МЕТОДЫ

ОПРЕДЕЛЕНИЯ

МИКРОКОЛИЧЕСТВ

ПЕСТИЦИДОВ

В ПРОДУКТАХ

ПИТАНИЯ,

КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Там 1

X “Г” МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МИКРОКОЛИЧЕСТВ § Ж а и ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ В ДВУХ ТОМАХ ТЪм 1 ф

МОСКВА. 1992 «КОЛОС»,

При разработке методических указаний по определению остаточных количеств пестицидов, применяемых на небольшом числе культур, среднее значение определения устанавливают для каждой культуры. Широкое применение пестицидов на различных культурах предполагает установление среднего значения определения для наиболее типичных объектов, которые выбирают в соответствии с преимущественным содержанием в них растительных восков и масел, животных жиров, гумуса, пигментов и других коокстрактивных веществ. В соответствии с этим методические указания практически могут быть использованы для анализа других объектов из субстратов указанного вида.

Утверждено 06.08.81 N? 2422-81

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ РОВРАЛЯ В ВОДЕ, ПОЧВЕ, ТОМАТАХ, КАРТОФЕЛЕ, ВИНОГРАДЕ,

ВИНОГРАДНОМ СОКЕ И ВИНЕ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ ^#

Краткая характеристика препарата.    Ровраль    - 1-изопропил-

карбамоил-3-(3,5-дихлорфенил)-3-гидантион.    Брутто    формула

CuHuOjNjCIi* Молекулярная масса 330,17. Общепринятое название -ипродион. ДСД 0,3 мг/кг. В винограде МДУ 0,4 мг/кг, содержание остатков ровраля в землянике, картофеле, огурцах, томатах не допускается. В воде ПДК 0,03 мг/л. Химически чистый препарат - белое кристаллическое вещество без запаха, т. пл. 136 °С, растворим в этаноле, ацетонитриле, толуоле, бензоле, ацетоне, метилене хлористом и практически нерастворим в воде. Упругость паров незначительна: при 20 °С - 2,7 • 10"^s Па. Ровраль - фунгицид, применяемый в борьбе с серой гнилью на винограде и овощных культурах.

Принцип метода. Метод основан на извлечении препарата из анализируемых проб органическим растворителем ацетонитрилом или ацетоном, очистке экстрактов путем перераспределения между двумя несме-шивающимися растворителями и последующем определении методом ТСХ. При необходимости экстракт дополнительно очищают на колонке с силикагелем.

Метрологическая характеристика метода. Метрологическая характеристика метода приведена в таблице 131.

Избирательность метода. Определению ровраля нс мешают препараты дерозал, бенлат, зупарен, применяемые, как и ровраль, при борьбе с серой гнилью.

Реактивы и материалы. Ацетонитрил ч. Бензол х.ч. н-Гексан ч. Толуол чл.а. Сульфат натрия безводный, чщ.а. Хлористый метилен, свежеперсгнанный. Ацетон чщ.а. Гептан х.ч. Этиловый эфир (медицинский). Едкий натр х.ч., 1 М водный раствор. Едкое кали особой чистоты, 15%-ный. Этиловый спирт х.ч. Хлороформ х.ч. Хлороводородная кислота х.ч., 0,1 М и 5 М. Нитрит натрия х.ч. Хлорид аммония 5%-ный раствор в 0,1 М хлороводородной кислоте или аммоннй сульфа-н иловокислый, 5%-ный раствор в 0,1 М хлороводородной кислоте. Этилацстат х.ч. Силикагель для хроматографии Л 100/160 ц. N-(1-нафтил) этилендиамин дигидрохлорид ч. 1-Нафтол чщ.а. Дифениламин чл.а. Хлорид цинка чл.а. Пластинки хроматографические «Силу-

♦ Разработаны Ю.А. Бунятяном, С.А. Джагацпанян (Филиал ВНИИГИНТОКС); Л.Г. Маргацкой (Республиканская станция защиты растений, г. Алма-Ата).

131. Метрологическая характеристика метода

Анализируемый объект

Параметры Вода Почва Томаты Картофель

Предел обнаружения, мкг Предел определения, мг/л или мг/кг Среднее значение определения, % Стандартное отклонение, % Доверительный интервал (л-5, р-0,95), % 2,0 2,5 5,0 2,5 0,02 0,05 0,1 0,05 93,5 87,6 83,0 90,8 ±4,52 ±3,29 ±5,70 ±3,62 ±5,61 ±4,08 ±7,07 ±4,49 Продолжение Параметры Анализируемый объект Виноград Виноградный сок Вино Предел обнаружения, мкг 5.0 5.0 5.0 Предел определения, мг/л 0.2 0.1 0,1 или мг/кг Среднее значение опредс- 84.0 86,0 76,0 ления, % Стандартное отклонение, % ±5,50 ±5,90 ±5,50 Доверительный интервал ±6,80 ±7.30 ±6,80

(л = 5. р = 0,95), %

фол» УФгя- Д и а з о р с а к т и в: к 10 г нитрита натрия приливают 20 мл концентрированной хлороводородной кислоты и доводят объем жидкости до 50 мл дистиллированной водой (раствор используется свежеприготовленным). Проявляющие реагенты: N2 1 - 5 г N-(1-нафтил) этилендиамина растворяют в 100 мл 1 М хлороводородной кислоты; N? 2-1%-ный раствор 1-нафтола в этиловом спирте; N? 3-2,8 г едкого кали растворяют в 50 мл дистиллированной воды и добавляют ОД г I-нафтола. Раствор устойчив в течение 7 дней при хранении в холодильнике; N2 4 - 0,5 г дифениламина растворяют в 100 мл ацетона и добавляют 0,5 г хлористого цинка. Раствор используется свежеприготовленным. Стандартный раствор ровраля с содержанием 100 мкг д.в. препарата в 1 мл хлороформа, ацетона или этилового спирта. Готовят из х.ч. или технического препарата с учетом процентного содержания действующего вещества. Раствор устойчив в течение 10-15 дней.

Приборы, аппаратура и посуда. Прибор для отгонки растворителей. Камера для хроматографирования. Камера для опрыскивания хроматографических пластинок. Воронки: делительные на 0,5 и 1 л; химические; Бюхнера. Колбы: конические на 0,25 и 1 л; мерные на 100 и 1000 мл; стеклянные размером 300 х 15 мм для колоночной хроматографии, круглодонные со шлифом 29 на 250 мл; Бунзена. Пипетки на 1; 2 и 5 мл.

519

Микропипетки. Пульверизаторы стеклянные. Шкаф сушильный. Вентилятор или фен. Водоструйный насос. Стекловата.

Подготовка к определению хроматографической колонки. В стеклянную колонку (300 х 15 мм) помещают небольшой стскловатный тампон, затем силикагель на высоту 10 см. Перед употреблением колонку промывают 50 мл гексана.

Ход анализа. Экстракция и очистка. Пробу воды (100 мл) помещают в делительную воронку и трижды экстрагируют хлористым метиленом порциями по 50; 30 и 30 мл. Объединенный экстракт высушивают безводным сернокислым натрием и отгоняют растворитель на ротационном испарителе при температуре 60-70 °С. Остаток количественно переносят ацетоном на хроматографическую пластинку.

Пробу измельченного растительного материала (томаты, картофель) или почвы (50 г) экстрагируют трижды 75 мл ацетонитрила, экстракты фильтруют в делительную воронку и очищают гексаном 3 раза по 30 мл, гексановый экстракт промывают 30 мл ацетонитрила и сливают с начальным ацетонитрильным экстрактом, а гексановый экстракт отбрасывают. Объединенный ацетонитрильный экстракт упаривают на ротационном испарителе до 20-30 мл. К остатку ацетонитрила добавляют смесь воды с хлористым метиленом (80:50) и встряхивают 5 мин. Отделяют хлористый метилен и пропускают через безводный сернокислый натрий в круглодонную колбу, водный раствор экстрагируют метиленом хлористым еще дважды по 30 мл, пропускают через безводный сернокислый натрий и собирают в круглодонную колбу ротационного испарителя. Растворитель выпаривают досуха. Если экстракты очистились недостаточно, очистку проводят на хроматографической колонке.

Измельченные ягоды винограда (25 г) гомогенизируют с 150 мл ацетона 5-10 мин. Массу фильтруют на воронке Бюхнера, осадок промывают двумя порциями ацетона по 50 мл. Из объединенного фильтрата растворитель удаляют на ротационном испарителе при температуре не более 65 °С, а оставшуюся жидкость переносят количественно в делительную воронку и добавляют 50 мл бензола, встряхивают 3-5 мин. При образовании эмульсии добавляют 1 мл этилового спирта. Бензольный экстракт фильтруют в колбу через слой безводного сернокислого натрия и отгоняют до 0,5-1 мл. Следы растворителя удаляют током воздуха. Сухой остаток растворяют в ацетоне, переносят количественно на хроматографическую пластинку.

Сок или вино (50 мл) помещают в коническую колбу на 1 л и встряхивают с 250 мл ацетона 1-2 мин. Затем оставляют в покое на 10 мин. Из смеси растворитель удаляют на ротационном испарителе при температуре 65 °С. Дальше поступают, как описано для винограда.

Очистка на колонке. Пробу вносят в колонку с помощью 25 мл гексана (5x5 мл). Коэкстрактивные вещества вымывают из колонки 50 мл гексана, препарат элюируют 25 мл хлористого метилена, затем 5%-ным раствором этилацетата в хлористом метилене (100 мл). Элюат упаривают.

Хроматографирование. Хроматографирование проводят нисходящим способом. Хроматографические пластинки «Силуфол* сгибают от верхнего края на 2 см. Пробы с помощью ацетона и стандартные растворы наносят на пластинку на расстоянии 2 см от линии сгиба. Гнутый конец пластинки помещают в лодочку, в которую налит

подвижный растворитель - смесь гептан - этиловый эфир (1:4) или смесь толуол - этанол (93:7). Лодочка помещена в камеру для хроматографирования. После окончания хроматографирования пластинку вынимают из камеры и оставляют на несколько минут на воздухе (под вытяжкой) для удаления следов растворителей.

Условия проявления хроматограмм (в зависимости от проявляющего реактива): А. Хроматограмму опрыскивают смесью 1 М раствора едкого натра и этилового спирта (50:50). Выдерживают пластинку в сушильном шкафу при 120 °С в течение 10 мин, затем опрыскивают последовательно 5 М хлороводородной кислотой, диазорсактивом, 5%-ным раствором хлорида аммония и сульфаминокислого аммония в 0,1 М хлороводородной кислоте. После высушивания пластинок в токе воздуха хроматограмму обрабатывают проявляющим реагентом N° 1 или N? 2;

Б. Пластинки опрыскивают 15%-ным спиртовым раствором едкого кали и тсрмостатируют при 150 °С в течение 20 мин, затем пластинки последовательно обрабатывают диазорсактивом и проявляющим реагентом N® 3 или N? 4.

При наличии ров рал я в пробе на хроматограммах проявляются розово-фиолетовые пятна в случае применения проявляющего реагента N? 1, оранжевые пятна - в случае применения реагента N? 2, 3 или малиновые - в случае применения реагента N? 4. Величина Rr пятен 0,35 (гептан-диэтиловый эфир 1:4) и 0,50-0,55 (толуол-этанол 93:7).

Обработка результатов анализа. Количественная оценка хроматограмм проводится путем сравнения площадей пятен и их интенсивности, проб и стандартных растворов. Содержание препарата в исследуемой пробе (X, мг/кг или мг/л) вычисляют по формуле

А

X - — ,

Р

где А - количество препарата в анализируемой пробе, мкг; Р - количество или объем анализируемой пробы, г или мл.

Требования безопасности. При проведении исследований необходимо соблюдать правила предосторожности, требуемые при работе с ядовитыми, взрыво- и легковоспламеняющимися веществами.

731-34

Сокращения ................ 3

Предисловие     4

Единые требования к методикам определения содержания остаточных количеств пестицидов в пищевых продуктах и объектах окружающей среды (методические указания) ............ 5

Глава I. Галогенсодержащие углеводороды ....... 11

ЛДЭ, ДДД. ДДТ) при совместном присутствии в воде хроматографическими методами................ 11

Методические указания по избирательному газохроматографическому определению хлорорганических пестицидов в биологических средах (моче, крови, жировой ткани и грудном женском молоке) ....    19

Методические указания по определению хлорорганических инсектицидов в гуза-пае и хлопковой шелухе хроматографическими методами    25

Методика определения ГХЦГ, ДДТ    и метаболитов в гуза-пае    25

Методика определения у-ГХЦГ и ДДТ в хлопковой шелухе методом тонкослойной хроматографии............ 28

/3- и б-ГХЦГ) и метаболитов (полихлорированных фенолов) в биологических жидкостях (крови), органах, тканях и субклеточных фракциях печени теплокровных животных методом тонкослойной хроматографии ................... 30

Методические указания по определению ГХЦГ и ДДТ в илово-сульфидных

лечебных грязях газожидкостной хроматографией....... 38

Методические указания по определению ДД в воде методом газожидкостной хроматографии............... 42

Методические указания по определению ДД и ДДБ в почве методом газовой хроматографии ............... 44

Методические указания по определению дилора в меде методом тонкослойной хроматографии............... 46

Методические указания по определению ко.мманда в бобовых хроматографическими методами............... 49

Методические указания по определению метоксихлора в воде, ботве и клубнях картофеля методом газожидкостной    хроматографии ....    53

Методические указания по определению митрана в воде, яблоках и капусте газохроматографическим методом    ......... 55

СОКРАЩЕНИЯ

ГЖХ - газожидкостная хроматография д.в. - действующее вещество

ДПР - детектор постоянной скорости рекомбинации

ДСД - допустимая суточная доза

ДЭЗ - детектор электронно-захватный

МДУ - максимально допустимый уровень

ОДК - ориентировочно допустимая концентрация

ПДК - предельно допустимая концентрация

ПИД - пламенно-ионизационный детектор

ПФД - пламенно-фотометрический детектор

СФ - спсктрофотомстричсский

ТИД - термо-ионный детектор

т.кип. - температура кипения

т.пл. - температура плавления

ТСХ - тонкослойная хроматография

ТСХЭ - хроматоэнзимная тонкослойная хроматография

УФ - ультрафиолетовый

ФОП - фосфорорганичсскис пестициды

ХОИ - хлорорганичсскис инсектициды

ХОП - хлорорганичсскис пестициды

х.ч. - химически чистый

ч. - чистый

ч.д.а. — чистый для анализа

ПРЕДИСЛОВИЕ

Экологические последствия использования пестицидов, их неблагоприятное влияние на здоровье населения хорошо известны. Одно из мероприятий, направленных на обеспечение безопасного применения этих веществ, - контроль за содержанием остаточных количеств препаратов в сельскохозяйственной продукции, продуктах питания, кормах, внешней среде. В соответствии с законодательными актами в нашей стране контроль за содержанием -сстицидов возложен на контрольно-токсикологические лаборатории станций защиты растений, отделы токсикологии проектно-изыскательских станций химизации сельского хозяйства, санитарно-эпидемиологические станции, лаборатории.

Систематически выпускаются справочные издания по методам определения микроколичеств пестицидов. В настоящем выпуске обобщены рекомендации отечественных специалистов по определению остаточных количеств пестицидов в различных средах, апробированные и одобренные группой экспертов и имеющие законодательный характер. Все методические указания утверждены органами санитарно-эпидемиологической службы. Перед названием каждой методики приведены дата утверждения и номер. В отличие от предыдущих выпусков (1977 и 1983 гг.) в книгу включены унифицированные методики определения отдельных групп препаратов, рекомендованных специалистами, сотрудничающих в области агропромышленного комплекса по проблеме «Гигиена и токсикология пестицидов, изучение возможных отрицательных последствий применения пестицидов и их профилактика*.

Методики предназначены для контроля за остаточными количествами пестицидов в экспортируемой продукции, но могут быть использованы также для контроля качества отечественной продукции. Методические указания сгруппированы по классам определяемых соединений, а внутри каждого подраздела для удобства пользования пестициды расположены по алфавиту. Такая форма изложения позволяет сделать обобщения по методам определения важнейших классов псстицидных препаратов. Методы определения биологических средств защиты растений выделены в специальный раздел во втором томе.

В сборник включены методики определения в продуктах питания, кормах, сельскохозяйственной продукции, воде, почве, воздухе, биологическом материале пестицидов различного химического строения в одной пробе, методики определения групп препаратов, близких по строению, методики определения в одной пробе смесей препаратов, используемых в интенсивных технологиях возделывания сельскохозяйственных культур, а также методики определения отдельных препаратов.

Методические указания включают краткую характеристику физикохимических свойств препарата, описание принципа метода определения, перечень необходимых реактивов и приборов, детальное изложение техники определения и способа расчета результатов анализа. Государственные стандарты на химические реактивы, аппаратуру и приборы периодически изменяются в связи с истечением срока годности, поэтому описание текущей нормативно-технической документации на реактивы и приборы вынесено в Приложение.

Предусмотрено, что при использовании всех методик пробы отбирают в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов», утвержденными 21.08.79 № 2051-79.

При определении остаточных количеств пестицидов необходимо руководствоваться Правилами устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) системы здравоохранения, № 2455-81 от 20.10.81.

В связи с важностью получения сопоставимых данных об остаточных количествах пестицидов для решения вопросов о возможности и путях реализации продукции растениеводства по назначению во втором томе приведены методические указания по контролю уровней и изучению динамики содержания пестицидов в почве и растениях, а также перечень утвержденных санитарно-гигиенических норм максимально допустимых уровней содержания пестицидов в пищевых продуктах (МДУ) и предельно допустимые концентрации пестицидов (ПДК) в почве и воде.

Книга предназначена для работников лабораторий, занимающихся контролем остаточных количеств пестицидов. Она полезна агрономам, врачам, биологам, химикам и другим специалистам, занятым защитой растений, охраной окружающей среды, профилактикой неблагоприятного воздействия пестицидов на население.

Утверждено 10.10.79

ЕДИНЫЕ ТРЕБОВАНИЯ К МЕТОДИКАМ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ И ОБЪЕКТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ {МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ)

Настоящие методические указания распространяются на методики определения содержания пестицидов в продуктах питания, воде, почве, кормах, биологическом материале, воздухе.

Указания устанавливают единые требования к построению, содержанию, изложению нормативных документов (аттестатов, технических условий, методических указаний) на методики определения содержания пестицидов в продуктах питания, кормах и объектах внешней среды.

требования к приборам, реактивам, к подготовке и проведению анализа, обработке результатов, метрологическому обеспечению.

Общие положения. Нормативные документы на методики определения содержания пестицидов в пищевых продуктах, кормах и объектах природной среды должны соответствовать современным требованиям нормативно-технической документации, принятым в нашей стране и международных организациях.

В документы нужно включать современные методы, проверенные в экспериментальных и производственных условиях, имеющие метрологическое обеспечение. Следует предусматривать использование приборов, прошедших государственные испытания, внесенных в Государственный реестр и выпускаемых серийно, а также приборов, требования к которым установлены в Государственных стандартах и нормативно-технической документации. Целесообразно предусматривать приборы с регистрацией показаний в форме, пригодной для статистической обработки, в том числе с выходом на вычислительные устройства.

В методики определения содержания пестицидов в пищевых продуктах, кормах и объектах окружающей среды необходимо включать аналогичные по точности дублирующие методики для повышения достоверности идентификации и для того, чтобы можно было использовать имеющиеся приборы.

В методики следует включать требования по обеспечению безопасности труда и производственной санитарии.

Срок действия временных нормативных документов устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.

Единые требования к методикам. Нормативный документ должен содержать вводную часть и следующие разделы: «Краткая характеристика препарата*, «Принцип метода*, «Метрологическая характеристика метода*, «Избирательность метода*, «Реактивы и растворы*, «Приборы и посуда*, «Подготовка к определению*, «Ход анализа*, «Обработка результатов анализа*, «Требования безопасности*.

В заглавии должны найти отражение наименование пестицида, объекты анализа и принцип метода определения (например, «Методические указания по определению хлорорганичсских пестицидов в почве хроматографическим методом*).

Вводная часть должна отражать назначение и область применения методики (или методик). Она должна содержать:    характеристику

действующего вещества (или действующих веществ); общепринятое название (Common name) и название по Госту; химическое название; структурную и эмпирическую формулы, молекулярную массу; синонимы или торговые названия; физические и химические свойства - цвет, запах, температуру кипения, упругость паров, стабильность, растворимость в воде и основных органических растворителях, коэффициенты распределения (если они известны); допустимую суточную дозу, максимально допустимые уровни и предельно допустимые концентрации; особые токсические свойства (возможность образования метаболитов с большей токсичностью и их характеристика); область применения пестицида; группу пестицида и перечисление культур, на которых его применяют (например, послсвсходовый гербицид на посевах картофеля).

Раздел «Принцип метода* должен отражать принцип, на котором основана методика, с указанием основных параметров определения и

6

возможности определения основных токсических метаболитов (например: «Методика основана на хроматографировании ДДТ и его метаболитов ДДД и ЯДЕ в тонком слое силикагеля в системе гексан - ацетон после экстракции из увлажненной почвы смесью растворителей н-гсксан -ацетон и очистки экстракта концентрированной серной кислотой»).

Если действующее начало определяется в сумме с его токсическими метаболитами, следует их перечислить.

Раздел «Метрологическая характеристика метода» должен отражать следующие параметры: диапазон определяемых концентраций; предел обнаружения в мкг; предел обнаружения в мг/кг, мг/л или мг/м³ (пределы обнаружения, кроме оговоренных специально случаев, нс должны превышать МДУ или ПДЮ; среднее значение определения стандартных количеств пестицидов в пробе в % (для установления процента определения на различных культурах следует проводить анализ типичных представителей, а в случае узкой области применения пестицида — на тех культурах, для которых предназначен пестицид; число параллельных определений (л) нс должно быть менее 5); стандартное отклонение; относительное стандартное отклонение; доверительный интервал среднего (при р = 0,95 и п » 5).

Среднее значение определения стандартных количеств и доверительный интервал среднего приводятся для трех концентраций: равной МДУ; равной удвоенному пределу обнаружения; равной половине МДУ (ПДК), если она выше предела обнаружения или, сети МДУ (ПДК) нс установлены, для трех концентраций в определенном диапазоне концентраций.

В разделе «Избирательность метода» характеризуют избирательность метода в присутствии пестицидов, близких по химическому строению и области применения. Если имеются мешающие определению примеси, дают (по возможности) их описание и указывают концентрацию, с которой начинает сказываться их влияние.

Раздел «Реактивы и растворы» должен содержать перечень применяемых реактивов и материалов с указанием степени их чистоты в соответствии с существующими стандартами, научно-технической документацией, а также растворов с указанием сроков хранения и необходимого количества.

В методиках гззохроматографичсского определения остаточных количеств пестицидов должны быть указаны типы хроматографа и детектора и его селективность; материал, длина и диаметр хроматографической колонки.

В методиках по определению остатков пестицидов методом тонкослойной хроматографии должны быть указаны размер пластинок, толщина слоя, марка сорбента и его зернение.

В методиках по определению остатков пестицидов оптическими методами должны быть указаны тип прибора, тип и размеры кювет и тип катодной лампы (атомно-абсорбционная спектрофотометрия).

Раздел «Подготовка к определению* должен содержать требования ко веем подготовительным работам, предшествующим определению остаточного количества пестицидов: приготовлению стандартных, градуировочных и других растворов с указанием сроков их хранения; очистке растворителей; приготовлению хроматографических пластинок и наса-

док; кондиционированию хроматографических колонок; построению градуировочных графиков.

При использовании способов очистки растворителей, отличающихся от общепринятых, должно быть дано подробное их описание.

Раздел должен содержать требования к установке и подготовке всех средств определения в соответствии со стандартами и научно-технической документацией, с учетом требований безопасности.

Установление зависимости аналитического сигнала от содержания определяемого вещества, построение градуировочного графика необходимо проводить в соответствии со стандартами и Научно-технической документацией на приборы.

Раздел «Ход анализа» должен содержать конкретные, подробные сведения о порядке выполнения всех операций по определению содержания остаточных количеств пестицидов в отобранных пробах пищевых продуктов, кормах, воде, почве.

Раздел должен содержать следующие подразделы: «Озоление, гидролиз пробы» (в случае необходимости), «Экстракция и очистка экстрактов» и др.

В методиках определения микроколичеств пестицидов методом газовой хроматографии стел уст приводить условия хроматографирования, а именно: необходимые газы и скорости их потока (мл/мин); температура термостата колонки, детектора, испарителя (°С); вводимые в испаритель объемы упаренных экстрактов; время удерживания - абсолютное и относительное (среднее из трех определений); способ построения градуировочного графика; линейный динамический диапазон детектирования; способ количественного определения.

В методиках определения остаточных количеств пестицидов хроматографией в тонком слое нужно приводить способы приготовления хроматографических пластинок: условия нанесения пробы на пластинку; условия, хроматографирования; вид хроматографической камеры; подвижная фаза; способ и степень насыщения парами подвижного растворителя; длина пробега растворителя; проявляющий реактив; способ обработки хроматограмм (нагревание, облучение УФ-евстом и т.п.); величина п (среднее из 5 определений); способ количественного определения. При использовании денситометра приводятся его основные параметры.

При фотоколориметричсском и спсктрофотометричсском определениях способ приготовления градуировочных растворов должен быть представлен в виде таблицы и указана длина волны, при которой измеряется оптическая плотность градуировочных растворов.

Для повышения надежности идентификации пестицидов методика должна включать альтернативные способы очистки экстракта. Методика газохроматографического определения остаточных количеств пестицидов должна включать анализ нс менее чем на двух хроматографических колонках, заполненных неподвижными фазами различной полярности. Методика определения остаточных количеств пестицидов методом тонкослойной хроматографии должна включать, как правило, альтернативные условия хроматографирования (разные сорбенты, проявляющие реагенты, не менее двух подвижных растворителей).

Раздел «Обработка результатов анализа* должен содержать сведения по обработке полученных данных и расчетные формулы. Содержание

S

остатков пестицидов в анализируемой пробе вычисляют как среднее из двух-трех параллельных определений. Результаты определения остаточных количеств пестицидов по действующему началу суммируют с результатом определения токсичных метаболитов в пересчете на исходное действующее вещество.

Содержание токсичных метаболитов в анализируемом субстрате определяют раздельно от исходного действующего вещества в том случае, если для них утверждены максимально допустимые уровни остаточных количеств.

Раздел «Требования безопасности» должен содержать специальные правила безопасности при выполнении операций определения содержания остаточных количеств и соответствовать «Правилам устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Минздрава СССР» № 2455-81 от 20.10.81.

В методических указаниях должны содержаться сведения об авторе или авторских коллективах, принимавших участие в разработке методики (фамилия, и., о., место работы).

Если в разработке методики принимало участие несколько авторских коллективов, то их нумерация приводится в тексте методики в соответствующих разделах арабскими цифрами, а ссылки даются в скобках.

Сети какая-либо часть методики утверждалась ранее, то следует указать номер утверждения и дату.

Для разработки методики определения микроколичеств пестицидов

9