Государственное санитарно-эпидемиологическое нормирование _Российской Федерации_
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Определение остаточных количеств трифенацина (по дифенацину) в воде методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
Методические указания МУК 4.1.2405—08
Издание официальное
Москва • 2009
Федеральная служба но надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека
4.1. Методы контроля. Химические факторы
Определение остаточных количеств трифенацина (по дифенацину) в воде методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
Методические указания МУК 4.1.2405-08
МУК 4.1.2405-08
п. 7.2., тщательно перемешивают, получают рабочие растворы №№ 2 -5 с концентрацией дифенацина 0,05; 0,1; 0.25 и 0,5 мкг/см3, соответственно.
Растворы хранятся в холодильнике в течение недели.
7.5. Установление градуировочной характеристики
Градуировочную характеристику, выражающую линейную (с угловым коэффициентом) зависимость площади пика дифенацина (относительные единицы) от концентрации вещества в растворе (мкг/см3), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4-м растворам для градуировки №№ 2-5.
В инжектор хроматографа вводят по 20 мм3 каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по п. 9.3. Осуществляют не менее 3-х параллельных измерений. Устанавливают площади пиков дифенацина.
Градуировочный график проверяют ежедневно по анализу 2-х растворов для градуировки различной концентрации. Если значения площадей отличаются более чем на 10% от данных, заложенных в градуировочную характеристику, ее строят заново, используя свежеприготовленные рабочие растворы для градуировки.
7.6. Приготовление 1% раствора уксусной кислоты в этилацетате
В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 50 - 70 см3 этил-ацетата, вносят 2 см3 ледяной уксусной кислоты, доводят до метки этилацетатом, тщательно перемешивают.
7.7. Подготовка концентрирующего патрона Sep-Pak Silica для очистки экстракта
Патрон Sep-Pak Silica устанавливают на аллонж с прямым отводом для вакуума*, сверху в патрон вставляют шприц с разъемом Льюера объемом не менее 10 см3, используемый в качестве емкости для элю-ента.
Концентрирующий патрон промывают последовательно 5 см3 этил-ацетата, затем 5 см3 смеси гексан-этилацетат (1:1, по объему). Процедуру проводят с использованием вакуума, скорость потока растворов через патрон не должна превышать 5 см3/мин, при этом нельзя допускать высыхания поверхности патрона.
МУК 4.1.2405-08
* Примечание: В отсутствии специального аллонжа, жидкость продавливают через патрон с помощью шприца, скорость продавливания раствора не должна превышать 1-2 капли в сек.
7.8. Проверка хроматографического поведения дифенацина на концентрирующем патроне Sep-Pak Silica
В круглодонную колбу вместимостью 10 см3 помещают 0,2 см3 градуировочного раствора № 1 дифенацина (п. 7.4.2), растворитель упаривают досуха при температуре не выше 35°С, остаток растворяют в 2 см3 этилацетата, помещая на 30 сек в ультразвуковую баню. Затем в колбу добавляют 2 см3 гексана, смесь тщательно перемешивают и вносят на концентриующий патрон, подготовленный по п. 7.7. Колбу обмывают 5 см3 смеси гексан-этилацетат (1:1, по объему) и также вносят на патрон. Патрон дополнительно промывают 15 см3 смеси гексан-этилацетат (1:1, по объему), 20 см3 смеси этих же растворителей в объемном соотношении 3:7, затем 20 см3 этилацетата. Скорость прохождения раствора через патрон не должна превышать 1-2 капли в сек. Элю-ат отбрасывают.
Дифенацин элюируют с патрона 40 см3 1% уксусной кислоты в этилацетате (п. 7.6), собирая 5 порций элюата по 5 см3 каждая непосредственно в круглодонные колбы. Растворы в колбах упаривают досуха при температуре не выше 35°С. Остаток в каждой колбе растворяют в 2-х см3 подвижной фазы (приготовленной по п. 7.2) и анализируют содержание дифенацина по п. 9.3. Фракции, содержащие дифенацин, объединяют и вновь анализируют. Рассчитывают уровень вещества в элюате, определяют полноту смывания с патрона и необходимый для очистки объем элюента.
ПРИМЕЧАНИЕ: Проверку хроматографического поведения дифенацина следует проводить обязательно, поскольку профиль вымывания может изменяться при использовании новой партии патронов и растворителей.
8, Отбор проб
Отбор проб производится в соответствии с ГОСТ Р 51592-2000 «Вода. Общие требования к отбору проб», «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов» (№> 2051-79 от 21.08.79).
Пробы воды анализируют в день отбора, при необходимости хранят в холодильнике при температуре 4-6°С в течение 10-ти недель. Для
11
МУК 4.1.2405-08
длительного хранения пробы замораживают и хранят в полиэтиленовой таре в морозильной камере при температуре -18°С.
Перед анализом образцы воды фильтруют через неплотный бумажный фильтр.
9. Выполнение определения
9.1. Экстракция
Образец анализируемой воды объемом 500 см3 помещают в делительную воронку вместимостью 1000 см3, добавляют 75 см3 хлористого метилена, интенсивно встряхивают делительную воронку в течение 2-х мин. После полного разделения фаз нижний органический слой переносят в круглодонную колбу вместимостью 250 см3, фильтруя его через 2-х см слой безводного сульфата натрия, помещенный в конусную химическую воронку диаметром 60 мм, снабженную бумажным фильтром «красная лента». Операцию экстракции водной фазы повторяют еще дважды порциями этилацетата по 50 см3. Отстоявшийся слой хлористого метилена (нижняя фаза) фильтруют в колбу с ранее полученным экстрактом.
Объединенный экстракт упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 40°С, подвергают очистке в соответствии с п. 9.2.
9.2. Очистка экстракта
Сухой остаток в колбе, полученный по п. 9.1, растворяют в 2 см3 этилацетата, помещая на 30 сек в ультразвуковую баню. Затем в колбу добавляют 2 см3 гексана, смесь тщательно перемешивают и вносят на концентрирующий патрон Sep-Pak Silica, подготовленный по п. 7.7. Колбу обмывают 5 см3 смеси гексан-этилацетат (1:1, по объему) и также вносят на патрон. Патрон дополнительно промывают 15 см3 смеси гексан-этилацетат (1:1, по объему), 20 см3 смеси этих же растворителей в объемном соотношении 3:7, затем 20 см3 этилацетата. Скорость прохождения раствора через патрон не должна превышать 1-2 капли в сек. Элюат отбрасывают.
Дифенацин элюируют с патрона 35 см3 1% уксусной кислоты в этилацетате (п. 7.6), собирая элюат непосредственно в круглодонную колбу. Раствор упаривают досуха при температуре не выше 35°С. Остаток в колбе растворяют в 2 см3 подвижной фазы (приготовленной по п. 7.2) и анализируют содержание дифенацина по п. 9.3.
МУК 4.1.2405-08
9.3. Условия хроматографирования
Измерения выполняют при следующих режимных параметрах:
Жидкостный хроматограф «Perkin Elmer» (США) с ультрафиолетовым детектором
Хроматографическая колонка стальная, длиной 250 мм, внутренним диаметром 2,0 мм, содержащая Spherisorb® S5 ODS 2, зернением 5 мкм
Температура колонки: комнатная
Подвижная фаза: ацетонитрил-вода-орто-фосфорная кислота
(85:15:0,1, по объему)
Скорость потока элюента: 0,3 см3/мин
Рабочая длина волны: 312 нм
Чувствительность: 0,01 ед. абсорбции на шкалу
Объем вводимой пробы: 20 мм3
Ориентировочное время выхода дифенацина: 6,25 - 6,40 мин
Линейный диапазон детектирования: 1 - 20 нг.
Образцы, дающие пики, большие, чем градуировочный раствор дифенацина с концентрацией 0,5 мкг/см3, разбавляют (не более чем в 50 раз) подвижной фазой для ВЭЖХ (подготовленной по п. 7.2).
10. Обработка результатов анализа
Содержание трифенацина в пробе рассчитывают по формуле:
Ах W
Х = «------------- , где
V х К
X - содержание трифенацина в пробе, мг/дм3;
А - концентрация дифенацина, найденная по градуировочному графику, в соответствии с величиной площади хроматографического пика, мкг/см3;
W - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования,
см3;
V - объем анализируемого образца воды, см3;
К - коэффициент пересчета, равный 0,66'.
' В случае иного содержания дифенацина в трифенацине коэффициент К соответствует этой величине.
13
МУК 4.1.2405-08
11. Проверка приемлемости результатов параллельных определений
За результат анализа принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости (1):
100
( * , + * г)
где Хь Хг результаты параллельных определений, мг/дм3; г- значение предела повторяемости (таблица 1), при этом г ™ 2.8стг. При невыполнении условия (1) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.
12. Оформление результатов
Результат анализа представляют в виде:
(X ± А) мг/дм3 при вероятности Р= 0.95,
где X- среднее арифметическое результатов определений, признанных приемлемыми, мг/дм3;
А- граница абсолютной погрешности, мг/дм3;
А -6*Х/Ю0,
S - граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, таблица 1), %.
В случае если содержание компонента менее нижней границы диапазона определяемых концентраций, результат анализа представляют в виде:
«содержание вещества в пробе менее 0.0002 мг/дм3»*
* - 0.0002 мг/дм3 - предел обнаружения.
13. Контроль качества результатов измерений
Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-1-6-2002 «Точность (правильность и прецинзионность) методов и результатов измерений».
13.1. Стабильность результатов измерений контролируют перед проведением измерений, анализируя один из градуировочных растворов.
14
МУК 4.1.2405-08
13.2. Плановый внутрилабораторный оперативный контроль процедуры выполнения анализа проводится методом добавок.
Величина добавки Сд должна удовлетворять условию:
где А- граница абсолютной погрешности, мг/дм3;
где ± дл-(±длР) - характеристика погрешности (абсолютная погрешность) результатов анализа, соответствующая содержанию компонента в испытуемом образце (расчетному значению содержания компонента в образце с добавкой соответственно) мг/дм3, при этом:
А =8 *Х/100,
8D- граница относительной погрешности методики (показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций, таблица 1), %. Результат контроля процедуры Кк рассчитывают по формуле:
К X' - X -
где X, X, Сд среднее арифметическое результатов параллельных определений (признанных приемлемыми по п.11) содержания компонента в образце с добавкой, испытуемом образце, концентрация добавки, соответственно, мг/дм3;
Норматив контроля К рассчитывают по формуле
Проводят сопоставление результата контроля процедуры (Кк) с нормативом контроля (К).
Если результат контроля процедуры удовлетворяет условию
Ik.Uk,
процедуру анализа признают удовлетворительной.
При невыполнении условия (2) процедуру контроля повторяют. При повторном невыполнении условия (2) выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и принимают меры по их устранению.
13.3. Проверка приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости:
15
Расхождение между результатами измерений, выполненных в двух разных лабораториях, не должно превышать предела воспроизводимости (R)
где Х|, Х2 - результаты измерений в двух разных лабораториях, мг/дм3;
R - предел воспроизводимости (в соответствии с диапазоном концентраций, таблица 1), %.
14. Разработчики
Юдина Т.В., Федорова Н.Е., Волкова В.Н. (Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана).
0-60 Определение остаточных количеств трифенацина (по ди-фенацину) в воде методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методические указания. - М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2009. - 16 с.
1. Разработаны Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (авторы Юдина Т.В., Федорова Н.Е., Волкова В.Н.)
2. Рекомендованы к утверждению комиссией по санитарно-эпидемиологическому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (протокол № 2 от 3.07.2008).
3. Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г. Онищенко 17 июля 2008 г.
4. Введены в действие с 1 сентября 2008 г.
5. Введены впервые.
ББК 51.21
Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 127994, Москва, Вадковский пер., д, 18/20.
Тиражировано отделом издательского обеспечения Федерального центра гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора 117105, Москва, Варшавское ш., 19а Отделение реализации, тел./факс 952-50-89.
© Роспотребнадзор, 2009 © Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2009
МУК 4.1.2405-08
УТВЕРЖДАЮ Руководитель Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главный Государственный санитарный врач Российской Федерации
Г.Г. Онищенко
17 июля 2008 г.
Дата введения: 1 сентября 2008 г.
4.1. Методы контроля. Химические факторы
Определение остаточных количеств трифенацина (по дифенацину) в воде методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
Методические указания МУК 4.1.2405-08
Настоящие методические указания устанавливают метод высоко-эффективной жидкостной хроматографии для определения в воде массовой концентрации трифенацина (по дифенацину) в диапазоне 0,0002 - 0,002 мг/дм3.
Трифенацин - смесь производных индан-1,3-дионов, основным компонентом которой является дифенацин (дифацинон)- содержание не менее 70%.
Дифенацин
2-(дифенилацетил)-индан-1,3-дион (ШРАС)
СгзН^Оз Мол. масса 340,4
Твердое вещество светло-желтого цвета. Температура плавления 145-147Х. Растворимость в органических растворителях (в г/кг): хло-
3
МУК 4.1.2405-08
роформ - 204; толуол - 73; ксилол - 50; ацетон - 29; этанол -2,1; н-гептан - 1,8. Практически не растворим в воде - менее 0,3 мг/дм3. Растворим в щелочах с образованием солей. Стабилен в течение 14 дней при pH 6-9, гидролизуется (< 24 час) при pH 4. Быстро разлагается в воде на солнечном свету. Слабая кислота, образует водорастворимые соли щелочных металлов.
Краткая токсикологическая характеристика:
Острая пероральная токсичность (LD50) в мг/кг: для крыс - 2,3; мышей - 340; кроликов -35; кошек -14,7; собак - 3-7,5; острая дермальная токсичность (LD50) для крыс - менее 200 мг/кг; острая ингаляционная токсичность (LC50) для крыс - менее 2 мг/дм3 (4 ч).
Область применения
Дифенацин - ротентицид класса индандионов, обладающий антикоагулянтной активностью, рекомендуется для борьбы с грызунами в открытом грунте (осень, зима, весна) на зимующих культурах (зерновые, пастбищные травы, древесные, кустарниковые насаждения и др.), в защищенном грунте на всех культурах независимо от сезона. Применяется в виде приманки.
ОДУ дифенацина в воде водоемов - 0,0008 мг/дм3.
1.Метрологические характеристики
При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и её составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности Р=0,95 не превышает значений, приведенных в таблице 1, для соответствующих диапазонов концентраций.
Таблица 1
Метрологические параметры |
Анализиру
емый
объект |
Диапазон определяемых концентраций, мг/кг (дм3) |
Показатель точности (граница относительной погрешности) ±5. % Р=0,95 |
Стандартное отклонение повторяемости, аг, % |
Предел Повторяемости, г, % |
Предел воспроизводимости, R, % |
Вода |
от 0,002 до 0,001 вкл. |
100 |
5,2 |
14 |
17 |
менее 0,001 до 0,0002 |
150 |
5,4 |
15 |
18 |
|
МУК 4.1.2405-08
Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата для полного диапазона концентраций (п = 20) приведены в таблице 2.
Таблица 2
Полнота извлечения вещества, стандартное отклонение, доверительный интервал среднего результата |
Анализи
руемый
объект |
Метрологические параметры, Р - 0,95, п = 20 |
Предел
обнару
жения,
мг/дм3 |
Диапазон
определяемых
концентраций,
мг/дм3 |
Среднее
значение
определения
% |
Стандартное
отклонение,
S,% |
Доверительный интервал среднего результата, +,_% |
Вода |
0.0002 |
0,0002-0,002 |
75,5 |
__ |
2,0 |
|
2. Метод измерений
Методика основана на определении трифенацина (по дифенацину) с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с ультрафиолетовым детектором после экстракции из анализируемой пробы воды дихлорметаном и последующей очистки экстракта на патроне для твердофазной экстракции Sep Рак Silica.
Для расчета содержания трифенацина в пробе воды используют поправочный коэффициент, учитывающий массовую долю дифенацина в трифенацине.
3, Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы
3,1, Средства измерений
Жидкостный хроматограф «Perkin Elmer» (США) с ульт- Номер в Государственном
рафиолетовым детектором Весы аналитические ВЛА-200 Колбы мерные 2-50-2, 2-100-2 и 2-1000-2 Меры массы
Пипетки градуированные 2-го класса точности вместимостью 1,0,2,0, 5,0, 10 см3
Пробирки градуированные вместимостью 5 или 10 см3 ГОСТ 1770 Цилиндры мерные 2>го класса точности вместимостью ГОСТ 1770 10, 50, 100 и 1000 см3
5
МУК 4 Л .2405-08
Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.
3.2. Реактивы
Дифснацин, аналитический стандарт с содержанием действующего вещества 98,2% («Блок-1»)
Ацетонитрил для хроматографии, хч ТУ-б-09-4326-76
Вода бидистиллированная, деионизованная или перегнанная ГОСТ 6709 над КМп04
н-Гексан, хч ТУ 6-09-33-75
11атрий сернокислый безводный, хч ГОСТ
Кислота орто-фосфорная, хч, 85% ГОСТ 6552
Метилен хлористый (дихлорметан), хч ГОСТ 12794
Этиловый эфир уксусной кислоты (этилацетат) эталонный ГОСТ 4166
Допускается использование реактивов иных производителей с аналогичной или более высокой квалификацией.
3.3. Вспомогательные устройства, материалы
Аллонж прямой с отводом для вакуума (для работы с концентрирующими патронами)
Баня ультразвуковая фирмы Донау (Швейцария)
Бумажные фильтры "красная лента", обеззоленные Воронки делительные вместимостью 1000 см3 Воронки конусные диаметром 30-37 и 60 мм Груша резиновая
Колбы плоскодонные вместимостью 200 - 250 см3
Колбы круглодонные на шлифе вместимостью 10, 100 и 250
см3
Мембранные фильтры капроновые, диаметром 47 мм Насос водоструйный
Патроны для твердофазной экстракции типа Sep-Pak Sillica Cartridges (масса сорбента 690 г)
Пробирки центрифужные
6
МУК 4.1.2405-08
Ротационный вакуумный испаритель В-169 фирмы Buchi, ТУ 25-11-917-74 Швейцария
Стаканы химические, вместимостью 50 и 100 см5 ГОСТ 25336
Стекловата
Стеклянные палочки
Установка для перегонки растворителей
Набор для фильтрации растворителей через мембрану
Хроматографическая колонка стальная, длиной 250 мм,
внутренним диаметром 2,0 мм, содержащая Spherisorb® S5
ODS 2, зернением 5 мкм
Шприц для ввода образцов для жидкостного хроматографа вместимостью 50- 100 мм3
Шприц медицинский с разъемом Лмоера ГОСТ 22090
Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.
4. Требования безопасности
4.1. При выполнении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, требования электробезоиасности при работе с электроустановками по ГОСТ 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на жидкостной хроматограф.
4.2. Помещение должно соответствовать требованиям пожаробезопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009. Содержание вредных веществ в воздухе не должно превышать норм, установленных ГН 2.2.5.1313-03 «Предельно-допустимые концентрации (ПДК) вредных веществ в воздухе рабочей зоны». Организация обучения работников безопасности труда - по ГОСТ 12.0.004.
5. Требования к квалификации операторов
К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе.
К проведению пробоподготовки допускают оператора с квалификацией «лаборант», имеющего опыт работы в химической лаборатории.
7
МУК 4.1,2405-08
6. Условия измерений
При выполнении измерений соблюдают следующие условия:
• процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20±5)°С и относительной влажности не более 80%.
• выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.
7. Подготовка к выполнению измерений
Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ, кондиционирование хроматографической колонки, приготовление растворов для градуировки и внесения, установление градуировочной характеристики, подготовка патронов для твердофазной экстракции, проверка хроматографического поведения вещества на них, отбор проб.
7.7. Подготовка органических растворителей
7.1.1, Очистка ацетонитрила
Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора не менее 1 часа, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия.
7.1.2. Очисткаэтилацетата Этилацетат промывают последовательно 5%-ным водным раствором карбоната натрия, насыщенным раствором хлористого кальция, сушат над безводным карбонатом калия и перегоняют или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок не менее 50.
7.1.3. Очистка н-гексана Растворитель последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты, до тех пор, пока она не перестанет окрашиваться в желтый цвет, водой до нейтральной реакции промывных вод, перегоняют над поташом.
8
МУК 4.1.2405-08
7.2. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ
В мерную колбу вместимостью 1000 см3 помещают 850 см3 ацетонитрила, 150 см3 бидистиллированной или деионизованной воды и 1 см3ортофосфорной кислоты, перемешивают, фильтруют и дегазируют.
7.2. Кондиционирование хроматографической колонки
Промывают колонку подвижной фазой (приготовленной по п. 7.2) при скорости подачи растворителя 0,3 см3/мин до установления стабильной базовой линии.
7.4. Приготовление градуировочных растворов и растворов внесения
7,4.1. Исходный раствор дифенацина для градуировки (концентрация 100 мкг/см3)
В мерную колбу вместимостью 100 см3 вносят 0,0100 г дифенацина, добавляют 50-70 см3 ацетонитрила, перемешивают, доводят ацетонитрилом до метки, вновь перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в течение месяца.
Растворы № 1-5 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного раствора для градуировки.
7.4,2. Раствор Ns 1 дифенацина для градуировки и внесения (концентрация 10 мкг/смJ)
В мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 10 см3 исходного раствора дифенацина с концентрацией 100 мкг/см3 (п. 7.4.1), разбавляют ацетонитрилом до метки, перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в течение месяца.
Раствор используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения действующего вещества методом «внесе-но-найдено», а также контроле качества результатов измерений методом добавок.
7.4.3. Рабочие растворы Ns 2-5 дифенацина для градуировки (концентрация 0t05 -0,5 мкг/см3)
В 4 мерные колбы вместимостью 100 см3 помещают по 0,5; 1,0; 2,5 и 5,0 см3 градуировочного раствора №1 с концентрацией 10 мкг/см3 (п. 7.4.2), доводят до метки подвижной фазой, приготовленной по
9