государственная комиссия по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями РАСТЕНИЯ И СОРНЯКАМИ ПРИ мех СССР

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОДЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОЗ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВКЕшНЕЙ СРЕДЕ

Часть XI

Москва - 1961

Государственная комиссия по химичеоким средствам борьбы вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Чаоть Х1-я

Данные методики апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы о вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР

Москва - 1981

Стр.

6* Методические указания по определению остаточных количеств рицида "П" в рисе и водо газожидкостной

хроматографией -................. 93

7. Методические указания по определению матилнитрофооа,

фенитрооксона и п-нитрокреаола в зерне и продуктах переработки зерна методом хроматографии в тонком

слое....................... ЮЗ

8. Энзимно-хроматограбический метод определения фоо-фороргэничоских пестицидов в раотителышх продуктах и биосуОстратах .................. 109

тонком слое.................... 118

2.    Методические указания но определению остеточных ко

личеств гербицида малорано в почвах о различным содержанием гумуса методом TGX........... 124

3.    Методические указания по определению остаточных количеств HE-I66 в огурцах хроматографией в тонком

сдое и фотометрическим методом .......... 129

4.    Методические указания по определению остаточных количеств теидекса в воде и почве.......... 136

5.    методические указания по опр делению ФДН    -ди-

ывтмл-Ж-(З-хлорфонил)-гуанидиаа) в огурцах и воде методом тонкослойной    хроматографии ........ 139

6.    Методические укззаиия по определении дитана М-45 в

продуктах питания растительного происхождения и воде ........................ 149

П. Гетероциклические соединения

7.    Методические указании но определению базаграна в

воде, почве, зерне и    растительном    историале ....    152

УЪ

Cip,

6. Uti то диче окне указания по определению фунгицида бай-летона методом ТСХ в почве, корнях,зеленых листьях,

плодах томатов и огурцов..........’.    .    .    159

9. Методические указания по газохидкостно-хроматографическому определению бентазона в почве ч растениях 166

10.    Методические указания по определению диквата в се

менах подсолнечника и масле из семян подсолнечника опектрофотометричеоким методом .......... 174

11.    Методические указания по определению метазина в во

де, почве, овощах и биологическом материале методом хроматографии в тонком одое сорбента....... 181

12. Методические указания по определению остаточных количеств симм-триазиновых гербицидов (симазинэ, ат-разина, проказина, промо трина, семерона, меэорэни-ла, метазина, метопротрина) в почве гээожидкоотной

хроматографией .................. 188

13.    Мотодичеокие указания по определению котофора в семенах хлопчатника методом хроматографии в тонком

слоо....................... 198

14.    Мотодичеокие указания по определению ронстэрт (ок

сидна зона) в рисе методами газовой и тонкослойной хроматографии ................... 205

15.    Методические указания по определению тачигьренэ в

вода методом тонкослойной хроматографии ...... 209

1C Методические указания по определению тербацилэ в эфирных маолэх и эфиромасличном сырье методом газожидкостной хроматографии ............. 214

17.    Мотодичеокие указании по определению трифорииэ в

воде....................... 220

18.    Методические указании по определению остаточных ко

личеств текто(тиабанда зола) в картофеле и свекле тонкослойной хроматографлей............ 227

19.    Методические указания но определению остаточных ко

личеств фона зоне в почве, воде, свекле и растительных обьоктах газожидкостной    хроматографией ....    234

Прочие пеотигиды

I. Методические указания по определению остаточных.

количеств хлората магния полярографическим ue-wov ••• 2чЗ

2.    Методические указания по определению нортроаа в

ьодо, черноземной почве и сахарной свекле ............ 2**8

3.    Методичеокие указания по определению содержания

общой ртути в **чсе, яйцах, рыбе, молочных продуктах, ПОЧВ", .....*..................................Zj'J

Бактериальные пестициды

1.    ?Летодические указания по определению микробиологи

ческих инсектицидов не прямым иммунофлюореогентним методом ..............................................268

2. U*годические указания по определению виталичина А

j воздухо м'етодом тонкослойной хроматографии.........276

3* Методические указания по определению полиэдров» вируса ядерного полиэдроза капустной совки на растительных объектах иыыунофлюоресцентным методом ....... 260

тов в воде, почве и растительном материале ......... 289

2. Методические указания по ^пределе*чю актеллика

растительной продукции, почве и воде ................. 296

Настоящие методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-иоследователь-ских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токоикологичеоких лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других Министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пео-тицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде*

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомио-сии по химическим средствам борьбы о вредителями, болезнями растений и оорнпками при МСХ СССР. (Председатель группы экспертов М.А.Клисенко).

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования оанэпидслужбы ИМПиТМ им.Е.И.Ыарциновокого и лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минэдрава СССР.

"утаздлю"

Заместитель Главного Государственного санитарного врача СССР

А.И.Зайченко

28 января 1980т    #    2133    -80

Методические указания по определению метилнитрофоса, фепитрооксона и п-нитрокрезода в зерне и продуктах переработки зерна методом хроматографии в тонком слое

I .Краткая характеристика действующих веществ Метилнятрофос - 0,0-диметил-0-(3-метил-4-иитрофеннл) -тиофосфат

Синонимы: метатпоп, сумлтион .фенитротис л, фол атион, польовадофос, вататион, дянатион, hodotjioh, препарат 56G0Q, Байер 41813, агратнон-20.

Химически чистый продукт - светлая жидкость со слабым непрлятнш-! запахом. T_f;Mn 95°С при 0,1 т рт.ст.;шготность 1,303; коэффициент преломления 1,5505; даапенпе паров при 20°С - 6.10“^ мм рт.ст.; летучесть 0,82 иг/при 20° С; 2,33 мгЛг при 30°С; 6,11 мг/м'* при 40°С; растворимость в воде окаю 30 ?*г/л, хорошо растворяется в <5олышшс?пе органических растворителей.

Препарат гидролизуется в щелочной среде ( в 0,1 и, NaOH при 30°С период полураспада 12 мин). При нагревании вше 100°С пзомсризуется и может разлагаться со взрывом.Хранить препарат необходимо в эмалированной или стеклянной таре,железо сиособствует разложению препарата. Выпускается в форме 30 &-пого к.з. я 50 % -иого к.э.

H^TJ< в воздухе рабочей золи 0,1 мг/м*⁵. ДОК в полевых культурах утверждены 0,1 мг/кг. В настоящее время ре кем* до-вал*? ДОК в зер.че I мг/кг, муке 0,3 мг/кг, хлебе 0,1 мг/кг.

ЮЗ

Применяется в качестве контактного инсектицида и акари-цида для борьбы с вредителями овощных, технических, плодовых культур, обработки незагруженных зернохранилищ, рекомендован для обработки зерна.

Фенитрооксоп - 0,О-диметил-О- (3-метил-4-нитрофенил) -фосфат- токсический метаболит метилнитрофоса

^C9**I2⁰6^^P

Относ, мол. масса 261,1

В чистом виде - светлая жидкость со слабым неприятным валахом.

П-нитрокрезол - 3 метил-4-ыитрофенол

Мол.масса 153

В чистом виде - кристаллическое вещество светло-s злтого цвета, 129°С. Трудно растворим в воде, хорошо - в эфире, этаполе.

2. Методика определения метилнитро^са и его метаболитов (фенитрооксона, п-птрокрезола) шмуке, хлебе, отрубях

методом хроматографии в тонком слое

2.1,    Основные положения

2.1.1.    Принцип метода

Метод основан на извлечении метилнитрофоса и его мета-

oCDHtt

болитов - фенитрооксона и п-нитрокрезола Итз^муки, хлеба,* отрубей смесью органических растворителей (н-гексан - диэтило-вый эфир 7:3), спиртовой очистке с вымораживанием и определения их методом хроматографии в топком слое с проявлением по нитрогруппе. Чувствительность определения метилнитрофоса и фенитрооксона 2 мкг (0,1 мг/кг), п-нитрокрезола 0,1 мкг (0,005 мг/кг). Величина Rf метилнитрофоса, фенитрооксона, п-нитрокрезола - 0,43^0,02; 0,24*0,03; 0,15*0,02 соответственно. Определению метилнитрофоса мешает присутствие метафо-са (Rf = 0,42). Для идентификации этих соединений используется метод Л\Х.

ТО*

2.1.2,    Метрологическая характеристика метода:

-    Диапазон определяемых концентраций 2-50 мхг ыетилпитро-фоса, фенитрооксона, 0,1-20 мкг п-нитрокрезола в анализируемой пробе.

-    Предел обнаружения метилпитрофоса и фенитрооксона 2 мкг (0,1 мг/кг), п-нитрокрезола 0,1 мкг (0,005 мг/кг).

-    Размах варьирования для метилпитрофоса 65-9C# в пределах концентрации 0,2-1 мг/кг (для хлеба 50-75^ при концентрации 0,1 мг/кг);фенитрс жсона 69-85>6 в пределах концентраций 0,2-1 мг/кг; п-нитрокрезола 79-67^ в пределах концентраций 0,05-0,5 мг/кг.

-    Среднее значение определения стандартных количеств ме-тнлкитрофоса 72£ (в хлебе 6IJ6), фенитрооксона 75/6, п-нитрокрезола 83J6.

-    Стандартное отклонение для метилпитрофоса 9,6; фенитрооксона 8,2; п-нитрокрезола 6,8.

-    Относительное стандартное отклонение для метилнитро^оса 0,13; фенитрооксона 0,11; п-нитрокрезола 0,08.

-    Доверительный интервал среднего при р=0,95 и п=5 для метилпитрофоса 72*11,456; фенитрооксона 75*9,9#; п-нитрокрезола 83*8,2%.

2.1.3.    Определению метилпитрофоса мо ;т мешать метафос, имещий близкое значение 1\у = 0,40*0,02. Для идентификации в этом случае может быть рекомендован метод П£Х.

2.2. Реактивы и материалы Н-гексан, х.ч,

Диэтиловый эфир медицинский Ацетон, х.ч.

Этиловый спирт ректификат Натрий сернокислый безводный, х.ч.-Фильтры бумажные (красная лента)

Силикагель КСК, раздробленный и просеянный через сито 100 меш

Кальций сернокислый (Са50₄*2 Н₂0), прокаленный 6 часов при 160°С

Цинковая пиль

П-днметиламинобензалъдегид, х.ч.

Уксусная кислота, ледяная

105

Проявляющий реактив: axSSjfxjHUErjrap 0,25^-ный раствор п-диметиламннобенэальдегида в этаноле. Хранят в темной склянке. Раствор перед обработкой пластинок смешивают в соотношении 10:1 с ледяной уксусной кислотой.

Стандартный раствор: готовят основные стандартные растворы а).метилнитрофоса 500шсг/мл (50 мг МИФ растворяют в : хетоя* в мерной колбе емкостью 100 мл), б) фенитрооксопа 500 мкг/мл 1,50 мг - в ацетоне в 100 мл мерной колбе),

в$ п-нитрокрезола 100 ыхг/ил (10 мг - в ацетоне в 100 мл мерной колбе). Из основных стандартных растворов готовят рабочий раствор, содержащий по 100 мкг/мл метилнитрофоса и фенитроок-сона и 10 мкг/мл п-ннтрокрезола (20 мл раствора "а" + 20 мл раствора "б" + 10 мл раствора "в" вносят в мерную колбу емкостью 100 мл и доводят до метки ацетоном/.

2.3. Приборы, посуда, аппаратура 2.3Л. Для вкс.'ракцин

Колбы конические плоскодонные с пробками, емкостью 250, 100 мл

Воронки фильтровальные диаметром 5 ом

Ротационный испаритель с набором колб емкостью 50 и IOCtax

Колбы мерные емкостью 100 мл

Пробирки мерные на шлифах, емкостью 5 мл.

2.3.2. Для аналитического определения Пластинки стеклянные размером 9 х 12 см Камера для хроматографирования Пульверизатор стеклянный Камера для опрыскивания

Компрессор иля баллон с азотом или сжатым воздухом я равномерного i )лкоднсперсного опрыскивания пластинок Шшехкн на I мл, 5 мл, 10 мд, £0 мд

Микропипеткж для нанесения стандартных растворов на 0,1-0,2 мл

Капилляры для нанесения проб Термостат СШ-35

2.4 Подготовка к определению.

Для приготовления 5 пластинок берут 14 г силикагеля, 1,5г сернокислого кальция, подготовленного как описано выше, I г

106

цинковой пыли I 40    ьоды. Силикагель о гипсом смешивают в

фарфоровой стуши, прибавляют цинковую пыль и воду и хорошо размешивают до образования однородной массы. 10 г суспензии

наносят на пластинку и равномерно распределяют по поверхности. Сушат пластинки строго в горизонтальном положении в течение 13-20 часов при комнатной температуре, хранят в эксикаторе.

2.5. Опжсание_е опр деления метилнитрофоса, фенитрооксона к п-лтрокрезола B$ytfe, отрубях, х*ебе

2.5.1.    Экстракция

Для проведения исследований отбирается средняя проба зерна муки, хлеба, отрубей весом I кг. Из каждой пробы (хлеб измельчают) для анализа методом квартования отбирается три навески по 20 гI зерно по 50 г).

Пробу заливают 50 мл смеси н-гексая - диэтиловпй эфир 7:3 и оставляют на час, периодически встряхивая. Сливают растворитель через <|яльтр, пробу заливают новой порцией экстрагента и экстрагируют еще час. Объединяют обе порции экстракта, сушат безводным сернокислым натрием в течение 15 мин и переносят в прибор для отгонки растворителей. Упаривают растворитель до объема v I мл под вакуумом на ротационном испарителе при температуре бани не более 45°С, т.к. летучесть метилнитрофоса резко увеличивается с повышением температуры. Остатку растворителя дают испариться на воздухе при комнатной температуре. Сухой остаток растворяют в 5мл этанола и вымораживают при 0°С в течение 30 мин. Выпавшие хлопья отфильтровывают через бумажный фильтр, раствор переносят в пробирку со шлифом емкостью 5 мл, упаривают под вакуумом на ротационном испарителе до ~ 0,3 мл и проводят рпре-деление методом хроматография в тонком слое.

2.5.2.    Хроматография в тонком слое

Остаток из пробирки количественно переносят на хроматографическую пластинку, ополаскивая колбу эфиром. На эту же пластинку наносят три пятна рабочего стандартного раствора в пределах 0,04-0,2 мл, т.е. 4-20мкг МНО и фенитрооксона и 0,4-2 мкг п-нитрокрезола.Помещают пластинку в камеру, в которую за 30 inu до хроматографирования палита смесь н-гексан - ацетон 4:1. После того как фронт растворителя поднимется на 10 см,пластинку вынимаю? из камеры,дают растворителю испариться и опрыскивают

107

пластинку проявляющим реактивом. Термостатируют пластинку при 100-120°С в течение 5-7 мин. Метилнятрофос, фенитрооксон и п-нитрокрезол проявляются в виде желтых пятен на белом фоне о Rj 0,43; 0,24; 0,15 соответственно. Чувствительность определения метилнитрофоса и фенитрооксона 2 мкг, п-нитрокрезола 0,1мкг Количественное определение проводят путем сравнения окраски и измерения площади пятна пробы о окраской и площадью стандартов. Площадь пятен измеряемся с помощью промасленной миллиметровой бумаги. Прямопропорциональная зависимость площади пятна* от концентрации соединений соблюдается до 20 мкг. При большем содержании пестицидов берут аликвотную часть пробы.

2.6. Обработка результатов.

Содержание каждого вещества в пробе рассчитывают по

формуле:

, где

2,7. Настоящие методические указания разработаны

М.В.Письменной, ВНИИ гигиены и токсиколягии пестицидов, полимерных и пластически! масо, г.Киев.

3.    Требования безопасности

Соблюдаются требования безопасности обычно рекомендуемые для работы с химическими реактивами.

4,    Литература

Н.Н.Мельникав, Химия ж технология пестицидов. Изд. "Хи мия", ы. 1974, с. 518.

М.А.Югисенко; Т.А.Лебедева, З.Ф.Юркова, Химический анализ микроколичеств ядохимикатов. Изд. "Медицина", М. 1972, с. 67.

108