государственная комиссия по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями РАСТЕНИЯ И СОРНЯКАМИ ПРИ мех СССР

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОДЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОЗ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВКЕшНЕЙ СРЕДЕ

Часть XI

Москва - 1961

Государственная комиссия по химичеоким средствам борьбы вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Чаоть Х1-я

Данные методики апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы о вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР

Москва - 1981

Стр.

6* Методические указания по определению остаточных количеств рицида "П" в рисе и водо газожидкостной

хроматографией -................. 93

7. Методические указания по определению матилнитрофооа,

фенитрооксона и п-нитрокреаола в зерне и продуктах переработки зерна методом хроматографии в тонком

слое....................... ЮЗ

8. Энзимно-хроматограбический метод определения фоо-фороргэничоских пестицидов в раотителышх продуктах и биосуОстратах .................. 109

тонком слое.................... 118

2.    Методические указания но определению остеточных ко

личеств гербицида малорано в почвах о различным содержанием гумуса методом TGX........... 124

3.    Методические указания по определению остаточных количеств HE-I66 в огурцах хроматографией в тонком

сдое и фотометрическим методом .......... 129

4.    Методические указания по определению остаточных количеств теидекса в воде и почве.......... 136

5.    методические указания по опр делению ФДН    -ди-

ывтмл-Ж-(З-хлорфонил)-гуанидиаа) в огурцах и воде методом тонкослойной    хроматографии ........ 139

6.    Методические укззаиия по определении дитана М-45 в

продуктах питания растительного происхождения и воде ........................ 149

П. Гетероциклические соединения

7.    Методические указании но определению базаграна в

воде, почве, зерне и    растительном    историале ....    152

УЪ

Cip,

6. Uti то диче окне указания по определению фунгицида бай-летона методом ТСХ в почве, корнях,зеленых листьях,

плодах томатов и огурцов..........’.    .    .    159

9. Методические указания по газохидкостно-хроматографическому определению бентазона в почве ч растениях 166

10.    Методические указания по определению диквата в се

менах подсолнечника и масле из семян подсолнечника опектрофотометричеоким методом .......... 174

11.    Методические указания по определению метазина в во

де, почве, овощах и биологическом материале методом хроматографии в тонком одое сорбента....... 181

12. Методические указания по определению остаточных количеств симм-триазиновых гербицидов (симазинэ, ат-разина, проказина, промо трина, семерона, меэорэни-ла, метазина, метопротрина) в почве гээожидкоотной

хроматографией .................. 188

13.    Мотодичеокие указания по определению котофора в семенах хлопчатника методом хроматографии в тонком

слоо....................... 198

14.    Мотодичеокие указания по определению ронстэрт (ок

сидна зона) в рисе методами газовой и тонкослойной хроматографии ................... 205

15.    Методические указания по определению тачигьренэ в

вода методом тонкослойной хроматографии ...... 209

1C Методические указания по определению тербацилэ в эфирных маолэх и эфиромасличном сырье методом газожидкостной хроматографии ............. 214

17.    Мотодичеокие указании по определению трифорииэ в

воде....................... 220

18.    Методические указании по определению остаточных ко

личеств текто(тиабанда зола) в картофеле и свекле тонкослойной хроматографлей............ 227

19.    Методические указания но определению остаточных ко

личеств фона зоне в почве, воде, свекле и растительных обьоктах газожидкостной    хроматографией ....    234

Прочие пеотигиды

I. Методические указания по определению остаточных.

количеств хлората магния полярографическим ue-wov ••• 2чЗ

2.    Методические указания по определению нортроаа в

ьодо, черноземной почве и сахарной свекле ............ 2**8

3.    Методичеокие указания по определению содержания

общой ртути в **чсе, яйцах, рыбе, молочных продуктах, ПОЧВ", .....*..................................Zj'J

Бактериальные пестициды

1.    ?Летодические указания по определению микробиологи

ческих инсектицидов не прямым иммунофлюореогентним методом ..............................................268

2. U*годические указания по определению виталичина А

j воздухо м'етодом тонкослойной хроматографии.........276

3* Методические указания по определению полиэдров» вируса ядерного полиэдроза капустной совки на растительных объектах иыыунофлюоресцентным методом ....... 260

тов в воде, почве и растительном материале ......... 289

2. Методические указания по ^пределе*чю актеллика

растительной продукции, почве и воде ................. 296

Настоящие методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-иоследователь-ских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токоикологичеоких лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других Министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пео-тицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде*

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомио-сии по химическим средствам борьбы о вредителями, болезнями растений и оорнпками при МСХ СССР. (Председатель группы экспертов М.А.Клисенко).

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования оанэпидслужбы ИМПиТМ им.Е.И.Ыарциновокого и лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минэдрава СССР.

УТШаШ

Замэотитель Главного госудаиот-венного овнитерного врача СССР

А«И.Зайченко и 28 „ января    _{1980 г>}

к? 2Ш-&0

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

по определению полихлорированных бифенилов в присутствии хлорорганических пестицидов в птице продуктах методом газовой хроиатогрвфии

1.    Физико-химические свойства полихлорированных бифенилов изложены в сборнике "Методические указания по опре, .лению микроколичеств пеотицидов в продуктах питания, кормах и внешней среда”, часть IX, с. 1-2.

2.    Методика определения полихлорированных бифенилов в пти-цопродуктах гаэохроматогрэфическим методом

2.1.    Основные положения

2.1.1.    Принцип методе

Метод основан на экстракции полихлорированных бифенилов (ПХБ) и хлорорганических пеотицидов (ХОП) из пробы органическими растворителями с последующей сернокислотной очисткой, щелочном дегидрохлорировании и количественном определении методом газожидкостной хроматографии на хроматографе о детектором по захвату электронов.

2.1.2.    Метрологическая характеристика метс,.з

Пределы обнаружения ПХБ и ХОГ1 при их совместном присутствии в желтках яиц - 0,600 и 0,005-0,060 мг/кг соответственно, в курином жире - 0,500 и 0,004-0,050 ыг/кг соответственно.

Среднее значение определения стандартных количеств ПХБ из 5 параллельных определений: в яичном желтке -77-8, в курином жире 70 * 5.

45

2.2.    Реактивы к растворы

Гексан, х.ч.

Петролейный эфир (температуре кипения 40-70°С).

Ацетон, х.ч»

Указанные растворители должны быть хрометографичеони чистыми. Для проверки чистоты реактивов необходимо проводить бланковые опыты.

Киолота,серная, х.ч., уд.вео 1,84 (нэпосредственно перед у потреб те кием экстрагированная ге коане*-).

Сернокиолый натрий, безводный, х.ч., экстрагированный гексаном и прооушенный при температуре 150°С в течение 5 ч.

Едкое кали плавленый (в твблетнэх), предварительно экстрагированный гекоаиом.

ЭТИЛОВЫЙ ОПИрТ, %,4/Р-НЫЙ.

Дистиллированная вод.-..

Стандартные растворы ПХБ в гексане: основасй раотвор, содержащий в I мл I мг ПХБ; рабочий раствор, содержащий в I мл 3 мкг ПХБ.

Стандартные растворы оме .ее* ХОП в гексане: основной раотвор, содержащий в I мл 100 мкг ДДТ, ДДЭ и ДДД и 20 мкг гамма-ГХиГ; рабочий раотвор, содержащий в I мл 0,1 мкг ДДТ, ДД9 и ДДД и 0,02 мкг гамма-ГХЦГ.

Носитель - хрома тон Л/- к\Л/ - ДМС^ .

Неподвижная фаэо - метилсиликон S Б-30 (5%).

Вата обезжиренная, промытая эфиром и гексаном.

2.3.    Приборы и посуда

Газовый хроматограф ^пЦвет-104^и с дотектором по захвату электронов.

Микрошприц с микрометром на 20 мкл.

Колонка стеклянная: длина 2 м, диаметр 3 мм.

Роторный испаритель.

иикроизмельчитоль тканей рТ-2.

Бани водяные.

Аппарат для встряхивания жидкостей.

Градуированные пробирки не 10 мл.

Колбы конические плоскодонные с притертыми пробками на 10 и 250 мл.

46

Целительные во;ч>нки на 100 и 250 мл.

Колбы мерные на 50 и 100 мл.

Мерные ци-.индры на 10 и 50 мл.

Колбы круглодоныые на 150 и 500 мл.

Обратный водяной холодильник Либихе на шлифах.

Пипетки на 2 и 5 мл.

Воронки химические диаметром 3 и 10 см.

Стаканы химические на 150 мл.

2.4.    Подготовка к определении

Жир средней пробы (200-250 г) вытапливают и отделяют от стромы. Среднюю пробу желтка яиц готовят из 10 штук яиц, смешивая на микроизмелъчителе тканей до )бразования гомогенной мэо-оы.

2.5.    Проведение определения

'*•.5.1. Желтки яиц

От средней пробы берут 10 г желтка и помещают в ксничеокую колбу на 250 мл. В колбу добавляют 100 мл ацетона и встряхивают в течение I ч на аппарате для встряхивания. Затем экотракт фильтруют в круглодонную колбу на 500 мл через воронку о обезжиренной ватой. Остаток в колбе промывают небольшими порциями ацетона (2 х 15 мл) и сливают черев воронку в ту же колбу. Из объединенных экстрактов отгоняют ацетон в роторном испарителе при температуре бани 20-25°С. Из оставшейся в колбе жидкой фазы ПХБ и ХОП экстрагируют двумя порциями гексана по 20 мл, вотря-хивая каждый раз колбу в течение 5 мин и разделяя олои о помощью делительной воронки. Объединенный гексановый экстракт переносят в делительную воронку и прибавляют осторожно 20 мл серной кислоты, затем сернокислотный слой отбрасывают и в делительную воронку прил. вают новую* порцию оерной киолоты. Операцию очистки повторяют до тех пор, пока сорная кислоты не станет бесцветной, причем на последующих стадиях необходимо перемешивание в делительной воронке слоев гексенового экстракта и серной кислоты. Очищенный гексановый экстракт промывают дистиллированной водой до нейтральной реакции промывных вод и переносят в хиыичеокий стакан для сушки безводным сульфатом натрия. Подоушейный экстракт перекосят в круглодонную колбу, сульфат натрия промывают гексаном (2 х 10 мл), и смывы объединяют в круглодонной

47

колбе. Гекоан упаривают на роторном испарителе до 2-3 мл, количественно, о помощью пиперки переносят в градуированную пробирку и доводят до метки 4 мл (экстракт k? I). Затем проводят обработку спиртовой щелочью. Для того 2 мл экстракта й? I помещают в коническую колбу емкостью 10 мд, снабженную обратным водяным холодильником, добавляют 0,4-0,5 г (четыре лепешки) едкого кали, 2 мл этилового спирта и смесь нагревают в течение 30 мин с моменте растворения едкого кали при температуре 55-58°С и перемешивании на магнитной мешалке. После охлаждения смось количественно поренооят в делительную воронку и добавляют 4 мл воды для разделения слое*. Водно-спиртовой слой отбрзсывзют, а гексановый промывают 2 мд I^-ной серной кислоты, водой до нейтральной реакции промывных во", оушат, фильтруя в градуированную пробирку через воронку с 3 г предварительно смоченного гекоаном сульфата натрия. После фильтрации сульфат натрия промывают 2 мл гекоана и отжимают стеклянной пробкой. Гексановый экстракт упаривают до 2 мл (экстракт V* 2).

2.5.2.    Куриный жир

10 г топленого куриного жира растворяют в 40 мл гексана, помещают раствор в делитольную воронку, проводят очистку концентрированной серной кислотой и все последующие стадии так, как описано выше для яичного желтка.

2.5.3.    Хроматографирование

Аликвотные части экстрактов й I и ft 2 последовательно вводят в хроматограф при идентичных условиях хроматографирования.

Рабочие параметры: температура колонки 180°С, тэмпорэтурэ испарителя 250°С, температура дотектора 250°С. Расход газа на колонку 75-80 мл/мин, расход газа на детектор ПО-115 мл/мин.

Для проведения количественного анализа необходимо построить калибровочные графики для смеси ПХБ (по сумма высот пиков Б°,

С°, Д°) и для каждого пестицида. Для этого в хроматограф инжектируется 0,25; 0,50; 1,00 и т.д. мкл стандартных растворов ПХБ и ХОП. Затем строят график зависимости величин высот ников чДля ЛХБ, гамыа-ГХДГ и ДДЭ) и величин площадей пиков (для ДДТ и ДДД) от суммарного количества введенного в хроматограф ПХБ или каждого пестицида. Затем по сумме высот пиков Б^, (г и (рио. I) с помощью калибровочного графика находят соответствующее этой сумме количество ПХБ.

48

л¹

*

Б¹- *»,*' - АДД ♦ изомер ПХБ (Б°);

С' - изомер ПХБ (С°) ; А* - ДАТ ♦ изомер ПХБ (А⁰). I* - 10* - изомеры ПХБ.

б) Хроматограмма экстракта ► 2 (пунктирная линия)

А¹- *• •**' - АДЭ (исходная) ♦ ДДЭ, образовавшееся при щелочном дегидрохлорировании Ч.Ч⁴'- ДАТ ♦ изомер ПХБ (A⁰); B^z, Cⁱn Д^х- пики изомеров ПХБ.

W

2.6. Обработка результатов анализа

Содержание ПХБ в анализируемом образца находят по формула

А . V/o

X а - —    МГ/КГ ,

Vi • f

где А - количество вещества, найденного по графику, нг; l/j - объем пробы, инжектируемой в хроматограф, мкл; п. - вес анализируемой пробы, г; j^2 " объем экстракта К? I, мл.

Оо этой же формуле находят содержание }С0П. В состав оме си ПХБ не входят вещеотва, мешающие определению гамма-ГХЦГ. По хроматограмме экотрактэ k? I находят высоту пика гамма-ГХЦГ, а затем по калибровочному графику - соответствующую величину А.

Пики Ш и ДДТ накладываются на пики ПХБ, при этом получаем широкие суммарные пики Ъ* и Д*. Для расчета содержания ДДТ (ДДД) из площади пика Д* (Б¹) (см. рио. I) вычитаем площадь пика Д²(б²). по разности площадей но графику находим величину А,

Содержание ДДЭ находят следующим образом: определяют значение соотношения пиков А°/С° на хроматограмме стандартного раствора ПХБ (рис. 2), используя это значение находят вклад высоты пика ПХБ в пик ДДЭ, умноиая величину соотношения пиков А°/С° на выооту пика С^(см. рис. I) и вычитая полученное значение из высоты пика А*, получаем значение выооты пика исходного ДДЭ, по которому на калибровочном графике находят соответствующее значение содержания ДДЭ (нг).

3. Требования безопасности

Необходимо соблюдать правила безопасности, принятые для работы о ЛВЖ и ядовитыми веществами.

Настоящие мотодичоокие указания разработаны Перетодчи-ным Н.В. и Фоу.новой О.С. (ВШШ птицеперерабатывающей промышленности НПО "Комплекс").

50