МЕТОДЫ

ОПРЕДЕЛЕНИЯ

МИКРОКОЛИЧЕСТВ

ПЕСТИЦИДОВ

В ПРОДУКТАХ

ПИТАНИЯ,

КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Там 1

X “Г” МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МИКРОКОЛИЧЕСТВ § Ж а и ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ В ДВУХ ТОМАХ ТЪм 1 ф

МОСКВА. 1992 «КОЛОС»,

При разработке методических указаний по определению остаточных количеств пестицидов, применяемых на небольшом числе культур, среднее значение определения устанавливают для каждой культуры. Широкое применение пестицидов на различных культурах предполагает установление среднего значения определения для наиболее типичных объектов, которые выбирают в соответствии с преимущественным содержанием в них растительных восков и масел, животных жиров, гумуса, пигментов и других коокстрактивных веществ. В соответствии с этим методические указания практически могут быть использованы для анализа других объектов из субстратов указанного вида.

Утверждено 08.06.89 N? 5004 - 89

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ДЕЙСТВУЮЩЕГО ВЕЩЕСТВА ПРЕПАРАТА ТОРК И ЕГО МЕТАБОЛИТА В ВОДЕ, ПОЧВЕ И РАСТИТЕЛЬНОМ МАТЕРИАЛЕ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ •

Торк (оксид фенбутатина) - акарицид. Действующее вещество препарата - ди[трыс(2-димстил-2-фснилэтилового)олова1 оксид.    Брутто

формула C₆oH7eOSn₂. Молекулярная масса 1052. Химически чистое вещество представляет собой белый кристаллический поршок с т. пл. 138-139,5 °С, хорошо растворимый в ряде органических растворителей (ксилол, толуол, бензол, гексан, ацетон и др.), практически не растворимый в воде, нелетуч. В воде гидролизуется с образованием трис(2-мстил-2-фенил)пропилоловогидроксида, который при комнатной температуре переходит опять в исходное вещество. Разрушается под действием сильных окислителей. Препарат торк малотоксичен, ЛД50 для белых крыс 2500 мг/кг (орально).

Принцип метола. Метод основан на извлечении торка из воды, яблок хлористым метиленом, хлороформом, пет релейным эфиром или торка совместно с метаболитом из воды, яблок, цитрусовых, огурцов смесью хлороформ - уксусная кислота (75:1), очистке экстрактов на колонках с силикагелем КСК или оксидом алюминия и хроматографировании в тонком слое с последующим обнаружением зон локализации соединений путем обработки гематоксилином, пирокатехиновым фиолетовым, кверцетином, дитизоном.

Метрологическая характеристика метола приведена в таблице 47.

Избирательность метола. Определению нс мешают препараты акрекс, ксльтан, антио, рогор, применяемые, как и торк, против растительноядных клещей. Определению могут мешать оловоорганические препараты, например пликтран и его метаболиты.

Реактивы и растворы. Ацетон х.ч. Уксусная кислота ледяная х.ч. Гексан х.ч. Хлороформ х.ч. Хлороводородная кислота чд.а., 0,2 н. водный раствор. Метилен хлористый ч. Серная кислота ч.д.а., 0,2 н. водный раствор. Петролейный эфир (используется только фракция с т. кип. 40-60 °С) ч. Пирокатсхиновый фиолетовый (индикатор) ч.д.а., 0,1%-ный раствор в этиловом спирте. Лимонная кислота х.ч., 0,5%-ный водный раствор. Гематоксилин х.ч., 0,1%-ный раствор в этиловом спирте. Кверцетин х.ч., 0,1%-ный раствор в этиловом спирте. Вода дистиллированная. Натрия сульфат безводный чд.а. Углерод четыреххлористый ч.д.а. Дитизон ч.д.а., 0,01%-ный раствор в четыреххлористом углероде. Анилин хлороводородный чд.а., 0,02%-ный водный раствор. Этиловый спирт х.ч. Бумажные фильтры обеззоленные («синяя лента»). Силикагель КСК. Силикагель Silpcarl (Чехословакия) для тонкослойной хроматографии. Хроматографические пластинки «Силуфол»

* Разработаны В. II. Кавецким, Л. И Бублик, В. А. Лесовой (УкрНИИЗР), Г. О. Оганесяном, Ю. А. Бунятяном (Филиал ВНИИГИИТОКС).

185

47. Метрологическая характеристика метода (р = 0,95, п * 5)

Пластинка Анализируемый объект Анализируемое соединение* Предел обнаружения, мкг Объем (масса) анализируемой пробы, мл, г «С илу фол* Вода Т 3 50 УФ254 М 2,5 50 Яблоки, т 2 50 цитрусовые, огурцы м 3 25 Силикагель Почва т 2.5 50 Яблоки т 10 50 Продолжение Диапазон Анализируе- опрсделяе- Среднее Пластинка Анализируе- мое сосди- мых кон- значение мый объект нсние* центраций опрсдслс- мг/кг, ния, % мг/л «Силуфол* Вода Т 0,06-0,2 93,05 ± 2,57 УФ*4 М 0,06-0,2 99.0 ± 1,57 Яблоки, т 0,08-0,4 97,55 ± 4,38 цитрусовые, огурцы м 0,12-0,4 91,0 ± 2,96 Силикагель Почва т 0.05-0,4 86,0 ± 3,8 Яблоки т 0,2-0,4 81,8 ± 6.1

• Т - торк, М - метаболит торка.

УФ254- Алюминия оксид для хроматографии И степени активности. Стандартные растворы торка и его метаболита с содержанием 10 и 100 мкг в 1 мл смеси ацетон - уксусная кислота (75:1), готовят из х.ч. веществ.

Приборы и посуда. Весы технические типа BJIKT. Весы аналитические типа ВЛДП. Аппарат для встряхивания жидкости в лабораторной посуде. Испаритель ротационный ИР-1М или другого типа. Камера для хроматографирования. Пульверизатор стеклянный. Осветитель ультрафиолетовый. Баня водяная. Плита электрическая. Колбы: мерные на 25 и 100 мл; конические ТС на 50; 100 и 250 мл; круглодонные на 100 мл. Цилиндры мерные на 10; 20; 50; 100 и 250 мл. Воронки лабораторные. Стаканы химические ТС на 50 и 100 мл. Хроматографические колонки стеклянные диаметром 1,5 см и длиной 30 см. Воронки делительные на 250 мл. Пипетки на 0,1; 1; 5; 15 и 20 мл. Ртутно-кварцевая лампа ПРК-2 или ПРК-4. Пластинки стеклянные для хроматографии размером 9 х 12 см.

Подготовка к определению. Приготовление растворов. Стандартные растворы торка и его метаболита (100 мкг/мл). 25 мг х.ч. вещества помещают в мерную колбу на 25 мл и растворяют смесью ацетон - уксусная кислота (75:1). Отбирают 10 мл раствора в мерную колбу на 100 мл и доводят до метки смесью ацетона с уксусной кислотой (75:1).

Стандартные растворы торка и его метаболита (10 мкг/мл). Из стандартного раствора торка и его метаболита ООО мкг/мл) отбирают 10 мл в мерную колбу на 100 мл и доводят до метки смесью ацетона с уксусной кислотой (75:1). Растворы хранят в прохладном защищенном от света месте нс дольше 1 мсс.

0,1%-ный раствор гематоксилина в 95%-ном этиловом спирте. 0,1 г гематоксилина помешают в колбу на 100 мл, добавляют 1 каплю концентрированной хлороводородной кислоты и доводят до метки 95%-ным этиловым спиртом. Раствор хранят в темной склянке нс дольше недели.

0,1%-ный раствор пирокатсхинового фиолетового. 0,1 г пирокатс-хинового фиолетового растворяют в 100 мл этилового спирта. Раствор хранят в темной склянке не дольше недели.

0,1%-ный раствор кверцетина в 96%-ном этиловом спирте. Кверцетин (0,5 г) растворяют в 300 мл этилового спирта при слабом нагревании, охлаждают, добавляют 25 мл концентрированной хлороводородной кислоты и доводят объем до 500 мл этиловым спиртом. Раствор хранят в темной склянке нс дольше недели.

0,01%-ный раствор дитизона в четыреххлористом углероде. Свежеприготовленный 0,01%-ный раствор дитизона в четыреххлористом углероде с последующей обработкой 0,02%-ным раствором хлороводородного анилина хранят в темном и прохладном месте, используя нс дольше двух дней.

0,5%-ный раствор лимонной кислоты. Лимонную кислоту (0,5 г) растворяют в 99,5 мл дистиллированной воды. Раствор хранят нс дольше 1 мсс.

0,2 н. раствор серной кислоты. Концентрированную серную кислоту (5,56 мл) разбавляют водой до 1 л. Хранят в сухом прохладном месте нс дольше 3 мсс.

Приготовление    хроматографической

колонки с силикагелем. Стеклянную колонку размером 1,5 х 30 см, снабженную краном и стеклянным фильтром, заполняют на 25 см силикагелем КСК (0,7 мм). Колонку перед употреблением промывают смесью хлороформа с уксусной кислотой (75:1).

Приготовление    хроматографических

пластинок. 20 г силикагеля смешивают в стеклянном стаканчике с 29 мл 0,5 н. уксусной кислоты и перемешивают в течение 15 мин стеклянной палочкой. Смесь наносят на три стеклянные пластинки размером 9 х 12 см. Сушат на воздухе 14-15 ч. Пластинку «Силуфол» помешают в хроматографическую камеру с 0,5 н. уксусной кислотой. После того как растворитель поднимется до верхнего края, пластинку вынимают и сушат 1 ч на воздухе.

Приготовление колонки с оксидом алюминия. Оксид алюминия II степени активности, нейтральный (100 г) помешают в коническую колбу на 250 мл, добавляют 6 мл дистиллированной воды и перемешивают при встряхивании в течение 7 ч.

187

В хроматографическую колонку вкладывают ватный тампон, затем насыпают оксид алюминия слоем высотой 7 см и пропускают 20-25 мл растворителя (хлористый метилен, хлороформ).

Ход анализа. Экстракция, очистка экстрактов и хроматографирование. Пробу воды (50 мл) переносят в коническую колбу на 250 мл и заливают 15 мл смеси хлороформа с уксусной кислотой (75:1) (для определения торка и его метаболита) или 15 мл органического растворителя: хлорсфюрм, хлористый метилен, петролейный эфир (для определения торка). Экстрагируют на встряхиватсле в течение 5-10 мин. Переносят смесь в делительную воронку и разделяют водный слой. Органическую фракцию собирают в отдельную колбу вместимостью 50 мл. Водный слой еще трижды экстрагируют тем же экстрагентом (порциями по 15 мл) и снова собирают в ту же колбу. Объединенные экстракты фильтруют через фильтр с безводным сульфатом натрия. Отгоняют растворитель на ротационном испарителе и остаток наносят на хроматографическую пластинку, обработанную уксусной кислотой. Рядом наносят стандартные растворы торка и метаболита, содержащие 1-5 мкг соединений, и хроматографируют в системе подвижных растворителей гексан - ацетон (4:1). После того как растворители поднимутся на высоту 10 см, пластинку вынимают, сушат на воздухе 30 мин и проявляют хроматограмму.

Воздушно-сухую измельченную почву (50 г) помещают в коническую колбу и заливают 100 мл органического растворителя. Экстрагируют торк при встряхивании в течение 15 мин. Затем экстракт отделяют и фильтруют через бумажный фильтр с безводным сульфатом натрия. Экстракцию в течение 7-10 мин повторяют еще дважды, заливая по 50 мл растворителя. Объединенные экстракты упаривают на роторном испарителе до небольшого объема (1-2 мл). Остаток наносят количественно полоской с левой стороны на пластинку размером 9 х 12 см с силикагелем и хроматографируют в подвижной фазе гексан - ацетон (4:1). Когда фронт растворителей поднимется на высоту 10 см, пластинку вынимают, сушат на воздухе 30 мин, затем поворачивают пластинку против часовой стрелки на 90°, слева наносят стандартный раствор, содержащий 1-5 мкг торка, и хроматографируют в той же подвижной фазе. После того как растворители поднимутся на высоту 10 см, пластинку вынимают, сушат на воздухе 1 ч и проявляют хроматограмму.

Измельченный растительный материал (яблок, цитрусовых, огурцов) (25 г) помещают в коническую колбу на 250 мл и заливают 50 мл смеси органического растворителя с уксусной кислотой (75:1). Экстрагируют на встряхиватсле в течение 5 мин. Экстракт отделяют, а растительный материал экстрагируют еще трижды порциями растворителя по 15-20 мл. Объединенные экстракты пропускают через колонку с силикагелем КСК, собирая элюат в колбу прибора для отгонки растворителя и упарив до 1-2 мл, остаток наносят на хроматографическую пластинку. Экстракты можно очищать, также предварительно упарив пробу до 1-2 мл, внеся остаток в подготовленную колонку с оксидом алюминия и промыв ее 50 мл хлороформа. Элюат упаривают до 1-2 мл и наносят на хроматографическую пластинку. Рядом наносят стандартные растворы торка и его метаболита, содержащие 1-5 мкг соединений, и хроматографируют в подвижной фазе гексан - ацетон (4:1). После того как растворитель поднимется на высоту 10 см, пластинку вынимают, сушат на воздухе

188

1 ч и проявляют хроматограмму одним из четырех способов: 1) опрыскивание 1 мл 0,1%-ного раствора гематоксилина в 95%-ном этиловом спирте, УФ-облучснис в течение 5 мин и опрыскивание 1 мл 0,5%-ного водного раствора лимонной кислоты; 2) УФ-облучснис в течение 10 мин и опрыскивание 1 мл 0,1%-ного этанольного раствора пирокатсхинового фиолетового; 3) опрыскивание 1 мл 0,2 н. раствора серной кислоты, УФ-облученне в течение 10 мин и опрыскивание 1 мл 0,1%-ного этанольного раствора кверцетина; 4) опрыскивание 1-2 мл 0,01%-ного раствора дитизона в четыреххлористом углероде, опрыскивание 0,02%-ным раствором (1-2 мл) хлороводородного анилина.

При наличии торка и его метаболита в пробе на хроматограмме, обработанной гематоксилином, зоны локализации соединений проявляются в виде сиреневых пятен на голубом фоне; при обработке пиро-катсхиновым фиолетовым - в виде синих пятен на светло-коричневом фоне; кверцетином - в виде желтых пятен на светлом фоне; дитиэо-ном - в виде желтых пятен на бледно-розовом фоне. Величины R_r торка и его метаболита равны соответственно 0,66 ± 0,01 и 0,37 ± 0,01. Содержание торка и его метаболита в пробе находят путем сравнения размеров и интенсивности окраски пятен с пятнами стандартных растворов.

Обработка результатов анализа. Концентрацию торка и его метаболита (X, мг/л, мг/кг) рассчитывают по формуле

А

X - — ,

Р

где А - количество вещества, обнаруженное на хроматограмме, мкг; Р - объем (вода) или навеска (почва, растительный материал) исследуемой пробы, взятой для анализа, мл, г.

Требования безопасности. Следует соблюдать все необходимые меры безопасности при работе в химических лабораториях.

СОКРАЩЕНИЯ

ГЖХ - газожидкостная хроматография д.в. - действующее вещество

ДПР - детектор постоянной скорости рекомбинации

ДСД - допустимая суточная доза

ДЭЗ - детектор электронно-захватный

МДУ - максимально допустимый уровень

ОДК - ориентировочно допустимая концентрация

ПДК - предельно допустимая концентрация

ПИД - пламенно-ионизационный детектор

ПФД - пламенно-фотометрический детектор

СФ - спсктрофотомстричсский

ТИД - термо-ионный детектор

т.кип. - температура кипения

т.пл. - температура плавления

ТСХ - тонкослойная хроматография

ТСХЭ - хроматоэнзимная тонкослойная хроматография

УФ - ультрафиолетовый

ФОП - фосфорорганичсскис пестициды

ХОИ - хлорорганичсскис инсектициды

ХОП - хлорорганичсскис пестициды

х.ч. - химически чистый

ч. - чистый

ч.д.а. — чистый для анализа

ПРЕДИСЛОВИЕ

Экологические последствия использования пестицидов, их неблагоприятное влияние на здоровье населения хорошо известны. Одно из мероприятий, направленных на обеспечение безопасного применения этих веществ, - контроль за содержанием остаточных количеств препаратов в сельскохозяйственной продукции, продуктах питания, кормах, внешней среде. В соответствии с законодательными актами в нашей стране контроль за содержанием -сстицидов возложен на контрольно-токсикологические лаборатории станций защиты растений, отделы токсикологии проектно-изыскательских станций химизации сельского хозяйства, санитарно-эпидемиологические станции, лаборатории.

Систематически выпускаются справочные издания по методам определения микроколичеств пестицидов. В настоящем выпуске обобщены рекомендации отечественных специалистов по определению остаточных количеств пестицидов в различных средах, апробированные и одобренные группой экспертов и имеющие законодательный характер. Все методические указания утверждены органами санитарно-эпидемиологической службы. Перед названием каждой методики приведены дата утверждения и номер. В отличие от предыдущих выпусков (1977 и 1983 гг.) в книгу включены унифицированные методики определения отдельных групп препаратов, рекомендованных специалистами, сотрудничающих в области агропромышленного комплекса по проблеме «Гигиена и токсикология пестицидов, изучение возможных отрицательных последствий применения пестицидов и их профилактика*.

Методики предназначены для контроля за остаточными количествами пестицидов в экспортируемой продукции, но могут быть использованы также для контроля качества отечественной продукции. Методические указания сгруппированы по классам определяемых соединений, а внутри каждого подраздела для удобства пользования пестициды расположены по алфавиту. Такая форма изложения позволяет сделать обобщения по методам определения важнейших классов псстицидных препаратов. Методы определения биологических средств защиты растений выделены в специальный раздел во втором томе.

В сборник включены методики определения в продуктах питания, кормах, сельскохозяйственной продукции, воде, почве, воздухе, биологическом материале пестицидов различного химического строения в одной пробе, методики определения групп препаратов, близких по строению, методики определения в одной пробе смесей препаратов, используемых в интенсивных технологиях возделывания сельскохозяйственных культур, а также методики определения отдельных препаратов.

Методические указания включают краткую характеристику физикохимических свойств препарата, описание принципа метода определения, перечень необходимых реактивов и приборов, детальное изложение техники определения и способа расчета результатов анализа. Государственные стандарты на химические реактивы, аппаратуру и приборы периодически изменяются в связи с истечением срока годности, поэтому описание текущей нормативно-технической документации на реактивы и приборы вынесено в Приложение.

Предусмотрено, что при использовании всех методик пробы отбирают в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов», утвержденными 21.08.79 № 2051-79.

При определении остаточных количеств пестицидов необходимо руководствоваться Правилами устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) системы здравоохранения, № 2455-81 от 20.10.81.

В связи с важностью получения сопоставимых данных об остаточных количествах пестицидов для решения вопросов о возможности и путях реализации продукции растениеводства по назначению во втором томе приведены методические указания по контролю уровней и изучению динамики содержания пестицидов в почве и растениях, а также перечень утвержденных санитарно-гигиенических норм максимально допустимых уровней содержания пестицидов в пищевых продуктах (МДУ) и предельно допустимые концентрации пестицидов (ПДК) в почве и воде.

Книга предназначена для работников лабораторий, занимающихся контролем остаточных количеств пестицидов. Она полезна агрономам, врачам, биологам, химикам и другим специалистам, занятым защитой растений, охраной окружающей среды, профилактикой неблагоприятного воздействия пестицидов на население.

Утверждено 10.10.79

ЕДИНЫЕ ТРЕБОВАНИЯ К МЕТОДИКАМ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ И ОБЪЕКТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ {МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ)

Настоящие методические указания распространяются на методики определения содержания пестицидов в продуктах питания, воде, почве, кормах, биологическом материале, воздухе.

Указания устанавливают единые требования к построению, содержанию, изложению нормативных документов (аттестатов, технических условий, методических указаний) на методики определения содержания пестицидов в продуктах питания, кормах и объектах внешней среды.

требования к приборам, реактивам, к подготовке и проведению анализа, обработке результатов, метрологическому обеспечению.

Общие положения. Нормативные документы на методики определения содержания пестицидов в пищевых продуктах, кормах и объектах природной среды должны соответствовать современным требованиям нормативно-технической документации, принятым в нашей стране и международных организациях.

В документы нужно включать современные методы, проверенные в экспериментальных и производственных условиях, имеющие метрологическое обеспечение. Следует предусматривать использование приборов, прошедших государственные испытания, внесенных в Государственный реестр и выпускаемых серийно, а также приборов, требования к которым установлены в Государственных стандартах и нормативно-технической документации. Целесообразно предусматривать приборы с регистрацией показаний в форме, пригодной для статистической обработки, в том числе с выходом на вычислительные устройства.

В методики определения содержания пестицидов в пищевых продуктах, кормах и объектах окружающей среды необходимо включать аналогичные по точности дублирующие методики для повышения достоверности идентификации и для того, чтобы можно было использовать имеющиеся приборы.

В методики следует включать требования по обеспечению безопасности труда и производственной санитарии.

Срок действия временных нормативных документов устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.

Единые требования к методикам. Нормативный документ должен содержать вводную часть и следующие разделы: «Краткая характеристика препарата*, «Принцип метода*, «Метрологическая характеристика метода*, «Избирательность метода*, «Реактивы и растворы*, «Приборы и посуда*, «Подготовка к определению*, «Ход анализа*, «Обработка результатов анализа*, «Требования безопасности*.

В заглавии должны найти отражение наименование пестицида, объекты анализа и принцип метода определения (например, «Методические указания по определению хлорорганичсских пестицидов в почве хроматографическим методом*).

Вводная часть должна отражать назначение и область применения методики (или методик). Она должна содержать:    характеристику

действующего вещества (или действующих веществ); общепринятое название (Common name) и название по Госту; химическое название; структурную и эмпирическую формулы, молекулярную массу; синонимы или торговые названия; физические и химические свойства - цвет, запах, температуру кипения, упругость паров, стабильность, растворимость в воде и основных органических растворителях, коэффициенты распределения (если они известны); допустимую суточную дозу, максимально допустимые уровни и предельно допустимые концентрации; особые токсические свойства (возможность образования метаболитов с большей токсичностью и их характеристика); область применения пестицида; группу пестицида и перечисление культур, на которых его применяют (например, послсвсходовый гербицид на посевах картофеля).

Раздел «Принцип метода* должен отражать принцип, на котором основана методика, с указанием основных параметров определения и

6

возможности определения основных токсических метаболитов (например: «Методика основана на хроматографировании ДДТ и его метаболитов ДДД и ЯДЕ в тонком слое силикагеля в системе гексан - ацетон после экстракции из увлажненной почвы смесью растворителей н-гсксан -ацетон и очистки экстракта концентрированной серной кислотой»).

Если действующее начало определяется в сумме с его токсическими метаболитами, следует их перечислить.

Раздел «Метрологическая характеристика метода» должен отражать следующие параметры: диапазон определяемых концентраций; предел обнаружения в мкг; предел обнаружения в мг/кг, мг/л или мг/м³ (пределы обнаружения, кроме оговоренных специально случаев, нс должны превышать МДУ или ПДЮ; среднее значение определения стандартных количеств пестицидов в пробе в % (для установления процента определения на различных культурах следует проводить анализ типичных представителей, а в случае узкой области применения пестицида — на тех культурах, для которых предназначен пестицид; число параллельных определений (л) нс должно быть менее 5); стандартное отклонение; относительное стандартное отклонение; доверительный интервал среднего (при р = 0,95 и п » 5).

Среднее значение определения стандартных количеств и доверительный интервал среднего приводятся для трех концентраций: равной МДУ; равной удвоенному пределу обнаружения; равной половине МДУ (ПДК), если она выше предела обнаружения или, сети МДУ (ПДК) нс установлены, для трех концентраций в определенном диапазоне концентраций.

В разделе «Избирательность метода» характеризуют избирательность метода в присутствии пестицидов, близких по химическому строению и области применения. Если имеются мешающие определению примеси, дают (по возможности) их описание и указывают концентрацию, с которой начинает сказываться их влияние.

Раздел «Реактивы и растворы» должен содержать перечень применяемых реактивов и материалов с указанием степени их чистоты в соответствии с существующими стандартами, научно-технической документацией, а также растворов с указанием сроков хранения и необходимого количества.

В методиках гззохроматографичсского определения остаточных количеств пестицидов должны быть указаны типы хроматографа и детектора и его селективность; материал, длина и диаметр хроматографической колонки.

В методиках по определению остатков пестицидов методом тонкослойной хроматографии должны быть указаны размер пластинок, толщина слоя, марка сорбента и его зернение.

В методиках по определению остатков пестицидов оптическими методами должны быть указаны тип прибора, тип и размеры кювет и тип катодной лампы (атомно-абсорбционная спектрофотометрия).

Раздел «Подготовка к определению* должен содержать требования ко веем подготовительным работам, предшествующим определению остаточного количества пестицидов: приготовлению стандартных, градуировочных и других растворов с указанием сроков их хранения; очистке растворителей; приготовлению хроматографических пластинок и наса-

док; кондиционированию хроматографических колонок; построению градуировочных графиков.

При использовании способов очистки растворителей, отличающихся от общепринятых, должно быть дано подробное их описание.

Раздел должен содержать требования к установке и подготовке всех средств определения в соответствии со стандартами и научно-технической документацией, с учетом требований безопасности.

Установление зависимости аналитического сигнала от содержания определяемого вещества, построение градуировочного графика необходимо проводить в соответствии со стандартами и Научно-технической документацией на приборы.

Раздел «Ход анализа» должен содержать конкретные, подробные сведения о порядке выполнения всех операций по определению содержания остаточных количеств пестицидов в отобранных пробах пищевых продуктов, кормах, воде, почве.

Раздел должен содержать следующие подразделы: «Озоление, гидролиз пробы» (в случае необходимости), «Экстракция и очистка экстрактов» и др.

В методиках определения микроколичеств пестицидов методом газовой хроматографии стел уст приводить условия хроматографирования, а именно: необходимые газы и скорости их потока (мл/мин); температура термостата колонки, детектора, испарителя (°С); вводимые в испаритель объемы упаренных экстрактов; время удерживания - абсолютное и относительное (среднее из трех определений); способ построения градуировочного графика; линейный динамический диапазон детектирования; способ количественного определения.

В методиках определения остаточных количеств пестицидов хроматографией в тонком слое нужно приводить способы приготовления хроматографических пластинок: условия нанесения пробы на пластинку; условия, хроматографирования; вид хроматографической камеры; подвижная фаза; способ и степень насыщения парами подвижного растворителя; длина пробега растворителя; проявляющий реактив; способ обработки хроматограмм (нагревание, облучение УФ-евстом и т.п.); величина п (среднее из 5 определений); способ количественного определения. При использовании денситометра приводятся его основные параметры.

При фотоколориметричсском и спсктрофотометричсском определениях способ приготовления градуировочных растворов должен быть представлен в виде таблицы и указана длина волны, при которой измеряется оптическая плотность градуировочных растворов.

Для повышения надежности идентификации пестицидов методика должна включать альтернативные способы очистки экстракта. Методика газохроматографического определения остаточных количеств пестицидов должна включать анализ нс менее чем на двух хроматографических колонках, заполненных неподвижными фазами различной полярности. Методика определения остаточных количеств пестицидов методом тонкослойной хроматографии должна включать, как правило, альтернативные условия хроматографирования (разные сорбенты, проявляющие реагенты, не менее двух подвижных растворителей).

Раздел «Обработка результатов анализа* должен содержать сведения по обработке полученных данных и расчетные формулы. Содержание

S

остатков пестицидов в анализируемой пробе вычисляют как среднее из двух-трех параллельных определений. Результаты определения остаточных количеств пестицидов по действующему началу суммируют с результатом определения токсичных метаболитов в пересчете на исходное действующее вещество.

Содержание токсичных метаболитов в анализируемом субстрате определяют раздельно от исходного действующего вещества в том случае, если для них утверждены максимально допустимые уровни остаточных количеств.

Раздел «Требования безопасности» должен содержать специальные правила безопасности при выполнении операций определения содержания остаточных количеств и соответствовать «Правилам устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Минздрава СССР» № 2455-81 от 20.10.81.

В методических указаниях должны содержаться сведения об авторе или авторских коллективах, принимавших участие в разработке методики (фамилия, и., о., место работы).

Если в разработке методики принимало участие несколько авторских коллективов, то их нумерация приводится в тексте методики в соответствующих разделах арабскими цифрами, а ссылки даются в скобках.

Сети какая-либо часть методики утверждалась ранее, то следует указать номер утверждения и дату.

Для разработки методики определения микроколичеств пестицидов

9