ГОСКОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬШ С ВРЕДИТЕЛЯМ. БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ И СОРНЯКАМИ ПРИ МИНСЕЛЬХОЗЕ СССР

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЕ МИКРОКОДЕ ЧЕС ТЗ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ * КОРМАХ И ВНЕ&-НЕЙ СРЕДЕ

ЧАСТЬ ХЕ-я

Москва - 1983

ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬБЫ С ВРЕДИТЕЛЯМИ, БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИЙ И СОРНЯКАМИ ПРИ МСХ СССР

МБТОДИЧВСКИВ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕС1В ПЕС1ИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ,КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

ЧАСТЬ ХШ

Данные методики апробированы и рекомендованы в качвотва официальных группой экспертов при Гоокомиосии ло химическим оредотвам борьбы с вредителями,болезнями растений и сорняками

при МСХ СССР

Москва-1983

ствеино 2 и 4.

К - калибровочный коэффициент, его значение определяют для

шкала 50.Ю~^Х2А.

Значение К (мм/мг) находят следующим образом:

К = 1/3 (    +    "4-    ),    здесь    И_г;    1Ь;    Н₃    -    высоты

пиков препарата в мм, I- количество стандартного раотво-ра препарата, введенное в хроматограф, мкл, С - концентрация стандартного раствора в гдкг/мл.

2.5.2,2* Метод тонкослойной хроматографии.

Прооу, сконцентрированную до/*0,3 мл количественно переносят на пластинку с сорбентом.

Параллельно наносят серию стандартных растворов с содержанием 3,5,10 мкг чойстнущого вещества мстилмеркаптофоса.

Хроматографируют в системе гексан-ацетон (2:1) , просушивают и обрабатывают про/шляющим реактивом; затем пластинку прогревают при температуре 00=-70^оС н течение 5-7 минут и опрыскивают 2‘<-ной лимонной кислотой (10£-пом уксусной кислотой). Цропарат проявляется в виче двух пятен синего цвета на желтом фоне.

Rf-o.ssH Rf-о,4г.'

ПпжниЙ продел обнаружения 5 мкг.

Содержание ?.ют.:лмсркапто<рооа б анаппзируемоИ пробе в мг/кг (мг/л) мычиоляют по «^рмуле^х:

,1’Де

л - содержание поступи .и * лм.члязгп^е’^'Й пробе, мг/кг(чг/ч)

А - количество препарата, найденное ни хроматограмме при сравнении оо стандартом, мкг;

Уагчет по*ут на аселлютно сухую почту no сумме площач^лй е.'*ух пят¹¹»;.

-75-

B - навеска пробы в г (мл);

Sj - площадь пятна стандартного раствора, мм²;

” площадь пятна пробы, мм².

2.6.    Расчет результатов анализа.

Формулы расчета результатов анализа приведены в 2.5.2.

2.7.    Техника безопасности.

Необходимо соблюдать общепринятые правила безопаоности при работе с органическими растворителями и токсическими веществами.

3. Методика разработана Акоронко С.Л., Лейка З.А. (ВНИИГИНГОКС), Кирильчук П.П. (Литомирская областная санитарно-эпидемиологическая станция), Кочанов В.И. (Киевский институт усовершонствования врачей).

-259-

ССДБРЖАНИЕ

ХЛОРОРГАНлЧЕСКИБ ПЕСТИЦИДЫ

I.Временные методические указания указания по

определению ХОП (ДДТ,ДДЗ,ДДД, -ГХЦГ) в рыбе и рыбной продукции методом газожидкостной хроматографии.

2. Методические указали® по определению ХОП и сим-триазиновых пестицидов при их совместном присутствии в почве с помощью Г1Х*

3* Временные методические указания по определению остаточных количеств митрана в воде,сливах и

^яблоках методом ТСХ.

ШЙОРОРГАНИЧВСКИВ ПЕСТИЦИДУ

1.    Мотодические указания по определению афоса в воздухе рабочей зоны методами ГЬХ и ТСХ.

2,    Временные методические указания по определению боя-стара в ботве и клубняах картофеля,листьях и стеблях хлопчатника,капусте,почве к водэ ТСХ и ГЗЕХ.

3* Методические указания по определению глифосата и его метаболита- аминометилфосфоновой кислоты методом хроматографии в воде,почве,растительном материале,

4.    Мотодические указания по определению остаточных количеств дурсбана в воде,почве,лесной растительности

и биосредах методом ТСХ.

5.    Временные методические указания по определению каун-тора в растениях сахарной свеклы и почве методом ТСХ,

260-

6* Методические указания по определению метилмеркалто-фоса в воде,почве,винограде и зеленой массе хмеля ГЖХ и ТСХ.    67

7.    Временные методические указания по определению о<$у-

нака методами ГЖХ и ТСХ в почЕе,растениях,воде водоемов.    76

8.    Зременные методические указания по определению протио-фоса в растительном материале,почве и воде методами

ГКХ и ТСХ.    82

9.    Временные методические указания по определению се-лекрона в растительной продукции,почве и воде ТСХ

и ГЖХ.    91

10.    временны» методические указания по определению хлоро

фоса энзимно-хроматографическим методом в листьях болладоны и траве мяты перечной.    90

11.    Методические указания по определению в зерне и про

дуктах его переработки ФОП.применяемых для обеззараживания зерна и зернохранилищ,хроматографическими методами.    ₁₀₅

АЗОТСОДЕРЖАЩИЕ ПЕСТИЦИД]

1.    Методические указания по определению остаточных количеств пкрекса,диносеба,каратака,ДНОКа в воде,почве.

и растительном материале    хроматографическими методами. цу

2.    Временные методические указания по определению байгой*

методом ГЗКХ в молоке.    138

3.    Временные методические указания по определению барнона в воде,почве,растениях методом ГЖХ.

- 261 -

4.    Методические указания по определению кронетона

в воде,почве,корнеклубнеплодах и растительном материале ТСХ,    *54

5.    Временные методические указания по определению ридо-

кила методой хроматограмм в воде,почве,растительном материале,    *50

6.    Временные методические указания по определению ров-

роля методом ТСХ в поде,почве,томатах,картофеле,винограде, виноградном соке и ринэ.    I6S

7.    Временные методические указания ронилана в растительной продукции,почве и воде ТСХ и    ГЖХ.    175

8.    Временные методические указания по определению эвисех-

та в растительной продукции,почве и в воде ТСХ,    182

9.    Временные методические указания по определению эти-

римала в растительной продукции,почве и воде ТСХ,    188

ПРОЧИЕ ПЕСТИЦИДЫ

I* Времонние методические указания по определению гора-нилбутирата методом ГИХ и ТСХ в почве,воде,корнеплодах и листьях сахарной свеклы.    *^5

2.    Временные методические указания по определению бром-

пропилата(неорона) в яблоках и цитрусовых методом газовой хроматографии.    206

3.    Временные методические указания по определению иллокса-на в воде и печво методом ГП.

4.    Временные методические указания по хроматографическому определению иэатрина в печво    и    воде.    217

5.    Временные методические указания по определению омаЯта методами Г££Х и ТСХ в почве,в воде и растениях.

6.    Методические указания по определению хлората магния в почве,воде,растениях(подсолнечнике,луке) и в воздухе полярографическим и хроматографическим (ТСХ) методами.

7.    Временные методические указания по определению оста точных количеств некоторых аналогов ювенильного гор иона (алтосида.алтозара и п-<5ром*енилового эфира гераниола) в растениях картофеля и почве методами ТСХ и Ш.

Дополнения

Л- 71938 от 20Л«СЗгТирах 2000 экз. .заказ Н» шз Типография ВАСИ:ИЛ

Настоящие методические указания предназначены для

санитарно-эпидемиологических станций и научно-исслодова-телъских учреждений Минздрава СССР,а также ветеринарных_вагрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других Министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания,кормах и внешней среде.

Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качество официальных группой экспертов при Госкомиссни по химическим средствам борьбы с вредителями,болезнями растений и сорняками при ИЛ СССР.(Председатель группы экспертов - М.Д.Клисенко).

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования саяэпидслу^бы ИМПиТМ им.Мар-нпновского Е.Я. и лабораторным советом при Главней санитарно-эпидемиологическом управления Кик здрава СССР.

-67-

"Утверхцаю⁰

Заместитель Главного Государственного врача СССР

Л.И.Зайченко "22¹¹ октября 1981 г,

Ё 2479-81

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИИ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ 1ВДШМЕРКАПТОФОСА В ВОДЕ, ПОЧВК, ВИНОГРАДЕ И ЗЕЛЕНОЙ МАССЕ ХМЕЛЯ ГАЭОгИДКОСТНОЙ И ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ

I. Краткая характеристика препарата.

Метилмеркаптофоо - (метасистокс, метилдеметон, метилсистокс)

О.О-диметил- 5-2(этилтио)-этилтиофосфат - смесь из 702 тионового

и 30% тиолового эфиров. Относительная молекулярная масса 230,29.

Тионовый изомер , _{и п} f.

* >Р0СН_гСН_г£С₂Н£-

сн±о

- жидкость о характерным неприятным запахом. Т_кип 93°С при 0,5мм рт«от., давление паров при 20°С 1,85»10”⁵мм рт.ст., летучесть ври 20°С - 23, 30° -56, 40° - 129 мг/м³,d|°1,1904. Растворимость в воде 0,033 г/100 мл. Хорошо растворим в большинстве органических растворителей.    q

ТиоловиЯ изомер    ->    >    CHj>q_Hs

- жицкооть с т. кип. Ю2°С при 0,4 ш рт.ст., давление паров при 20°С З.б-Ю^мм рт.ст., летучесть при 20° - 4,3, 30°- 12,4, 40° - 34 мг/м³, d |° 1,207. Растворимость в воде 0,33 г/100 мл.

-60-

Хорошо растворим в большинстве органических растворителей*

Тионовый гаомер постепенно переходит в более токсичный тиоло-вый. 10% метилмеркаптофоса превращается в тиоловый изомер при 20° в течение 104 дней, при 30°- 26 и при 40°- В дней. Оба изомера легко разрушаются щелочами. Выпускается в форме 30%-ного концентрата. Высокоэффективный системный инсектицид и акаригхид внутрираститель-ного действия. Высокотоксичное соединение (I-П гр. Г.К.), ДДдд для различных видов лабораторных животных 30-70 мг/кг. ЦДК в воде

O.0L мг/л. ДОК в яблоках, сахарной свекле, хмеле - 0,7 мг/кг.

2. Методика определения метилмеркаптофоса в воде, почве, винограде и зеленой массе хмеля метопом газожидкостной и тонкослойной хроматографий

2.1. Основные положения.

2.1*1.Принцип метода.

Метод оонован на определении газожидкостной и тонкослойной хроматографией метилмеркаптофоса после извлечения из исследуемой пробы органическим растворителем. Очистка от коэкстрачтивных вещест.1 проводится в системе жидкость-жидкость и (или) на хроматографической колонке.

2.Х.2, Метрологическая характеристика метода газожидкостной

хроматографии

12,0

-69-

Чувствителыюоть метода при анализе воды - 0,005 мг/кг, при анализе почвы, винограда и хмеля - 0,02 мг/кг. Метрологическая характеристика метода тонкослойной хроматографии

Анализируемый об"ект :Размах : .варьи- . •рования * Среднее :0тнос*тель-: значение .ное отан- . определения * дартное % :отклонение : Доверительный интервал среднего, % при = 0,95 Вода 80-92 86.4 5,8 ± 7,3 Почва 63-78 72 16 ± 20 Виноград 70-80 75 20 ± 22,5 Зеленая масса хмеля 70-78 74 20 ± 25

Диапазон определяемых концентраций - 0,05-ОД мг/кг(иг/л). Предел обнаружения 0,05 мг/кг (мг/л).

2.2, Реактивы и растворы.

1.    Гексан, х.ч. ТУ 6-09-3375-78;

2.    Ацетон, ГОСТ 2603-79

3.    Эфир диэтиловый, х.ч,, ГОСТ 6262-79;

4.    Натрия сульфат безводный, ч., ГОСТ 4166-76;

5.    Натрий хлористый, ч., ГОС/ 4233-77;

6.    Кальций сернокислый, ч.д.а., ГОСТ 3210-77;

7.    Кальций хлористый, х.ч., ГОСТ 4161-77, 0,05 Н ра-р;

8.    Гипс медицинский, СТ ГОХП 27-1860’;

9.    Силикагель КСК. Товарный силикагель измельчают, просеивают через сито Г00 ме.и.Хранят без доотупа влаги;

10.    БрбмфенодовыЙ синий индикатор, чда, ТУНГ УХП 271-59;

11.    Серебро азогнокислоо, чда, ГОСТ' 1277-75;

-70-

12. Окись алюминия для хроматографии П ст.акт.,ТУ 6-09-3916-75.

Проявляющие реагенты:

Смесь растворов броглренолового синего (БФС) и азотнокислого серебра.

Готовят два раствора: А- 0,5# водноацетоновый раствор AgMOj (I ч. воды и 3 ч. ацетона). Б- 0,05 г. БФС растворяют в 10 мл ацетона. Раствор Б разбавляют раствором А до об"ема 100 мл. Хранят в темном прохладном месте. Для осветления фона плаотинки используют 2#-ныЙ раствор лимонной кислоты или 10#-кЙ раствор уксусной киолоты.

2.3. Приборы и посуда.

1.    Ротационный вакуумный испаритель, МРТУ 42-2589-66

2.    Колбы конические со шлифами на 250-500 мл, ГОСТ 10344-72

3.    Колбы круглодонные для отгонки растворителей ГОСТ 10394-72

4.    Колбы мерные на 100 мл,ГОСТ 1770-74

5.    Воронки делптельные емкостью IСО-ЗОО мл, ГОСТ 10054-75

6.    Цилиндры мерные на 50-100 мл, ГОСТ 1770-74

7.    Пипетки на 0,1 мл и I мл , ГОСТ 20292-74

8.    Камера хроматографическая, ГОСТ 10565-75

9* Пульверизаторы стеклянные, ГОСТ 10391-74

10.    Стеклянные пластинки 9x12 см

11.    Газовый хроматограф о детектором по захвату электронов (детектор постоянной скорости рекомбинации) марки "Цвет", 'Тазохром" и др.

12.    Азот газообразный, особой чистоты, содержание 0₂ не более 0,003#, ГОСТ 9293-74.

-71-

2.4.    Отбор, хранение г. доставка проб.

2.4.1.    Отбир проб производится р соответствии с унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей сре:ш для определения микроколичеств пестицидов, утвержденными Заместителем Главного Государственного санитарного врача СССР 21.00.1979 г. зп £ 2051-79.

2.4.2.    Приготовление пластинок.

14 г силикагеля тщательно смешивают с 1-1,5 г сернокислого кальция или I - 1,5 г медицинского гипса, добавляют 40 мл дистиллированной воды и перемешивают до образования однородной массы.

7-Я г сорбционной массы равномерно наносят на пластинку общепринятым способом.

2.4-3. Приготовление хроматографической колонки.

3 хроматографическую колонку помещают Ватный тампон, последовательно 3-4 г натрия сернокислого безводного, 5 г окиси алюминия, сверху снова 2 г натрия сернокислого безводного.

2.5.    Проведение опре. .елонпя.

2.5.1. Экстракция и очистка экстрактов.

Вода. 500 мл пробы помещают п .делительную воронку, добавляют 10 г хлористого натрия, хорошо перемешивают и экстрагируют ди?тп-ловым эфиром 3x50 мл. Объединенный о.'пириьгй экстракт сушат безводным сульфатом натрия, кошхентрируют при* температуре баня но шло 30°0 до О,С -0,3 гил. Досуха упаривают на воздухе. Остаток в колбе растворяют в I мд гексана и хроматографируют (ГЖХДС$).

Почва. 35 г пробы помещают в коническую колбу и заливают рО;д смеси адетон-0,05 И водный раств->р£а^(1:1). Прегл piyiTpcrewi:

30 мин на аппарате для зечннхитп:::’. Э*;стра.аулэ повторsi*n^% тр;-*'ы. Об^недииеньыс экстракты |Тиь;ьтр:^гит, перенося? в деяпгелче"? иконку.

■добавляю? 100 :vi "псг:ллчр^м12ч<;^»: oo.ti

каптофоо триады по 50 мл гексана. ГскОииовие акстракты об"оди-HJU0T, сушат безводным сульфатом нагрия, концентрируют до объема 0.2-0,3 мл при температуре бани не выше 50°С. Досуха упаривают па воздухе. Остаток растворяют и I гп гексана и хроматографируют (ГЕХ, тех).

В и и о г р ад и зеле и ап масса хмеля.

26 г измельченной пробы помещают в коническую колбу и заливают 50 мл диэтилоного эфира. Колбу встряхивают на аппарате для встряхивания I чао. Экстракцию повторяют триады. Экстракты фильтруют через бумажный фильтр, сушат бозводним оулкратом натрия, концентпируют до С,3-0,* мл при температуре бани не вы-i(io 30°С.

Очистка на хроматографической колонке.

Подготовленную, как описано вызие, колошеу нромывшит гексаном, эдгат отбрасывают и вводят в колошу упаренный эфирный экстракт (если растворитель упарен досуха, остаток растворяют в 1-3 мл эфира), чают раствору впитаться: и элюируют метилмерзсапто-фоо 50 мл диэтилового эфира.

Элюат к^тпонтрируют досуха как описано вша, остаток растворяют I мл гексана и хроматографируют (ГХХ и ТСХ).

2.5.2. Идентификации и количественное определение метилмеркаптофося.

2.5.2.1. Метод i аз-.жидкостной хроматографии

Хроь*атограф с термопочным детектором (марки "Цьет",Газо-

хром и дг.)

Скорость движения лентн еаюепмеца 200 м*!/«пе

-73-

гр    —TP

Рабочие шкалы измерителя малых токов 50.10    ,    100.10    ,

200.Г0"¹²а.

Колонка стеклянная длиной 2 м и внутренним диаметром 3 мм заполнена набивкой, состоящей из 20% полиэтиленгликольоеба-цин^та на силанизировалном ДМС£ хроматоне/^- АIV (0,16-0,20 ш)

Скорость газа-носителя азста - 20 мл/шн, водорода - 15 мл/Шн воздуха - 24. л/час Температура колонки - 190°С Температура испарителя - 205°С

Линейность детектирования соблюдается в пределах от 0,1-5 иг.

?Лчпималыю детектируемое количество мстнлмерколтофоса 0,1 нг. Время удерживания метилмеркапто<|хюа - 5 мин.

Количественное определение производят пугал измерения высот пиков по формуле:

х ₌ -LI.CtwL-y(W)..-H.---(мг/кг или Мг/л) •

К(мм/нг) • ^ (мкл) *т{т, мл)

где X - количество препарата в пробе в мг/л или мг/кг,

И - высота пика г гр о парата в мм,

V    - об"ем экстракта в градуированной прсбирде, мл,

V    - об"ем аликвотной части экстракта, мкд, т- масса пли об"ем образца, г или. мл,

М - масштаб записи пиков.

Принимают кцеалу 50.10“^А за основную, ;**яя нее М-1. *лл школы 100.10~*² и 200.10~*²Л значение М составляет соотдет-