МУК 4.1.1240—03

Главный государственный санитарный врач Российской Федерации,

Первый заместитель Министра здравоохранения Российской Федерации

16 марта 2003 г.

Дата введения: 1 июля 2003 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств карбосульфана и его основного метаболита карбофурана в клубнях картофеля и почве; метаболитов карбофурана -3-гидроксикарбофурана в клубнях картофеля и 3-кето карбофурана в почве методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания

Настоящие методические указания устанавливают метод высокоэффективной жидкостной хроматографии для определения массовой концентрации карбосульфана и его метаболитов карбофурана и 3-гидроксикарбофурана в клубнях картофеля в диапазоне 0,05—0,3 мг/кг, а также карбосульфана и его метаболитов карбофурана и 3-кетокарбо-фурана в почве в диапазоне 0,01—0,1 мг/кг.

Карбосульфан - действующее вещество репарата МАРШАЛ, КЭ (250 г/л), фирма-производитель ФМС Европа НВ (США).

2,3-дигидро-2,2-диметилбензофуран-7-ил(дибутиламинотио)метил-карбамат (IUPAC)

Эмпирическая формула: C20H32N2O3S.

Молекулярная масса: 380,5.

Вязкая жидкость от светло-желтого до бурою цвета со слабым фенольным запахом. Температура кипения 124—128 °С при 0,1 На. Препарат разлагается при температуре выше 150 °С. Давление паров при

1

20 °С: 0,16 х 10'⁶ммрт. ст. Растворимость в органических растворителях при 20 °С: более 50 % в ксилоле, н-гексане, хлороформе, метаноле, хлористом метилене и ацетоне. Растворимость в воде - 0,3 мг/дм³ (25 °С). Стабилен в этилацетате при 60 °С, разрушается при pH ниже 7.

Период полураспада в водных растворах (при 25 °С): менее часа (pH 4), 22 часа (pH 6), 184 часа (pH 7), 340 часов (pH 8), более 1 400 часов (pi I 9).

Краткая токсикологическая характеристика

Острая пероральная токсичность (LD ₅₀) для крыс - 250 мг/кг (самцы), 185 мг/кг (самки); острая дермальная токсичность (1Л)₅₀) для кроликов - > 2 000 мг/кг; острая ингаляционная токсичность (LK$o) для крыс - 1,53 мг/дм³ (самцы), 0,63 мг/дм³ (самки).

Гигиенические нормативы

ОДК в почве - 0,01 мг/кг по карбофурану.

МДУ в картофеле (с учетом содержания метаболитов) - 0,25 мг/кг.

В почве карбосульфан быстро разлагается. Период его полураспада (ДТ50) в зависимости ог типа почвы колеблется от 2 до 12 дней. Вещество хорошо связывается с почвой. Основным метаболитом карбосульфа-на при распаде в почве является карбофуран. Период полураспада (ДТ50) карбофурана в лабораторных условиях составляет диапазон от 3 до 100 дней, в нолевых в среднем он равен 50 дням. Продуктом дальнейшей деградации карбофурана является 3-кетокарбофуран (содержание от 5 до 20 %).

В растениях идентифицированы 8 метаболитов, среди которых преобладают карбофуран и 3-гидроксикарбофуран.

Карбофуран

2,3-дигидро-2,2-диметилбснзофуран-7-ил N-мстил карбамат (ШРАС) OCONHCH3

60S

Эмпирическая формула: С|₂Н,₅ЫОз.

Молекулярная масса 221,3.

Белое кристаллическое вещество со слабым запахом фенола. Температура плавления 150—152 °С. Давление паров при 33 °С: 2,7 мИа. Растворимость в органических растворителях при 25 °С (г/кг): 1-метил-2-пирролидон - 300; димстилформамид - 270; димстилсульфоксид - 250; ацетон - 150; ацетонитрил - 140; дихлорметан - 120; циклогексанон - 90; бензол, этанол - 40. Растворимость в воде при 25 °С - 351 мг/дм³.

Карбофуран стабилен в водных растворах при pH 3; с увеличением pH его стабильность уменьшается: период полураспада при pH 5 - 28 дней, при pH 7 - 21 день, при pH 9 - около 21 ч.

МУК 4.1.1240—03

3-гидроксикарбофурана при анализе клубней картофеля (или карбосуль-фана и карбофурана при анализе почвы), перемешивают и наносят на колонку, подготовленную но и. 7.11. Промывают колонку 30 см³ этилацета-га, затем 30 см³ ацетона (при анализе проб почвы только 30 см³ тгилаце-гата) со скоростью 1—2 капли в 1 с. Фракционно (но 5 ем³) огбирают элюат, упаривают, остатки растворяют в 5 ем³ ацетонитрила, анализируют на содержание карбосульфана, карбофурана и 3-гидрокеикабофурана соответственно но и.и. 9.3.1.1 (9.3.2.1), 9.3.1.2 (9.3.2.2), 9.3.1.3.

Фракции, содержащие карбосульфан и карбофуран, объединяют вместе, 3-гидрокеикарбофуран - отдельно, упаривают досуха, остатки в колбах растворяют в 10 см³ ацетонитрила, анализируют соответственно по п.п. 9.3.1.1 (9.3.2.1), 9.3.1.2 (9.3.2.2), 9.3.1.3.

Рассчитывают содержание веществ в элюатах, определяют полноту смывания с колонки и необходимый для очистки объем элюента.

Проверку хрома гофафичеекого поведения 3-кето карбофурана на колонке е оксидом алюминия (при анализе почвы) проводят отдельно. Для этого на колонку, подготовленную но и. 7.11, е помощью пипетки наносят 0,5 см³ стандартного раствора № 1а 3-кето карбофурана, промывают колонку 30 ем³ этилацетата со скоростью 1—2 капли в секунду, (вбирают фракции но 5 см³ каждая, упаривают, остатки растворяют в 5 ем³ подвижной фазы № 3 (и. 7.5) и анализируют содержание 3-кетокарбофурана по п. 9.3.2.3. Рассчитывают уровень вещества в элюате, определяют полноту смывания е колонки и необходимый для очиегки объем элюента.

Примечание. Проверку хромато|рафичсского повеления карбосульфана, карбофурана, 3-гидроксикарбофурана и 3-кегокарбофурана следует проводить обязательно, поскольку профиль вымывания может изменяться при использовании новой партии сорбентов и растворителей.

8. Отбор проб

Огбор проб производится в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов» (№ 2051 -79 от 21.08.79).

Отобранные пробы почвы и клубней картофеля анализируют в день отбора или хранят при 4 °С в течение 3 дней.

Для длительного хранения пробы почвы подсушивают при комнатной температуре в отсутствие прямого солнечного света. Сухие почвенные образцы Moiyr храниться в течение года. Перед анализом сухую почву просеивают через сито с отверстиями диамегром 1 мм.

Пробы клубней картофеля для длительного хранения замораживают и хранят при температуре -18 °С. Непосредственно перед анализом образцы картофеля измельчают.

11

МУК 4.1.1240—03

9. Выполнение определения

9. /. Клубни картофеля

9.1.1.    Экстракция

Образец измельченных клубней картофеля массой 20 г помещают в коническую колбу вместимостью 200—250 см³, вносят 4 см³ буферного раствора (по п. 7.2), добавляют 80 см³ смеси н-гсксана с ацетоном (4:1, по объему), встряхивают на механическом встряхивателе в течение 10 мин.

После отстаивания раствор осторожно декантируют в круглодонную колбу вместимостью 150—250 см³, фильтруя через слой (2 см) безводного сульфата натрия, помещенный в конусную химическую воронку диаметром 60 мм, снабженную бумажным фильтром «белая лента». Пробу подвергают дополнительной экстракции 80 см³ хлористого метилена при встряхивании в течение 5 мин. Отстоявшийся раствор хлористого метилена (нижняя фаза) отбирают с помощью пипетки и фильтруют в колбу с ранее полученным экстрактом. Затем промывают фильтр 10—15 см³ хлористого метилена.

Объединенный экстракт упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре нс выше 35 °С, подвергают очистке в соответствии с п. 9.1.2.

9.1.2. Очистка жстракта

Остаток, полученный по п. 9.1.1, с помощью 1,5—2 см³ этилацета-та порциями переносят в колонку, дают растворителю стечь до верхнего края сорбента. Карбосульфан и карбофуран элюируют с колонки 25 см³ этилацетата, собирая элюат в круглодонную колбу вместимостью 100 см³ (колба № 1), 3-гидроксикарбофуран - 25 см³ ацетона, собирая элюат в отдельную круглодонную колбу (колба № 2). Этилацетатный и ацетоновый растворы упаривают раздельно на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 35 °С почти досуха, вносят в колбы по 3—4 см³ н-гексана, вновь упаривают. Операцию упаривания с н-гсксаном повторяют трижды.

Остатки в колбах растворяют в 4 см³ ацетонитрила и анализируют на содержание карбосульфана и карбофурана (раствор в колбе № 1), а также 3-гидроксикарбофурана (раствор в колбе № 2) соответственно по п.п. 9.3.1.1, 9.3.1.2 и 9.3.1.3.

9.2. Почва

9.2.1.    Экстракция

Образец суховоздушной почвы массой 10 г помещают в коническую колбу вместимостью 200—250 см³, добавляют 50 см³ ацетона и встряхивают на механическом встряхивателе в течение 10 мин.

МУК 4.1.1240—03

Отстоявшийся раствор осторожно декантируют через химическую воронку диаметром 60 мм, снабженную бумажным фильтром «белая лента», в круглодонную колбу вместимостью 150—250 ем³. Пробу подвергают дополнительной экстракции 40 см³ хлористого метилена при встряхивании в течение 5 мин. Отстоявшийся раствор фильтруют в колбу е ранее полученным экстрактом, промывают фильтр 10—15 ем³ хлористого метилена.

Объединенный экстракт упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 35 °С и подвергают очистке в соответствии е п. 9.2.2.

9.2.2. Очистка экстракта Остаток, полученный по и. 9.2.1, с помощью 1,5—2 ем³ этилацетата порциями переносят в колонку, дают растворителю стечь до верхнего края сорбента. Карбосульфан, карбофуран и 3-кетокарбофуран элюируют с колонки 25 см³ этилацегага, собирая элюат в мерный цилиндр (с пришлифованной пробкой) вместимостью 25 см³. Элюат тщательно перемешивают, две равные его части помещают в отдельные круглодонные колбы, упаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 35 °С почти досуха, вносят в колбы по 3—4 см³ н-гексана, вновь упаривают. Операцию упаривания с н-гексаном повторяют трижды.

Остаток в первой колбе растворяют в 1 см³ ацетонитрила, анализируют на содержание карбосульфана и карбофурана соответственно но п.п. 9.3.2.1 и 9.3.2.2. К остатку во второй колбе добавляют 0,2 см³ ацетонитрила, тщательно перемешивают, вращая колбу круговыми движениями, затем вносят 0,8 мл подвижной фазы № 3 (и. 7.5), вновь тщательно перемешивают, помещают на ультразвуковую баню на 2 мин, анализируют содержание 3-кстокарбофурана но 9.3.2.3.

9.3. Условия хроматографирования

Жидкостный хромакнраф с ультрафиолетовым детектором (Perkin-Elmer, США)

9.3.1. Клубни картофеля Колонка стальная длиной 25 см, внутренним диаметром 4,0 мм, содержащая /orbax ODS, зернением 5 мкм Температура колонки: комнатная Скорость потока элюента: 1 см³/мин Рабочая длина волны: 220 нм Чувствительность: 0,01 сд. абсорбции на шкалу Объем вводимой пробы: 20 мкл

9.3.1.1. Определение карбосульфана.

Подвижная фаза: ацетонитрил-вода (85 : 15, по объему)

Время выхода карбосульфана: 7,52—7,73 мин

13

МУК 4.1.1240—03

9.3.1.2.    Определение карбофурана

Подвижная фаза: ацетонитрил-вода (38 : 62, по объему)

Время выхода карбофурана: 7,91—8,12 мин

9.3.1.3.    Определение 3-гидроксикарбофурана Подвижная фаза: ацетонитрил-вода (28 : 72, но объему)

Время выхода 3-гидкорсикарбофурана: 3,99—4,02 мин Линейный диапазон детектирования 5—30 нг

Образцы, дающие пики, большие чем стандартные растворы е концентрацией 1,5 мкг/см³, разбавляют ацетонитрилом.

9.3.2. Почва

Колонка етальная длиной 20 см, внутренним диаметром 2 мм, содержащая Spherisorb S5 ODS 2, зернением 5 мкм Температура колонки: комнатная Скорость потока элюента: 0,4 см³/мин Рабочая длина волны: 220 нм Объем вводимой пробы: 20 мкл

9.3.2.1.    Определение карбосульфана

Подвижная фаза: ацетонитрил-вода (85 : 15, по объему) Чувствительность: 0,01 ед. абсорбции на шкалу Время выхода карбосульфана: 8,63—8,76 мин

9.3.2.2.    Определение карбофурана

Подвижная фаза: ацетонитрил—вода (38 : 62, по объему) Чувствительность: 0,01 ед. абсорбции на шкалу Время выхода карбофурана: 6,83—6,92 мин

9.3.2.3.    Определение 3-кетокарбофурана Подвижная фаза: ацетонитрил-вода (28 : 72, но объему) Чувствительность: 0,02 ед. абсорбции на шкалу Время выхода 3-кетокарбофурана: 7,87—8,1 мин Линейный диапазон детектирования 1—10 нг

Образцы, дающие ники, большие чем стандартные растворы с концентрацией 0,5 мкг/см³, разбавляют ацетонитрилом при определении карбосульфана и карбофурана или подвижной фазой № 3 при определении 3-кетокарбофурана.

10. Обработка результатов анализа

10.1. Клубни картофеля

Содержание карбосульфана в пробе с учетом его основных метаболитов (карбофурана и 3-гидроксикарбофурана) в эквиваленте действующего вещества рассчитывают но формуле:

_v _ (А + Б • К_х + В • КО • V

X--,    где

т

МУК 4.1.1240—03

X - содержание карбосульфана в пробе е учетом его основных метаболитов (карбофурана и 3-гидроксикарбофурана), выраженное в эквиваленте д.в., мг/кг;

Л, Б, В - концентрации карбосульфана, карбофурана и 3-гидрокси-карбофурана, найденные по 1радуировочным графикам, мкг/см³;

V- объем экефакга, подготовленного ;ыя хроматофафирования, ем³;

т - масса анализируемого образца, г;

К, и К₂ - коэффициенты пересчета содержания карбофурана и 3-гидроксикарбофурана на эквивалент карбосульфана, равные соответственно 1,72 и 1,6.

10.2. Почва

Содержание карбосульфана в пробе с учетом его основных метаболитов (карбофурана и 3-кетокарбофурана) в эквиваленте действующего вещества рассчитывают по формуле:

л —-, где

т

X - содержание карбосульфана в пробе с учетом его основных метаболитов (карбофурана и 3-кетокарбофурана), выраженное в эквиваленте д.в., мг/кг;

А, Б, Г - конценфация карбосульфана, карбофурана, 3-кетокарбофурана, найденные по градуировочным фафикам, мкг/см³;

V- объем экефакга, подготовленного для хроматофафирования, см³;

т - масса анализируемого образца, г;

К, и К₃ - коэффициенты пересчета содержания карбофурана и 3-кетокарбофурана на эквивалент карбосульфана, равные соответственно 1,72 и 1,62.

11. Контроль погрешности измерений

Оперативный конфоль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ 2335—95 «ГСИ. Внуфенний конфоль качеегва результатов количественного химического анализа».

12. Разработчики

Юдина Т. В., Федорова II. Е., Волкова В. И. Федеральный научный центр гигиены им. Ф. Ф. Орисмана (ФНЦГ им. Ф. Ф. Орисмана).

141000, г. Мытищи Московской обл., ул. Семашко, д. 2, лаборатория аналитических методов котроля. Тел.: (095) 586-1276.

15

МУК 4.1.1240—03

3-гицроксикарбофуран

2.3- дигид ро-2,2-диметил-3-гидроксибензофуран-7-ил N-метилкар-бамаг (ШРАС)

Эмгшрическа формула: C12H15NO4.

Молекулярная масса: 237,3.

Белое кристаллическое вещество.

Острая пероральная токсичность (LD₅₀) для крыс - 18 мг/кг.

3-ке1 окарбофуран

2.3- дигидро-2,2-диметил-3-кетобензофуран-7-илЫ-мстилкарбамат (ШРАС)

Эмпирическая формула: C12H13NO4.

Молекулярная масса: 235,3.

Белое кристаллическое вещество.

Острая пероральная токсичность (1Л)₅₀) для крыс - 69 мг/кг.

Область применения препарата

Карбосульфан - инсектицид и нематоцид системного и контактно-го действия, рекомендуемый ;ыя борьбы с почвообитающими и листог-рызущими насекомыми - вредителями цигрусовых, люцерны, кукурузы, сорго, сои, овощных и полевых культур, включая картофель (колорадский жук, картофельная нематода, проволочник).

1. Метрологические характеристики метода

Метрологические характеристики метода представлены в табл. 1.

Таблица 1

Метрологические параметры

Определяемое вещество Метрологические параметры, V 0,95, п 24 предел обнару жения, мг/кг диапазон определяемых концентраций, мг/кг среднее значение определения, % стандартное отклонение, S, % доверительный интервал среднего результата, % Клубни картофеля Карбосульфан 0,05 0,05—0,3 76,90 4,89 ±2,1 Карбофуран 0,05 0,05—0,3 75,95 5,02 ±2,1 3-Г идрокси-карбофуран 0,05 0,05—0,3 77,76 4,08 ±1,7 Почва Карбосульфан 0,01 0,01—0,1 83,57 4,80 ±2,5 Карбофуран 0,01 0,01—0,1 83,38 4,58 ±2,4 З-Кетокарбо- фуран 0,01 о о © 83,47 4,37 ±2,3

3

2. Метод измерений

Методика основана на определении веществ с номощыо высокоэффективной жидкостной хроматографии (В^Г)ЖХ) с ультрафиолетовым детектором после экстракции из анализируемых проб клубней картофеля смесыо н-гексана е ацетоном (4 : 1), почвы - ацетоном, затем хлористым метиленом, очистки экстракта на колонке с оксидом алюминия.

Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

В предлагаемых условиях определения метод специфичен в присутствии пестицидов, применяемых в интенсивной технологии выращивания картофеля (хлор- и фосфорорганические пестициды, симм-три-азины, фенилмочевины, пиретроиды).

3. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы

3.1. Средства измерении

Жидкостный хромакнраф с улырафиолеговым детектором с переменной длиной волны (фирмы Perkin-Elmer, США) или приборы с аналогичными техническими характеристиками    № Госреестра 15945—97

Весы аналитические ВЛЛ-200    ГОСТ 34104—80К

Весы лабораторные общего назначения, с наибольшим пределом взвешивания до 500 г и пределом допустимой почетности ± 0,038 г    ГОСТ 7328

Мономер ЭВ-74    ГОСТ 22261 —76

Колбы мерные, вместимостью 50, 100 и 1 000 см³ ГОСТ 1770-74 Пипетки 1радуированные 2-го класса точности, вместимостью 1,0, 2,0, 5,0, 10 и 15 см³    ГОСТ    29227

Пипетки с одной меткой 2-го класса точности, вместимостью 15 см³    ГОСТ 29169

Цилиндры мерные 2-го класса точности, вместимостью 10, 25, 50, 100, 200, 500 и 1 000 см³ ГОСТ 1770—74Е

Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы Карбосульфан аналитический стандарт с содержанием д.в. 90,1 % (фирмы ФМС, США) или другого производителя Карбофуран аналитический стандарт с содержанием д.в. 99,5 % (фирмы ФМС, США) или другого производителя

4

МУК 4.1.1240—03

Стеклянные палочки

Установка для перегонки раствори гелей

Набор для фильтрации растворителей через

мембрану

Хроматографическая колонка стальная, длиной 25 см, внутренним диаметром 4,0 мм, содержащая Zorbax ODS, зернением 5 мкм Хроматографическая колонка стальная, длиной 20 ем, внутренним диаметром 2 мм, содержащая Spherisorb S5 ODS 2, зернением 5 мкм

Шкаф сушильный    ТУ    64-1-1411—76

Шприц для ввода образцов для жидкостного хроматографа, вместимостью 50—100 мм³

Допускается применение другого оборудования и хрома Ю1рафиче-ских колонок с аналогичными техническими характеристиками, обеспечивающими аналогичное разделение.

4. Требования безопасности

4.1.    При работе е реактивами соблюдать требования безопасности, установленные для работ е токсичными, едкими, легковоспламеняющимися веществами (ГОСТ 12.1005-88).

4.2.    При выполнении измерений с использованием газового и жид-костного хрома тофафов соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инегрукцией по эксплуатации прибора.

5. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений допускают лиц, имеющих квалификацию не ниже лаборанта-исследователя, с опытом работы на жидкостном хроматографе.

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

•    процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят согласно ГОСТ 15150-69 при температуре воздуха (20 ± 5) °С, атмосферном давлении 630—800 мм рт. ст. и относительной влажности не более 80 %;

•    выполнение измерений на жидкостном хроматофафс проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к определению

Выполнению измерений предшествуют следующие операции: очистка органических растворителей, подготовка буферного раствора, подвижных фаз для ВЭЖХ, кондиционирование хроматографической ко-

МУК 4.1.1240—03

ломки, приготовление стандартных растворов, построение градуировоч-ных характеристик, подготовка колонки для очистки экстракта, проверка хроматографического поведения веществ на колонке с оксидом алюминия.

7.1. Подготовка органических растворителей

7.1.1.    Очистка ацетонитрила

Ацетонитрил кипятят с обратным холодильником над пентоксидом фосфора не менее 1 ч, после чего перегоняют, непосредственно перед употреблением ацетонитрил повторно перегоняют над прокаленным карбонатом калия.

7.1.2.    Очистка этилацетата

Этилацетат промывают последовательно 5 %-ным водным раствором карбоната мафия, насыщенным раствором хлористого кальция, сушат над безводным карбонатом калия и перегоняют или подвергают ректификационной перегонке на колонне с числом теоретических тарелок нс менее 50.

7.1.3.    Очистка ацетона

Растворитель сушат над молекулярными сигами 4 Л и подвергают фракционной перегонке на ректификационной колонне, целиком собранной из стекла е числом теоретических тарелок не менее 30. До начала отбора главной фракции приемник несколько раз промывают дистиллятом. Перегонку продолжают до тех пор, пока в сосуде для перегонки не останется приблизительно 100 см³ ацетона. Температуру водяной бани следует снижать по мере уменьшения объема ацетона, во всех случаях она не должна превышать температуру кипения ацетона более чем на 20°.

7.1.4.    Очистка н-гексана

Растворитель промывают новыми порциями концентрированной серной кислоты до тех пор, пока она не перестанет окрашиваться в желтый цвет, водой до нейтральной реакции промывных вод, перегоняют над поташом.

7.2. Подготовка буферного раствора (pH 8)

Для приготовления 1 н раствора едкою натра в мерную колбу вместимостью 100 ем³ помещают 4,0 г вещества, растворяют в 40—50 ем³ дистиллированной воды, доводят водой до метки, тщательно перемешивают.

Навеску борной кислоты массой 12,367 г помещают в коническую колбу вместимостью 250 ем³, вносят 100 ем³ 1 н раствора едкого натра, перемешивают.

7

Лликвогу полученного раствора борной кислоты объемом 53,4 см³ помещают в мерную колбу вместимостью 100 см³ и доводят объем до метки 0,1 п раствором соляной кислоты. Контролируют pH буферного раствора с помощью иономсра, при необходимости доводят значение до pH 8, применяя 0,1 н растворы соляной кислоты или едкого натра.

7.3.    Подготовка подвижной фиш № 1 для ВЭЖХ (шиит карбосульфана по п.п. 9.3.1.1 и 9.3.2.1)

В мерную колбу вместимостью 1 000 ем³ помещают 850 см³ ацетонитрила, добавляют 150 см³ дистиллированной воды, перемешивают, фильтруют и дегазируют.

7.4.    Подготовка подвижной фиш № 2 для ВЭЖХ (шиит карбофурана по п.п. 9.3.1.2 и 9.3.2.2)

В мерную колбу вместимостью 1 000 ем³ помещают 380 см³ ацетонитрила, добавляют 620 см³ дистиллированной воды, перемешивают, фильтруют и дегазируют.

7.5.    Подготовка подвижной фи ш № 3 для ВЭЖХ (анализ 3-гидроксикарбофурана и 3-кетокарбофурана

соответственно по п.п. 9.3.1.3 и 9.3.2.3)

В мерную колбу вместимостью 1 000 см³ помещают 280 см³ ацетонитрила, добавляют 720 см³ дистиллированной воды, перемешивают, фильтруют и дегазируют.

7.6. Кондиционирование хроматографической колонки

Промывают колонку соответствующей подвижной фазой (№№ 1, 2, 3) до установления стабильной базовой линии. Скорость подачи растворителя при анализе картофеля - 1 см³/мин, почвы - 0,4 см³/мин.

7.7. Приготовление стандартных растворов для градуировки

7.7.1. Исходные стандартные растворы для градуировки (концентрация 1 мг/см³)

В мерные колбы вместимостью 100 см³ раздельно помещают 0,1110 г карбосульфана (0,1005 г карбофурана, 0,1018 г 3-гидроксикарбофурана, 0,1020 г 3-кетокарбофурана), доводят до метки ацетонитрилом, тщательно перемешивают.

Исходные стандартные растворы хранятся в морозильной камере в течение 3 месяцев в плотно закрытой посуде.

7.7.2. Растворы № 1 для градуировки (концентрация 10 мкг/емг)

В мерные колбы вместимостью 100 ем³ помещают 1 см³ каждого исходного стандартного раствора карбосульфана (карбофурана, 3-гидрокси-

МУК 4.1.1240—03

карбофурана, 3-кстокарбофурана) с концентрацией 1 мг/см³, доводят до метки ацетонитрилом, тщательно перемешивают. Растворы хранятся в морозильной камере в течение 3 месяцев в плотно закрытой посуде.

7.7.3. Рабочие растворы №№ 2—7 для градуировки (соответствуют концентрациям 0,05—1,5 мкг/см³)

При анализе образцов клубней картофеля в мерные колбы вместимостью 100 см³ помещают 15—20 см³ ацетонитрила, вносят с помощью пипетки 15, 10; 5 и 2,5 см³ раствора № 1 концентрации 10 мкг/см³ в ацетонитриле (п. 7.7.2), перемешивают, доводят до метки ацетонитрилом, вновь перемешивают. Получают растворы карбосульфана, карбофурана и 3-гидроксикарбофурана №№ 2—5 с концентрациями 1,5; 1,0; 0,5 и 0,25 мкг/см³.

При анализе образцов^ почвы в мерные колбы вместимостью 100 см³ помещают 15—20 см³ ацетонитрила, вносят с помощью пипетки 5; 2,5; 1,0 и 0,5 см³ раствора № 1 карбосульфана и карбофурана с концентрацией 10 мкг/см³ в ацетонитриле (п. 7.7.2), перемешивают, доводят до метки ацетонитрилом, вновь перемешивают. Получают растворы карбосульфана и карбофурана №№ 4—7 с концентрациями 0,5; 0,25; 0,1 и 0,05 мкг/см³. Для приготовления рабочих растворов 3-кстокарбофура-на в мерные колбы вместимостью ИЮ ем³ помещают 15—20 см³ подвижной фазы № 3 для ВЭЖХ (п. 7.5), вносят с помощью пипетки 5; 2,5; 1,0 и 0,5 см³ раствора №1 концентрации 10 мкг/см³ в ацетонитриле (п. 7.7.2), перемешивают, доводят до метки подвижной фазой № 3 для ВЭЖХ, вновь перемешивают. Получают рабочие растворы 3-кстокарбо-фурана №№ 4—7 с концентрациями 0,5; 0,25; 0,1 и 0,05 мкг/см³.

Растворы готовят непосредственно перед работой.

Для оценки полноты извлечения карбосульфана, карбофурана, 3-гидроксикарбофурана и 3-кстокарбофурана из картофеля и почвы (методом «внсссно-найдсно») их стандартные растворы готовят на ацетоне.

7.8. Приготовление стандартных растворов для проверки хроматографического поведения веществ па колонке с оксидом алюминия

7.8.1. Исходные стандартные растворы (концентрация 1 мг/см³)

В мерные колбы вместимостью 100 см³ раздельно помещают 0,1110 г карбосульфана (0,1005 г карбофурана, 0,1018 г 3-гидроксикарбофурана, 0,1020 г 3-кстокарбофурана), доводят до метки этилацетатом, тщательно перемешивают.

Исходные стандартные растворы в этилацетате хранятся в морозильной камере в течение 3 месяцев в плотно закрытой посуде.

9

МУК 4.1.1240—03

7.8.2. Растворы № la в этилацетате (концентрация 10 мкг/см³)

В мерные колбы вместимостью 100 ем³ помещают 1 ем³ каждого иеходного стандартного раствора карбосульфана (карбофурана, 3-гид-рокеикарбофура на, 3-кетокарбофурана) в этилацетате е концентрацией 1 мг/см³, доводят до метки этилацетатом, тщательно перемешивают. Растворы хранятся в морозильной камере в течение 3 месяцев в плотно закрытой посуде.

Примечание. Для предотвращения деградации определяемых веществ необходимо безусловное соблюдение позиций, изложенных в п.п. 7.7 и 7.8.

7.9. Построение градуировочных характеристик

Для построения 1радуировочных характеристик в инжектор хрома-то1рафа вводят но 20 мкл рабочих стандартных растворов, соответствующих концентрациям карбосульфана, карбофурана и 3-гидроксикар-бофурана 0,25; 0,5; 1,0 и 1,5 мкг/см^г(клубни картофеля); карбосульфана, карбофурана и 3-кетокарбофурана - 0,05; 0,1; 0,25 и 0,5 мкг/см³ (почва), хроматографируют в соответствии с п.п. 9.3.1.1, 9.3.1.2, 9.3.1.3 или 9.3.2.1, 9.3.2.2, 9.3.2.3.

Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Находят среднее значение площади хромапмрафического пика ;ыя каждой концентрации. Строят 1радуировочные 1рафики зависимости площади хрома-то1рафического пика (отн. единицы) от концентрации веществ в растворе (мкг/см³).

7.10. Подготовка колонки с оксидом алюминия для очистки жстракта

Оксид алюминия сушат в сушильном шкафу при 150 °С в течение 2 ч, охлаждают в эксикаторе, затем дезактивируют водой (4 % по массе).

Нижнюю часть стеклянной колонки длиной 25 см, внутренним диаметром 8—10 мм уплотняют тампоном из стекловаты, медленно выливают в колонку (при открытом кране) суспензию 4 г оксида алюминия в 15—20 ем³ этилацетата. Даюг растворителю стечь до верхнего края сорбента и помещают на него слой безводного сульфата натрия высотой 0,5 ем. Колонку промывают 10 ем³ ацетона, затем 20 см³ этил-ацетата со скоростью 1—2 капли в 1 с. После этого колонка готова к работе.

7.11. Проверка хроматографического поведения карбосульфана,

карбофурана, 3-гидроксикарбофурана и 3-кетокарбофурана на колонке с оксидом алюминия

В круглодонную колбу вместимостью 10 см³ помещают но 0,5 ем³ стандартного раствора № 1а (п. 7.8.2) карбосульфана, карбофурана и