государственная комиссия по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями РАСТЕНИЯ И СОРНЯКАМИ ПРИ мех СССР
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОДЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОЗ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВКЕшНЕЙ СРЕДЕ
Часть XI
Москва - 1961
Государственная комиссия по химичеоким средствам борьбы вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ
Чаоть Х1-я
Данные методики апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы о вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР
Москва - 1981
Стр.
6* Методические указания по определению остаточных количеств рицида "П" в рисе и водо газожидкостной
хроматографией -................. 93
7. Методические указания по определению матилнитрофооа,
фенитрооксона и п-нитрокреаола в зерне и продуктах переработки зерна методом хроматографии в тонком
слое....................... ЮЗ
Азотсодержащие пестициды
*1# Производные мочевины, гуанидина, дитио-карбаииноаой кислоты, анилиды карбоновых кислот, нитропроизводные, дитиокарбаматы
I. Ыетодичоские указания по определению дуада в растительном материале, почве и воде хроматографией в
8. Энзимно-хроматограбический метод определения фоо-фороргэничоских пестицидов в раотителышх продуктах и биосуОстратах .................. 109
тонком слое.................... 118
2. Методические указания но определению остеточных ко
личеств гербицида малорано в почвах о различным содержанием гумуса методом TGX........... 124
3. Методические указания по определению остаточных количеств HE-I66 в огурцах хроматографией в тонком
сдое и фотометрическим методом .......... 129
4. Методические указания по определению остаточных количеств теидекса в воде и почве.......... 136
5. методические указания по опр делению ФДН -ди-
ывтмл-Ж-(З-хлорфонил)-гуанидиаа) в огурцах и воде методом тонкослойной хроматографии ........ 139
6. Методические укззаиия по определении дитана М-45 в
продуктах питания растительного происхождения и воде ........................ 149
П. Гетероциклические соединения
7. Методические указании но определению базаграна в
воде, почве, зерне и растительном историале .... 152
УЪ
Cip,
6. Uti то диче окне указания по определению фунгицида бай-летона методом ТСХ в почве, корнях,зеленых листьях,
плодах томатов и огурцов..........’. . . 159
9. Методические указания по газохидкостно-хроматографическому определению бентазона в почве ч растениях 166
10. Методические указания по определению диквата в се
менах подсолнечника и масле из семян подсолнечника опектрофотометричеоким методом .......... 174
11. Методические указания по определению метазина в во
де, почве, овощах и биологическом материале методом хроматографии в тонком одое сорбента....... 181
12. Методические указания по определению остаточных количеств симм-триазиновых гербицидов (симазинэ, ат-разина, проказина, промо трина, семерона, меэорэни-ла, метазина, метопротрина) в почве гээожидкоотной
хроматографией .................. 188
13. Мотодичеокие указания по определению котофора в семенах хлопчатника методом хроматографии в тонком
слоо....................... 198
14. Мотодичеокие указания по определению ронстэрт (ок
сидна зона) в рисе методами газовой и тонкослойной хроматографии ................... 205
15. Методические указания по определению тачигьренэ в
вода методом тонкослойной хроматографии ...... 209
1C Методические указания по определению тербацилэ в эфирных маолэх и эфиромасличном сырье методом газожидкостной хроматографии ............. 214
17. Мотодичеокие указании по определению трифорииэ в
воде....................... 220
18. Методические указании по определению остаточных ко
личеств текто(тиабанда зола) в картофеле и свекле тонкослойной хроматографлей............ 227
19. Методические указания но определению остаточных ко
личеств фона зоне в почве, воде, свекле и растительных обьоктах газожидкостной хроматографией .... 234
Прочие пеотигиды
I. Методические указания по определению остаточных.
количеств хлората магния полярографическим ue-wov ••• 2чЗ
2. Методические указания по определению нортроаа в
ьодо, черноземной почве и сахарной свекле ............ 2**8
3. Методичеокие указания по определению содержания
общой ртути в **чсе, яйцах, рыбе, молочных продуктах, ПОЧВ", .....*..................................Zj'J
Бактериальные пестициды
1. ?Летодические указания по определению микробиологи
ческих инсектицидов не прямым иммунофлюореогентним методом ..............................................268
2. U*годические указания по определению виталичина А
j воздухо м'етодом тонкослойной хроматографии.........276
Дополнения
I. Хроматографическое определение микроколичеотв пропанида, линурона, монолинурояа и их метаболи
3* Методические указания по определению полиэдров» вируса ядерного полиэдроза капустной совки на растительных объектах иыыунофлюоресцентным методом ....... 260
тов в воде, почве и растительном материале ......... 289
2. Методические указания по ^пределе*чю актеллика
растительной продукции, почве и воде ................. 296
Настоящие методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-иоследователь-ских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токоикологичеоких лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других Министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пео-тицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде*
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомио-сии по химическим средствам борьбы о вредителями, болезнями растений и оорнпками при МСХ СССР. (Председатель группы экспертов М.А.Клисенко).
Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования оанэпидслужбы ИМПиТМ им.Е.И.Ыарциновокого и лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минэдрава СССР.
*Утверв«гъ*
Заместитель Главного Государственного санитарного врача СССР
А.И. Зайченко
и 19 октября 1979г
j *2C8I -V0
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕННО ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ГЕТЕРОФОСА В ОВОЩНЫХ КУЛЬТУРАХ, ПОЧВЕ, ВОДЕ И ВОЗДУХЕ МЕТОДАМИ ТОНКОСЛОЙНОЙ И ГАЭО-ЮШЮСТНОЙ ХШШ'ОГРАФЛИ
I. Краткая характеристика препарата
Гетерофсо - новый отечественный немэтицвд и почвенный инсектицид, разработанный и синтезированный во ВНИИ химических средств защиты растений. Препарат рекомендуется к использованию для борьбы с вредителями картофеля, кукурузы, томатов, огурцов и др. главным образом путем внесения в почву в виде гранул.
Действующее вещество - бесцветная жидкость со специфическим запахом, температура кипения 120 °С при 0,3 мм рт.ст*, d 1,143. Хорошо растворим в алифатических и ароматических углеводородах, спиртах, ацетоне, хлорсодержащих растворителях.
Структурная формула CtH$0^ р О
С6Н*0' ^ SCyH7
Химическое название: О-этил-О-фенил-S-прспилтаофосфат.
Гетерофос высокотоксичен для теплокровных - ЛД^ ^30-60мг/кг.
ПДК в воздухе, воде и ДОК в пищевых продуктах не установлены.
Основная примесь, присутствующая в техническом продукте -О-метил-О-этал- S -нрооилтиофосфат.
2. Методика определения гетерофоса в растительных пробах, почве, воде и воздухе.
2.I.. Основные положения.
2.1.1. Принцип метода.
Метод основан на извлечении препарата и его примеси органическими растворителями: гексаном - из воды, ацетоном с последующим перераспределением в гексан - из растительных проб и почвы; улавливание пестицида из воздуха производят с помощью пенополиуретана с последующей экстракцией гексаном из поглотителя. Идентификацию и количественное определение проводят о помощью ТСХ на шшстянк; ч "Силуфол" или методом ГЖХ с ТИД.
2.1.2. Метрологическая характеристика метода.
Нижний предел определения составляет для метода ТСХ -0,05 мг/кг в почве и овощах, 0,002 мг/л в воде, 0,02 мг/м3 в воздухе. При использовании метода ГЖХ чувствительность /нижний предел определения/ . повышается в 10 раз.
Минимально определяемые количества в пробе - 0,5 мкг гете-рофоса, I мкг примеси /ГСХ/ и 0,2 нг гетерофоса, 0,5 нг примеси
/т/.
Процент определения гетерофоса в почве и овощах - 75-85#, в воде - 93-98#.
Доверительный интервал /при 0,95, П = 5/ не более'5#.
2.1.3. Избирательность метода.
Другие фосФороргьчические пестициды, применяемые на тех же культурах и вредителях,не мешают определению.
2,2. Реактивы и растворы.
Ацетон осч ТУ 6-09-3513-75
Гексан ТУ 6-09-3375-73
Натрий сернокислый безводный чда
Носитель для газовой хроматографии хроматон^
/0,16-0,20 мм/ с 5# ХВ-60 или 5# Sfi-30
Стандартные растворы гетс!>офоса и 0-метил -0-этил- S-пропилтиофосфата в ацетоне концентрацией I мг/мл /хранят в холодильнике в плотно закрытой колбе/. С per:: хранения - 2 мес.
Проявляющий реактив для ТСХ: 50 мг бромфенолового синего растворяют в 10 мл ацетона и доводят "о ICC мл 1>-иым водно-ацетоновым раствором азотнокислого серебра /ацетон:вода, 3:1/
5#-ннй раствор лимонной кислоты в дистиллированной воле. Срок хранения - 2 дня. о2
2.3. Приборы и посуда.
Хроматограф газовый "Газохром" 1106 Т или любой другой с термоионным детектором Генератор водорода
Аспирационное устройство для протягивания воздуха через поглотитель
Микрошприцы на 10 мкл
Пластинки для ТСХ "Силуфол" /ЧССР/, промытые ацетоном и высушенные при 120°С в течение 2 час. /хранят в эксикаторе/
Прибор для отгонки растворителей /ротационный вакуумный испаритель РИ-1/
Аппарат для встряхивания
Хроматографическая колонка стеклянная длиной 1м, внутренним диаметром 4 мм. иеред работой заполненная носителем колонка продувается при температуре 220°С в ""зиение 20 час.
Аллонжи стеклянные Мерные колбы на 100 мл
Пулъверизаторфтекляняне Камера для хроматографир
Колбы плоскодонные с пришлифованными пробками на 250 мл Делительные воронки на 250 и 500 мл Колбы круглодонные на 50 и 100 мл
/стеклянный сооуд с пришлифованным стнклом/
Стеклянные капилляры или микропипетки для нанесенря проб на пластинку
Воронки химические Цилиндры мерные Фильтры АФА-В-18
2.*» Подготовка к определению
Воздух со скоростью 3 л/мин. протягивают в течение 15-20 мин. через аллонж, заполненный последовательно 2-3 фильтрами АФА-В-18 /для улавливания пыля, содержащей пестицид/ и пробкой из пенополиуретана, которую готовят следующим образом: вырезают из пенополиуретановой губки пробки размером ^3 см и толщиной
63
2 см, заливают ацетоном на 15-20 мин., ацетон отжимают, еще раз промывают ацетоном, высушивают в струе сухого воздуха. Подготовленные таким -Оразом пробочки хранят в эксикаторе или в плотно закрытой склянке.
Отоор почвенных и растительных проб и воды производят в соответствии с разработанными для отбора проб методическими указаниями.
2.5 Ход анализа
Воздух.Пенополиуретан и фильтры переносят в химический стакан и трижды промывают ацетоном или гексаном порциями по 15 мл, тщательно отвечая растворитель пинцетом и сливая его в круглодонную колбу для стгона растворителей. Упаривают экстракт с помощью ротационного испарителя до объема 0,2-0,3 мл.
Вола. УЮ ыл води помещают в делительную воронку и трижды экстрагируют гексаном порциями по 30 мл, встряхивая пробу 5 мин. Объединенный экстракт сушат безводным сернокислым натрием /~5-7 г/ и отгоняют растворитель до небольшого объема.
Почва. Навеску возду^пс-стхс* почин 30 г помещают в колбу для экстракции, слегка увлажняют, заливают 60 мл ацетона я оставляют нз ночь /либо экстрагируют на приборе для встряхивания, 30 мин./. Экстракт фильтруют через слой безводного сульфата натрия. Экстрагируют еще дважды порциями ацетона по 40 ыл, встряхивая колбу 10 мин. Объединенный экстракт переносят в делительную воронку, разбавляют 4-хкратным объемом воды и экстрагируют готерофос из водно-ацетонового слоя гексаном порциями по 15-20 мл в течение 5 млн. 3 раза. Гексановые экстракты сушат безводным сернокислым натрием, упаривают.
Овощи. 30 г мелко измельченной ножом растительной массы /огурцы, картофель, томаты и т.д./ помещают ь колбу емкостью 250 ыл, заливают 60 ыл ацетона и экстрагируют. R*:e операции - как и при экстракции из почвы. 2,6 Методы аналитического определения Определение пестицида методом ТСХ
После упаривания исследуемый раствор и стандартные растворы наносят на илас'.льку и хроматографируют. /Подвижный растворитель необходимо ззливать ь хроматографическую камеру зь 20-30 мин. до начала хроматографирования/.
64
После поднятия фронта растворителя на 10-12 си пластинку вынимают из камеры, просушивают на воздухе до испарения растворителя и cdpuuctuemiT гроявляющм реактивом. Гетерофос и 0- ^етил-О-этил-$-пропилтиофосфат проявляются в виде сине-фио’етовых пятен на серо-синем фоне. Дач вякреплсо** пластинки сушат 10 мин. при температуре около 80°С в сушильном шкафу и обрабатывают 5£-ным раствором лимонной кислоты. На желтом фоне проявляются четкие синие пятна. Окрао-ка устойчива в течение нескольких суток.
Коэкстрактпвные вещества, в небольшом количестве остающиеся в экстракте после переэкстракции из водно-ацетоновой среди в гексан, не мешают определению, 'г^и'^стаются при хроматографировании практически на старте,
В качестве подвижных растворителей можно использовать одну из трех смесей, приведенных в таблице вместе с величинами Kj :
|
Недвижный растворитель |
ь |
|
гетерофос |
О-метил-О-этил-S-пропил-тиофосфат |
|
Гексан + ацетеш 5:1 |
0,70 |
0.58 |
|
Гексан + ацетон 3:1 |
0,83 |
0,76 |
|
Гексан * иц«тси 1:1 |
0,^ |
0,81 |
л-личиство препарата и примеси вычисляют по следующим формулам? в воздухе ^ А ■ (ЫЪ + t). 760
1Га*1?3-Р /vir/м3/;
в воде /мг/л/;
А
в почве овощах *Х = ^ /мг/кг/;
где. А.- количество препарата, найденное путем визуального сравнения размера и интенсивности окрашивания пятен пробы и стандартных растворов, мкг; 7Г0 - объем воздуха, отобранного при анализе ( t , Р),л; Р - атмосферное давление в месте отбора пробы, мм рт.ст.; т^кт -ратура воз..ухп в хлесте отбора пробы, °С; ЯГ- объе:.: отобранной для анализа пробы воды, мл; М - навеска почвы или растительной гяас*к, г.
65
Определение методом ГXX# Условие хроматографирования
Хроматограф и Газохром" с ТИД
Стеклянная колонка I м х 0,4 см., заполненная хроматоном У~4#-2)МС$ з 5^ ХЕ-60 / альтернативная колонка - 5% J*E-30/. Расход газов: азота- 60 мл/ мин., водорода- 23 мл/ мин., воздуха- 200 мл/мип.
Температуры: колонки 170 °С, испарителя- 220°С.
Скорость протяжки ленты самописца 600 мм/ час.
Рабочая шкала электрометра I хЮ“10 А объемом Линейность детектирования 0,01-20 нг в пробей мкл При указанных условиях время удерживания гетерофоса составляет 2,6 мин., О-метил-О- этил пропилтиофосфата - 1,1 мин.
Количественное определение пестицида и примеси проводят путем сравнения площади пика исследуемого раствора гетерофоса с пиком, соответствующим эталонному раствору известной концентрации / при условии, что пики близки по величине и работа ведется в диа-мхоке линейности ГИД/:
+ *с.-£;-Г.
где Сх- концентрация исследуемого экстракта, мкг/^л;
Сэт - концентрация эталонного раствора, мкг/мл;
j^x - площадь пика раотвора неизвестной концентрации, mm2j г* ЭТв- площадь пика эталонного раствора, мм2 о^ьеп j&rpQKTy/u ■' Площадь пиков определяют как произведение высоты пика на ширину, измеренную на половине высоты.
Времена удерживания других ФОП в приведенных условиях определению методом ГКХ не мешают.
3. Настоящие методические указания разработаны Заманской И.Ш. и "аром К.А. / ВНИИ химических средств зашиты растений/.
4. Требования безопасности.
Соблюдаются требования безопасности, обычн! з при работе с VSS. Кроме того, следует учесть, что гетерофос- высокотоксичний нрепореу, поэтому при работе с ним требуется особая осторожность.
66
Хлорсодеряэщио пестициды
1. Но тонические указания по определению ноорока л нодо методом газовой хроматографии . ......... .
2. Методические указания по определению нитрохлоре и
профорано в эфирных маслах и эфиромаеличном оырье методом газожидкостной хроматографии .......
3. Мотодичоскио указания по определению ЭФ-2 в воде и
почве газожидкостной хроматогрофиой ....... .
4. Мотодичоскио указания по определению хлорорганичес-ких пеотицидов в воде, продуктах питания, кормах и табачных изделиях хрометогрофиой в тонком олоо . .
5. Методические указания по определению полихлориро
ванных бифенилов в присутствии хлороргзничоских постицидов в птицепродуктах методом газовой гроыа-тографии...... . . .
Фосфорсодержащие постициды
I. Мотодиче окне указания по опродолению остаточных количеств вэлоксоно в растительном мате риале, ночво и водо тонкослойной и газожидкостной хроматографией •
2• Мотюдичоокио указания по опродолению остаточных количеств готорофоса в овощных культурах, почве и воздухе методами тонкослойной и газожидкостной хроматографии ....................
3. Методические указания по оиродолони» остаточных количеств дуребона в растительном материале, почве и воде тонкослойной и гсзохидкостной хроматогрэфиой •
4. Мотодичоские указания по определению остаiочных ко
личеств кзофоса-3 в рисе, почве и воде газожидкостной и тонкослойной хроматографией ...... • . •
3. Нотодпчоскиа указания по определению мотилнитроуоса и фоиитрооксоао в зорно и продуктах переработки зерна хромато-энзимами к гаэохроиотографичоским методом .......................
