МУК 4.1.1420-03
Измерение концентраций флудиоксонила в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Федеральная служба по напору в сфере laiiuu ы прав iiorpcCine.icii и благополучия человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды

Сборник методических указаний

Выпуск 3 Часть 8

МУК 4.1.1416—03, 4.1.1418—4.1.1420—03 ¹

ББК 51.23+51.21 060

060 Oupc.ie. iciiiic остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды: Сборник методических указаний.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора. 2007.—13 с — Вып. 3.—Ч. 8.

1. Сборник подготовлен: Федеральным научным центром гигиены им. Ф. Ф. ^г)рисмана (чл.-корр. РАМН. проф. В. Н. Ракшский. проф.

Т. В. Юлина): Московской ссльскохтяйс1венной академией им. К. А. Тимирязева (нроф. В. А. Калинин, к. х. н. А. В. Дов1 илевич). при участии Департамента госсанэпиднадзора Минздрава России (А. Г1. Веселов). Разработчики методик указаны в конце каждой из них.

2.    Меюднческие указа пня рекомендованы к утверждению Комиссией по госсанэпиднормированию при Минздраве России.

3.    Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации. Первым заместителем Миниара здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г. Г. Онищенко 24 июня 2003 г.

4.    Введены с 30 июня 2003 г.

5.    Введены впервые.

ББК 51.23+51.21

С¹ Роспотребнадзор, 2007 €> Федеральный центр гигиены и

эпидемиологии Росно гребка пора, 2007

7.6. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади или высоты хроматографического пика (отн. единицы, мм) от концентрации флудноксонила в растворе (мкг/см³). устанавливают методом абсолютной калибровки по пяти растворам для градуировки: растворы № 2—6. растворы № 7—11 или растворы № 12—16.

В инжектор хроматографа вводят по 20 мм³ градуировочного раствора № 2—6 или по 10 мм³ раствора № 7—11 (или № 12—16) и анализируют в условиях хроматографирования по п. 7.6.1.1; 7.6.1.2.1 (или 7.6.1.2.2). Осуществляют нс менее 3-х параллельных измерений.

7.6.1. Условия хроматографического анализа

Измерения выполняют при следу ющих режимных параметрах.

7.6.1.1.    Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым

детектором Perkin-Elmer (США)

Колонка стальная длиной 25 см. внутренним диаметром 4.6 мм. содержащая Hipersil ODS. зернением 5 мкм.

Температу ра колонки: комнатная.

Подвижная фаза, ацетонитрил-вода (1 : 1, по объему).

Скорость потока элюента: 1 сяг/мин.

Рабочая длина волны: 268 нм.

Чувствительность: 0.005 ед. абсорбции на шкалу'.

Объем вводимой пробы: 20 мм³.

Ориентировочное время выхода флу дноксонила: 8.0—8.5 мин.

Линейный диапазон детектирования 1—10 нг.

Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 5 мкг/мл. разбавляют подвижной фазой № 1.

7.6.1.2.    Альтернативные условия хроматографирования

Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором Мили-хром (Россия).

7.б. 1.2.1. Колонка стальная, длиной 64 мм, внутренним диаметрам 2 мм, содержащая Силасорб 600, зернением 5 мкм

Температу ра колонки: комнатная.

Подвижная фаза: хлороформ-метанол (95.5 :0.5. по объему ).

Скорость потока элюента: 100 мм³/мин.

Рабочая длина волны: 268 нм.

Чувствительность: 0.2 ед. абсорбции на шкалу.

Объем вводимой пробы: 10 мм³.

40

МУК 4.1.1420—03

Ориентировочный удерживаемый объем флудиоксонила: 670 мм³.

Линейный диапазон детектирования: 5—50 нг.

Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 5 мкг/мл. разбавляют подвижной фазой № 2.

7.6.1.2.2. Колонка стальная, длиной НО мм, внутренним диаметрам 2 мм, содержащая Сепарон CGN-CN, зернением 5 мкм

Температу ра колонки: комнатная.

Подвижная фаза: н-гексан - метанол - изопропанол (92 :4 :4. по объему).

Скорость потока элюента: 100 мм7мин.

Рабочая длина волны: 268 нм.

Чувствительность: 0. 2 ед. абсорбции на шкалу.

Объем вводимой пробы: 10 мм\

Ориентировочный удерживаемый объем флу диоксонила: 600 мм³.

Линейный диапазон детектирования: 5—50 нг.

Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 5 мкг/мл. разбавляют подвижной фазой № 3.

Градуировочную характеристику проверяют ежедневно по анализу двух стандартных растворов различной концентрации. Если значения площади (высоты) хроматографических пиков отличаются более чем на 10% от данных, заложенных в градуировочную характеристик), ее строят заново, используя свежеприготовленные рабочие стандартные растворы.

8. Выполнение измерении

Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 см³, заливают 10 см³ ацетона, помещают на встряхива-тсль на 10 мин. Растворитель сливают, фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями ацетона объемом 10 см³.

Объединенный экстракт упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани нс выше 40 °С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха. остаток растворяют в 10 см³ подвижной фазы № 1 или в 1 см³ подвижной фазы № 2 (№ 3) и анализируют при условиях хроматографнро-вания. указанных в п. 7.6.1.1 или 7.6.1.2.1 (7.6.1.2.2). соответственно.

Пробу вводят в инжектор хроматографа не менее двух раз. Устанавливают площадь (высоту) пика, с помощью градуировочного графика определяют концентрацию флудиоксонила в хроматографируемом растворе.

41

МУК 4.1.1420—03

Результат количественного анализа представляют в виде:

• результат анализа X (мг/м²), характеристика погрешности 8. %. Р = 0.95 или

X ± Л, мг/м², Р = 0.95. где

Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность.

11. Контроль погрешности измерении

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ 2335—95. «ГСИ. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа».

12. Разработчики

Юдина Т. В.. Федорова Н. Е.. Волкова В. Н. (Федеральный научный центр гигиены им. Ф. Ф. Эрнсмана. г. Мытищи Московской обл.). 141000. г. Мытищи Московской обл.. ул. Семашко, д. 2. лаборатория аналитических методов контроля.

Телефон: (095) 586-12-76.

Новицкий В. Ф.. Марусич Н. И.. Капуцкая В. К.. Гинько Г. В. (Белорусский научно-исследовательский санитарно-гигиенический институт). 220012, г. Минск, ул. Ф. Скорины. 8/47. тел. 394-375.

Содержание

Определение остаточных количеств метилизотиоцианата в томатах и огурцах методом газожидкостной хроматографии: МУК 4.1.1416—03..............................4

Измерению концентраций шрама в воздухе рабочей зоны и атмосферном воздухе населенных мест методом газожидкостной хроматографии:

МУК 4.1.1418—03....................................................................................................15

Измерение концентраций фенмедифама в атмосферном воздухе населенных мест методом высокоэффективной жидкостной хроматографии: МУК 4.1.1419—03....................................................................................................24

Измерение концентраций флудиоксонила в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной    жидкостной хроматографии: МУК 4.1.1420—03..............33 ²

МУК 4.1.1420—03

УТВЕРЖДАЮ Главный государственный санитарный врач Российской Федерации,

11ервый заместитель Министра здравоохранения Российской Федерации Г. Г. Онищенко

24 июля 2003 г.

Дата введения: 30 июня 2003 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение концентраций флудиоксоннла в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания МУК 4.1.1420—03

Вводная часть

Настоящие методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения в воздухе рабочей зоны массовой концентрации флудиоксоннла в диапазоне 0.1— 1.0 мг/м³.

Флудиоксонил - действующее вещество препарата МАКСИМ. КС (25 г/л), фирма производитель Сингента (Швейцария).

4-(2.2-дифтор-1,3-бснзодиоксил-4-ил)-1 Н-пнролл-З-карбоннтрил (IUPAC)

C,2H^:N_:0₂.

Мол. масса 248.2.

Бесцветное кристаллическое вещество без запаха. Температура плавления: 199.8 °С.

Давление паров при 25 °С: 3.9 х ИГ* мПа.

33

МУК 4.1.1420—03

Хорошо растворим в ацетоне, этаноле, метаноле, н-октанолс. плохо растворим в гексане: растворимость в воде: 1.5—1.8 мг/л.

Коэ<|к|)иш»ент распределения н-окганол/вода: Kw log Р = 4.12 (25 °С).

В биологически активных почвах в аэробных условиях флудиоксо-нил быстро разлагается или переходит в прочносвязанное состояние: DT5o= 10—25 дней.

Агрегатное состояние в воздухе рабочей зоны - аэрозоль.

Краткая токсикологическая характеристика. Острая пероральная токсичность (LD50) для крыс и мышей> 5 ООО мг/кг: острая дермальная токсичность (LD₅₀) для крыс > 2 ООО мг/кг; острая ингаляционная токсичность (LK50) для крыс > 2 600 мг/м³.

Область применения препарата Флудиоксонил - контактный фунгицид широкого спектра действия с продолжительной активностью, рекомендуемый для предпосевной обработки семян озимой и яровой пшеницы, озимой ржи. кукурузы, подсолнечника и гороха против болезней всходов, а также клубней картофеля против комплекса болезней при хранении. В качестве протравителя семян выпускается препарат в Blue 2.5 %-го концентрата суспензии.

Ориентировочно безопасный уровень воздействия (ОБУВ) в воздухе рабочей зоны - 1.0 мг/м³.

1. Погрешность измерений

Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью, нс превышающей ± 25 %. при доверительной вероятности 0.95.

2. Метод измерения

Измерения концентраций флудиоксонидз выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с ультрафиолетовым детектором.

Концентрирование флудиоксонила из воздуха осуществляют на бумажные фильтры «синяя лента», экстракцию с фильтра проводят ацетоном.

Нижний предел измерения в анализируемом объеме пробы - 1—

5 нг.

Определению не мешают компоненты препаративной формы, а также пестициды, применяемые при выращивании зерновых культур, картофеля, подсолнечника.

МУК 4.1.1420—03

3. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы

3.1. Средства измерений

Жидкостный хроматограф Pcrkin-Elmer (США) с ультрафиолетовым детектором

Жидкостный хроматограф Милихром (Россия) с ультрафиолетовым детектором Весы аналитические ВЛА-200 Пробоотборное устройство ОП-442ТЦ (ЗАО «ОПТЭК». г. Санкт-Петербург) или аспирационное устройство ЭА-1 Барометр-анероид М-67 Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2. цена деления 1 °С. пределы измерения 0—55 °С

Мерные колбы, вместимостью 50 и 100 см³ Пипетки градуированные 2-го класса точности, вместимостью 1. 2. 5 и К) см³ Цилиндры мерные 2-го класса точности, вместимостью 50 и 500 см³

Допускается использование средств или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы

Флудиоксонил с содержанием действующего вещества 99.8 % (Сингента. Швейцария) Ацетонитрил для хроматографии, хч н-Г ексан. ч

Вода бидистиллированная или деионизированная Метиловый спирт, хч Изопропиловый спирт (пропанол-2), хч Хлороформ (трнхлорметан)

3.3. Вспомогательные устройства Воронки химические, конусные.

диаметром 34—10 мм    ’ ГОСТ    25336

Колбы грушевидные со шлифом.

вместимостью 100 см³    ГОСТ    10394

35

Насос водоструйный    ГОСТ 10696

Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М    ТУ 25-11-917—76

или ротационный вакуумный

испаритель В-169 фирмы Buchi. Швейцария

Холодильник водяной обратный    ГОСТ 9737

Хроматографическая колонка стальная.

длиной 25 см. внутренним диаметром 4.6 мм.

содержащая Hipersil ODS. дернением 5 мкм

Хроматографическая колонка стальная.

длиной 80 мм. внутренним диаметром 2 мм.

содержащая Сепарон CGN-CN. зернением

5 мкм

Хроматографическая колонка стальная, длиной 64 мм. внутренним диаметром 2 мм. содержащая Силасорб 600. зернением 5 мкм Шприц для ввода образцов для жидкостного хроматографа, вместимостью 50 мм³ Установка для перегонки растворителей Груша резиновая Стеклянные палочки

Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1.    При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими, легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1005-88.

4.2.    При выполнении измерений с использованием жидкостного хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.

5. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя. с опытом работы на жидкостном хроматографе.

МУК 4.1.1420—03

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

•    процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5) °С и относительной влажности нс более 80 %;

•    выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению измерении

Перед выполнением измерений проводят очистку ацетонитрила и гексана, подготовку подвижных фаз для ВЭЖХ. приготовление растворов. кондиционирование хроматографических колонок, установление градуировочной характеристики, отбор проб.

7. /. Очистка ацетонитрила и гексана

Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пснтоксидом фосфора нс менее 1 ч. после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия.

Гексан встряхивают с небольшими порциями концентрированной серной кислоты до тех пор. пока свежая порция кислоты нс перестанет окрашиваться. Затем гексан последовательно промывают водой. 2 %-м раствором гидроксида натрия и снова водой, после чего сушат ши гидроксидом натрия и перегоняют.

7.2. Подготовка подвижных фа? для ВЭЖХ

7.2.1.    Подвиж ная фаза № 1

В мерную колбу вместимостью 1 ООО см³ помещают 500 см³ биди-стиллированной воды, добавляют 500 см³ ацетонитрила, перемешивают, фильтруют и дегазируют.

7.2.2.    Подвижная фаза № 2

В мерную колбу вместимостью 1 000 см³ помещают 500—700 см³ хлороформа, вносят 5 см³ метанола и доводят хлороформом до метки, фильтруют.

7.2.3.    Подвиж ная фаза № 3

В мерну ю колбу вместимостью 1 000 см³ наливают по 40 см³ изопропанола и метанола, доводят объем раствора в колбе до метки гексаном. фильтруют.

37

МУК 4.1.1420—03

7.3. Приготовление градуировочных растворов

7.3.1.    Серия Л (измерение по п. 7.6.1.1)

7.3.1.1. Исходный рас шор флудиоксонила для 1рад\ ировки (концетрация ЮОмкг/см³)

В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 0,01 г флудиок-соннла. растворяют в 50—70 см³ ацетонитрила, доводят до метки этим же растворителем, тщательно перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в течение месяца.

Рабочие градуировочные растворы флудиоксонила готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного стандартного раствора.

7.3.1.2. Раствор № 1 флудиоксонила для 1радуировки в ацетонитриле (концагграция К) мкг/см³)

В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 10 см³ исходного стандартного раствора флудиоксонила с концентрацией ИХ) мкг/см³ (п. 7.3.1.1). разбавляют ацетонитрилом до метки. Раствор хранится в холодильнике в течение месяца.

7.3.1.3. Рабочие градуировочные растворы № 2—6 (концентрация 0,05—0,50 мкг/см³)

В 5 мерных колб вместимостью 100 см³ помещают по 0.5; 1.0; 2.0;

3.0    и 5.0 см³ стандартного раствора № 1 с концентрацией 10 мкг/см³ (п. 7.3.1.2). доводят до метки подвижной фазой № 1. тщательно перемешивают. получают рабочие растворы № 2—6 с концентрацией флудиоксонила 0.05; 0,1; 0.2; 0.3 и 0.5 мкг/см³. соответственно. Растворы хранятся в холодильнике в течение 15 дней.

7.3.2.    Серия Б (измерение по п. 7.6.1.2.1)

7.3.2.1. Исходный раствор флудиоксонила в подвижной фазе № 2 для градуировки (концентрация 100 мкг/см³)

В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 0.01 г флудиоксонила. растворяют в 50—70 см³ подвижной фазы № 2 (п. 7.2.2). доводят до метки этим же растворителем, тщательно перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в течение месяца.

7.3.2.2. Рабочие градуировочные растворы № 7—10 (концентрация 0,5—5,0 мкг/см³)

В 5 мерных колб вместимостью 100 см³ помещают по 0.5; 1.0; 2.0;

3.0    и 5.0 см³ исходного стандартного раствора флудиоксонила в подвижной фазе № 2 с концентрацией 100 мкг/см³ (п. 7.3.2.1). доводят до

МУК 4.1.1420—03

метки этим же растворителем, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы № 7—11 с концентрацией флудноксонила 0.5; 1.0; 2.0;

3.0    и 5.0 мкг/см³, соответственно.

Рабочие стандартные растворы хранятся в холодильнике в течение месяца.

7.3.3. Серия В (измерение по п. 7.6.1.2.2)

7.3.3.1. Исходный раствор флудноксонила в изопропаноле для градуировки (концентрация 100 мкг/см³)

В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 0.01 г флудиок-сонила. растворяют в 50—70 см³ изопропанола. доводят до метки этим же растворителем, тщательно перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в течение 3-х месяцев.

7.3.3.2. Рабочие 1радуировочш>1е растворы № 12—16 (конце! прация 0,5—5,0 мкг/см³)

В 5 мерных колб вместимостью 100 см³ помещают по 0.5; 1.0; 2.0;

3.0    и 5.0 см³ исходного стандартного раствора флудноксонила в изопро-паноле с концентрацией 100 мкг/см³ (п. 7.3.4.1). доводят до метки подвижной фазой № 3 (п. 7.2.3), тщательно перемешивают, получают рабочие растворы № 12—16 с концентрацией флудноксонила 0.5; 1.0; 2.0;

3.0    и 5.0 мкг/см³. соответственно. Рабочие стандартные растворы хранятся в холодильнике в течение месяца.

7.7. Отбор проб

Отбор проб воздуха проводят в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 «ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей юны».

Воздух со скоростью 1—5 дм7мин с помощью элсктроаспиратора протягивают через бумажный фильтр «синяя лента», закрепленный в фильтродержателе. Для измерения концентрации флудноксонила на уровне ’/₂ ОБУВ воздуха рабочей зоны необходимо отобрать 1 дм³ воздуха.

Срок хранения отобранных проб, помещенных в полиэтиленовые пакеты, в холодильной камере при 4°С- 15 дней.

7.5. Кондиционирование хроматографических колонок

Промывают колонку подвижной фазой (п. 7.2) в течение 30 мин при скорости подачи растворителя 1.0 или 0.1 c.m Vmhh до установления стабильной базовой линии.

39

1

2