государственная комиссия по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями РАСТЕНИЯ И СОРНЯКАМИ ПРИ мех СССР

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОДЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОЗ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВКЕшНЕЙ СРЕДЕ

Часть XI

Москва - 1961

Государственная комиссия по химичеоким средствам борьбы вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Чаоть Х1-я

Данные методики апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы о вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР

Москва - 1981

Стр.

6* Методические указания по определению остаточных количеств рицида "П" в рисе и водо газожидкостной

хроматографией -................. 93

7. Методические указания по определению матилнитрофооа,

фенитрооксона и п-нитрокреаола в зерне и продуктах переработки зерна методом хроматографии в тонком

слое....................... ЮЗ

8. Энзимно-хроматограбический метод определения фоо-фороргэничоских пестицидов в раотителышх продуктах и биосуОстратах .................. 109

тонком слое.................... 118

2.    Методические указания но определению остеточных ко

личеств гербицида малорано в почвах о различным содержанием гумуса методом TGX........... 124

3.    Методические указания по определению остаточных количеств HE-I66 в огурцах хроматографией в тонком

сдое и фотометрическим методом .......... 129

4.    Методические указания по определению остаточных количеств теидекса в воде и почве.......... 136

5.    методические указания по опр делению ФДН    -ди-

ывтмл-Ж-(З-хлорфонил)-гуанидиаа) в огурцах и воде методом тонкослойной    хроматографии ........ 139

6.    Методические укззаиия по определении дитана М-45 в

продуктах питания растительного происхождения и воде ........................ 149

П. Гетероциклические соединения

7.    Методические указании но определению базаграна в

воде, почве, зерне и    растительном    историале ....    152

УЪ

Cip,

6. Uti то диче окне указания по определению фунгицида бай-летона методом ТСХ в почве, корнях,зеленых листьях,

плодах томатов и огурцов..........’.    .    .    159

9. Методические указания по газохидкостно-хроматографическому определению бентазона в почве ч растениях 166

10.    Методические указания по определению диквата в се

менах подсолнечника и масле из семян подсолнечника опектрофотометричеоким методом .......... 174

11.    Методические указания по определению метазина в во

де, почве, овощах и биологическом материале методом хроматографии в тонком одое сорбента....... 181

12. Методические указания по определению остаточных количеств симм-триазиновых гербицидов (симазинэ, ат-разина, проказина, промо трина, семерона, меэорэни-ла, метазина, метопротрина) в почве гээожидкоотной

хроматографией .................. 188

13.    Мотодичеокие указания по определению котофора в семенах хлопчатника методом хроматографии в тонком

слоо....................... 198

14.    Мотодичеокие указания по определению ронстэрт (ок

сидна зона) в рисе методами газовой и тонкослойной хроматографии ................... 205

15.    Методические указания по определению тачигьренэ в

вода методом тонкослойной хроматографии ...... 209

1C Методические указания по определению тербацилэ в эфирных маолэх и эфиромасличном сырье методом газожидкостной хроматографии ............. 214

17.    Мотодичеокие указании по определению трифорииэ в

воде....................... 220

18.    Методические указании по определению остаточных ко

личеств текто(тиабанда зола) в картофеле и свекле тонкослойной хроматографлей............ 227

19.    Методические указания но определению остаточных ко

личеств фона зоне в почве, воде, свекле и растительных обьоктах газожидкостной    хроматографией ....    234

Прочие пеотигиды

I. Методические указания по определению остаточных.

количеств хлората магния полярографическим ue-wov ••• 2чЗ

2.    Методические указания по определению нортроаа в

ьодо, черноземной почве и сахарной свекле ............ 2**8

3.    Методичеокие указания по определению содержания

общой ртути в **чсе, яйцах, рыбе, молочных продуктах, ПОЧВ", .....*..................................Zj'J

Бактериальные пестициды

1.    ?Летодические указания по определению микробиологи

ческих инсектицидов не прямым иммунофлюореогентним методом ..............................................268

2. U*годические указания по определению виталичина А

j воздухо м'етодом тонкослойной хроматографии.........276

3* Методические указания по определению полиэдров» вируса ядерного полиэдроза капустной совки на растительных объектах иыыунофлюоресцентным методом ....... 260

тов в воде, почве и растительном материале ......... 289

2. Методические указания по ^пределе*чю актеллика

растительной продукции, почве и воде ................. 296

Настоящие методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-иоследователь-ских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токоикологичеоких лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других Министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пео-тицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде*

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомио-сии по химическим средствам борьбы о вредителями, болезнями растений и оорнпками при МСХ СССР. (Председатель группы экспертов М.А.Клисенко).

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования оанэпидслужбы ИМПиТМ им.Е.И.Ыарциновокого и лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минэдрава СССР.

"Утверждаю"

5аместителъ Главного государствеиного санитарного враче СССР

А.И.Зэяченко "19"окт*бря 1979г. Я2D92-79

Методические указания по определению котофоре ■ оемеиах хлопчатнике методом хроматография в тонком слое

I. Характеристика анализируемого пестицида

Яотофор, 2-этал--т'лО“-4,в~блс-(изо1трогтул[шино)-симм-триазин, ГС 16068, сшшш.

си

СН₃

N N

Y - ^СН*

Г и %л Z    А/Н-СН

Молекулярная масса 255,39.

Хиюгесскк чистнй препарат представляет собой белый порошок о темперэ турой плавления 104-Х06?С. Трудно растворяется в воде (16 мг/’л), хорошо - в органических растворителях - хлороформе, ацетоне, метаноле».

Технический препарат котофора представляем собой смачивающийся порошок, содержащий 80£ действугаего вещества.

Препарат котофор малотоксичен для теплокровных( для кр*;о ЗЩ_Л 4?Б*>«*/кг, для г/идпей 2300мг/кг), откосится к группе веществ умеренно кумулиру^шпе ( к.^ 2,6).

ДОК кстофора в кокковом* «аоле 4,5мг/кг, в жмыхе - 0,38мг/хг. ТШ ко гофера в вод-з cocxjxftiCT I,Слег/л, а при поступлении в огго-;тгза с водой 5,0 1Л*/л.

Как и прочее симм-тртзЕны кото^ор стоек во внешней среде. В г. л?а и г-оде of сохраняет свою ах мл,кость от 10 до К >*o<vi»od в зависимости or внесенного количества.

»У2

2, Методика определения котофора в семенах

хлопчатника методом тонкослойной хроматографии

2Л. Основные положения 2.1Л. Принцип метода

Методика основана на хроматографировании котофора в тонком слое пластинок "сдлуфол" или тонком слое силикагеля КОК в системе н-гексап-ацетон или четыреххлористый углерод-диэтклошй эфир после экстракции метанолом и очистки экстракта I X соляной кислотой.

2Л.2. Метрологическая характеристика методики

Диапазон определяемых концентраций 0,С6мг/кг-1,0мг/кг. Предел обнаружения Зжг в анализируемой пробе, что соответствует О.Обмг/кг. Среднее значение определения стандартных количеств С = 84$, число параллельных определений Л-=5, дисперсия 28,6, стандартное отклонение J =5,348, величина точного измерения (доверительный пн-тервалИ_09>-._у=5, относительное стандартное отклонение 5,9# (по величине'точного измерения). Среднее значение определения стандартных количеств и доверительинтервал среднего (841 5$ ) приведены для 3-х концентраций, находящихся в определяемом диапазоне концентраций (0,ОЗмг/кг, 0,1мг/кг, 0,2мг/кг).

Определению остаточных количеств котофора в семенах хлопчатника близкие по строению и области применения пестициды (например, прометрин) не мешают.

2.2. Реактивы и материалы

Метиловый спирт, х.ч. ГОСТ 6995-67

Ацетон, ч.д.а. ГОСТ 2603-71

к-Гексан, х.ч. 176-09-3375-73

Хлороформ, ч,д.а. ГОСТ 3160-51

Этиловый эфир, нзркозннй

Углерод четареххлористый, х.ч. ГОСТ 20288-74

Натрий сернокислый безродный, х.ч. ГОСТ 4166-66

Сатакагель КСК , ГОСТ 3956-76, ТУ6-09-2523-72

Кальций сернокислый, ч.д.а. ГОСТ 3210-65

ГромФеноловнй синий водорастворимый, индикатор, *:.д.а.

ТУ 6-09-3719-74

\99

Серебро азотнокислое, х.ч. ГОСТ 1277-75 Лимонная кислота, х.ч, ГОСТ 3652-69 Соляная кислота, х.ч. ГОСТ 3118-67 Натр едкий, х.ч. ГОСТ 4328-66 Фильтры бумажные II,Осм, ТУ6-09-1678-72 Пластинки для хроматографии ^иСилуфол"(ЧССР)

Вата обезжиренная (гигроскопическая)

Вода дистиллированная

Раствор бромфенолового синего в ацетоне-0,4#

Водный раствор азотнокислого серебра-2?»

Водный раствор лимонной киолош-^

Водный раствор соляной кислота-I н Водный раствор едкого натра-1н

Ставдартный раствор котофора х.ч. в хлороформе - ЮОмкг/ыд

2,3, Приборы, аппаратура, посуда

Аппарат для встряхивания жидкости в лабораторной посуде

ТУ 64-I-I08I-73

Шкаф вытяжной химический

ШКаф сушильный электрический общелабораторного назначения ТУ I6-53I-299-7I

Испаритель ротационный ИР-IM, ТУ 25-II-9I7-74

‘Баня водяная ТУ 46-22-608-75

Камера для опрыскивания

Камера для хроматографирования ГОСТ 10565-75

Пульверизатор стеклянный

Воронка делительная на 25Скд ГОСТ 8613-75

Воронки простые конусообразные о коротким сте&леы #5

ГОСТ 8613-75, ТУ 25-II-I06I-75

Колбы лабораторные конические на 25Скл ГОСТ 10394-72 Колбы лабораторные круглодонные короткогорлые на 100мл ГОСТ 10394-72

Колбы мерные о коническим шлифом на 10Олл ГОСТ 1770-74 Капилляры стеклянные

Гашетки с делениями на ICkn ГОСТ 20292-71 Цнкрошшетки па 0,1мл с ценой деления 0,001ш Сыта лабораторное е диаметром отверстий 2 мы Пласлшки стиклшние для шщесеккя тошсого сдоя сорбента 90 х 120ш

Колеи мерные с    шлифом    на ICOQ/ji ГОСТ [Г ГО 74

2:4. Подготовка к опредслелвл

.    4    '    .

2.4.1. Приготовление стандартного и других растворов .

•

Приготовление стандартного раствора. 10 иг котофора х.ч. рйс№ ворлют в 100мл хлороформа'.В 1мл такого раствора содержится IQOfar котофора. Хранят в холодильнике. в плотно закрытой склянке. Срок хранения 3 месяца. Химически чистый котофор модно получить ий .технического препарата. Способ очно тки технического препарата ,« содержащего 8Q£ действующего вещества, заключается ^двукратной;перекристаллизации хлороформа.* Полнота оЧистка контролируется по температуре плавления 104-106*0.

v Приготовление 1л раствора соляной кислоты,. 83мл'Зб£ соляной кислоты (dL« 1Д789Г/СМ³) доводят в мерной¹ колбе ’ до 1л дизталли-рованной водой. Раствор мокло приготовить из фахеанала. Хранить v* ‘ в прохладном месте в плотно закрытой склянке,. Срок хранения 3 месяца. \    *

Приготовление 1н раствора ’едкого натра. 40г едкого натра расту . воряют в дистиллированной воде и доводят до 1л. Рекомендуется ио-пользбвать свежеприготовленные раствора едкого натра. ■ • *    ,    *

Приготовление 0,4^-ноГо раствора бромфенолового синего в аде-топе. 0,4 г броыфенолового синего растворяют в 125,9мл ацетона. Хранят в холодильнике в плотно закрытой склянке. Срок хранения *    ••

2. педели. .

Приготовление 2^-ного водного раствора азотнокислого оеребра.

2г азотнокислого серебра растворяют в 98 ш дйстюхлироваязюй вода. ** Хранят в холодильнике я плотно закрытой склшпсё^:.- Срок хранения I неделя. .

Приготовление проявляющего реактива *Iv Скойпдают равные объемы 0,4^-ного раствора бромфеноловогоеннего' в'айбтонс и 2^-ного водного раствора азотнокислого серебра, рекомендуется свежеприготовленная смебь.    v    .

Приготовлезше 4^-иого водного' раствора лЁмокной кислоты (проявляющий решетив *2). 4г дшдбнной; кислоты растворяют в 96 мл дисти/~ _в ' лнровшшой вода’. Хранить в холодилью'л<о в плотно закрытой склянко.

Срок хранения I месяц. ₍    ,

2CI

.    2.4.2.    Приготовление    хроматографических    пластинок

Тщательно пр ослы тую содой, хромовой смесью, дистиллированной водой и высушенную стеклянную плаотйпку '90x120мм протирают этил о- ( шк спиртом 'или диэтиловым эфиром и покрывают сорбционной массой, приготовляемой из 35г силикагеля КСК, 2г кальция сернокислого и 90 мл дистиллированно^ воды. Силикагель предварительно очищают от примеси. Для чего заливают на 10-20 часов .разбавлсшюй соляной кислотой (1:1), кислоту сливают, прог.тают силикагель гоДоЙ и кипятят £-3 часа с разбавленной азотной кислотой (1:1), промывают водопроводной водой, затем дистиллированной водой до нейтральной реакции промывных вод, сушат в сушильном шкафу- 4~о. часов при температуре Х30*С« Силикагель дробят и просеивают через с и то 100м ей. Хранят в оклянкс с притертой пробкой.

10 г сорбционной массы равномерно распределяют по всей поверхности пластинки путем ее покачивания. Сушат пластинкй-при комнатной температуре 18-20. чаоов. Хранят в эксикаторе. ^; .

2.4.3. Условия хроматографирования и способ I ' келмчеотвенного определения    -    '

Пробу и стандартные растворы наносят на хроматографическую •плаотйнку так, чтобы размер шпяя не превышал 10-12мм. Центр плавна должен находиться на расстолзпш 1*5мм от нижнего края пластинки. Нанесение пробы на пластинку производится о помощью пипеток с оттянутым концом или капилляров. Стандартные рас те о рюшное я тся мик-рошшыкой. Пластинки с наносонными пробами Помещаются в хромато-графАческую камеру, предс товляицул собой стеклянный сосуд с притертой стеклянной крышкой, либо,.» эксикатор. Камера оодерхит смесь растворителей н-гексана и ацетона (10:3), либо четцреххлористого углерода и диэтилозого эфира (4:1). Перед хроматогрефтошнием камера насыщается парами системы подвижных растворителей в течение 30 минут. Поело подъема фронта раотворителей на высоту 10 см хрома тоГ1л£ированио прекращав тел. В вытяжном шкафу удаляются пары растворителей. Затем обрабатывают хроматографическую пластинку в камере, под вытяжным шкафом о помощью пульверизатора прошедшим реакгпвОм 1рГ. Пластинку подсушивают па воздухе и обрабатывают црояюяххдим реактивом J#2.    -    .    V.

Котсфор обнаруживается на пластинках в виде синих пятен с* еле-дуосьжн величжшия:/RI :

ЬОЙ/    ;

Система    1

подвижных, растворителей    : Силикагель * Сидуфол

И ,’ ■■■    I! ! I..... -    - ----.I-.. ..I... .I... —Ли......■■■■..,    .    ■    -■    -    ,    .

Гексан + ацетон    (10:3)    0,52    t    0,01 0.50    -    0,01

Чешреххлористый углерод +

диэтиловый эфир    (4:1)    0,21    -    0,29    -    0,01

Количество котофора в пробе определяет сравнением размеров и интенсивности окраски пятеп пестицида на хроматограммах пробы и стандартного раствора,

I '    2.4.4.Отбор пробы

\. . _ ' • . • . . • -/-. Отбор пробы производится-в соответствии о "Правилами отбора •: проб для анализа пестицидов", рекомендуемыми специалистами СЭВ. ' Отобрашше пробы семян хлопчатника дехшш содержаться^ сухом месте,'в укупоренной, защодеппой от света (стеклянной или полиэтиленовой) таре

JB прцесое подготовки к анализу семена хлопчатника необходимо освободить от волокон ваты, очистив от кожуры и измельчить'.

' 1 ’ ^v ...... : •

2.5 , Проведение определения

э натра до нейтральной-реакции (ро- кндичаторной *бу-* • ^ • . -

‘ ;    Щ

. 50 г измельченных семян хлопчаткаса помес^вт в коническую (• . ' колбу на 250ал, заливают метиловым спиртом до покрытия пробы и оставляют на ночь. Препарат трижды экстрагируют метиловым спиртом порциями по 75мл. Метаноловые экс тракты'объединяют и сливают их через слой безводного сернокислого натрия. Упаривают мстанолозыЯ экстракт на водяной бане до' небольшого Объема (ОД - 0,2мл). Остатку метилового спирта дают испариться полностью при комнатной температуре! К сухому остатку прибавляют ’5мл 1н раствора ооляио’й кислоты, тщательно очипиш стенки колбы стеклянной палочкой. Смывы ■* сливают в делительную ворошку чероз слой ваты. Колбу еще трижды ополаскивают 1н раствором соляиоД кислоты по 5мл и сливают В ту же делительную воронку.. Водный раствор котофора в ^визированной форме дважды промывают в делительной' воронко хлороформом и оргалл^ чоские яыт'шш отбрасывают. Затем в делительную возику прилив акт 1н раствор одного

ш

маге). После этого в воронку прибавляют равный объем хлороформа, предварительно, насыщешюго водой и встряхивают 1-2 минуты. Хлороформный экстракт сливают через воронку о безводным сернокислый натрием в колбу для отгонки растворителя. $сстракцию хлороформом повторяют трижды, сливая хлороформ .в ту же колбу. Хлороформ отго- , няют на водяной бане, либо на приборе.для отгонки растворителя до. небольшого объема (0,1 - 0,2мл). Этот объем наносят на хроматографическую пластинку, после чего еще трижды ополаскивают колбу хлороформом (небольшими объемами/, смывы также наносит на пластинку в центр пятна.    ‘    .    ⁴

Затем плаотанка (силикателевая или ^иСд)*уфол") помещается в хроматографичеокую камеру. . Далее определение проводят в уоловиях сложенных в подразделе 2.4.3.

2.6, Обработка результатов

Содержание оотатхов котофора в анализируемой пробе вычисляют как среднее из двух параллельных определений. .

Допустимое расхождение результатов параллельных определений не должно превышать 2,&сЯ

Расчет содержания остаточных количеств котофора проводят по формуле:

А    •    ^:    :    ‘    s

^хв;Т    "... ’■    ■

.. гдо:Х - содержание котофо“ра в анализируемой пробе, мг/кг;

А - количество котофора, найденное путем сравнения с стацдарт-шми* количествами, мкг;

Р - масса пробы,, г. ^    /

.    v    ’    "    •    *•    •    '*    •    -    .    .

'•    -3.    Требования безопасное та    /.    •

При определении остаточных количеств котофора необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с ядовитыми, взры-во- и огнеопасными веществами.

>    '    иетогцска.    резряботпко ч.С.Пстроснн,

А.А .^унчт*н ,0.'Г. Гек>ркчн (Дрч.?*;*** ВНИИГУ.ПТОКС, Ррева .

20.4 /