Федеральная служба но надзору о сфере защиты нраи потребителей и благополучия челонска

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды

Сборник методических указаний

Выпуск 2 Часть 3 МУК 4.1.1221—4.1.1223—03

ББК 51.23+51.21 060

060 Определение остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах, сельскохозяйственном сырье и объектах окружающей среды: Сборник методических указаний.—М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора. 2005.—30 с.—Вып. 2.—Ч. 3.

1.    Сборник подготовлен: Федеральным научным центром пн мены им. Ф. Ф. Орисматта (чл.-корр. РАМН, ироф. В. Н. Ракитский. проф. Т. В. Юдина); Московской сельскохозяйственной академией им. К. А. Тимирязева (проф. В. А. Калинин, к. хим. и. Довшлевич А. В.): при участии Департамент гос-санэпиднадэора Минздрава России (А. II. Веселов). Разработчики методик указаны в конце каждой из них.

2.    Методические указания рекомендованы к >тверждению Комиссией по госсанэпиднормированию при Минздраве России.

3.    Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации. Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г. Г. Онищенко 16 марта 2003 г.

4.    Введены с I июля 2003 г.

5.    Введены впервые.

ББК 51.23+51.21

© Роспотребнадзор, 2005 © Федеральным центр гигиены и

эн идем полон н Роспотребнадзора, 2005

МУК 4.1.1223—03

3.    Требования техники безопасности

Необходимо соблюдать общепринятые правила техники безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами. электронагревательными приборами и сжатыми газами, а также требования, изложенные в документации на приборы.

4.    Контроль погрешности измерений

Оперативный контроль погрешности и воспроизводимости измерений осуществляется в соответствии с рекомендациями МИ 2335—95. ГСИ. Внутренний контроль качества результатов количественного химического анализа.

5. Разработчики

В. И. Должснко. П. А. Тарарин. Т. А. Маханькова. Н. А. Ермолова (Всесоюзный научно-исследовательский институт защиты растений (Санкт-Петербург).

МУК 4.1.1221—1223—03

Содержание

Измерение концентраций клстодима и его основных метаболитов клетодим сульфона и клего;шм сульфоксида в воздухе рабочей юны методом высокоэффективной жи;и<ос пюй хроматографии:

МУК 4.1.1221—03......................................................................................................4

Измерение концентраций кломазона в ботве и корнеплодах сахарной свеклы, корнеплодах моркови и клубнях карго ([кия методом газожидкостной хроматографии (дополнение к № 5(Х)6-89):

МУК 4.1.1222—03....................................................................................................14

Определение остаточных количеств метрибузина в клубнях картофеля методом газожи;осоепюй хрома гофафии:

МУК 4.1.1223—03....................................................................................................23

3

МУК 4.1.1223—03

УТВЕРЖДАЮ Главный государственный санитарный врач Российской Федерации,

Первый заместитель Министра здравоохранения Российской Федерации Г. Г. Онищенко

16 марта 2003 г

Дата введения - 1 июля 2003 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств метрнбузнна в клубнях картофеля методом газожидкостной хроматографии

Методические указания _МУК    4.1.1223—03_

1. Вводная часть

Фирма производитель: Байер. АГ.

Торговое название: ЗЕНКОР, СП.

Действующее вещество: метрибузин. 4-амино-б-////?е///-бутил-3-мсти.тгио-1.2.4-триазин-5(4Ну-он (ИЮПАК).

Структурная формула:

Эмпирическая формула: C_xHi.,N.,OS.

Молекулярная масса: 214.3.

Химически чистое вещество: бесцветные кристаллы.

Температу ра плавления: 126.2 °С.

Давление паров при 20°С <10 ⁵мбар.

Растворимость (г/1000.мл) при 20 °С в воде - 1.2. в гексане - 2.0. этаноле - 10. метаноле - 450. ацетонитриле - > 600. этилацстатс - > 600. ацетоне - 820. хлороформе - 850.

Стабильность: устойчив к действию разбавленных кислот и щелочей до pH 12.5 при 20 °С.

Гигиенические нормативы: МДУ в картофеле - 0.25 мг/кг.

23

МУК 4.1.1223—03

Область применения препарата: Зенкор. СП - гербицид для борьбы с однолетними двудольными и злаковыми сорными растениями.

2. Метод определения метрибузина в клубнях картофеля с применением газожидкостной хроматографии

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода Метод основан на извлечении остаточных количеств метрибузина из анализируемого объекта ацетоном, последующем перераспределении препарата из водно-ацетоновой фракции в дихлорметан. проведении очистки экстракта на колонке с силикагелем и концентрирования конечного рсэкстракта.

Количественное определение проводят с применением газожид-костной хроматографии с использованием термоионного детектора (ТИД). пламенно-фотометрического детектора (ПФД) или детектора электронного захвата (ДЭЗ), набивной или капиллярной колонки с неподвижной фазой типа SE-30.

2.1.2. Избирательность метода

Проведение очистки экстрактов, а также использование селективных детекторов позволяет устранять влияние возможных мешающих анализу сопутствующих компонентов.

2.1.3. Метрологическая характеристика метода Диапазоны измеряемых концентраций, пределы обнаружения и другие метрологические параметры метода прсдстаатсны в табл.

Таблица

Метрологические параметры метода

Метрологические параметры. Р = 0,95, п = 5 Анализируемый объект, клубни картофеля Предел обнаружения, мг/кг 0,05 Диапазон определяемых концентраций, мг/кг 0,05—0,5 Среднее значение определения. % 88,9 Стандартное отклонение, S % 4,1 Относительное стандартное отклонение, DS % 2,0 Доверительный интервал среднего, % 88,9 ±3,7

МУК 4.1.1223—03

Ротационный испаритель типа LP 203 или аналогичный

Пипетки мерные емкостью 1. 2. 5 и 10 мл    ГОСТ 20292—74Е

Пробирки конические градуированные на 15 мл    ГОСТ 1770—74Е

Стаканы стеклянные на 200 мл    ГОСТ 25336—82Е

Установка для перегонки растворителей при атмосферном давлении

Установка ультразвуковая «Серьга» УЗМ002 или аналогичная

2.4. Отбор проб

Отбор проб для анализа проводят в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микро количеств пестицидов», утвержденными 21.08.79. № 2051—79.

Отобранные пробы хранят в стеклянной или полиэтиленовой таре в холодильнике нс более одного дня. Для длительного хранения пробы помещают в морозильную камеру с температурой -18 °С.

Перед анализом клубни картофеля промывают водой для удаления остатков почвы. Из каждого неочищенного клубня берут сегменты по осевой линии. Сегменты нарезают ножом и после гомогенизации выделяют средний образец.

2.5. Подготовка к определению

2.5.1.    Подготовка и очистка реактивов и растворителей

Перед началом работы рекомендуется проверить чистоту применяемых органических растворителей. Для этого 100 мл растворителя упаривают в ротационном испарителе при температуре 40 °С до объема 1.0 мл и хроматографируют. При обнаружении мешающих определению примесей проводят очистку растворителей в соответствии с общепринятыми методиками.

2.5.2.    Подготовка и кондиционирование набивной колонки

Подготовленной насадкой (5 % SE-30 на хроматоне N-Super или другом носителе) заполняют стеклянную колонку и уплотняют ее под вакуумом. Колонку устанавливают в термостате хроматографа, не подсоединяя к детектору , и кондициониру ют ее при рабочем расходе газа-носителя и температуре 260 °С в течение 8—10 ч.

МУК 4.1.1223—03

2.5.3. Приготовление стандартных растворов

Основной раствор мстрибузина с содержанием НК) мкг/мл готовят растворением 0.010 г препарата, содержащего 99.3 % д.в.. в ацетоне в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранят в холодильнике нс более месяца.

Рабочие стандартные растворы с концентрациями 1.0. 2.0. 5.0 и

10.0    мкг/мл (при использовании ТИД и ПФД) или 0.1. 0.2.0.5 и 1.0 мкг/мл (при использовании ДЭЗ) готовят из основного стандартного раствора мстрибузина соответствующим последовательным разбавлением ацетоном. Рабочие растворы хранят в холодильнике не более двух недель.

При изучении полноты извлечения мстрибузина в модельных опытах используют ацетоновые растворы вещества.

2.5.4. Построение калибровочного графика

Для построения калибровочного графика в инжектор хроматографа вводят по 1—2 мкл рабочего стандартного раствора мстрибузина с концентрацией 1.0. 2.0. 5.0 и 10.0 мкг/мл (при использовании ТИД и ПФД) или 0.1, 0,2. 0.5 и 1.0 мкг/мл (при использовании ДЭЗ). Осуществляют нс менее 5 параллельных измерений и находят среднее значение высоты (площади) хроматографического пика для каждой концентрации. Строят калибровочный график зависимости высоты (площади) хроматографического пика в мм (мм*) от концентрации мстрибузина в растворе в мкг/мл.

2.5.5. Подготовка колонки с силикагелем

Силикагель прогревают в термостате при 130 °С в течение Зч и охлаждают до комнатной температу ры. Стеклянную колонку размером

30.0    х 1.0 см заполняют (при легком постукивании) 3.0 г силикагеля (высота слоя -7.0 см). Над слоем силикагеля помещают слой безводного сульфата натрия высотой 1,5—2.0 см и перед использованием промывают содержимое колонки 5.0 мл смеси дихлорметан : диэтиловый эфир (8 : 2).

2.6. Подготовка пробы

Образец массой 20.0 ± 0.1 г помещают в плоскодонную колбу емкостью 200 мл. добавляют 50 мл ацетона, слегка встряхивают и подвергают обработке ультразвуком в УЗ-банс по 5 мин два раза. После этого содержимое колбы фильтруют через складчатый бумажный фильтр белая лента в делительную воронку емкостью 500 мл. К остатку образца, находящемуся в колбе, приливают 50 мл ацетона и процедур) экстрагирования и фильтрования повторяют.

При использовании аппарата для встряхивания в колбу с образцом вносят 80 мл ацетона и встряхивают в течение 30 мин. Содержимое

27

МУК 4.1.1223—03

колбы фильтруют через складчатый бумажный фильтр белая лента в делительную вороню емкостью 500 мл. Внутренние стенки колбы с образцом ополаскивают 20 мл ацетона и экстрагент фильтруют.

К объединенному фильтрату в делительную вороню добавляют 250 мл бидистиллированной воды. 25 мл насыщенного водного раствора натрия хлорида и 25 мл дихлорметана. Воронку встряхивают в течение 1 мин и после 5-ти минутного отстаивания нижний дихлор.метановый слой фильтруют через слой безводного сульфата натрия (толщина слоя - 1.0—1.5 см), помещенный на бумажный фильтр синяя лента, в грушевидную колбу (концентратор) емкостью 100 мл. Экстрагирование с использованием 25 мл дихлорметана повторяют еще раз. Водноацетоновый слой отбрасывают.

Объединенный дихлормстановый экстракт упаривают на ротационном испарителе досуха при температуре водяной бани 40 °С. Остаток в колбе (концентраторе) псрерастворяют 3 мл дихлорметана и переносят его для очистки в подготовленную колонку с силикагелем. Мстрибуэин элюируют двумя объемами по 5.0 мл смеси дихлормстан:диэтиловый эфир (8 :2). собирая элюат в коническую пробирку емкостью 15 мл. Элюат упаривают досуха в токе азота. Сухой остаток растворяют в 1 мл ацетона (при использовании ТИД и ПФД) или в 5 мл ацетона (при использовании ДЭЗ) и анализируют его на содержание мстриб\зина по п. 2.7.

2.7. Условия хроматографирования

2.7.1. При использовании чабивиои колонки Газовый хроматограф «Цвет-560» с ТИД. ПФД или ДЭЗ (ДПР). Колонка хроматографическая набивная размером 1 м х 3 мм (внутренний диаметр) с неподвижной фазой 5 % SE - 30 на хроматонс N -Super. 0.125—0.16 мм

Показания электрометра - 8 х 10⁹ Скорость движения ленты самописца - 0.25 см/мин Температура испарителя - 250 °С Температура колонки - 200 °С

Температу ра детектора - 350 °С (для ТИД. ДЭЗ). 250 °С (для ПФД) Скорость потока газа-носителя (азот) - 30 см³/мин Скорость водорода и воздуха к ТИД - 15 и 300 см³/мин соответственно. к ПФД - 60 и 250 см³/мин соответственно Объем вводимой пробы - 1—2 мкл Время удерживания метрибузина - 4.0 ± 0.1 мин

МУК 4.1.1223—03

Предел детектирования - 0.05 иг для ДЭЗ (ДПР). 0.5 иг для ТИД и 1.0 нг для ПФД.

Линейный диапазон детектирования - 0.1—1.0 нг для ДЭЗ (ДПР). 0.5—10 нг для ТИД и 1.0—10 нг для ПФД-ссра.

2.7.2. При использовании капиллярной колонки

Газовый хроматограф с ТИД. ПФД или ДЭЗ.

Колонка хроматографическая капиллярная размером 5 м х 0,53 мм (внутренний диаметр) с неподвижной фазой НР-1 (типа SE - 30). 2.65 мкм.

Температура испарителя - 250 °С.

Температура колонки с программированием при использовании ТИД или ДЭЗ от 60 °С (1 мин) до 260 °С (15 мин) со скоростью 10°С/мин; при использовании ПФД-ссра от 160 °С (1 мин) до 260 °С (15 мин) со скоростью 10 °С/мин.

Температу ра детектора - 300 °С (для ТИД. ДЭЗ). 200 °С (для ПФД).

Скорость потока газа-носителя (гелий) - 10 см/мин.

Скорость водорода и воздуха к ТИД - 30 и 300 см/мин соответственно. к ПФД - 90 и 200 см³/мин соответственно, дополнительного газа (гелий) к ТИД - 60 см³/мин. дополнительного газа (азот) к ДЭЗ -40 см³/мин.

Объем вводимой пробы - 1 мкл.

Время удерживания мстрибузина при использовании ТИД или ДЭЗ 14.4 ± 0.1 мин. при использовании ПФД - 4.5 ± 0.1 мин.

Предел детектирования - 0.02 нг для ДЭЗ. 0,2 нг хтя ТИД и 0.5 нг хтя ПФД.

Линейный диапазон детектирования - 0.05—1.0 нг хтя ДЭЗ. 0,2— 10 нг хтя ТИД и 0,5—10 нг хтя ПФД

2.7.3. Обработка результатов анализа

Содержание мстрибузина рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:

Н_ГЛ-У

Н₀т

Л' - содержание мстрибузина в пробе, мг/кг:

Н\ - высота (площадь) пика образца, мм (мм²);

Н₀ - высота (площадь) пика стандарта, мм (мм²);

А - концентрация стандартного раствора мстрибузина. мкг/мл;

V- объем экстракта, подготовленного хтя хроматографирования, мл; т - масса анализируемой части образца (г).

29