МЕТОДЫ

ОПРЕДЕЛЕНИЯ

МИКРОКОЛИЧЕСТВ

ПЕСТИЦИДОВ

В ПРОДУКТАХ

ПИТАНИЯ,

КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Там 1

X “Г” МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МИКРОКОЛИЧЕСТВ § Ж а и ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ В ДВУХ ТОМАХ ТЪм 1 ф

МОСКВА. 1992 «КОЛОС»,

При разработке методических указаний по определению остаточных количеств пестицидов, применяемых на небольшом числе культур, среднее значение определения устанавливают для каждой культуры. Широкое применение пестицидов на различных культурах предполагает установление среднего значения определения для наиболее типичных объектов, которые выбирают в соответствии с преимущественным содержанием в них растительных восков и масел, животных жиров, гумуса, пигментов и других коокстрактивных веществ. В соответствии с этим методические указания практически могут быть использованы для анализа других объектов из субстратов указанного вида.

Утверждено 28.12.82 N? 2649-82

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МЕТАФОСА,

ФОСФАМИДА И ХЛОРОФОСА В СУШЕНЫХ ОВОЩАХ И ПЛОДАХ (КАРТОФЕЛЬ. МОРКОВЬ. ПЕТРУШКА. ЯБЛОКИ. ГРУШИ,

СЛИВА) МЕТОДАМИ ТОНКОСЛОЙНОЙ И ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ ^ф

Краткая характеристика препаратов приведена на с. 63. 64.

Принцип метода. Метод основан на экстракции препаратов из сушеных овощей и плодов органическим растворителем (этилацетат) или смесью растворителей (30%-ный раствор ацетона в н-гсксанс), очистке полученных экстрактов и последующем качественном и количественном определении методами хроматографии в тонких Слоях сорбентов и ГЖХ.

Метрологическая характеристика метода приведена в таблицах 38—40.

Реактивы и растворы. Спирт этиловый 96%-ный рсктиф. Ацетон х.ч. или чд.а., перегнанный. /«-Гексан х.ч. (дважды перегнанный, первая перегонка над активированным углем). Этилацетат. Гидроксид натрия. Нитрат серебра. Аммиак водный. Карбонат натрия кристаллический. Уксусная кислота ледяная. Цинковая пыль. Эфир диэтиловый. Спирт метиловый х.ч. Хлороформ х.ч. Диоксан члд. Бензол х.ч. Кислота хлороводородная х.ч., 0,1 н. раствор. Растворимый крахмал. Хромовая смесь (насыщенный раствор бихромата калия в концентрированной серной кислоте). Оксид алюминия для хроматографии.

Проявляющие реагенты. N? 1- 0,25%-ный раствор л-димстиламинобснзальдсгида в этаноле. Хранят в темной склянке, готовят перед опрыскиванием пластинок, смешивая раствор л-димстиламинобснзальдсгида с ледяной уксусной кислотой в соотношении 10 : Г, № 2-4 н. раствор гидроксида натрия; N? 3 - раствор хлорида палладия. 0,5 г хлорида палладия помещают в мерную колбу на 100 мл, прибавляют 40 мл 0,1 н. раствора хлороводородной кислоты, растворяют при нагревании (60-70 °С) на водяной бане. После полного растворения прибавляют дистиллированную воду до метки. Полученный раствор переносят в склянку с хорошо притертой пробкой. Хранят на холоде. Срок хранения - несколько месяцев; N? 4 - раствор резор-

• Разработаны О.И. Залуцкой, НА. Самошинским, С.С. Кедеш (ЛТЭИ).

731-9

3S. Метрологическая характеристика метола опрелеления метафоса и хлорофоса в сушеных плодах и овощах хроматографией в тонких слоях сорбентов (л - 5, р - 0,95)

Объект Предел определения, мг/кг Среднее значение определения, % Стандартное отклонение. % Доверительный интервал, % Яблоки 0,08 Метафос 81,2 ±8,11 ±8,27 Груши 0,10 87,2 ±10.3 ±10,6 Сливы 0.08 87,2 ±13,3 ±13,5 Картофель 0,05 86,8 ±7,14 ±7,74 Морковь 0,10 87,2 ±10.3 ±10,5 Петрушка 0.08 82,4 ±10,4 ±10,6 Яблоки 0.08 Хлорофос 68,0 ±8,0 ±8,15 Груши 0.08 88.0 ±9,24 ±9,41 Сливы 0.08 72,0 ±9,24 ±9.41 Картофель 0.05 76.8 ±6,86 ±6.99 Морковь 0.08 72,0 ±9,24 ±9.41 Петрушка 0,08 72,0 ±5,66 ±5,76

39. Метрологическая характеристика метола опрелеления фосфамида в сушеных плодах и овощах хроматографией в тонких слоях сорбентов (л - 5, р - 0.95)

Объект Предел определения, мг/кг Среднее значение определения, % Стандартное отклонение, % Довсритсл ь-ный интервал, % 1 2 1 2 1 2 Яблоки 0.1 82,7 75,2 ±10.1 ±4,79 ±10,3 ±4.8 Груши 0.08 83,4 71,5 ±11.1 ±4,39 ±11,3 ±4,48 Сливы 0,10 72,0 72,0 ±10.2 ±7,08 ±10,4 ±7.21 Картофель 0,08 88,0 76,8 ±10,2 ±5,78 ±10,2 ±5,88 Морковь 0,10 73.6 75,7 ±9.53 ±5,03 ±9,71 ±5,12 Петрушка 0,08 84,3 70.9 ±6.96 ±5,20 ±7,09 ±5,30

Примечание. 1- внесено 1/2 МДУ фосфамида; 2 - внесено количество фосфамида, соответствующее МДУ.

40. Метрологическая характеристика определения метафоса методом ГЖХ (л - 5-10, р - 0,95)

кристаллической смешивают в соотношении 2 : 3 (смесь готовят перед опрыскиванием пластинок).

Сульфат кальция чл.а., высушенный при 160 °С в течение 6 ч и просеянный через сито (100 мсш). Хранят в склянке с хорошо притертой пробкой. Сульфат натрия безводный чд.а.

Силикагель КСК (силикагель измельчают в шаровой мельнице, просеивают, отбирают фракцию с размером частиц 100 мсш, заливают хлороводородной кислотой в соотношении 1 : 1 и кипятят в колбе с обратным холодильником в течение 30 мин; процедуру повторяют несколько раз, меняя кислоту, до отрицательной реакции на ионы Fe²* и Fc³*).

Затем нейтрализуют кислоту 5%-ным раствором щелочи и промывают силикагель дистиллированной водой до отрицательной реакции на хлорид-ионы (проба с раствором нитрата серебра).

Для удаления содержащейся в силикагеле воды и части органических веществ его промывают диэтиловым эфиром в течение 6 ч при трех сливах. Затем для окончательного извлечения органических веществ силикагель промывают метанолом в течение 6 ч при трех сливах.

После этого силикагель помещают слоем 1 см на стекло и сушат в термостате при температуре 110 °С в течение 2 ч для стандартизации количества воды, содержащейся в адсорбенте. Очищенный таким образом силикагель хранят в склянке с хорошо притертой пробкой.

Стандартные растворы метафоса х.ч., фосфамида х.ч., хлорофоса х.ч. в н-гсксанс (100 мкг/мл).

Приборы и посуда. Аппарат для встряхивания. Вакуумный насос. Весы аналитические. Весы технические. Посуда мерная лабораторная стеклянная вместимостью: колбы мерные - 10; 25; 50; 100; 250 и 1000 мл; пикнометры (калиброванные) - 2; 5; 10 мл; пипетки - 1; 2; 5; 10; 20; 25 мл; микропипстки - 0,1; 0,2; 1 мл; цилиндры мерные - 2; 5; 10; 100; 250 мл. Прибор для отгонки растворителей (перегонная колба, дефлегматор, холодильник, алонж с отростком для подключения вакуума, колба-приемник — все на шлифах). Чашки фарфоровые выпарительные. Эксикаторы. Стаканы химические, колбы конические на 100; 250 и 500 мл. Медицинские шприцы различной вместимости. Бкжсы. Хроматографические камеры. Воронки стеклянные для фильтрования. Подставка из винил пласта дая сушки чистых стеклянных пластинок. Под-

131

ставка с металлическим каркасом и стеклянными полочками для сушки стеклянных пластинок с адсорбционным слоем в обезвоженной атмосфере. Пульверизаторы стеклянные. Пластинки для хроматографирования (зеркальные стеклянные размером 9 х 12 см). Перед нанесением адсорбента пластинки моют хромовой смесью, затем проточной водопроводной водой, потом дистиллированной водой, сушат, а перед нанесением адсорбента протирают этиловым спиртом. Хроматограф «Газохром-1106 Э*. снабженный ДЭЗ, или аналогичный. Микрошприцы на 1 и 10 мкл. Стеклянные хроматографические колонки длиной 1.6 м, спиральные с радиусом 9 см, заполненные сорбентом под давлением 1,013 х 10^s Па в токе азота. Электроплитка. Баня водяная.

Подготовка к определению. Приготовление хроматографических пластинок. Для приготовления сорбционной массы используют:

а)    силикагель с гипсом. Силикагель (14 г) и 1,5 г гипса тщательно перемешивают в фарфоровой ступке, прибавляют 40 мл дистиллированной воды, получившуюся суспензию наносят на 7-8 пластинок (по 6 мл суспензии на пластинку);

б)    силикагель с крахмалом, силикагель (40 г), 1 г растворимого крахмала. 125 мл дистиллированной воды. Крахмал заваривают в 15 мл дистиллированной воды, добавляют остальную воду и силикагель, хорошо перемешивают. Полученную суспензию наносят на 13-15 пластинок (по 10 г суспензии на каждую пластинку).

Для приготовления пластинок с цинковой пылью к суспензии прибавляют 1 г просеянной цинковой пыли;

в)    силикагель с оксидом алюминия. Силикагель (9 г) и 9 г оксида алюминия тщательно перемешивают в фарфоровой ступке, приливают при перемешивании 30 мл дистиллированной воды. Полученную суспензию наносят на 6-8 пластинок.

Адсорбционную массу наносят чайной ложкой и разравнивают по всей поверхности легким покачиванием пластинки (можно использовать аппликатор). Полученные таким образом пластинки сушат на воздухе в течение 16-18 ч, хранят в камере, содержащей хлорид кальция, на специальном штативе.

Ход анализа. Экстракция и очистка экстрактов. Пробы отбирают в соответствии с установленными правилами отбора проб для анализа пестицидов, для определения остаточных количеств ФОП в сушеных плодах - по ГОСТ 12001 - 66, а в сушеных овощах - по ГОСТ 13342 - 67.

Средний образец измельчают на механическом измельчителе до размера частиц 0,5-0,8 см, тщательно перемешивают и берут для анализа пять параллельных навесок по 25-30 г. Каждую навеску продукта заливают 30-40 мл (в зависимости от объекта - морковь, картофель, сливы, груши - 30 мл; яблоки, петрушка - 40 мл) 30%-ного раствора ацетона в «-гексане, встряхивают в течение 1 ч на аппарате для встряхивания и оставляют при комнатной температуре на 1 ч. После отстаивания и фильтрования экстракцию повторяют еще дважды.

Объединенные экстракты сушат безводным сульфатом натрия (1-2 г), фильтруют в перегонные колбы через фильтр «красная лента* и слой безводного сульфата натрия (1-2 г). В приборе для отгонки под вакуумом отгоняют растворитель до 0,5-1 мл и количественно пс-

132

реносят в центрифужные пробирки, центрифугируют 5-10 мин при 3000 об/мин. Отцентрифугированный раствор количественно переносят в пробирки вместимостью 3-5 мл, с помощью вентилятора растворитель удаляют досуха, сухой остаток растворяют в охлажденном ацетоне, вымораживают 1,5 ч в холодильнике, фильтруют, удаляют ацетон с помощью вентилятора. Сухой остаток растворяют в //-гексане и полученный таким образом экстракт используют для дальнейшего анализа (для экстрактов из сушеного картофеля вымораживание не требуется). Полученный экстракт хроматографируют.

Качественная    идентификация    мстафо-

са, фосфамида и    хлорофоса при    совмест

ном присутствии в сушеных овощах и плодах. Весь экстракт концентрируют до небольшого объема (0,5-0,2 мл) и наносят микропипеткой на хроматографическую пластинку (силикагель - крахмал или силикагель - оксид алюминия) так, чтобы диаметр пятна не превышал 0,8-1 см. На расстоянии 2 см от пятна исследуемого экстракта, а также один от другого наносят по 0,1 мл стандартных растворов метафоса, фосфамида и хлорофоса. После нанесения проб пластинку высушивают при комнатной температуре с помощью вентилятора. Затем ее вносят в камеру для хроматографирования, на дно которой налита смесь н-гсксан - ацетон (4 : 1). Пластинку устанавливают под углом 80-85° так, чтобы ее нижний край был погружен в растворитель на 0,5-0,7 см во избежание размывания пятен, нанесенных на пластинку. После того как фронт растворителя поднимется на 10 см выше линии старта, пластинку вынимают из камеры, оыс} кивают ь вытяжном шкафу, используя вентилятор (как после нанесения проб на пластинку, так и после хроматографирования ее каждый раз высушивают в вытяжном шкафу при комнатной температуре с помощью вентилятора), затем хроматографирование повторяют в системе н-гсксан - эфир (1:1), а потом в системе н-гсксан - ацетон (1 : 1). После удаления растворителей часть пластинки, где нанесены стандартные растворы метафоса и фосфамида, обрабатывают проявляющим реагентом N? 3. Примерно через 3 мин мстафос проявляется на хроматограмме в виде темно-коричневых пятен на белом фоне с R_f 0,87 ± 0,76, а фосфа-мид — в виде ярко-коричневых пятен на белом фоне с R_f 0,57 ± 0,51.

Часть пластинки, содержащую хлорофос, также обрабатывают реагентом N? 3, просушивают на воздухе и выдерживают 10 мин в сушильном шкафу при температуре 100 °С. Зоны локализации хлорофоса (как стандартного раствора, так и исследуемого экстракта) проявляются в виде оранжевых пятен (R_f 0,36 ± 0,32).

Идентификация и количественное определение метафоса методом хроматографии в тонких слоях сорбентов. Для хроматографирования проб картофеля, слив, груш экстракт концентрируют до объема 0,5-0,2 мл и количественно наносят на хроматографическую пластинку (силикагель - гипс - цинковая пыль) так, чтобы диаметр пятна нс превышал 0,8-1 см. На расстоянии 2 см от исследуемого экстракта и один от другого наносят стандартные растворы метафоса, содержащие соответственно 2; 5 н 8 мкг его (т.с. такие количества метафоса, в пределах которых он может находиться в исследуемом экстракте, нанесенном на пластинку). Высушенную пластинку хромато-

133

СОКРАЩЕНИЯ

ГЖХ - газожидкостная хроматография д.в. - действующее вещество

ДПР - детектор постоянной скорости рекомбинации

ДСД - допустимая суточная доза

ДЭЗ - детектор электронно-захватный

МДУ - максимально допустимый уровень

ОДК - ориентировочно допустимая концентрация

ПДК - предельно допустимая концентрация

ПИД - пламенно-ионизационный детектор

ПФД - пламенно-фотометрический детектор

СФ - спсктрофотомстричсский

ТИД - термо-ионный детектор

т.кип. - температура кипения

т.пл. - температура плавления

ТСХ - тонкослойная хроматография

ТСХЭ - хроматоэнзимная тонкослойная хроматография

УФ - ультрафиолетовый

ФОП - фосфорорганичсскис пестициды

ХОИ - хлорорганичсскис инсектициды

ХОП - хлорорганичсскис пестициды

х.ч. - химически чистый

ч. - чистый

ч.д.а. — чистый для анализа

ПРЕДИСЛОВИЕ

Экологические последствия использования пестицидов, их неблагоприятное влияние на здоровье населения хорошо известны. Одно из мероприятий, направленных на обеспечение безопасного применения этих веществ, - контроль за содержанием остаточных количеств препаратов в сельскохозяйственной продукции, продуктах питания, кормах, внешней среде. В соответствии с законодательными актами в нашей стране контроль за содержанием -сстицидов возложен на контрольно-токсикологические лаборатории станций защиты растений, отделы токсикологии проектно-изыскательских станций химизации сельского хозяйства, санитарно-эпидемиологические станции, лаборатории.

Систематически выпускаются справочные издания по методам определения микроколичеств пестицидов. В настоящем выпуске обобщены рекомендации отечественных специалистов по определению остаточных количеств пестицидов в различных средах, апробированные и одобренные группой экспертов и имеющие законодательный характер. Все методические указания утверждены органами санитарно-эпидемиологической службы. Перед названием каждой методики приведены дата утверждения и номер. В отличие от предыдущих выпусков (1977 и 1983 гг.) в книгу включены унифицированные методики определения отдельных групп препаратов, рекомендованных специалистами, сотрудничающих в области агропромышленного комплекса по проблеме «Гигиена и токсикология пестицидов, изучение возможных отрицательных последствий применения пестицидов и их профилактика*.

Методики предназначены для контроля за остаточными количествами пестицидов в экспортируемой продукции, но могут быть использованы также для контроля качества отечественной продукции. Методические указания сгруппированы по классам определяемых соединений, а внутри каждого подраздела для удобства пользования пестициды расположены по алфавиту. Такая форма изложения позволяет сделать обобщения по методам определения важнейших классов псстицидных препаратов. Методы определения биологических средств защиты растений выделены в специальный раздел во втором томе.

В сборник включены методики определения в продуктах питания, кормах, сельскохозяйственной продукции, воде, почве, воздухе, биологическом материале пестицидов различного химического строения в одной пробе, методики определения групп препаратов, близких по строению, методики определения в одной пробе смесей препаратов, используемых в интенсивных технологиях возделывания сельскохозяйственных культур, а также методики определения отдельных препаратов.

Методические указания включают краткую характеристику физикохимических свойств препарата, описание принципа метода определения, перечень необходимых реактивов и приборов, детальное изложение техники определения и способа расчета результатов анализа. Государственные стандарты на химические реактивы, аппаратуру и приборы периодически изменяются в связи с истечением срока годности, поэтому описание текущей нормативно-технической документации на реактивы и приборы вынесено в Приложение.

Предусмотрено, что при использовании всех методик пробы отбирают в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов», утвержденными 21.08.79 № 2051-79.

При определении остаточных количеств пестицидов необходимо руководствоваться Правилами устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) системы здравоохранения, № 2455-81 от 20.10.81.

В связи с важностью получения сопоставимых данных об остаточных количествах пестицидов для решения вопросов о возможности и путях реализации продукции растениеводства по назначению во втором томе приведены методические указания по контролю уровней и изучению динамики содержания пестицидов в почве и растениях, а также перечень утвержденных санитарно-гигиенических норм максимально допустимых уровней содержания пестицидов в пищевых продуктах (МДУ) и предельно допустимые концентрации пестицидов (ПДК) в почве и воде.

Книга предназначена для работников лабораторий, занимающихся контролем остаточных количеств пестицидов. Она полезна агрономам, врачам, биологам, химикам и другим специалистам, занятым защитой растений, охраной окружающей среды, профилактикой неблагоприятного воздействия пестицидов на население.

Утверждено 10.10.79

ЕДИНЫЕ ТРЕБОВАНИЯ К МЕТОДИКАМ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ И ОБЪЕКТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ {МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ)

Настоящие методические указания распространяются на методики определения содержания пестицидов в продуктах питания, воде, почве, кормах, биологическом материале, воздухе.

Указания устанавливают единые требования к построению, содержанию, изложению нормативных документов (аттестатов, технических условий, методических указаний) на методики определения содержания пестицидов в продуктах питания, кормах и объектах внешней среды.

требования к приборам, реактивам, к подготовке и проведению анализа, обработке результатов, метрологическому обеспечению.

Общие положения. Нормативные документы на методики определения содержания пестицидов в пищевых продуктах, кормах и объектах природной среды должны соответствовать современным требованиям нормативно-технической документации, принятым в нашей стране и международных организациях.

В документы нужно включать современные методы, проверенные в экспериментальных и производственных условиях, имеющие метрологическое обеспечение. Следует предусматривать использование приборов, прошедших государственные испытания, внесенных в Государственный реестр и выпускаемых серийно, а также приборов, требования к которым установлены в Государственных стандартах и нормативно-технической документации. Целесообразно предусматривать приборы с регистрацией показаний в форме, пригодной для статистической обработки, в том числе с выходом на вычислительные устройства.

В методики определения содержания пестицидов в пищевых продуктах, кормах и объектах окружающей среды необходимо включать аналогичные по точности дублирующие методики для повышения достоверности идентификации и для того, чтобы можно было использовать имеющиеся приборы.

В методики следует включать требования по обеспечению безопасности труда и производственной санитарии.

Срок действия временных нормативных документов устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.

Единые требования к методикам. Нормативный документ должен содержать вводную часть и следующие разделы: «Краткая характеристика препарата*, «Принцип метода*, «Метрологическая характеристика метода*, «Избирательность метода*, «Реактивы и растворы*, «Приборы и посуда*, «Подготовка к определению*, «Ход анализа*, «Обработка результатов анализа*, «Требования безопасности*.

В заглавии должны найти отражение наименование пестицида, объекты анализа и принцип метода определения (например, «Методические указания по определению хлорорганичсских пестицидов в почве хроматографическим методом*).

Вводная часть должна отражать назначение и область применения методики (или методик). Она должна содержать:    характеристику

действующего вещества (или действующих веществ); общепринятое название (Common name) и название по Госту; химическое название; структурную и эмпирическую формулы, молекулярную массу; синонимы или торговые названия; физические и химические свойства - цвет, запах, температуру кипения, упругость паров, стабильность, растворимость в воде и основных органических растворителях, коэффициенты распределения (если они известны); допустимую суточную дозу, максимально допустимые уровни и предельно допустимые концентрации; особые токсические свойства (возможность образования метаболитов с большей токсичностью и их характеристика); область применения пестицида; группу пестицида и перечисление культур, на которых его применяют (например, послсвсходовый гербицид на посевах картофеля).

Раздел «Принцип метода* должен отражать принцип, на котором основана методика, с указанием основных параметров определения и

6

возможности определения основных токсических метаболитов (например: «Методика основана на хроматографировании ДДТ и его метаболитов ДДД и ЯДЕ в тонком слое силикагеля в системе гексан - ацетон после экстракции из увлажненной почвы смесью растворителей н-гсксан -ацетон и очистки экстракта концентрированной серной кислотой»).

Если действующее начало определяется в сумме с его токсическими метаболитами, следует их перечислить.

Раздел «Метрологическая характеристика метода» должен отражать следующие параметры: диапазон определяемых концентраций; предел обнаружения в мкг; предел обнаружения в мг/кг, мг/л или мг/м³ (пределы обнаружения, кроме оговоренных специально случаев, нс должны превышать МДУ или ПДЮ; среднее значение определения стандартных количеств пестицидов в пробе в % (для установления процента определения на различных культурах следует проводить анализ типичных представителей, а в случае узкой области применения пестицида — на тех культурах, для которых предназначен пестицид; число параллельных определений (л) нс должно быть менее 5); стандартное отклонение; относительное стандартное отклонение; доверительный интервал среднего (при р = 0,95 и п » 5).

Среднее значение определения стандартных количеств и доверительный интервал среднего приводятся для трех концентраций: равной МДУ; равной удвоенному пределу обнаружения; равной половине МДУ (ПДК), если она выше предела обнаружения или, сети МДУ (ПДК) нс установлены, для трех концентраций в определенном диапазоне концентраций.

В разделе «Избирательность метода» характеризуют избирательность метода в присутствии пестицидов, близких по химическому строению и области применения. Если имеются мешающие определению примеси, дают (по возможности) их описание и указывают концентрацию, с которой начинает сказываться их влияние.

Раздел «Реактивы и растворы» должен содержать перечень применяемых реактивов и материалов с указанием степени их чистоты в соответствии с существующими стандартами, научно-технической документацией, а также растворов с указанием сроков хранения и необходимого количества.

В методиках гззохроматографичсского определения остаточных количеств пестицидов должны быть указаны типы хроматографа и детектора и его селективность; материал, длина и диаметр хроматографической колонки.

В методиках по определению остатков пестицидов методом тонкослойной хроматографии должны быть указаны размер пластинок, толщина слоя, марка сорбента и его зернение.

В методиках по определению остатков пестицидов оптическими методами должны быть указаны тип прибора, тип и размеры кювет и тип катодной лампы (атомно-абсорбционная спектрофотометрия).

Раздел «Подготовка к определению* должен содержать требования ко веем подготовительным работам, предшествующим определению остаточного количества пестицидов: приготовлению стандартных, градуировочных и других растворов с указанием сроков их хранения; очистке растворителей; приготовлению хроматографических пластинок и наса-

док; кондиционированию хроматографических колонок; построению градуировочных графиков.

При использовании способов очистки растворителей, отличающихся от общепринятых, должно быть дано подробное их описание.

Раздел должен содержать требования к установке и подготовке всех средств определения в соответствии со стандартами и научно-технической документацией, с учетом требований безопасности.

Установление зависимости аналитического сигнала от содержания определяемого вещества, построение градуировочного графика необходимо проводить в соответствии со стандартами и Научно-технической документацией на приборы.

Раздел «Ход анализа» должен содержать конкретные, подробные сведения о порядке выполнения всех операций по определению содержания остаточных количеств пестицидов в отобранных пробах пищевых продуктов, кормах, воде, почве.

Раздел должен содержать следующие подразделы: «Озоление, гидролиз пробы» (в случае необходимости), «Экстракция и очистка экстрактов» и др.

В методиках определения микроколичеств пестицидов методом газовой хроматографии стел уст приводить условия хроматографирования, а именно: необходимые газы и скорости их потока (мл/мин); температура термостата колонки, детектора, испарителя (°С); вводимые в испаритель объемы упаренных экстрактов; время удерживания - абсолютное и относительное (среднее из трех определений); способ построения градуировочного графика; линейный динамический диапазон детектирования; способ количественного определения.

В методиках определения остаточных количеств пестицидов хроматографией в тонком слое нужно приводить способы приготовления хроматографических пластинок: условия нанесения пробы на пластинку; условия, хроматографирования; вид хроматографической камеры; подвижная фаза; способ и степень насыщения парами подвижного растворителя; длина пробега растворителя; проявляющий реактив; способ обработки хроматограмм (нагревание, облучение УФ-евстом и т.п.); величина п (среднее из 5 определений); способ количественного определения. При использовании денситометра приводятся его основные параметры.

При фотоколориметричсском и спсктрофотометричсском определениях способ приготовления градуировочных растворов должен быть представлен в виде таблицы и указана длина волны, при которой измеряется оптическая плотность градуировочных растворов.

Для повышения надежности идентификации пестицидов методика должна включать альтернативные способы очистки экстракта. Методика газохроматографического определения остаточных количеств пестицидов должна включать анализ нс менее чем на двух хроматографических колонках, заполненных неподвижными фазами различной полярности. Методика определения остаточных количеств пестицидов методом тонкослойной хроматографии должна включать, как правило, альтернативные условия хроматографирования (разные сорбенты, проявляющие реагенты, не менее двух подвижных растворителей).

Раздел «Обработка результатов анализа* должен содержать сведения по обработке полученных данных и расчетные формулы. Содержание

S

остатков пестицидов в анализируемой пробе вычисляют как среднее из двух-трех параллельных определений. Результаты определения остаточных количеств пестицидов по действующему началу суммируют с результатом определения токсичных метаболитов в пересчете на исходное действующее вещество.

Содержание токсичных метаболитов в анализируемом субстрате определяют раздельно от исходного действующего вещества в том случае, если для них утверждены максимально допустимые уровни остаточных количеств.

Раздел «Требования безопасности» должен содержать специальные правила безопасности при выполнении операций определения содержания остаточных количеств и соответствовать «Правилам устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Минздрава СССР» № 2455-81 от 20.10.81.

В методических указаниях должны содержаться сведения об авторе или авторских коллективах, принимавших участие в разработке методики (фамилия, и., о., место работы).

Если в разработке методики принимало участие несколько авторских коллективов, то их нумерация приводится в тексте методики в соответствующих разделах арабскими цифрами, а ссылки даются в скобках.

Сети какая-либо часть методики утверждалась ранее, то следует указать номер утверждения и дату.

Для разработки методики определения микроколичеств пестицидов

9