ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬБЫ С ВРЕДИТЕЛЯМИ, БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИИ И СОРНЯКАМИ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Часть 17-я

Данные методики апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками

Москва

ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬШ С ЬРЬЦЦ1ТШШ_>Б0ДЕ31Ш1 РАСТЕНИЙ И СОРНЯКАМИ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИИ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ ДОГМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Чаотъ 17-я

Данные методики апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомнссии по химическим средствам борьбы с вредителями,боле8нями растений и сорняками

Москва -

- I 34 -

20мл).Иа содового раствора посла его подкисления до pH 4+5 эко-трагируют БПК диэтиловым эфиром (2 раза по Юил).8фир1ы1 вко-тракт сушат над серноквслым натрием и выпаривает досуха.Пробу метилируют диазометаыом,выпаривают досуха и растворяют в 2мл гексана (экстракт №2).Экстракт №1 анализируют на содорхавио кара-хода,экстракт №2 - метилового эфира БПК.

Экстракты tel и te2 хроматографируют при следующих условиях: -рабочая шкала электрометра 10»10”*°а;

-рабочая шкала потенциометра 1мв;

-скорость протяжки картограммы 200мм/ч;

-колонка стеклянная размером 150^3см,заполненная хроматовом /V-AW-OMCS (Фр.0,20-0,25мм) с    силоксаыа ХЕ-60;

-температура термостата (°С)колонки 223,испарителя 250,детектора 250;

-расход газа-носителя (мл/мин) черев колонку 85,через продувочную камеру детектора 140;

-объём пробы«вводимый в испаритель,2-Змкл;

-линейность детектирования от 0,2 до 4 иг;

-абсолютное время удерживания карахола Пмин 20сек,метилового эфира БПК Пмии:

Хроматографирование каждого экстракта проводят трижды,измеряют высоты пиков,вычисляют среднее значение высоты и по кали-оровочянм графикам находят количество карахола ■ БПК в аликвоте экстракта.

2.7. Обработка результатов анализа.

Содержание карахола и БПК в пробе (X) в мг/кг вычисляют по формуле:

100 • А • Vk

- 135 -

где: к - количество карахола (или БПК),найденное в аликвоте экстракта по калибровочному графику,иг;

У₁ - объём аликвоты, вводимой в прибор, мкл;

YJ- общий объём экстракта, мд;

Р - навеска анализируемой пробы, г;

Я - среднее значение определения стандартных количеств, найденное предварительно,$•

8. Требования безопасности.

Соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях.

4. Разработчики.

Пнленкова И.И..Фатьянова А.Д.

Всесоюзный научно-исследовательский технологический институт гербицидов и регуляторов роста растений (ВНИТИГ),г.Уфа.

Хлорорганнческие пестициды

7.    Временные методические указания по определению блазера в воде, почве, сое и зеленых листьях методом хроматографии в тонкой слое

27 ноября 1984 Г* №3156-84

8.    Временные методические указания по определению

дилора в меде методом тонкослойной хроматографа    22    мая 1985 г. №3884-85

9.    Временные методические указания по хроматографическому определению Щ в воде

22 мая 1985 г. №3876-85

10.    Временные методические указания по определению

модауна в воде и почве газохидкостной хроматографией    21    ноября 1985 Г. №4030-85

11.    Методические указания по определению тиолана и продуктов его превращения в воде хроматографическими методами _{а ноября 1Э6}5 г. №4035-85

12.    Временные методические указания по определению триалдата методом газожидкостной хроматографии в воде, почве и зерне пшеницы

21 ноября 1985 г. №4032-85

13.    Временные методические указания по определению мэтодами ПОС н ТСХ аналога ювенильного гормона п-хлорфенилового вФвпа гераниола в Берне пшеницы, почве,воде в зеленых листьях

12 апреля 1985 г. №3254-85

14.    Временные методическиеиу указания по определению остаточных количеств фозилада в свекле методом газожидкостной хроматографии

22 мая 1965 г. £3675-85

15.    ременные методические указания по определению регулятора роста растений ЭБ£-5 в воде, растительном материале методом ТСХ

21 ноября 1985 г. £4031-65

16.    Методические указания по определению остаточных количеств хлорорганлческлх пестицидов и продуктов их разложения (./«-изомера ПИТ. V-изомера ГХИГ. гептахлора, альдрина. кельтана. ДДЭ. ЛЛД. ЛИТ)

в воде хроматографическими методами при совместном присутствия j _{1986 Гв} Ш20-86

Азотсодержащие пестициды

17.    Временные методические указания по определению ацетала в воде, почве, картофеле, верне и зеленой массе кукурузы и сои методами ГаХ и ТСХ

21 ноября 1985 г. £4029-85

18.    Методические указать по определению диФенамяда в в воде методом тонкослойной хроматографии

21 ноября 1985 г. £4033-85

19.    Методические указания по определению карахола и его метаболита бензоклпродкислоты в почве методом газожидкостной хроматографии

31 июля 1984 г. £3072-84

20. Временные методические указания по определению лентаграна в растительной продукции, почве и воде ТСХ

12.04.85 г. №3253-85

21.    Методические указания по определению монуро-на и дкуроиа в чае методом газожидкостной хроматография ₃ 1Шваря Is85 г> >Ш87-85

22.    Временные методические укаэания по определению набу в воде, почве, капусте, сое и зеленых листьях методом хроматографа в тонком слое _{22 мая 19й5 г>} *3860-85

23.    Временные методические указания по определению раукдапа в воде методом ТСХ (дополнение к №2434-81)

21 ноября 1985 Г. №4034-85

24.    Временные методические указания по определению сонаяена в воде, почве и зеленой массе сои хроматографическими методами

3 января 1985 г. №3200-85

25.    Временные методические укаэания по определению соналена в маслах подсолнечника, репса

и клещевины ISX 22 мая 1985 Г. №3894-85

26. Временные методические указания по определению стомпа методом ПК в табаке

12 апреля 1985 Г. №3252-85

27. Методические укаэания по определению тклта в растениях,почве, воде методом гозоаидкост-

Настоящие методпческие указания предназначены для санитарно-эпидемиологических с таили Я и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Агропрома . СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве гфшиальнкх Группой экспертов при Госкомиссяи по химическим ерсдствам борьбы с вредителей,болезнями растений и сорняками Гпоагропрома СССР

Методические указания согласовали и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИОДяТО им.Марпиновского В.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.

РЩКШОНШ КОЛЛЕГИЯ

Л.Г.Александрова, Д.Б.Гйрешх, А.А.Калинина (за;4.председателя), Ц.А.Клисенко (председзтеть), Г.И.Короткова, М.В.Письменноя, Г.А.Хохолькога, В.Е.Кривейчук.

- тг7 -

"УТВЕРШЮ"

Заместитель Глазного Государственного санитарного врача СССР

А.И.Зайченко

« 31 и июля_1984г.

К* 3073-64

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ КАРАХОЛА А ЕГО МЕТАБОЛИТА БЕНЗО/ЛПРОПКИСЛОТУ 3 ПОЧВЕ KKT0_M0J

ГАЗОжКДКОСТКО.] XPOUATOrAvAB.

I.Краткая характеристика веществ.

Караход.

Химическое название: этиловый э*ир N-0еизоил-/^-(3,4-дихлорфенил)-3-аыинопропионовой кислоты.

Структурная формула:

Эмпирическая формула: Cjgl

Молекулярная масса 366,36

Синонимы: сурике,бензоиллропэтил

Физико-химические свойства: белые кристаллы с Т.плавенкн 70-71°С.Практически нерастворим в воде.Растворимость в органических растворителях(%масса/объём): в этаноле 10,метаноде 30, ацетоне 70,толуоле 15.

Препарат мало токовчан для теплокровных животных и человека. ЛД₅₀=1550мг/кг(для крыс).

УДУ карахола в продуктах питания 0,01мг/кг.

Выпускается в gopue 40%-ного концетрата эмульсии.Применяется в качестве гербицида против овсюга в посевах зерновых культур.

- T 2°

Бензоилпропкислота (БПК).

Химическое название: N -бензоил-/У-( 3,4- дихлорфенил) -2-аминолропионеввя кислота.

БПК- белое кристаллическое вещество.Хорошо растворные в этаноле,толуоле.дизтиловом эфире.Является естественный метаболитом карихола ь окружающей среде.

2.Кетсдика определения карахола и БПК*

2.1.Основные положения.

2.1.1. Принцип метода.

Метод основан на экстракции карахола и БПК иа почвы смесью воды и ацетона,очистке экстрактов и газохроматогра-фическом определения анализируемых веществ (БПК в виде метилового эфира) с использованием детектора по захвату электронов. Количественное определение проводят по методу абсолютной калибровки с помощью калибровочного графика*

2.1.2. Метрологическая характеристика метода.

Диапазон определяемых концентраций 0,01-0,20ыг/кг.

Предел обнаружения 0,С002шсг.

Предел обнаружения в почве 0,01мг/кг.

Среднее значение определения стандартна количеств карахола 90,8%,ЕПК-76,9%.

Число параллельных определений п 9*

Стандартное отклонение для карахола 9,7%, для БПК 4,4%.

Относительное стандартное отклонение для карахола 0,11, для БПК 0,06.

Доверительный интервал среднего при Р=0,95 и п-I составляет для карахола 90,8+7,5%,для БПК 76,9+8,7%.

- \'S

2.1.3.Избирательность метода.

Определение не мешают пестициды ряда феноксиалканкарбоыовьс. кислот (2, 4-Д, 2,4-ДП и др.).

2.2.Реактивы и материалы.

Карахол с содержанием основного вещества не менее 38,5£.

Б ЛК.

Юг карахола (д.в.) перемешивают с раствором едкого натра (12г) в воде (120мл) и метаноле (50мл) при 60°С в течение 3-х часов.Полученный раствор фильтруют,затем выпаривают,удаляя метанол и подкисляют.Образовавшийся осадок промывают водой и пе-рекрмсталлизови^ают из толуола.Тпл, 155-157°С.

Ацетон, чда, ТОТ 2603-79.

Гексан, ч, ТУ 6-09-8375-78.

Натрий сернокислый безводный, хч, ГОСТ 4166-76.

Фосфорно-молибденовая кислота, хч.ТУ 6-09-3540-73, 4С$-ный водный раствор.

Толуол, чда, ГОСТ 5789-78.

Эфир диэтиловый, *^ч» ГОСТ 6352-79

Кислота соляная, хч, ГОСТ 3118-77.

Калий гидроокись,ГОСТ 6-01-801-74.

Натр едкий, хч, ГОСТ 4328-77.

Натрий углекислый кислый, хч, ГОСТ 4201-79 , 3*>-ныЙ водный раствор.

Метиламин, 25$Ь-ный водный раствор, ТУ 6-09-2086-77.

Мочевина, ТУ 6691-77.

Азот особой чистоты газообразный, ГОСТ 9293-74,в баллоне о редуктором.

Хроматои /ММНС$(фР'0,2(М)₉251Ш) о 5$ силоксаиж Xfc!-«>G, пр-во ЧССР.

Нитрозометилыочевина.

Получение нитрозометилыочевины.

Схема реакции:

cu_hNu₂ -на + н₂мсощ — сН}Мтн₂ * ща

сн^л/исощ + НЩ -CU₅n(no)CONH₂ * и_г0

Во взвешенную литровую кслбу наливают 200г 24>г-ного водного раствора метиламина (примечание I) и добавляют при охлаждении коыц. соляную кислоту до кислой реакции на метилрот,на что требуется 155мл кислоты.Затем доливают столько воды,чтобы обишй вес достиг 500г и прибавляют ЗООг мочевины,после чего раствор осторожно кипятят с обратным холодильником 2 часа 45 минут и энергично 15 минут.

Раствор охлаждают до комнатной температуры,растворяют в нём ПОг 95%-ного азотистокислого натрия и охлаждают до 0°С.

В трёхлитровом стакане готовят смесь бООг льда и ЮОг конц.сер-ной кислоты,охлаждая стакан льдом и солью.К этому раствору прн перемешивании приливают холодный раствор метилиочевины и нитрита с такой скоростью,чтобы температура не поднималась выше 0°С.

Нитрозометилмочевина всплывает на поверхность в виде кристаллического пенистого осадка.который немедленно отфильтровывают через вороику Бюхнера,хорошо отжимают.Кристаллы размешивают до образования пасты с 50мл холодной воды,отсасывают,отжимают и сушат в вакуум-эксикаторе до постоянного веса.

Выход 105-ПЬг 66-72% от теоретического (примечание 2).

Примечания:1.Метиламин применяется либо в виде водного раствора, либо в виде хлор тидрата.

2. Полученный таким образом продукт можно хранить в холодильнике длительное время.

3. Ирк температуре выше 20°С его не следует хранить более I час).При температуре 30°С он мо-

- 131

жет неожиданно разложиться без взрыва,но с выделением паров»

Диазометан.

Получение диазометана.

Схема реакции:

о%н(м)шн_г *КОН—-Ц/У_г + КСНО +1Н_}0

В круглодонную колбу на 100мл помещают Змл 5Q£-Horo водного раствора едкого кали и 1Смл диэтнлового э^ира.Смесь охлаждают до 5°С,после чего при взбалтывании прибавляют 1г нитрозоме-тилмочевины.

Колбу присоединяют к холодильнику,нижний конец которого снабжён отводом,проходящим черев резиновую пробку и погружённым в слой эфира на дне приёмника.Приёмник охлаждают смесью льда и соли.

Реакционную колбу погружают в водяную баню,нагретую до 50°С.Эфир в колбе доводят до кипения.Время от времени содержимое колбы перемешивают.

Отгонку прекращают,как только дистиллят станет бесцветным.

Нм в коем случае не следует отгонять весь эфир!

Метилирование проб.

К сухому остатку приливают небольшими порциями раствор диазометана в диэтиловом эфире до прекращения обесцвечивания. Затем взбалтывают и выпаривают на воздухе досуха.

2.3. Приборы,аппаратура и посуда.

Хроматограф серии "Цвет" с детектором постоянной скорости рекомбинации или любой аналогичный прибор с элек?роноэахват-ным детектором.

Колонка стеклянная длиной 1,5м н внутренним диаметром Змм.

- 132 -

Испаритель ротационный ИР-IM, ТУ 25-11-917-74.

Колбы мерные, цилиндры, мензурки ГОСТ 1770-74.

Колбь грушевидные для отгонки растворителя ёмкостью 100мл.

Стаканы химические ёмкостью 250мл ГоСТ 10594-72.

КолОы Зрленмейера со шлифом ёмкостью гЬОмл ГОСТ 10Ъ94-72.

Пипетки различной ёмкости ГОСТ 20292-74.

Пробирки градуированные со шлифом ГОСТ 10515-75 ёмкостью 5мл.

Воронка Бюхнера* ГОСТ ^147-81.

Воронки конусообразные d 56 ГОСТ 8613-75.

Воронки делительные ёмкостью 500-1000мл.

Колбы для фильтрования под вакуумом ГОСТ 6514-75.

Насос вакуумный* ГОСТ 106%-75.

2.4. Подготовка к определению.

2.4.1. Приготовление стандартных я калибровочных растворов и построение калибровочного графика.

Стандартный раствор карахола с концентрацией 0,2мг/мл готовят расшорением навески 0,0100г в 50мл толуола.

Стандартный раствор БПК с концентрацией 0,2мг/мл готовят растворением навески 0,0100г в 50мл толуола.

Срок хранения растворов в холодильнике I месяц.

При построении калибровочного графика для определения карахола готовит 10 искусственных смесей: в пробирки с притёртыми пробками помечают 1;2;3;4;5;Ю;20;В0;40мкл стандартного раствора карахола и доводят объём раствора в каждой пробирке до 2мл. Хроматографируют по 2мкл полученных растворов. Измеряют высоты пиков,соот-ветсвующих карахолу,и строят графики зависимости высоты в мм от количества карахола в иг.

При построении калибровочного графика для определения БПК готовят 1C искугтвеиных смесей: в пробирки с притёртыми пробками исиевцшт по 1;2;3;4;5;10;15;2С;ЗС;41мкл стандартного растрорз ГПК,метилируют БПК дизэоиетаном,прилизан его Эчирный раствор

- 133 -

до прекращения исчезновении жёлтой окраски,знтем испаряют досуха содержимое пробирок и растворяют сухой остаток в каждой из пробирок в 2мл толуола.Хроматографируют по 2мкл полученных растворов. Измеряют высоты пиков,соответствующих метиловому эфиру БПК,и строят график зависимости высоты в мм от количества БЛК в иг.

2.4.2. Приготовление насадки и кондиционирование колонки.

Взвешивают на технических весах силоксаи ХЕ-60 в количестве 5/Ь от веса хроматона    .растворяют    в    хлороформе,всыпа

ют в раствор хроматоы и тщательно перемешивают в течение 15-20 мин.Затем выпаривают на водяной бане растворитель и насадку подсушивают в сушильном шкафу при Ю0°С в течение 2-х часов.Насадку засыпают в колонку,уплотняют,устанавливают колонку в термостат хри матогра(*,а и стабилизируют в токе азота особой чистоты при температуре 250°6 в течение 8-10 час ,не подключая к детектору.

2.5.    Отбор пробы.

Отбор пробы проводится в соответствии с "Правилами отбора проб для анализа пестицидов".

2.6.    Проведение определения.

10-20г почвы заливают ЗЬыл ацетона и 15мл воды и встряхивают в течение часа.Затем почву отфильтровывают на воронке Бюхнера. Осадок промывают 5-10мл смеси ацетона с водой (7:8) и смыв присоединяют к _чильтрату.Из фильтрата отгоняют ацетон с помощью ротационного испарителя,остаток разбавляют водой до объёма 30мл.Водный раствор переносят в делительную воронку и встряхивают с гексаном 3 раза (по Юмл) для экстракции карахола.Гексан собирают, промывают водой,сушат над безводным сернокислым натрием и выиа-равают до объёма 2мл (экстракт ¥?1).Оставшуюся водную часть подкисляют 2мл соляной кислоты и для извлечения БИК встряхивают 3 раза а диэтилоьым эфиром (25,20,Юмл) .Мирные вытяжки собвря/.т и встряхивают триидм о 3%-ным раствором гидрокарбоната натри#- (по