МУ 3252-85
Методические указания по определению стомпа в табаке методом газожидкостной хроматографии

X ~г	МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МИКРОКОЛИЧЕСТВ
§	ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ
QJ £ с и	ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ
	В ДВУХ ТОМАХ Том 1 ф

Утверждено 12.04.85 № 3252 - 85

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ СТОМПА В ТАБАКЕ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ ¹

Краткая характеристика препарата. Стомп - 3,4-диметил-2,6-динитро-М(пснтил-3)анилин - кристаллическое вещество оранжевожелтого цвета. Брутто формула C^H^NjO¹. Молекулярная масса 281,3. Общепринятое название псноксалин. Т.пл. 56-57 °С. Растворимость в воде при 20 °С 0,3 мг/л. Хорошо растворяется в хлорированных и ароматических углеводородах. Стабилен в щелочных и кислых средах.

Как селективный почвенный гербицид эффективен для борьбы с одно- и двудольными сорняками на посевах кукурузы, хлопчатника, риса, бобовых, табака. Рекомендуется вносить перед посадкой. Применяется также для химического пасынкования табака. ДСД 0,25 мг/кг; МДУ в табаке 0,1 мг/кг.

Принцип метода. Методика основана на газохроматографичесом определении стомла с ДПР на неподвижной фазе ECSS-X после экстракции смесью вода - хлороводородная кислота - этанол, очистки экстракта жидкость-жидкостным перераспределением в гексан и на колонке с силикагелем.

Метрологическая характеристика метода. Диапазон определяемых концентраций 0,03-0,5 мг/кг. Минимально детектируемое количество 0,2 нг. Метрологическая характеристика метода представлена в таблице 50.

50. Метрологическая характеристика метода определения остаточных количеств стомпа в табаке методом ГЖХ

Количество стомпа, внесенного в пробу, мг/кг	Количество стомпа, обнаруженного в пробе, мг/кг	Процент определе ния	Стандартное отклонение, мг/кг
0,05	0,043	84,0	±0,0016
0,25	0,23	90,4	±0,009
0,5	0,42	86,8	±0,016

Продолжение

Относительное Среднее Доверительный интервал стандартное отклонение. среднего при р » 0,95, отклонение мг/кг * - 5. % ±3,7 0,0012 ±0.002 ±3,8 0,006 ±0,01 ±3,8 0,012 ±0,02

Избирательность методе. Трефлан и паарлан, применяемые в настоящее время в табаководстве, определению нс мешают.

Реактивы и растворы. Этиловый спирт ректиф. Хлороводородная кислота ч. «-Гексан ч. Бензол х.ч. Сульфат натрия безводный ч. Подкисленный этанол (к 200 мл дистиллированной воды приливают 20 мл концентрированной хлороводородной кислоты и доводят до метки этанолом в мерной колбе на 1 л). 1 н. раствор хлороводородной кислоты. Смесь гексана с бензолом (8:2). Азот особой чистоты. Силикагель для колоночной хроматографии JI (0,1/0,2 мм) ECSS-X 5% на газ-хром Q (0,1-0,12 мм). Стандартный раствор стомпа в бензоле (0,0005 мг/мл).

Приборы и посуде. Хроматограф «Цвет-106» с ДПР или аналогичный. Микрошприц на 10 мкл. Ротационный вакуумный испаритель. Аппарат для встряхивания. Гомогенизатор. Сушильный шкаф. Колбы: конические со шлифом на 250 и 500 мл; мерные на 1 л; круглодонные на 100 мл; колба Бунзена. Воронка Бюхнера. Хроматографические колонки длиной 500 мм с диаметром 20 мм. Воронки делительные на 500 и 1000 мл. Стаканы химические на 100 и 150 мл. Воронки химические разные. Пипетки разные. Фильтры бумажные. Вата обезжиренная.

Подготовка к определению. Ус тановление линейного динамического диапазона. Готовят раствор стомпа в бензоле (0,005 мг/мл). В 10 колб вместимостью по 50 мл вносят пипеткой 1-10 мл раствора стомпа в бензоле, доводят до метки бензолом, перемешивают и по 4 мкл полученных растворов поочередно вводят в хроматограф. До хроматографирования растворы необходимо хранить в защищенном от света месте, так как препарат разлагается под действием УФ-лучей.

Приготовление силикагеля для колоночной хроматографии. Силикагель марки Л (0,1/0.2 мм) перед употреблением высушивают в течение 4 ч при температуре 140 °С и переносят в склянку с притертой пробкой. К остывшему силикагелю осторожно при перемешивании приливают небольшими порциями дистиллированную воду из расчета 20 мл на 80 г силикагеля, тщательно перемешивают встряхиванием до исчезновения комочков и оставляют на 24 ч для равномерного распределения воды. Проверяют активность каждой вновь приготовленной порции силикагеля.

Ход анализа. Навеску измельченного табака (10-20 г) помещают в стакан гомогенизатора и заливают солянокислым этанолом (соотношение экстрагирующей смеси и образца по массе 20:1). Гомогенизируют 4 мин при 5000 об/мин или встряхивают на механическом встряхиватслс в течение 2 ч. Фильтруют экстракт под вакуумом, дважды промывают остаток на фильтре солянокислым этанолом порциями по 15 мл и переносят в делительную воронку. Добавляют к экстракту 100 мл 1 н. раствора хлороводородной кислоты, 50 мл гексана и экстрагируют в течение 1 мин. Отделяют гексановый слой и повторяют экстракцию гексаном трижды порциями по 20 мл. Объединенные гексановые экстракты фильтруют через слой безводного сульфата натрия в кругло-донную колбу и упаривают досуха на ротационном вакуумном испарителе.

В хроматографическую колонку вносят 14 г активированного силикагеля в гексане, уплотняют сорбент, вносят слой безводного сульфа-

203

та натрия высотой 1-1,5 см и промывают колонку 30 мл гексана. Скорость прохождения растворителя через колонку - 2 капли в секунду. Сухой остаток в колбе растворяют в 10 мл смеси гексана с бензолом и вносят в колонку. Колбу промывают смесью гексана с бензолом трижды порциями по 5 мл и каждый новый объем вносят в колонку после того, как мениск предыдущего достигнет поверхности силикагеля. Промывают колонку 50 мл гексана, установив скорость прохождения растворителя через колонку 3-4 капли в секунду. Собранный элюат отбрасывают. Стомп элюируют из колонки 130 мл смеси гексана с бензолом. Первые 30 мл элюата отбрасывают, а последующие 100 мл собирают, упаривают досуха на ротационном вакуум-испарителе при температуре водяной бани 40 °С, растворяют осадок в 2-5 мл бензола и аликвоты по 4-6 мкл вводят в хроматограф.

Условия хроматографирования. Газовый хроматограф «Цвет-105» с ДПР. Колонка стеклянная длиной 1 м с внутренним диаметром 3 мм. Твердый носитель газ-хром Q (0,1-0,012 мм). Неподвижная фаза 5% ECSS-X. Температура (°С): детектора - 230, колонки - 190, испарителя - 250. Рабочая шкала электрометра 20 • 10"¹² А. Скорость потока газа-носителя (азота) 32 мл/мин; продувочного газа (азота) - 94 мл/мин. Время удерживания стомпа при названных условиях 3,2 мин. В испаритель вводят 4 мкл рабочего раствора в бензоле.

Обработка результатов анализа. Количественное определение проводят путем сравнения высоты пиков стандартного и исследуемого растворов. Содержание остаточных количеств стомпа в анализируемой пробе вычисляют как среднее из трех параллельных определений.

Содержание пестицида в анализируемой пробе (X, мг/кг) рассчитывают по формуле

lOOCtfxV^Vo H„V_XP( 100 - W)

где С - концентрация стандартного раствора пестицида, мкг/мл; Н_х и Н„ - высота хроматографического пика соответственно исследуемого и стандартного растворов, мм; У_х - объем пробы исследуемого раствора, введенный в хроматограф, мкл; У„ - объем пробы стандартного раствора, введенный в хроматограф, мкл; У₀ - общий объем исследуемого раствора, мл; Г - навеска образца, кг; W - влажность анализируемой пробы, %.

Требования безопасности. Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями и токсичными веществами.

204

1

Разработаны Т.А. Персжогиной (ВИТИМ).