государственная комиссия по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями РАСТЕНИЯ И СОРНЯКАМИ ПРИ мех СССР

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОДЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОЗ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВКЕшНЕЙ СРЕДЕ

Часть XI

Москва - 1961

Государственная комиссия по химичеоким средствам борьбы вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Чаоть Х1-я

Данные методики апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы о вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР

Москва - 1981

Хроматограф ТазохромтПОб. Э":. детектор олектроппогр захвата, мпоклтедь 1:1, окорость диаграммной ленты 1см/мин. Колонка стекля кная(1500x3,5'мм),- заполненная 5% SE-ЭО. Температура колонки 190 °С, детектора и испарителя 225 °С. Газ-постель - азот осо- * боп чистоты(40 мл/мин), поддув детекторз-бОмд/мин. .Линейность детектора 0,002-0,02 мкг, чувствительность - 0,001 мкг. Время удернивапия 3,5 мип.    *

2.6. Обработка результатов анализа.

\ • ... .• .. , • .

Количественное определение проводят путем сравнения плодадея ..._v пиков проб #ставдат>Т1гых растворов, причем для сравнения выбирает пики, различающиеся по своим размером’не Солсе чем в 1,5-2 раза. Содержание бектазоиа в анализируемой пробе в'кг/кг (X) рао-считывают по формуле:    '    .

где у.- содерхание гербицида в стандартном растБлрс.мкг

"• ^с •    2Г ‘    ,

• 5_СТ - площадь пика стандартного раствора, мы

Snp " ?др9Йвд$ пика пробы, Stir    *

if - объем экстракта, введенного в хроматеграф, мкг ,

•    ■    т,    X    .    _#.    .    !    ’

[} х - объем конечного экстракта, в котором растзореи ’ .у

;.ч*и^:;^-

Стр.

6* Методические указания по определению остаточных количеств рицида "П" в рисе и водо газожидкостной

хроматографией -................. 93

7. Методические указания по определению матилнитрофооа,

фенитрооксона и п-нитрокреаола в зерне и продуктах переработки зерна методом хроматографии в тонком

слое....................... ЮЗ

8. Энзимно-хроматограбический метод определения фоо-фороргэничоских пестицидов в раотителышх продуктах и биосуОстратах .................. 109

тонком слое.................... 118

2.    Методические указания но определению остеточных ко

личеств гербицида малорано в почвах о различным содержанием гумуса методом TGX........... 124

3.    Методические указания по определению остаточных количеств HE-I66 в огурцах хроматографией в тонком

сдое и фотометрическим методом .......... 129

4.    Методические указания по определению остаточных количеств теидекса в воде и почве.......... 136

5.    методические указания по опр делению ФДН    -ди-

ывтмл-Ж-(З-хлорфонил)-гуанидиаа) в огурцах и воде методом тонкослойной    хроматографии ........ 139

6.    Методические укззаиия по определении дитана М-45 в

продуктах питания растительного происхождения и воде ........................ 149

П. Гетероциклические соединения

7.    Методические указании но определению базаграна в

воде, почве, зерне и    растительном    историале ....    152

УЪ

Cip,

6. Uti то диче окне указания по определению фунгицида бай-летона методом ТСХ в почве, корнях,зеленых листьях,

плодах томатов и огурцов..........’.    .    .    159

9. Методические указания по газохидкостно-хроматографическому определению бентазона в почве ч растениях 166

10.    Методические указания по определению диквата в се

менах подсолнечника и масле из семян подсолнечника опектрофотометричеоким методом .......... 174

11.    Методические указания по определению метазина в во

де, почве, овощах и биологическом материале методом хроматографии в тонком одое сорбента....... 181

12. Методические указания по определению остаточных количеств симм-триазиновых гербицидов (симазинэ, ат-разина, проказина, промо трина, семерона, меэорэни-ла, метазина, метопротрина) в почве гээожидкоотной

хроматографией .................. 188

13.    Мотодичеокие указания по определению котофора в семенах хлопчатника методом хроматографии в тонком

слоо....................... 198

14.    Мотодичеокие указания по определению ронстэрт (ок

сидна зона) в рисе методами газовой и тонкослойной хроматографии ................... 205

15.    Методические указания по определению тачигьренэ в

вода методом тонкослойной хроматографии ...... 209

1C Методические указания по определению тербацилэ в эфирных маолэх и эфиромасличном сырье методом газожидкостной хроматографии ............. 214

17.    Мотодичеокие указании по определению трифорииэ в

воде....................... 220

18.    Методические указании по определению остаточных ко

личеств текто(тиабанда зола) в картофеле и свекле тонкослойной хроматографлей............ 227

19.    Методические указания но определению остаточных ко

личеств фона зоне в почве, воде, свекле и растительных обьоктах газожидкостной    хроматографией ....    234

Прочие пеотигиды

I. Методические указания по определению остаточных.

количеств хлората магния полярографическим ue-wov ••• 2чЗ

2.    Методические указания по определению нортроаа в

ьодо, черноземной почве и сахарной свекле ............ 2**8

3.    Методичеокие указания по определению содержания

общой ртути в **чсе, яйцах, рыбе, молочных продуктах, ПОЧВ", .....*..................................Zj'J

Бактериальные пестициды

1.    ?Летодические указания по определению микробиологи

ческих инсектицидов не прямым иммунофлюореогентним методом ..............................................268

2. U*годические указания по определению виталичина А

j воздухо м'етодом тонкослойной хроматографии.........276

3* Методические указания по определению полиэдров» вируса ядерного полиэдроза капустной совки на растительных объектах иыыунофлюоресцентным методом ....... 260

тов в воде, почве и растительном материале ......... 289

2. Методические указания по ^пределе*чю актеллика

растительной продукции, почве и воде ................. 296

Настоящие методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-иоследователь-ских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токоикологичеоких лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других Министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пео-тицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде*

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомио-сии по химическим средствам борьбы о вредителями, болезнями растений и оорнпками при МСХ СССР. (Председатель группы экспертов М.А.Клисенко).

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования оанэпидслужбы ИМПиТМ им.Е.И.Ыарциновокого и лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минэдрава СССР.

УТВЕРХДАД:

Зги. Главного Государственного санитарного врача СССР

А.И.ЗАЙЧЕНКО

19 октября 19?9г. й 2С9С-79

КАТОЛИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ГАЗО/ЮКОСТГО-ХРОКАТОГРАФИЧЕС-КОКУ ОПЭДЕЛЗШ) БЕ1ГГА30НА В ПОЧВЕ И РАСТЕШЯХ

I. Характера стгка ачалиэхоуоюго псстзцзда

БептазснСснкожи: БАСО-3)- активное вещество гербицида базаг-рана, используемого для уничтожения устойчивых к производным 2,4-£ сорняков на посевах зерновых, а также лвцсрюл, сои, ряса, льна. Химическое название: З-изопровил-2,1.3-бензотцадиазиЕОГ-ОО-г.г-даскспд. Структурная формула:

Суммарная формула: Cjq    Ъ    0о#    Молекулярная    масса    240,3,

Точка плавленая I37-I39 °С. Со внешнему виду представляет собой бесцветное кристаллическое вещество. РастворихостьСв г на 100 г растворителя): ацеток-150,7; зтанол-66,1; этялацетзт-65,0; диэти-лоъа?. эфир-61.6; хлорофюрк-ie.0; бензол-3.3; вода-0,05. Хорошо р..створяется в водных растворах щелочей.

Мал ото копчен для теплокровных гавотних. ^50 А ля крыс -

1IC0 мг/кг веса.

2. .    Методцла    определения    бентаэона    в    почве    и

растениях.

iQG

2.1.    Основные полоаения.

2.1.1. Принцип метода.

Метод основан ка экстракции бентазона, очистке гкстракта, метилировании диметилсульфаток с последующим определением на хроматографе с детектором то захвату электронов или постоянной скорости ре-коибкканун. Для повышения специфичное?;: метода используют нопод-виаггые фазы различноа полярности: SE-?q а похиэтиленглыхоль 40 М.

Количественное определение проводят путем сравнения плоцадея паков проб а стандартных растворов.

2.1.2. Метрологическая характеристика опыта.

Дпацазон определяемых концентрация 0.002-0*02 ихг. Нихяяя предел детектирования- 0,001 мкгСзысота пака разка 5% пхалы сактсца). Чувствительность определения: для почвы- 0.03 мг/кг, д.тя растеяая-0,05 мг/кг. вреднее эначекпе определения стандартных растворов гербицида: 89£(почва), 71#(растения). Стандартное отклонение: 7,С#(по-чва), 8,З^С?астг-С1я). Относительное стандартное отклонение: почва-0,0С; растекпя-0,12.

Определению бентазона не хепают: линдац, 2,4-Д, 2М-4Х, сииазпн, атразик, дропазкн, лпзуроп, арезин, кзрб.

2.2.    Реактивы к растзоры.

Auctoh^CH^COCH^), ГОСТ 2603-71, чда.

Гексан(С_б3₆), МРГУ 6-09-2937-66.хч .

Хлороформ(СНС1₃). ГОСТ 3160-51, чда.

Мсти ловиа спирт сиптетяческнкССЕ^ОН),ГССТ 6995-67, хч-

Д:;>:етилсульгатСС3₃)₂50^. ХРТУ 6-09-3608-67, ч.

Кислота соляксяСЯСО, ГОСТ ЗЛ8-67, хч.

Кислота серкаяСЯ^О,.), ГОСТ 4204-66, хч.

Алюминия скасьСА1₂С₃), Х?ТУ 6-09-5296-66, II ст.активности, ч.

Патр-.п углс:-:исл;й,бсз?сд«!,.:*(/Ta₂C0tj), ГОСТ 83-63, хч.

Нетрия сернокислый, беэводныаС ^a₂SO^), ГОСТ 4166-76, хч.

Натри а ХдоркстыпС^СГ), ГОСТ 4233-66, хч Натр едкягС //аОН), ГОСТ 4328-66, хч.

Силикагель Л5 5/40(ЧСС?)

Хроматен Й-Н# (0,16 - 0,20 нм), ЧССР

аоподважныв жидкие фазшПолиэтиленглихоль 40 М, SE -30(550, *акосена на хроматон /!'№ (0,16-0,20 км), ЧССР A ClVi? газообразный, ГОСТ 9293-74, осч.

Иетл.црусцпЯ реагент: 1^-ныа раствор диметилс>лъфата в абсолют-чок катано ^.(Хранятся в морозильной камере холодильника в плотно укупоренной бутыли в течение 1-2 месяцев).

Ст^дартний раствор бентазона: 10 кг перекристаллизованного бентазона растворяй в мерной колбе в 100 мл хлороформа. (Соде ржа-дцу бентазона 10 мкг/мл). Ст&едарт'-ыа раствор хранится в т*2Мном ат>^хладном меоте в течение 2-3 месяцев без заметного разложения

2.3. Посуда и приборы.

Аппарат для встряхивания типа ЛБУ-1, ТУ 64-I-IC8I-73. Испаритель ротационный ПР-IX, ТУ 25-11-917-74.

Газовая хроматограф •Цвет-Юс?*, Таэохром 1106 Э* или другой о детектором постоянней скорости рекомбир.аю*и или детекторов электронного захвата.

С/лилькыа шкаф ШС-40 К, »1РТУ-42-1359-67.

Баня песочная ТУ 46-775-77

Водоструйный касос КХ 1230, ТУ 64-1-861-72.

Ьоронки делительные ВД З-ЗОО-ГОСТ 8613-75 и ВДЗ-ЮОО-ГОСТ8613-75 ХеЗСь-5СО-29/32 ТС. ГОСТ 10394-72.

Ч. лои остродснкые 0ХВ-5О-14/2Э ТС, ГОСТ 10394-72.

Стеклянные боксы СП 34/12. ГОСТ 7148-70.

Пробжря П 40 17-Г.С, ГОСТ 10515-75.

№

Колйн мерные, ГОСТ 1770-74(100 см³).

Стехлялвая колонка доп колоночное хроматографии длиной 2^-ХОыы (внутренний диаметр 25 км), в которую впаян стеклянный фильтр по ГОСТ 9775-69, кл.ПОР НО.

колонка стеклянная спиральная для газовоз хроматографии (длина 1500 мм, внутренний диаметр 3,5 мм)

Колонка стеклянная и -образная для газовоз хроматографии(дл на 650 мм, внутренний диаметр 3,5 мм).

2.Н. Подготовка к определенно.

2.^.1. Выделение и очистка бентазона нз технического препарата базаграна.

К 20 мл препарата базагран с содерхажем бентазона 480 г/л добазллют 50 мл воды, 3 мд конц.    а перекег.ивлют. Peers*.»р

мутнеет, выпадает осадок красноватого цвета. Надосадочкую мягкость отсасывает, осадок промывают водой(Зх50 мл), прсмызкыо до-ды и надосадо^нуо хидхость отбрасывают. Осадок рсстхорягт >; г.за* роформе и переносят на колонку с силхкггедвк IV 5АО, дредздрг-тельно промытую хлорофоомом(50 мл). Высота столба оорбавто- ? w:. Для элюирования бентазона через колонку пропускают 300 ад хлороформа. ХлороформныЛ экстракт упаривают до 150 мл, переносят в химические стакан на 500 мл, добавляют малыми порциями гекс.чи до устойчивого помутнения раствора и ставят в холодильник. ?в-рез 20 мин выпадает игольчатые кристаллы бентазона. Выход :>;.j sc 5,5 г(56& от расчетного).

Кристаллическую кассу растворяют в 50 ил хлороформа, добавля ют 250 мл гексана и оставляют для кристаллизации в холод иль кике на 16-18 члс. Кристаллы отфильтровывают через плотный бумажны* фильтр» промывают на фильтре охдлкденнш? гексаном и васутиальт

иъ

в термостате при 90-100 °С до постоянного веса. Полученный кристаллический беетазон использую? для приготовления стандартного раствора.

2.4.2. Приготовление хроматографических колонок и их кондиционирование.

2.5 г полиэтилекглихоля 40 И растворят? в 100 мл хлороформа в переносят в круглодонную колбу(500 смЪ, в которую предварительно помещают 47,5 г хроматона. Растворитель отгоняют на ротационном испарителе досуха. Полученным носителем заполняет хроматографическую колонку, после чего, не подключая к детектору, колонку кондиционируют при температуре 215 °С в тетение 18 час.

Колонку, заполненную SE-30 хондиционируют 18 час при температуре 250 °С.

2.5. Проведение определения.

2.5.1. Экстракция с очистка экстрактов.

Зеленая масса люцерны, солома ячменя. Навеску 10 г тщательно измельченной массы переносят з коничеекуб колбу с притертой пробкой, заливабт 100 мл хлороформа и настаивают в течение ночи. Хлороформ фильтруют через бумажный фильтр, остаток промывают хзороформом(2х50 мл), встряхивая по 30 мин. Объединенный хлороформный экстракт упагавают на ротационном испарителе до 2-3 мл л количественно перекосят в стекдянния бюкс, б который предварительно насыпается 10 г А?2^3. Бюкс помещают на песочную баню, нагретую до 50-60 °С и выдерживают до пол:.ого улетучивания хлороформа. Затем стеклянной палочкой тщательно перемешивают сорбент в бюксеСаерс-ткрая все комочки) до получения однородной по цвету массы. После этого сорбент переносят в колонку.

Для элюирования бентазона через колонку u pony ска ют* 4CJ ыл снеся концентрированной HCI и воды(1:20 по объему). Скорость вытекания 100-120 капель в мин. Из солянокислого раствора бентазон экстрапфубт хлороформом(3x40 мл), энергично встряхивая в течение 2 мин. Объединенные хлороформные экстракты фильтруот через бумажный фильтр с безв. VagSOfc и упаривают досуха в конической колбочке с оттянутым дном на ротационном испарителе.

Семена льна. Семена размалывают на мельнице, взвешивают 10 г и настаивают в конической колбе со 100 мл ацетона в течение ночи. Ацетон фильтруют через плоеный, складчатый бумажный фильтр. Остаток дважды промывают ацетоном по 50 мл, встряяявая каждый раз 30 уян. Ацетоновые, экстракты перепосят на тот зе фильтр, после чего упаривают до тех пор, пока на дне колбы не останется не оперяющийся маслянистый остаток. 5 остатку приливают 30 ил I &-ного раствора VeOH и перенеся? в делительную воронку. Колбу дважды смывают раствором щелочи по 30 мл и переносят в ту же воронку. Раствор щелочи дважды энергично встряхивают с 50 ыл гексана в течение 2 мин. Гексаноюз экстракт отбрасывают. Остаток подкисляют 7 мл коиц. KCI, перемен:зают и трижды встряхивают с хлороформом (по 20 мл). Хлороформный экстракт фильтруют через бухазаыз фпдътр, упаривают до 1-2 мл и дальше очищают на колонке как описаао выше.

Почва. 20 г воздушно-сухое, измельченной и просеянной почвы заливают в колбе на 500 мл смеси ацетона и воды(1:3 по объему) в количестве 150 мл и встряхивают в течение часа. После отстаивания жидкость фильтруют через бумажный фильтр, а остатох дважды промывают той же смесью по 100 мл, встряхивая каждый раз 30 мин. Объединенные экстракты подкисляют 5 мл ПСКкоиц.) и трижды встряхивают с 40 мл хлороформа каждый раз в течение 2 мин. Хлороформный экстракт пропускаю? через бумажный фильтр и упаривают досуха.

2.5.2. Метилирование бентазона.

Сухоя остаток из колбочки смывают 1£-яым раствором дяметилсулъ-фата в м*тааоле(трихды по I мл» тщательно смывая стенки колбочки) и переносят в пробирку с притертое проокоя» в которую пред воде тель-по помещают 0,1 гУ/а^ОО^СбезводныГ.). Пробирку закрывают обратным холодильником и помещает на Z5 мин в водяную баню при ^-55 °С(яерез казды^ 5 мин пробирзд осторолно встряхивают). Затем в пробирку добавляют 5 мл насыщенного раствора УеСХ, закрывают обратным холодильником и выдергивают в водяной бане 10 кин. при той хе температуре. После охлахденпя в пробирку добавляют I мл(точно) гексана, закрывают пробкой и энергично встряхивают 2 мин. Верхния гексановый слоя вводят в хроматограф(2 - 5 мкл).

Одновременно в конические колбочгя зносят стандартный раствор бентазона в хлороформе(I, 5 и 10 икг), хлороформ испаряют в токе воздуха, а все дальнейшие этапы проводят как описано выше для проб. В хроматограф вводят 2-5 мкд гексанового слоя.

2.5.3. Условия хроматографировг :шя

Хроматографы "Цвет 106”, "Газ о хром-НО 6 Э" или другие с ДЭЗ или аналогичными детекторами.

При работе на "Цвет-106”: детектор постоянной скорости рекомбинации. акала ’/.КТ-ЮхЮ"*². скорость протяжки диаграммы-1 см/вин., Коленка стеклянная, U-образная, 650x3,5 мм, заполненная полкати-хенглхкодем 40 К(5^). Температура колонки 180 °С, испарителя и детектора. 225 °С. Газ-носитель - азот особой чистотыСбО мл/мин), газ для поддува детектора - азот осч.(145 мд/мин), -Еипеяность детектора в пределах 0,002 - 0.С2 мкг, чувствительность 0,001 мкгСвысо-та пика равна 5% шкалы самописца), время удерживания бентазона 6 минут.

• '•>