ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬБЫ С ВРЕДИТЕЛЯМИ БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИИ И СОРНЯКАМИ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

по определению микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде

Данные методики апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии, болезнями растений и сорняками

Г0СУЛАРСТНЕШШ1 КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬШ С ВРЕДИТЕЛЯМИ БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ И СОРНЯКАМИ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИИ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ „ КОЖАХ И ВЫШНЕЙ СРЕДЕ

Данные методшш апробированы в рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при 1Ъскомяссиы„болезнями растений и сорняками

Москва- 1987 г,

47.

чаю? на аппарат для встряхявания не I чао. Затем растворитель отфильтровывают под вакуумом на воронке через бумажный фильтр и почву в колбе и на фильтре трижды промывает ааетоном (3 i 2D мл).

Ватем ацетон удаляют на ротационном испарителе в грушевидной колбе и на 250 мл, водный остаток из колбы лереаосят IOC мл дистиллированной воды, подкисленной до pR^I хлористоводородной кислотой, ъ делительную воронку, проводят экстракцию диэтидовнм эфиром и далее поступает так, как это описано при определении в воде.

Влваная почва: 100-300 г влажно! почвы, помещает в коническую колбу с притертой пробкой на 500 мл, приливает 5-10 ил концентрированной хлористоводородной кнодоти, тщательно перемешивает, помещает на аппарат для встряхивания, приливает 150-300 мл ацетона л далее поступает, как это описано выае.

2.5.2. Идентификация а количественное определение хлорфенокси-елгшнкарбоновых кислот.

2.5.2.1. Тонкослойная хроматография

Сухой остаток после уп8рнвояяя эфирного экстракта растворяют в I мл виетона, количественно наносят не хроматографическую пластинку "Силуфол" и развивают хроматограмму в системе растворителей хдорофоры-уксуспая кислота (19:1). Для хроматографирования использует ааенвеяяую камеру. Для насыщения стенки камеры обкладывает фильтровальной бумагой, которая касается смеси растворителей и пропитывается. Через 2 часе быстро открывает крышку камеры и помечав* плвстинку для развития хроматограммы. После окончания процесса хроматографирования плестипку извлекает из кроматографической камеры, суват на воздухе в вытяжном шкафу н затем помещает в сугмльныз нкзф на Э минуты при 1Ю°С, после чего повярачи-вахт пластяяку на 90°. _и развивают хремато трампу в другом направлении в системе растворителей бензол-н-гексан-уксусная кислота

48

(5:10*2), Поояе окончания процесса хроыатографпровапля одаотпику иввлекаю? се хроматографической камеры, супа? на воздухе в вцтяв-ном пкафу а обрабатывают проявляющим реактивом «'Я. 8а?ем пластинку облучаю? УО~светом в течении IO-I5 мпнут.Хлорфенокопалкаппарбоновые кислоты за пластинке обнаруживаются в вндо серо-черных оптен но белой фоне о Величины приведены в таблице 3.

В качестве второго проявляющего реактива ыопе? быть использован бромкрезоловыа зеленый. После развития хроматограйны во второй системе подв^ных растворителей пластинку извлекают вз хроматографической камеры* суша? на воздухе в вытянном шкафу а помещают в оушпльныО шкаф при НО°С во 20 w у? для удаления оледов уксусной кислоты. Затем пластинку обрабатывают проявляющая ревптпвоы #2. Хлорфенокоиалканкарбоновио кислоты обнаруияваюгея в виде иелтых пятен на голубом фоне.

Стандартные соединения С по 5 мкг ноидого) наносят на ту ае пластинку, что и пробу или не отдельную пластинку, которую помещаю? для развитая хроматограммы в камеру вместе с пластинкой, но которую нанесена проба.

2.5.2,2. Газопядкостная хроматография

К сухому остатку пошла упаривания эфирного экстракта прибавляют I мл 23^-ного раствора 2,2,2-трихлорэтааолз в трифторуЕсусное ангидриде, 5 мел концентрпрованаоО серной кпелоты, энергично встряхивают и помещаю? на кипящую водяную баню о обратным холодильником ее 15 минут. Затем удаляют растворитель током сухого воздухе до^ОД мл, пробавляю? 2 мл nso-октане, энергично встряхивают, прибавляю? 6 мл 0,5 И водного раствора ГОН о содеравмое ". вновь енергачпо вотряхиваю? в точеаии 2-х минут. Пооле расслоения Qas вводят в хроматограф 2-3 мал иво-октаново го слоя. Уолэвпп яроштографароюпоя (хроматограф Цвэт-106 о дотектором оо эаяве-

49

ту электронов поотоянноП скорости рекомбинации): стеклянная опи-рольная колонка (длине I и, внутренняя диаметр 3 мм) заполненная ЗЯ iЕ-30 па Хроматоие К, 0,16-0,20 мм, промытым кислотой н: - силе апэированным ДМХС, скорость газа-соопталя (азот особой чяототы) через колопау 50 мд/мян, окорость продувочного газа (азот особой частоты) через детектор 150 ил/мин, температура термостата колонок аО°С, температура нопарптеля 230^сС, температуре термостата детектора 2ЭО°С, шшло электрометра 20 .    скорость    дви-

певля дяяграимноЗ ленты потенцпе&зстра 2*i0 мм/час.

Ллх посксення подопаостн Едеят&£икацнп хроматографирование иопет быть проведено на соловке, заполненной J& ОК-17 на Хромосор-бо УГ , Параметры уаерппвапля п степени разделения трсхдорэтиловых зфзров Елорфенокспалкепсарбоповых кислот приведены в таблице 4. Близость параметров удорнлванвя трихлоратадовых эфиров 2М-4Х я 2,4-ДП не позволяет провестп раздельное опрсделеяпе этах соедпне-япО прп ах совместном присутствии в енвдпзпруемоЭ пробе.

Количественное определение хлорфенокспалдонпарбоновых кислот? проводптся методом абсолютной калибровки. Для построения калибровочного графа ка 2 мот соответствуюзей кислоты подвергай? этерпфн-ксшзс ток, кап ото оппсако выае. Сухой остаток растворяет в 5 ал оцстоиа п вводят в хроматограф различные количества этого раствора. Нс оез ординат откладываю? высоту ппгга соответствующего офяра, а на осп збсопсс со .та честно песлоть, введенное в хроматограф. Яра использовании такого графасе потере на стадии этерзфи-кацао по сказываются па полученных результатах п для внполвенпл определения не нупяо респодогать стандартами тряхлорэтндоввх эфиров кислот.

Табдппа I

Нотрэлогочеоиаи йораотеряотзгь nevoiui опреаеаевия х*ор£сяопосншвБ1шрбовоЫ1£ шыо? о погэпья гвуиьрвоО voHiaxyioflBoa xpoiiavorpe^nn JLaanason оорааоаяоа?: доваеетраопС О.СЫ.ОС мг/д пас иг/вг

Лоалеир7£^оя проба Прздвл обверуиеепя иг/s имя мг/пг Чволо оараллехьЕых onpoaoscaufl Размах варьсроваяия Й Среднее звечсяис спрсдзлеаая,& Волш 0„05 б 85-95® 50 83-95Й SO 70-60® 75 . J-85r 78 85-95* SO 75-85е 80 Почез ОсЗ 6 75-85* 80 80-90° 85 60-70® 65 70-80г 75 75<85* 80 _ 65^5е 70

о « г,<^50 б - 2,0-ЯП, в - 2,9-ДО, г - £5-08, Л - Й-АХЛ» о - &4Ю

62 о

Тобдшю 3

Шслота
2,0-Д	0,68	0,31
24-42	0,70	0оЭ8
2,0-ЦП	0,73	0,02
23-4Ш1	0,7*)	0,43
г,*-да	0,76	0,4?
23 «ОШ	0,76	0051

Настоящее методичеокпе указания предиаэвачеиы для оанзтар-но- ei?пдемяологическая станций п научко-сдтдедовагедьоаак учреа-девпй Минздрава ОССР_с а такие ветеринарныя₀огрохомпчеокп2₀иоа-тродьно-токсцкодоглчеокия дзбораяорпИ Гооогропрона СССР а лабораторий другая Министерств п ведомств₀зашшавдякол определением оояаточпых подачеств пестицидов и биопрепаратов о продуктов питания,, порток а виеипеП 0реде_о

Срои деЙотвпя временник методичбошн указаний уотоиш~ дпваетбя до утверпдеаия гнгпеничеокик нормашвов.

Методичеокае указания есробпровонн п рекомгвдог>оцы в качестве официальных ГруппоП экспертов при Госкомпссаи «о ишп-чеокпы сргдотааа борьбы о вредителям „болезнями раотопиО в оор-аяяшп.

Методические указания согдасовосн с одобреиы Лобо разорены оовотои при Гдеовом еапитарко-спсдемиологочеоиои увровдепап Минздрава ССС?_с

РШК1Ш0ННЛЯ КОЛЛЕГИЯ

Л.Г.Дяексацдрово₀ JLB_ornpenKO„ ЛЖКедиппне ( эам.иредоедотвая), Мвй.Кдисэпго ( председатель) о Г. во Коротко во ₀ В.ВоК^ао0ачуа_о Г_вЛ«ХоКольцова рА.МсВьсгадвсое

УТВЕРЖДАЮ

Заместитель Главного Государственного санитарного врача СССР

Л.И.ЗАИЧЕНКО

^w 27 "_04_ 1984    г.

S3025-84

МЕТСЩИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ 2,4-ДИХЛ0РФЕН0КСИУКСУСН0Й (2,4-Д),2-(2,4-ДЙХДОР-•КНОКСИ)ПРОПИОНОВОЙ (2,4-ДП), 4-(2,4-ДШ0РФШЮКСИ)МАСЛЯН0й (2,4-ДМ), 4-ХД0Р-2-МНГШФЕН0КСИУНСУСН0Й (24-4Х),

2-(2-МЕТИЛ-4-ХДОРвЕНОКСИ)пропионовой (ai-ш) и 4- (2-ШЛМЛ-4-ХЯ0РФЕН0КСИ)МАСЛЯНОЙ КИСЛОТ В ВЩШ И ПОЧВЕ ДРСШТОГРАвШЕСКИЫИ МЕТОДАМИ ПРИ СОШЕСТНСМ ПРИСУТСТШИ

I. Краткая характеристика препаратов

2,4-дв*лорф8йоисяуксусная кпслота (2,4 Д) - белое кристаллическое вещество, стабильное при хранения. Т.ол, 141°С, Т.кяп.

160°С/53,3 па. Константа дпссодиашзп 2,3,10"^: Стабильна про

хранении в растворах различных органических растворителей. При 20°С в I л воды растворяется 540 иг нсслоты, 24,3 г кислоты в 100 ьья дивтакового эфяра, 130 г кислоты в 100 нн столового с парта хорошо растворяется в ацетоне, четареххдорпстаи углероде п бензоле. Применяется для борьбы с двудольными сорнякамд в посевах зерновых культур в виде содеО (натриевая, аминная) в эфиров (бутиловый, октиловый, просшловыЯ, ыалехдетучпе эфиры Cg~CgK Препа-

соли н эфиры 2,4-ди стабильны прп храненпп, В растениях а окруса-ощеП среде 2,4-ЯМ разлагается до 2,4-Д п 2,4-дцхлор}>епол8. Применяется как селективный гербицид в посевах люцерны п зерновых культур; препарат малотокспчен для крыс ДД^ 2 г/кг. ЩЩ в воде 0,01 ыг/л,

рсн^зоон

jj^-СНз    C9H9O3CI    иол.иесоо    2)0,6 2

СГ

4-хлор-2-метплфенокспуксусяая кислота (21-4Х, иетаксон, дпкотеко, UCPA, аграксоп) - белое кристаллаческое вещество, без запаха, о Т.пл. 110,0-1 Ю, «?С, стабильное прп храпенлп кап в кристаллическом состоянии, тап п в виде растворов. Константа дпосоппация 5,4Л0“\ Растворимость в воде прп комнатной температуре составляет BS ыг/л. Хорога) растворима в оргаипчеокпх растворителях (S°C)s в зтополе Х53 r/ICO г, в дпэтпло&оы афире 77 г/IOO г, в толуоле 6 г/100 г, в ксилоле 5 г/IOO г$ хорою растворима в четыреххлоростом углероде, дихлорэтане, бензоле, хлорбензоле, ацетоне. &1-4Х образует раотво-римые соли щелочных металлов п органических оснований, которые могут выпадать в осадок в пествоП воде. Технический продукт имеет эеиех хлорбензола. Применяется в качестве гербицида в посевах льпа, зерновых и злаковых культур чаще воего в виде натриевых содей (дикотекс 40, дикотекс 60 и дпкотеко 80), Препарат среднетоксачез длп грыс: ЛДз0 - 700 мг/кг

рсн(сн₃)соон

O'

bl

2-( 2-метпя-4-хлорфенсксп)-лроппояовая кпелота (22-А2П, иекэпров. UCPP) - бесцветное кристаллическое вещество, без запаха, с Т.пл. 94-95°С. Стабильна прп хранении. В 100 мл води прп ЗЭ°С растворяет-

43.

оя 0,062 г шз слоты. Хороао растворима в большинстве органичеоких растворителей (днотиловый эфир, ацетон и др.). Образует раствори-те соли со щелочными металлами и этано дайн нами. Растворимость натриевой соля в воде ирн 15°С 46$ (в/о), Каляевой соля - 79,5$

(в/о) про 0°С п диэтанодаиннной соля 58$ (в/о) при 2D°C. Технический продукт имеет слегка фенольный запах и Т.пд. 90°С. 31-4ХП стабильна при хранении, к нагреванию, восстановителям, гидролизу и атмосферному окислению. Корродирует металлы в присутствии влаги. Применяется на посевах зерновых культур в виде аминной и калиевой солей. Препарат сред нетоксичен для крыс и мышей: ЛД^ « 650 -680 иг/яг. ПДК в воде 2,0 мг/л.

Мол.масса 228,66

4-(2-метид-4-хдорфеко11Си)-маодян8я кислота (31-4ХМ, бексон, тропотокс) - белое кристаллическое вещество с Т.пл.100°-101°С. Растворимость в воде при 2Э°С 44 мг/л. Хороео растворима в органических растворителях: в этаноле растворимость составляет 15$ (в/о), в ацетоне больяо 33$ (в/о), хорошо растворима в диэтиловом эфире. Образует водно-растворимые соля со щелочными металлами, которые в песткой воде выпадают в ооадок. Применяется для борьбы с сорнч-каш в посевах бобовых, элаковых и других культур в виде натриевой содн» Препарат ореднетоксичея для крыс в ьшией: ЛД₅0» 650-700 ыг/пг.

2. Методам определения 2,4-Д, 2,4-ДД, 2,4-ДМ, 31-4X,

31-4ХП в 2М-4ХМ в воде я почве хроматогррфнческяин ыетодаья

2Д. Основные подоаешзя

2.1.1. Прпнпнп метода. Метод основан ва экстракции хлорф.еноксп-

44

алкан карбоновых кподот пз воды п вочвы оргапнчеошш ростБорпте-лса с последукцпа определением методом газокидкоотвоС п двумерно О товкоелоОноD хроматографии.

2.Х.2. Метрологическая караптераотппа иетодо приведено в табллпах X п 2 2.2* Реактивы и раствора Асот газообрезиый особой частоты, ГОСТ 9293-74 Аммиак, водный, чда, ГОСТ 7160-79 Нитрат серебра, чда, ГОСТ 1277-81 Ацетон, хч, ГОСТ 2503-79 Бензол, хч, ГОСТ 5955-75

Гидрокарбона? патрило яде, ГОСТ 0201-79, 0,4 I! водный роотсор Броызреэоловый зеленый, чда, ТУ 6-09-1415-7О п-Гепсан, хч«, ТУ &-09-3575-78

Гидро^кспд натрия, яч., ГОСТ 4328-77, 0,1 U водсый рзотсор Эфир для наркозе (перегнанный). Оормопопея СССР Гпдрс^кспд полая, яч.₀ ГОСТ 9285-78, 0,5 М водный раствор Этиловый сперт , ТУ 6-09-7710-72 Серная кислота, хч., ГОСТ 4204-77 Хлористоводородная впелота, ч., ГОСТ 3118-67

ТрифторупсуспыО енгодрпд, ч., ИРГУ 6-09-38Г76-69

2,2,2-?рахдор»танод, ч«, ТУ 13П-ПО-69₀ 203-ииО раствор и ?ри-

ф?0руВСУCНОМ СЕГЕДРЦД©

Иэо-октап, отадоавнй, ГОСТ 5394-70

Уксусная ппелото, ледяная, нч., ГОС? 18290-72 Хлороформ, хч., ТУ 6-09-4253-76

Хрометоп W, 0,16-0,20 см, прожатый гасло то Q п сплеоазпроБоппый ДЫХС с 5# $Е-30 (ЧССР)

45.

Xpowocopd'W" , 80/100 ueo, промытый кислотой и оиланазированкыЗ ЛМХС с J% 0Y -17

Пластинки для тонкослойной хроматографии типа "Силуфол" (ЧССР),

13 х 15 см

Проявляющий реактив £1: в мерную колбу на ТОО мл помещают 0,3 г натрете серебро, 5 мл дистиллированной воды. 7 мл аммиака а доводят до метки ацетоном; при хранении в плотно закрытоа склянке беа доступа свете годен для применения в течении моояца.

Проявляющий реактив #2: в мерную полбу на 100 ал помещают 0,0*» г бром лизолового зеленого, растворяют в 9бЯ-ном этаноле, добавляют 0,1 М раствор гидроксида натрия до явно выравенЕого опоего окрас#! . кнвання н доводят до метая этанолом. Срок примеяешяя не органичен. Стандартные раствора хдорфеоонси&нкангшрбоновых ндолот в ацетоне с концентрацией ХОО мкг/ыл.

2.3. Приборы и посуда Газовый хроматограф с детекторов по захвату электронов (Цвет-3, Цвет-106, Цвет-ПО и др.)

Делительная воровка на I л, ГОСТ 6613-75 Колба Бунзена ыа 500 мл, ГОСТ 6514-75 Воронке Бюхнзра, диаметр 13 см, ГОСТ 9147-73 Грушевидные колбы на 100 мд, ГОСТ 10394-7 2 РотоцвовныВ испаритель ЙР-IH, ТУ 25-11-917-74 Нсточпек У9-сьета, ВИС-1, ТУ-3-3-1304-75 Аппарвт для встряхивания, ТУ 64-I-I08I-73 Ыераые колбы иа 10 я 100 мл, ГОСТ 1770-74 Вакуумный водоструйный стенляяныо насос, ГОСТ 10696-75 Камера хроматографа чес к» я, ГОСТ 10565-63 Ылкрооапетка, ГОСТ 2)292-74

46

Сушильный акаф, ТУ 64-I44IX-76E

Пульверпзатор стеклянный для обработки пластинок, ГОСТ 1939Г-74 Конические полбы на 500 ил, ГОСТ Х0394-7 2 Стеклянный лабораторный холодильник, XGT, ГОСТ 9499-70 Электроплитка, ТУ 92-275-76

2.4, Отбор проб

Отбор проб проводится в соответствии с “Унифицированными провалами отбора проб сельскохозяйственной продукции, ппдозыз продуктов ц объектов окрунасщеО среды для определения млпроколичеств пестицидов", утверпденных Банеотателем Гдавпого государственного санитарного врача СССР 21,08,79    2J3D5I-79

2,5» Проведение определения

2,5.1, Экстракция орепаратов аз анализируемых проб а очистка акстрактово

Вода» Пробу воды (0,3-0,75 л) помещают в делптельную вороаку подкисляют хлористоводородной кпсдотой до pH •*! (ивдпсстордая бумага) и экстрагируют тремя порциями диэтилового ефнра (100, 50 а 50 мл)о Объединенный эфирный экстракт перенося? в делительную воронку а экстрагируют 0,4 М водный раотвороы гидрокарбоната натрия (Э х 50 ил), Объедавенный гидродарбонатный экстракт пропивают двумя порциями е-гексаеа по Э ил, отбрасывая этот гексен, подгшо-ляют хлсрзотоводородной кислотой до pH I и трпада экстрагирую? дпэтилопыи эфиром (3 х 50 мл). Объединенный эфирный вкс^апт упаривают па ротационном испарителе до об&еиа 1-2 мл □ ьатеи дооуяа током сухого во ад у ха.

Почва. Сухая почва? £00 г почвы, растертой и просеянной через сито с размером отверстой X мм, помещают в коничеокую колбу с приолифованной пробкой ка 500 мл„ приливают 3-35 мл достпллп-рованпоО воды₀ добавляв» 5 мл Еодцоптраровавпой лдористонодородпоО кислоты, тоотельно переывсдвою?, приливаю? I5C мл аиетосс а помо-