измерений....................................................................14

14.    Разработчики.......................................................................................................14

3

Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации

2 февраля 2009 г.

Дата введения: 29 апреля 2009 г

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение концентраций пиноксадена в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.2463—09

Настоящие методические указания устанавливают метод высоко эффективной жидкостной хроматографии для определения в воздухе рабочей зоны и смывах с кожных покровов операторов концентрации пиноксадена в диапазонах соответственно 0,1—2,0 мг/м³; 0,1— 2,0 мкг/смыв.

2,2-Диметилпропионовая кислота, 8-(2,6-диэтил-4-метилфенил)-9-оксо-1,2,4,5тетрагидро-9Н-пиразоло[ 1,2-d][ 1,4,5]оксадиазепин-7-    ил

эфир (ШРАС)

c₂₃h₃₂n₂o₄.

Мол. масса 400,5.

4

МУК 4.1.2463—09

Бесцветное кристаллическое вещество, со сладковатым запахом. Температура плавления 120,5—121,6 °С. Давление паров - 2,0 х 10'⁷Па (при 20 °С), 4,6 х 10‘⁷Па (при 25 °С). Растворимость в органических растворителях при 25 °С (в г/дм³): ацетон - 250; дихлорметан - > 500; этил-ацетат - 130; метанол - 260; толуол - 130; н-октанол - 140; н-гексан -1,0. Растворимость в воде 200 мг/дм³ (25^О0С). Коэффициент распределения н-октанол-вода - logK_ow = 3,2.

Гидролитическая стабильность (DT₅o) при 25 °С - 17,2 дней (pH 4); 17,5 дней (pH 5); 9,9 дней (pH 7); 0,2 дня (pH 9).

Агрегатное состояние в воздушной среде - аэрозоль.

Краткая токсикологическая характеристика.

Острая пероральная токсичность (LD50) для крыс - более 5 000 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD₅₀) для кроликов - более 2000 мг/кг; острая ингаляционная токсичность (LC₃₀) для крыс (4 ч) -4,63 мг/дм* (самцы), 6,24 мг/дм³ (самки).

Область применения препарата.

Пиноксаден рекомендуется в качестве высокоэффективного селективного иослевсходового гербицида для подавления роста широкого спектра лаковых сорняков на посевах ячменя, пшеницы, ржи и тритикале.

Ориентировочный безопасный уровень воздействия (ОБУВ) пииок-садена в воздухе рабочей зоны - 1,0 мг/м³.

1. Погрешность измерений

Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью, не превышающей ± 25 %, при доверительной вероятности 0,95.

2. Метод измерений

Измерения концентраций пиноксадена выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на обращенной фазе с ультрафиолетовым детектором.

Концентрирование пиноксадена из воздуха осуществляют на бумажный фильтр «синяя лента», экстракцию с фильтров проводят этиловым спиртом. Смыв с кожных покровов также проводят этиловым спиртом.

Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 1 нг. Средняя полнота извлечения с фильтров - 95,82 %, с поверхности кожи -92,28%.

5

МУК 4.1.2463—09

3. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы

3.1. Средства измерений Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым Номер в Государственном детектором с переменной длиной волны (фирмы реестре средств измерений «Perkin Elmer», США)    15311-02

Барометр-анероид М-67    ТУ 2504-1797-75

Весы аналитические ВЛА-200    ГОСТ 24104

Колбы мерные 2-100-2 и 2-1000-2    ГОСТ 1770

Меры массы    ГОСТ 7328

Пипетки градуированные 2 класса точности вместимостью 1,0; 2,0; 5,0; 10 см³    ГОСТ 29227

Пробирки градуированные вместимостью 5 или 10 см³    ГОСТ 1770

Пробоотборное устройство ПУ-442ТЦ исп. 1    Номер в Государственном реестре

(ЗАО «ОИТЭК», г. Санкт-Петербург)    средств измерений 14531-03

Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2, цена деления ГС, пределы измерения 0—55 °С    ТУ 215-73Е

Цилиндры мерные 2 класса точности вместимостью 10, 250, 500 и 1 000 см³    ГОСТ 1770

Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы

Пиноксаден, аналитический стандарт с содержанием основного вещества 99,7 %

(фирмы «Сингента»)

Вода бидистиллированная, деионизованная или перегнанная над КМп0₄    ГОСТ 6709

Кислота муравьиная, 85 %, Рапгеас

Метиловый спирт (метанол), хч    ГОСТ 6995

Этиловый спирт (этанол) ректификованный    ГОСТ Р 51652 или

ГОСТ 18300

Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.

3.3. Вспомогательные устройства, матер иолы Аппарат для встряхивания типа АВУ-бс    ТУ 64-1-2851-78

Бумажные фильтры «синяя лента», обеззолениые ТУ 6-09-2678-77

6

МУК 4.1.2463—09

трации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны». Организация обучения работников безопасности труда по ГОСТ 12.0.004.

5. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе.

К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией «лаборант», имеющего опыт работы в химической лаборатории.

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

•    процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С и относительной влажности не более 80 %.

•    выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению измерений

Выполнению измерений предшествуют следующие операции: подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ, кондиционирование хроматографической колонки, приготовление растворов для градуировки и внесения, установление градуировочной характеристики, подготовка фильтров и салфеток для отбора проб, отбор проб.

7. /. Подготовка смеси растворителей для приготовления градуировочных растворов и проб

В мерную колбу вместимостью 1 000 см³ помещают 200 см³ метанола и доводят до метки бидистиллированной или деионизованной водой, перемешивают, фильтруют и дегазируют.

7.2. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ

В мерную колбу вместимостью 1 000 см³ помещают 250 см³ бидистиллированной или деионизованной воды, 1 см³ муравьиной кислоты, 750 см³ метанола, перемешивают, фильтруют и Дегазируют.

73. Кондиционирование хроматографической колонки

Промывают колонку подвижной фазой (приготовленной по п. 7.2) при скорости подачи растворителя 0,3 см³/мин до установления стабильной базовой линии.

8

МУК 4.1.2463—09

7.4. Приготовление градуировочных растворов и растворов внесения

7.4.1.    Исходный раствор пиноксадепа для градуировки (концентра-ция 100 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ вносят 0,0100 г пиноксадена, добавляют 50—70 см³ метанола, перемешивают, доводят метанолом до метки, вновь перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в течение 3 мес.

Растворы №№ 1—6 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного раствора для градуировки.

7.4.2.    Раствор № 1 пиноксадена для градуировки и внесения (концентрация 10 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 10 см³ исходного раствора пиноксадена с концентрацией 100 мкг/см³ (п. 7.4.1), разбавляют метанолом до метки, перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в течение месяца.

Этот раствор используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения действующего вещества методом «внесено-найдено».

7.4.3.    Рабочие растворы №№ 2—6 пиноксадена для градуировки (концентрация 0,05—1,0мкг/см³). В 5 мерных колб вместимостью 100 см³ помещают по 0,5; 1,0; 2,0; 5,0 и 10,0 см³ градуировочного раствора № 1 с концентрацией 10 мкг/см³ (п. 7.4.2), доводят до метки подвижной фазой, приготовленной по п. 7.2, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы №№ 2—6 с концентрацией пиноксадена 0,05; 0,1; 0,2; 0,5 и 1,0 мкг/см³ соответственно.

Растворы хранятся в холодильнике в течение 7 дней.

7.5. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (относительные единицы) от концентрации пиноксадена в растворе (мкг/см³), устанавливают методом абсолютной калибровки по 5 растворам для градуировки №№ 2—6.

В инжектор хроматографа вводят по 20 мм³ каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 7,5.1. Осуществляют не менее 3 параллельных измерений. Устанавливают площади пиков действующего вещества.

Градуировочный график проверяют ежедневно по анализу 2 растворов для градуировки различной концентрации. Если значения площадей отличаются более чем на 12 % от данных, заложенных в градуировочную характеристику, ее строят заново, используя свежеприготовленные рабочие растворы для градуировки.

9