Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды

Сборник методических указаний

Выпуск 3 Часть 6 МУК 4.1.1408—4.1.1411—03

ББК 51.23+51.21 060

060 Определение остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды: Сборник методических указаний.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2005.— Вып. 3.—Ч. 6.—52 с.

1.    Сборник подготовлен:    Федеральным научным центром гигиены

им. Ф. Ф. Эрисмана (акад. РАМН, проф. В. Н. Ракитский, проф. Т. В. Юдина); Московской сельскохозяйственной академией им. К. А. Тимирязева (проф.

В. А. Калинин, к. хим. н. А. В. Довгилевич); при участии Департамента госсанэпиднадзора Минздрава России (А. П. Веселов). Разработчики методик указаны в конце каждой из них.

2.    Методические указания рекомендованы к утверждению Комиссией по госсанэпиднормированию при Минздраве России.

3.    Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г. Г. Онищенко 24 июня 2003 г.

4.    Введены с 30 июня 2003 г.

5.    Введены впервые.

ББК 51.23+51.21

Редакторы Аванесова Л. И., Максакова Е. И. Технический редактор Климова Г. И.

Подписано в печать 12.05.05

Печ. л. 3,25 Заказ 12

Тираж 3000 экз.

Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 127994, Москва, Вадковский пер., д. 18/20

Оригинал-макет подготовлен к печати и тиражирован Издательским отделом Федерального центра гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора 117105, Москва, Варшавское ш., 19а Отдел реализации, тел. 952-50-89

© Роспотребнадзор, 2005 © Федеральный центр гигиены

и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2005

МУК 4.1.1411—03

обратным холодильником на водяной бане. Раствор в колбе охлаждают до комнатной температуры и добавляют в него 110 г нитрита натрия, охлаждают в бане со льдом, содержащим NaCl, до С и медленно при перемешивании вливают в смесь 600 г льда и 60 мл концентрированной серной кислоты, помещенную в стакан вместимостью 2 л, охлаждаемый снаружи смесью льда с поваренной солью. Выпавшие кристаллы нит-розометилмочевины немедленно отфильтровывают на воронке Бюхнера, хорошо отсасывают под вакуумом и промывают на фильтре ледяной водой.

Внимание! Нитрозометилмочевину хранят в темной склянке в холодильнике, т. к. под действием света и тепла она может взорваться.

73. Получение раствора диазометана

Диазометан взрывоопасен и очень ядовит. Все работы необходимо проводить в вытяжном шкафу!

В коническую колбу на 100 мл вносят 20 мл 40 %-ного раствора КОН и 50 мл диэтилового эфира, колбу помещают в баню со льдом и охлаждают до температуры 2—5° С. В охлажденную смесь порциями при перемешивании на магнитной мешалке или путем встряхивания вносят 5 г нитрозометилмочевины. Реакционную смесь выдерживают на холоду 10 мин. Затем эфирный слой сливают в чистую коническую колбу вместимостью 100 мл, добавляют 10—15 гранул КОН и колбу оставляют в бане со льдом на 2,5—3 часа для осушения раствора.

Раствор диазометана в эфире годен к употреблению при хранении в холодильнике в течение 1—2 суток. При хранении сосуды с диазометаном нельзя плотно закрывать!

7.4. Приготовление 1N раствора гидроксида натрия

В мерную колбу вместимостью 250 см³ помещают 10 г едкого натра, растворяют в 100—150 см³ дистиллированной воды, доводят водой до метки, тщательно перемешивают.

7.5. Приготовление растворов ортофосфорной кислоты

Для приготовления 1 М раствора ортофосфорной кислоты в мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 6,9 см³ орто-фосфорной кислоты, доводят водой до метки, тщательно перемешивают.

Для приготовления 0,01 М раствора ортофосфорной кислоты в мерную колбу вместимостью 500 см³ помещают 5 см³ 1М раствора ортофосфорной кислоты, доводят до метки водой, тщательно перемешивают.

МУК 4.1.1411—03

7.6. Приготовление растворов соляной кислоты

Для приготовления 1 N раствора соляной кислоты в мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 8,3 см³ концентрированной соляной кислоты, доводят водой до метки, тщательно перемешивают.

Для приготовления 0,05 N раствора соляной кислоты в мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 5 см³ 1 N раствора соляной кислоты, доводят до метки водой, тщательно перемешивают.

7.7. МетодВЭЖХ

7.7.7. Подготовка подвижной фазы для ВЭЖХ

В мерную колбу вместимостью 1000 см³ помещают 850 см³ 0,01 М ортофосфорной кислоты, 50 см³ метанола, добавляют 100 см³ ацетонитрила, перемешивают, фильтруют и дегазируют.

7.7.2. Кондиционирование хроматографической колонки

Промывают колонку подвижной фазой (приготовленной по и. 7.7.1) в течение 30 мин при скорости подачи растворителя 0,4 см³/мин до установления стабильной базовой линии.

7.8. Метод ГЖХ. Подготовка и кондиционирование колонки

Готовую насадку (3 % OV-17 на Супелкопорте) засыпают в стеклянную колонку, предварительно промытую последовательно этиловым спиртом, ацетоном и гексаном, уплотняют под вакуумом, колонку устанавливают в термостате хроматографа, не подсоединяя к детектору, и стабилизируют в токе азота при температуре 230° С в течение 16—20 ч.

7.9. Приготовление градуировочных растворов

7.9.1.    Исходный раствор имазапира для градуировки (концентрация 100 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 0,01 г имазапира, растворяют в 50—70 см³ метанола, доводят метанолом до метки, тщательно перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в течение 3 месяцев.

Растворы №№ 1—5 готовят объемным методом путем последовательного разбавления исходного стандартного раствора.

7.9.2. Серия А. Метод ВЭЖХ

7.9.2.1.    Раствор N° 1 имазапира для градуировки (концентрация 10 мкг/см³). В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 10 см³ исходного стандартного раствора имазапира с концентрацией 100 мкг/см³

МУК 4.1.1411—03

(п. 7.9.1), разбавляют метанолом до метки. Раствор хранится в холодильнике в течение месяца.

Этот стандартный раствор используют для приготовления проб с внесением при оценке полноты извлечения имазапира из исследуемых образцов.

7.9.2.2. Рабочие растворы ММ 2—5 имазапира для градуировки (концентрация 0,05—0,5 мкг/см³).

В 4 мерные колбы вместимостью 100 см³ помещают по 0,5, 1,0, 2,5 и 5,0 см³ стандартного раствора № 1 с концентрацией 10 мкг/см³ (п. 7.9.2.1), доводят до метки подвижной фазой для ВЭЖХ (приготовленной по п. 7.7.1), тщательно перемешивают, получают рабочие растворы №№ 2—5 с концентрацией имазапира 0,05, 0,1, 0,25 и0,5 мкг/см³, соответственно.

Растворы хранятся в холодильнике не более 10 дней.

7.9.3. Серия Б. Метод ГЖХ

7.9.3.1.    Раствор М 6 метилового эфира имазапира для градуировки (соответствует концентрации имазапира 10 мкг/см³).

В коническую колбу вместимостью 50 см³ отбирают с помощью пипетки 2 см³ стандартного раствора имазапира с концентрацией 100 мкг/см³ в метаноле (п. 7.9.1), растворитель отдувают потоком теплого воздуха и проводят метилирование, как указано в разделе 9.3, растворяя метиловый эфир в 20 см³ гексана. Получают раствор с концентрацией 10 мкг/см³. Раствор хранится в холодильнике в течение 30 дней.

7.9.3.2.    Рабочие растворы ММ 7—10 метилового эфира имазапира для градуировки (соответствуют концентрации имазапира 0,1— 1,.0 мкг/см³).

В 4 мерные колбы вместимостью 100 см³ помещают по 1,0, 2,0, 5,0 и 10,0 см³ стандартного раствора № 1 с концентрацией 10 мкг/см³ (п. 7.9.3.1), доводят до метки гексаном, тщательно перемешивают, получают рабочие растворы № 7—10 с концентрацией имазапира 0,1, 0,2, 0,5 и 1,0 мкг/см³, соответственно. Растворы хранятся в холодильнике в течение 20 дней.

7.10. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади или высоты пика (отн. единицы, мм) от концентрации имазапира в растворе (мкг/см³), устанавливают методом абсолютной калибровки по 4 растворам для градуировки №№ 2—5 (метод ВЭЖХ) или №№ 7—10.

МУК 4.1.1411—03

В инжектор хроматографа вводят по 20 мм³ (метод ВЭЖХ) или 1 мм³ (метод ГЖХ) каждого градуировочного раствора и анализируют в условиях хроматографирования по и. 9.4.1 или 9.4.2. Осуществляют не менее 3 параллельных измерений.

7.77. Подготовка концентрирующего патрона Диапак-С16 для очистки экстрактов

Патрон Диапак-С16 устанавливают на аллонж с прямым отводом для вакуума*, сверху в патрон вставляют шприц с разъемом Льюера объемом не менее 10 см³, используемый в качестве емкости для элюен-та.

Концентрирующий патрон промывают последовательно по 3 см³ гексана, хлористого метилена, метанола, бидистиллированной воды и 0,05 N соляной кислоты. Процедуру проводят с использованием вакуума, скорость потока растворителей через патрон не должна превышать 5 см³/мин, при этом нельзя допускать высыхания поверхности патрона.

* Примечание. В отсутствие специального аллонжа, жидкость продавливают через патрон с помощью шприца, скорость прохождения раствора не должна превышать 1—2 капли в с.

7.72. Проверка хроматографического поведения имазапира на концентрирующем патроне Диапак-С 16

В круглодонную колбу вместимостью 50 см³ помещают 0,2 см³ стандартного раствора № 1 имазапира (п. 7.9.2.1), растворитель упаривают досуха при температуре не выше 35° С, остаток растворяют в 1 см³ бидистиллированной воды и вносят на концентрирующий патрон, подготовленный по п. 7.11. Колбу ополаскивают дважды по 1 см³ бидистиллированной воды, растворы также вносят на патрон. Скорость прохождения раствора через патрон не должна превышать 1—2 капли в с. Элюат отбрасывают.

Промывают патрон 3 см³ бидистиллированной воды, затем 3 см³ гексана. Гексан продавливают до нижнего края сорбента. Имазапир элюируют с патрона 15 см³ хлористого метилена, собирая непосредственно в круглодонные колбы 3 порции элюата: первая - 9 см³, вторая - 3 см³, третья - 3 см³. Растворы в колбах упаривают досуха при температуре не выше 35° С. Вносят в колбы по 2—3 см³ ацетонитрила, вновь упаривают. Сухой остаток подвергают метилированию по п. 9.3 при проведении измерений методом ГЖХ (п. 9.4.2) или растворяют в 2 см³ подвижной фазы для ВЭЖХ (измерение по п. 9.4.1, ВЭЖХ), центрифу-

МУК 4.1.1411—03

гируют (фильтруют через слой стекловаты, помещенный в конусную химическую воронку) и хроматографируют.

При обнаружении вещества только в первой фракции элюирование имазапира с патрона осуществляют 9 см³ хлористого метилена; при наличии его в двух фракциях, объем элюента увеличивают до 12 см³; в трех-до 15 см³.

7.73. Приготовление смеси растворителей для экстракции

В мерную колбу вместимостью 2 ООО см³ помещают 500 см³ ацетона, вносят 20 см³ концентрированной соляной кислоты, доводят до метки бидистиллированной водой.

8. Отбор проб

Отбор проб производится в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов» (№ 2051—79 от 21.08.79).

Отобранные пробы дикорастущих грибов и ягод могут храниться в холодильнике при 4° С в течение 5 дней.

Для длительного хранения пробы замораживают и хранят в морозильной камере при -18° С в течение 6 месяцев.

Непосредственно перед анализом образцы грибов и ягод измельчают.

9. Выполнение определения

9.1. Экстракция

Образец измельченных грибов или ягод массой 20 г помещают в коническую колбу вместимостью 400—500 см³, вносят 200 см³ смеси растворителей для экстракции (приготовленной по и. 7.13), помещают на встряхиватель на 30 мин.

Раствор фильтруют на воронке Бюхнера через двойной бумажный фильтр «красная лента» под вакуумом. Экстракт переносят в мерный цилиндр вместимостью 250 см³ с пришлифованной пробкой, перемешивают, измеряют объем раствора, 1/100 его часть (около 2 см³) переносят в круглодонную колбу вместимостью 25 см³ и упаривают на ротационном вакуумном испарителе до водного остатка (~1 см³) при температуре не выше 35° С, внимательно следя за процессом и не допуская перебро-

МУК 4.1.1411—03

са жидкости при вспенивании. Далее проводят очистку экстракта по и.

9.2.

9.2.    Очистка экстракта на концентрирующем патроне Диапак-С16 Водный раствор, полученный по и. 9.1, вносят на концентриующий

патрон Диапак-С16, подготовленный по п. 7.11. Колбу ополаскивают дважды по 1 см³ бидистиллированной воды, растворы также вносят на патрон. Скорость прохождения раствора через патрон не должна превышать 1—2 капли в с. Элюат отбрасывают.

Промывают патрон 3 см³ бидистиллированной воды, затем 3 см³ гексана. Гексан продавливают до нижнего края сорбента. Имазапир элюируют с патрона 9-ю, 12-ю или 15-ю см³ (в соответствии с п. 7.12) хлористого метилена, собирая элюат непосредственно в круглодонную колбу. Раствор упаривают досуха при температуре не выше 35° С. Сухой остаток подвергают метилированию по п. 9.3 при проведении измерений методом ГЖХ (п. 9.4.2) или растворяют в 2 см³ подвижной фазы для ВЭЖХ (измерение по и. 9.4.1, ВЭЖХ), центрифугируют (фильтруют через слой стекловаты, помещенный в конусную химическую воронку) и хроматографируют.

9.3. Метилирование

В колбу с сухим остатком, полученным по и. 9.2, вносят 1,0 см³ раствора диазометана в эфире и выдерживают 30 мин. Растворитель отдувают потоком прохладного воздуха, остаток растворяют в 1 см³ гексана и анализируют по и. 9.4.2.

9.4. Условия хроматографирования

9.4.1. ВЭЖХ

Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором (фирмы Perkin-Elmer, США).

Колонка стальная длиной 25 см, внутренним диаметром 2,1 мм, содержащая Spherisorb S5 ODS 2, зернением 5 мкм.

Температура колонки: комнатная

Подвижная фаза:    0,01    М ортофосфорная кислота-метанола-

ацетонитрил (85 : 5 : 10, по объему).

Скорость потока элюента: 0,4 см³/мин.

Рабочая длина волны: 240 нм.

Чувствительность: 0,005 ед. абсорбции на шкалу.

Объем вводимой пробы: 20 мм³.

51

МУК 4.1.1411—03

Ориентировочное время выхода имазапира: 10,7—11 мин.

Линейный диапазон детектирования: 1—10 нг.

Образцы, дающие пики, большие, чем стандартный раствор имазапира с концентрацией 0,5 мкг/см³, разбавляют подвижной фазой для ВЭЖХ (приготовленной по и. 7.7.1).

9.4.2. ГЖХ

Хроматограф газовый «Цвет-560» с термоионным детектором

Колонка стеклянная длиной 1 м, внутренним диаметром 3 мм, заполненная 3 % OV-17 на Супелкопорте (0,16—0,20 мм).

Рабочая шкала электрометра 32 • 10⁹ом

Скорость движения ленты самописца 240 мм/час.

Температура термостата колонки - 170° С детектора - 320° С испарителя - 200° С.

Скорость газа-носителя (азота) -30 + 2 см³/мин

водорода - 12,5 ± 3 см³/мин воздуха - 180 см³/мин

Объем вводимой пробы - 1 мм³.

Ориентировочное время удерживания метилового эфира имазапира - 3 мин 5 с.

Линейный диапазон детектирования: 0,1—1 нг.

Образцы, дающие пики, большие, чем стандартный раствор метилового эфира с концентрацией имазапира 1 мкг/см³, разбавляют гексаном.

10. Обработка результатов анализа

Содержание имазапира в пробе рассчитывают по формуле:

X — содержание имазапира в пробе, мг/кг;

А - концентрация имазапира, найденная по градуировочному графику, мкг/см³;

V - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования,

см³;

т - масса анализируемого образца, г.

К - коэффициент пересчета, учитывающий объем экстрактов проб, используемый для анализа, равен 100.

МУК 4.1.1411—03

11. Контроль погрешности измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ 2335—95. ГСИ «Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа».

12. Разработчики

Юдина Т. В., Федорова Н. Е., Волкова В. Н., Волчек С. И., Гарбузова А. А.

Федеральный научный центр гигиены им. Ф. Ф. Эрисмана (ФНЦГ им. Ф. Ф. Эрисмана).

141000, г. Мытищи Московской обл., ул. Семашко, д. 2, лаборатория аналитических методов контроля.

Телефон: (095) 586-1276

МУК 4.1.1408—4.1.1411—03

Содержание

Определение остаточных количеств десмедифама в почве, корнеплодах и ботве сахарной, столовой и кормовой свеклы методом высокоэффективной

жидкостной хроматографии. МУК 4.1.1408—03........................................4

Измерение концентраций десмедифама в воздухе рабочей зоны и атмосферном воздухе населенных мест методом высокоэффективной жидкостной хроматографии.

МУК 4.1.1409—03.......................................................................................16

Определение остаточных количеств диквата в почве и клубнях картофеля спектрофотометрическим методом.

МУК 4.1.1410—03.......................................................................................26

Определение остаточных количеств имазапира в дикорастущих грибах и ягодах методами высокоэффективной жидкостной и газожидкостной хроматографии.

МУК 4.1.1411—03.......................................................................................39

3

МУК 4.1.1411—03

рителях при 25° С (г/100 см³): дихлорметан - 8,72; ацетон - 3,39; метанол - 10,5; толуол - 0,18; гексан - 0,00095. Растворимость в воде (г/дм³): 9,74 (15° С); 11,3 (25° С).

Стабилен в водной среде при pH 5 - 9 в темноте. Разрушается в растворе, в кислой среде на солнечном свету. DT₅₀ 6 дней при pH 5—9.

Константа диссоциации: рК] - 1,9; рК₂ - 3,6; рК₃ - 11.

Краткая токсикологическая характеристика. Острая пероральная токсичность (LD ₅₀) для крыс > 5 000 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD ₅о) для кроликов > 2 000 мг/кг; острая ингаляционная токсичность (ЬК₅₀) для крыс - 1,3 мг/дм³.

Область применения препарата. Имазапир рекомендуется в качестве системного гербицида сплошного типа действия против однолетних, многолетних однодольных и двудольных сорняков и древеснокустарниковой растительности.

Гигиенические нормативы.

ПДК в воде водоемов - 0,1 мг/дм³.

ОДК в почве - 0,5 мг/кг.

МДУ в дикорастущих грибах - 4,0 мг/кг.

ягодах - 2,0 мг/кг.

1. Метрологические характеристики метода

Метрологические характеристики метода представлена в таблицах 1 и 2¹.

Таблица 1 Метрологические параметры

Анализируемый объект Метрологические параметры, Р = 0,95, п = 24 Предел обнаружения, мг/кг Диапазон определяемых концентраций, мг/кг Среднее значение определения, % Стандартное отклонение, S, % Доверительный интервал среднего результата, % Дикорастущие грибы 0,5 0,5—5,0 84,78 2,65 3,9 Дикорастущие ягоды 0,5 0,5—5,0 76,82 2,05 3,0

МУК 4.1.1411—03

Таблица 2 Полнота извлечения имазапира из дикорастущих грибов и ягод (6 повторностей для каящой концентрации)

Среда Внесено имазапира мг/кг Обнаружено имазапира мг/кг Полнота извлечения, % Дикорастущие 0,5 0,4242 ±0,0158 84,85 грибы (опята) 1,0 0,8394 ±0,0198 83,94 2,5 2,1301 ±0,0982 85,20 5,0 4,2559 ±0,1113 85,12 Дикорастущие 0,5 0,3841 ±0,0095 76,82 ягоды (черника. 1,0 0,7636 ± 0,0244 76,36 клюква) 2,5 1,9032 ±0,0419 76,13 5,0 3,8984 ±0,1239 77,97

2. Метод измерений

Методика основана на экстракции имазапира из анализируемой пробы смесью ацетон-вода-соляная кислота, очистки экстракта на концентрирующем патроне Диапак-С16 и определении вещества с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с ультрафиолетовым детектором или газожидкостной хроматографии (ГЖХ) с термоионным детектором после превращения кислоты в соответствующий метиловый эфир.

Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

В предлагаемых условиях определения метод специфичен в присутствии гербицидов контактного (глифосат) и пролонгированного действия (триазин), применяемых по технологии совместно с имазапиром.

3. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы

3.7. Средства измерений Газовый хроматограф «Цвет» с термоионным детектором (ТИД) с пределом детектирования по азоту в азобензоле 1,5 х 10"¹² г/см³    ГОСТ    26703

Жидкостный хроматограф с ультрафиолетовым детектором с переменной длиной волны (фирмы

41

Perkin-Elmer. США) Весы аналитические ВЛА-200	Номер Госреестра 15945—97 ГОСТ 24104
Весы лабораторные общего назначения, с наибольшим пределом взвешивания до 500 г и пределом допустимой погрешности +/- 0,038 г	ГОСТ 7328
Колбы мерные вместимостью 50, 100, 1 000 и 2 000 см3	ГОСТ 1770
Микрошприц типа МШ-1М, вместимостью 1 см3	ТУ 2.833.105
Пипетки градуированные 2- класса точности вместимостью 1,0, 2,0, 5,0, 10 см3	ГОСТ 29227
Пипетки с одной меткой 2 класса точности, вместимостью 15 см3	ГОСТ 29169
Пробирки градуированные, вместимостью 5 или 10 см3	ГОСТ 1770

Цилиндры мерные 2-го класса точности, вмести-

мостью 10, 25, 50, 100, 200, 500 и 1 ООО см³ ГОСТ 1770

Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы Имазапир с содержанием действующего

вещества 99,4 % (БАСФ, Германия) Азот, осч, из баллона Ацетон, ч Ацетонитрил для хроматографии, хч ГОСТ 9293 ГОСТ 2603 ТУ-6-09-4326—76

Вода бидистиллированная, деионизованная или перегнанная над КМп04

н-Гексан, хч Калия гидроксид, хч Кислота ортофосфорная, хч, 85 % Кислота серная концентрированная, хч Кислота соляная (хлороводородная), хч Лед ТУ-6-09-3375 ГОСТ 4328 ГОСТ 6552 ГОСТ 4204 ГОСТ 3118 Метиламин гидрохлорид, ч Метилен хлористый (дихлорметан), хч Метиловый спирт (метанол), хч ТУ 6-09-3755—74 ГОСТ 12794 ГОСТ 6995

МУК 4.1.1411—03

Стекловата

Стеклянные палочки

Установка для перегонки растворителей

Набор для фильтрации растворителей

через мембрану

Холодильник водяной обратный    ГОСТ 9737

Хроматографическая колонка стальная,

длиной 25 см, внутренним диаметром

2,1 мм, содержащая Spherisorb S5 ODS 2,

зернением 5 мкм

Хроматографическая колонка стеклянная длиной 1 м, внутренним диаметром 3 мм Часовые стекла

Шкаф сушильный    ТУ 64-1-1411—76

Шприц для ввода образцов для жидкостного хроматографа вместимостью 50—100 мм³ Шприц медицинский с разъемом Льюера    ГОСТ 22090

Допускается применение хроматографических колонок и другого оборудования с аналогичными или лучшими техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1.    При работе с реактивами соблюдать требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими, легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1005.

4.2.    При выполнении измерений с использованием жидкостного и газового хроматографов соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019 и инструкциями по эксплуатации приборов.

5. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений допускают специалистов, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном и газовом хроматографах.

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

• процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят при температуре воздуха (20 ± 5)° С и относительной влажности не более 80 %;

МУК 4.1.1411—03

• выполнение измерений на жидкостном и газовом хроматографах проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к приборам.

7. Подготовка к выполнению измерений

Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей (при необходимости), получение Ы-нитрозо-Ы-метилмочевины. раствора диазометана, приготовление растворов, подвижной фазы для ВЭЖХ, кондиционирование хроматографических колонок, установление градуировочных характеристик, подготовка концентрирующих патронов для очистки экстрактов, проверка хроматографического поведения вещества на концентрирующих патронах.

7.7. Подготовка органических растворителей

7.1.1. Очистка ацетонитрила

Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора не менее 1 ч, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия.

7.7.2. Очистка хлористого метилена

Хлористый метилен промывают последовательно 5 %-ньгм водным раствором бикарбоната натрия, водой, сушат над безводным карбонатом калия и перегоняют или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок не менее 50.

7.1.3. Очистка н-гексана

Растворитель последовательно промывают порциями концентрированной серной кислоты, до тех пор, пока она не перестанет окрашиваться в желтый цвет, водой до нейтральной реакции промывных вод, перегоняют над поташом.

7.2. Получение N-нитро w-N-л i етилмо ч евин ы

В отсутствии коммерческого препарата нитрозометилмочевиньг осуществляют его синтез.

Все работы необходимо проводить в вытяжном шкафу!

В круглодонную колбу на шлифе вместимостью 1 л, снабженную обратным холодильником, помещают 80 г метиламина гидрохлорида и 300 г мочевины, растворяют содержимое в 400 мл воды и кипятят 3 ч с

45

1

Метрологические параметры приведены для метода ВЭЖХ.