МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА СССР ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОМИССИЯ ПО ХИМИЧЕСКИМ СРЕДСТВАМ БОРЬБЫ С ВРЕДИТЕЛЯМИ, БОЛЕЗНЯМИ РАСТЕНИИ И СОРНЯКАМИ

МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МИКРО -КОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ

В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

Справочное

издание

Под редакцией

доктора биологических наук М. А. КЛИСЕНКО

МОСКВА «КОЛОС» 1983

Me ком***»**» «.«■wi пол* ua imi.tvm дли	Материал	Способ отбор* гроб
отборе Проб
6-10 га	Капуста цветная	Метол Г1Д, нс пенсе 10
		растений, не менее 2 кг
6 га	Капуста кольраби	Метод ПД, не менее 10
		растений, не менее 0,5 кг
Б га	Капуста брюссельская	Метод ПД. учитывая
5 г а		головки, растущие на рваной высоте и равных частях растения, не менее 10 растений
	Лиственные овощи (са-	Метод ПД, не менее
	лат, шпинат, щавель)	10 растений
5 га	Укроп	Метод ПД, только
		листья

Величина средней пробы или исходного обрита*	ПОДГОТОИК* Среднего образца	Иглнчам среднего обрами. кг
	срезать и отбросить поверхность предыдущего среза, отбросить несъедобные листья, измельчить и выделять средний об-
2 КГ	Отбросить иесгедобныс части, остальное измельчить, перемешать и выделить средний образец	0,25
0.75 кг	Отбросить несъедобные части, остальное измельчить, перемешать и выделить средний образец Измельчить, перемешать, выделить с ре..-кнй образец	0.5
Не менее 1 кг		0,25
Салаг —0.5 кг Щавель —0.25 кг	Отбросить несъедобные части, растение вымыть, обчистить, измельчить и выделить средний образец	0.25
0.25 кг	Отбросить непригодные части, измельчить, перемешать и отвесить средний образец	0.25

Максимальна* агляхаа пол* или партии для отбора пров Материал Способ отбора проб Величина средне* пробы или исходного обраацг Оодгогопха среднего образца Пелизина с|*Аиаго образца. кг 5 га Молодой укроп, укроп для посодхи огурцов Метод ПД, целые растения 0,5 КГ Измельчить целые растения, перемешать и отвесить средний об-раэсц 0,25

Луковичные растения

10 га	Лук. чеснок. лух-порсЛ	Метод ПД, в полной зрелости	Лук, лук-порей — 1 кг, чеснок — 0.5 кг	Отбросить несъедобные части, растения измельчить, перемешать и отвесить средний образец. Для лука и лука порея с каждой штуки взять половину
5 г*	Лук-резанец, лук-батуи, лук-порей в ранней стадии развития	Метод ПД. целые растения	Лук, лук-порей — 0.5—I кг, .тук-резанец, лук-батуи— 0,25 кг	То же
5 га	Бобовые овощи (фасоль, горох, боб)	То же	0,5—1 кг бобов	Семена выделить, измельчить и выделить средний образец
50 га	Фасоль «зеленый боб»	> »	0.5 кг	Целые бобы измельчить, перемешать и выделить средний образец
20 г*/30 т	Помнзоры, перси	» 1	Мелкие овощи — 0,5—2 кг, крупные овощи — 2 кг	Овощи вымыть, измельчить и выделить средний образец

ic 3

Максимы) ьи* а велкам* пола ■да партии для отбора проб Материал Способ отбора проб Велктмма средней пробы НАМ исходного Обрами Подготовка среднего обрами Велвчииа среднего обрети» 20 га/500 т Огурец и бахчевые То же 10 овощей, из крупных бахчевых взять вырезки — масса пробы 0,5 — 3 кг Овощи вымыть, измельчить II выделить средний образец. Из крупных бахчевых взять вырезки 0.5 5 га Спаржа > > 0.5 кг Растения вымыть, измельчить и выделить средний образец После удаления листовых пластинок растения вымыть, высушить н выделить средний образец 0.25-0.5 5 га Ревень .Метод ПД. выборочно листья ГриЛы 2 кг (без листовых пластинок) 0.5 Шампиньоны и другие грибы Метод К. руководствуясь правилами сбора грибов Фрукты Не менее 0,5 кг Грибы измельчить, перемешать н отвесить средний образец 0.5 200 га/500 т Семечковые фрукты Ло 30 деревьев — выборочно, свыше 30 деревьев —метод ПД, в зависимости от площади, с 20—30 деревьев. Фрукты следует снимать с разных сторон дерева, с разной высоты и глубины кроны До 30 деревьев — 5 кг. до 1 га — 7 кг, 1—10 га — 10 кг. 10—30 га-12 кг. свыше 30 га — 15 кг Фрукты почетвертовать, от каждого плода взять >/« часть, четвертинки измельчить, перемешать и отвесить средний образец 0.5

П иймяпми

Максимальна* делании* полп или па|гтии ДЛЯ отбора проб Матерям Способ отборе про;, Волями** среди»* пробы или ягодного образца Подготовка среднего образца Ислянйиа среднего образца. кг ДО 200 га/200 т Косточковые фрукты (персики, абрикос ы. сливы) До 30 деревьев — выборочно, свыше 30 деревьев—метод ПД с 15—20 деревьев До 30 деревьев 4 кг. до 1 га —6 кг, свыше 1 га —8 кг Плоды поделить пополам, от каждого взять половину без косточки, измельчить, перемешать и выделить средний образец 0.5 До 200 га/100 т Вишни, черешни, сливы То же До 30 деревьев — 1.5    кг, до 1 га — 2 кг, свыше 1 га— 2.5    кг Косточки удалить, плоды измельчить, перемешать и отвесить средний образец 0.5 Орехи (грецкие, лещина) > » До30 растений 1 кг. свыше 30— 1,5 кг Из орехов вынуть ядра, измельчить их, пере-мешать и отвесить средний образец 0.25-0.5 10 га Ягоды (смородина, крыжоекнх*) До 30 кустов пробу взять с каждого куста с разной его стороны и глубины. свыше 30 кустов-метод СС с 25— 35 кустов До 30 кустов — не менее 1 кг*, свыше 30 кустов — не менее 1,5 кг Из тщательно перемешанного исходного образца взять половину, измельчить се. перемешать и отвесить средний образец 0.5 До 200 га Виноград Метод СС. боковые части кистей 1,5 кг Взять отделенные от основания боковые части кистей, тщательно перемешать исходный образец и взять половину. измельчить ее. перемешать и отвесить средний образец 0.5 До 1 га Мягкие фрукты (клубника. земляника, малина) Метод ПД До 500 м1—1,5 кг, 500 м*—0,25 га-2,5 кг, свыше 0,25 га—2,5 кг Тщательно перемешать исходный Образец, взять патовину, измельчить се, перемешать и отвесить средний образец 0,5

• Дл« ыж' инкхо С крупным! плодами проб* должна Cut», не менее 1,5 кг.

Приложение 2

Отбор проб мяса и внутренних органов убойных животных и проб рыбы

Материал Способ отбора Величии средней пробы или исходного образца Проба Величина среднего обрами, кг Рогатый скот и свиньи Выборочно от 3 животных при партии 100 голов, от 5 животных при партии 100—200 голов, от 7 животных при партии 200—500 голов, от 10 животных при партии боке 500 голов. Берут пробы жира, мышц, внутренних органов От каждой туши по 0,2—0.5 кг Каждый исходный образец составляет исходную пробу 0.2—0.5 Овцы То же От каждой туши по 0.1—0,2 кг То же 0.2—0,5 Домашние птицы > » От каждой тушкн по 50 г » » 0 .1-0,3 Дичь > 1 С оленей 200 г, с кабанов и косуль 100 г. с зайцев 20 г. с ьерна-тых 5 г > » 0.1 -0,3

Материл	Способ отбора	Величина средней пробы иди исходного обрами	Проба		Велнчипа среднего обрезай, кг
Яйца	В хозяйстве в ареале отбора проб берется по 10 и 20 яиц с определенных пунктов скупа. На птицефабриках — по 5 яиц из каждой пар-ТИМ	20 ЯИЦ	Каждый исходный образец составляет средний образец		20 яиц
Молоко	Со сливного пункта 500 ил. От коров а определенном хозяйстве по 100 мл молока	500 мл	То же		0.5
Рыба	При массе рыбы менее 0.1 кг берут пробу от нескольких рыб массой 0.5 кг. перемешивают и отбирают среднюю пробу. При массе рыбой	0.5 кг	Среднюю пробу п мают за средни раэец	рини-Й об-	0.5
	0,1—1 кг отбирают целые зкземп-ляры. При массе 1—2 кг берут одну продольную часть лолормны рыбы. При массе свыше 2 кг вырезают образец со средней части рыбы 100-200 г
Икра	От одной партии берут три образца по 100 г с каждой бочки (ящика)	0.1 кг	То же		0.1

Отбор проб материалов со складов, баз, хранилищ, транспортных средств

Максимальная величии* для отбор* проб Материал Способ о георя проб Величиях средней пробы яла исходного обрдеца Подготояка среднего образца Величина среднего образца, кг 100 Т Зерно, жмыхи и Зерно, ж В каждом сегменте поверх- пыхи, шрот 10 кг Зерно измельчить, тщатель- 1.0 100 Т шрот ИЗ ПЛОСКИХ хранилищ Зерно, жмыхи и иостн около 100 м* брать пробу методом К с трех слоев С каждого транспортного 10 кг но перемешать и выделить средний образец То же 1.0 100 Т шрот из средств транспорта Зерно, жмыхи н средства отдельно брать пробу методом К с трех слоев, с четырехосных вагонов — методом К X 2. с барок — КхЗ Из стольких отверстий, 10 кг I 0 1.0 100 т шрот из закромов, трюмов судов и цистерн Зерно, жмыхи и сколько имеется в данной таре, с трех слоев или методом ПР во иремя перегрузки Методом ПР с разных мест 7 кг > > 0.5—1.0 100 1 шрот в мешках Зерно, жмыхи и отдельных мешков Методом ПР из струи в рав- 7 кг 1 » 0.5—1.0 100 т шрот во время перегрузки Силос, свекломич- ных интервалах Метод ПР при удалении 2 л Перемешать и выделить 0,25 ный жом, пульпа, отвары верхнего слоя на глубине 30 см средний образец

Mukhumm аглнчик* дли отбор* ПС«>	Матетлал	Способ отбора про’	Величии* средней пробы или ИСХОДНОГО обр*ТЦ*	Подготовка среднего образца	Величина среднего образца, кг
		Материал в кусках (картофель, свекла и л		»- д.)
100 т	В хранилищах	Метод ПР, с верхнего, среднего и нижнего слоев	7 кг	Материал иочетвертоватъ, взять 1/4 часть, перемешать, измельчить и выделить средний образец	0.5—1.0
Одно средство транспорта	В средствах транспорта	Метод ПР. с верхнего, среднего и нижнего слоев Соломоподоб	3 кг ный материал	То же	0.5—1,0
До 100 т	Непрессован ни А	Метод ПР, на расстоянии 50 см от верха и низа из 20 мест	2 кг	Измел.чить, перемешать и выделить средний образец	0,1—0,2
Др 100 т	Прессованный	Метод ПР. из тхжов посте снятия с них проволоки Брать горстью с трех разных мест, стараясь не ломать растений	2 кг	То же	0,1-0,2
	Фрукты и овощи свежие	Метод ОШ, из различных упаковок, ящиков и т. д. из разных слоев	Из упаковок	Как в приложении 1, овощные культуры и фрукты	0,5—0,25
	Яблоки, груши, ПСрСЯКИ, айва	То же	10 кг (не менее 100 шт.)	Как в приложении 1, семечковые фрукты	0.5
	Абрикосы, сливы	» 1	4 кг (не менее 100 шт.)	Как в приложении 1, вишни. черешни, сливы	0,5-0,25
	Черешня, вишня, виноград, земляника	» »	4 кг	Как в приложении 1, вишни, черешни, сливы, виноград	0,5-0,25

Макснка.тыыи •гличииа для отбора проб Материал Способ отбора проб Величина средакА проб*. или ИСХОДНОГО об рома Модгогоака среднего образца Величака среднего образца, кг Крыжовник, ело- .Метод ОШ, из различных 3 кг Как в приложении 1, ягоды 0,5-0,25 родина. малина упаковок, ящиков и т. д. из разных слоев Садовая земляника То же 2 кг Как в приложении 1, мкг- 0,5-0,25 и другие лесные кие фрукты ягоды Огурцы, капуста » > 3 кг Как в приложении 1, поми- 0.5 кольраби, кор- доры. перец, огурец к неплоды, перец. бахчевые редис, помидоры Капуста белокочан* 1 • 10 кочанов Как я приложении 1. ка- 0,5 на я, к рас коко- лустные и лиственные чанная, цветная, овощи салат Молодая кухуруза > > 10 початков Как в приложении 1, хуку- ММЙ 0,25-0,5 Овощи в пучках 1 > 10 пучков г/** Как в приложении 1, овощ- ные культуры Бахчевые > » 5 штук — Другие овощи > . » 1 кг Как в приложении 1, овощ- 0,25-0,5 ные культуры

Овощи и фрукты сушеные

ООО упако	Овощи и фрукты	Метод ПР, с трех слоев	1-3 кг	Кусочки или брикеты из
вок	в виде кусочков			мельчить, перемешать и выделить средний обра
				зец
	Овощи и фрукты		0.6 кг	То же
	ь виде порошка и сушеной зелени

Ммсгим&льиая величин* для отборе проб	Материал	Способ отбора проб	Величина среднее пробы или исходного обрахца	Подготовка среднего образца	Величина среднего образца, кг
	Овощи и фрукты в брикетированной виде	Метод ВС. брикеты массой более 1 кг — отрезать сектор 1—2 см от крася, брикеты массой менее 1 кг — по одному брикету	1—3 кг	Кусочки или брикеты измельчить, перемешать и выделить средний образец	0.25

Пищссш продукты в жидкой форме

В крупной таре Метод ПР, тара высотой 2 л Разовые пробы сливают, пе (контейнеры, ци до 2 м — полный слой. ремешивают, выделяют стерны , баки, тара выше 2 м —с тред среднюю пробу и средний бочки и т. д.) уровней образец В мелкой таре (фляги, бутылки, банки) Метод ПУ 2 л Исходные образцы сливают, перемешивают, выделяют среднюю пробу и средний образец То же Во время перегрузки Метод ПР, с разных мест отдельных мешков 2 л

Пищевые продукты мазеобразной и твердой консистенции

В крупной таре Метод ПР. тара высотой до 2 м — полный слой, тара выше 2 м —с трех уровней 0,5—2 кг Разовые пробы сливают, перемешивают. выделяют среднюю пробу и средний образец, при этом исходные образцы материала твердой консистенции измельчаются В мелкой таре Метод ПУ 0.2—1 кг Исходные образцы объединяют. перемешивают, выделяют среднюю пробу и средний образец

Мнхгмыаль*»» величии* для отбор* проб	Матерная	Способ отбор* проб	Величии* средней пробы ИЛИ неходкого Обрило*	Подготояк» среднего обрило*	Величин* среднего обрив*, кг
Пии	\гше продукты в упаковке (консервы, товар в бумажной или пластмассовой упаковке, в мешках и				от. д.)
	Сгущенное молоко, джем, повидло и др.	Метод ПУ	1 банку от варки или 2 кг	В случае взятия 1 банки она составляет средний образец, а других случаях перемешать н выделить средний образен	0,5—1
	Мясные консервы	То же	1 кг	Измельчить, перемешать и выделить средний образец	0.5
	Другие товары (мука, крупа, чай, кофе и др.)	> 1 Продукты в ку	1 кг сках без упаковки	Удалить упаковки, перемешать, если нужно, измельчить н выделить средний образец	0,25-0,5
	Мясопродукты (ветчина. бекон, сало, колбаса и др.)	Метод ИР	0.5 кг	Отрезать исходные образцы массой 10 г с разных единиц продукции, измельчить и перемешать, средняя проба составляет средний образец	0,5
	Сосиски и сардельки	Метод ОШ	0.4—0.5 кг	Отделить как исходные образцы сосиски и сардельки, ие нарушая их целостности	0.4—0,5
	Твердый сыр	Метод ПР	0.05-0.1 кг	Исходные образцы измельчить, перемешать, они составляют средний образец	0,05-0,1

ПРЕДИСЛОВИЕ

Повышение благосостояния народа всегда находится в центре внимания КПСС. Об этом свидетельствует разработанная в соответствии с решением XXVI съезда партии и одобренная майским (1982 г.) Пленумом ЦК КПСС Продовольственная программа СССР на период до 1990 года. Одной из важнейших задач этой программы является развитие материально-технической базы агропромышленного комплекса, что предусматривает, в частности, расширение производства высокоэффективных средств защиты растений и увеличение их поставки сельскому хозяйству. Более широкое применение химических средств защиты растений позволит получать большую урожайность сельскохозяйственных культур, улучшит качество выращиваемой продукции и условия ее хранения.

Однако если неумело использовать химические средства защиты растений, то остатки пестицидов могут попасть в продукты питания, корма и объекты окружающей среды. Поэтому правильному применению пестицидов в нашей стране, как и вообще охране окружающей среды, уделяется особенно большое внимание. Научно обоснованной программой охраны природы в СССР явились постановления ЦК КПСС и Совета Министров СССР «Об усилении охраны природы и улучшении использования природных ресурсов» (1972 г.) и «О дополнительных мерах по усилению охраны природы и улучшению использования природных ресурсов» (1978 г.), которые директивно обязывают вести контроль за остатками пестицидов в продуктах питания, воде, почве и воздухе. Для предотвращения загрязнения окружающей среды пестицидами введено строгое регламентирование их применения, совершенствуются технология получения и применения пестицидов и препаративные формы их. Одно из обязательных требований, которое позволяет включать пестициды в список препаратов, разрешенных к применению, является разработка методов определения их остатков в продуктах питания, воде, почве и воздухе.

В предлагаемой книге представлены методические указания по определению остаточных количеств пестицидов в различных средах, разработанные спе-циалистами-аналитиками различных министерств и ведомств. В разработке данных указаний принимали участие: Т. Г. Аббасов, В. Д. Агарков, С. Л. Акоронко, Т. В. Алдошина, И. А. Антонова, Ж. А. Арутюнян, Г. У. Аслалян, Э. И. Бабкина, Ю. С. Баранов, Г. А. Бегунов, А. Б. Белова, С. Г. Билуши, Н. П. Бирюков, Ц. И. Бобовникова, 3. Н. Богомолова, М. Ф. Болоховец, К. А. Большакова, Г. С. Борисов, А. М. Ботвиньева, Л. И. Бублик, Г. Т. Брюшнина, Н. В. Букина, А. Л. Бурштейн, А. С. Василенко, Л. В. Васильковская, Р. Д. Васягина, Л. В. Воронин, И. В. Воинова, К. А. Гар, С. Г. Геворкян, В. М. Гезиков, Г. Н. Георгиева, Д. Б. Гиренко, И. Н. Гладенко, Н. И. Глембицкий, В. Е. Горбунова, Р. С. Горенштейн, В. А. Давтян, Э. Б. Данилова, Е. Г. Даурова, В. Ф. Демченко, А. В. Дибцева, Т. А. Евстегнеева, В. В. Егоров, В. В. Ермаков, А. В. Жарков, В. Н. Жуленко, А. Ф. Заболотный, И. Ш. Заманская, А. И. Затула, И. 3. Зисерман. 3. Златьев, А. И. Зорсва, Т. И. Зубко, Л.Н. Ка-вецкая, И. Н. Карпова, У. С. Кашимов, В. И. Кириченко, Н. И. Киселева, М. А. Клисенко, Е. С. Ковалева, А. Ф. Конюхов, В. В. Королев, Ф. И. Копытова, Е. И. Косачева, И. А. Кочеровская, В. И. Кофанов, И. Ш. Кофман, А. Н. Крылова, О. С. Кухтина, В. В. Лещев, Л. И. Лещинская, С. А. Ликунова, А. М. Макеева, О. А. Малинин, И. Н. Матвиенко, И. Л. Меерзон, Ф. Р. Мель-цер, Л. Д. Микадзе, Г. В. Миронюк, Н. А. Мовсетян, В. В. Молочников,

Максимальная величина л ля отбора проб	Материал	Способ отбора проб	Величина средней пробы или исходного об puna	Подготовка среднего обрела	Величина среднего обрата, кг
		Молоко
	Со сливного пункта	Из цистерн (танков) 3 пробы с разной глубины по 100 мл. Из струи 3 пробы с интервалом в несколько минут	100 МЛ	Каждая средняя проба является средним образцом	300 МЛ
	С молочных ферм	От 10 выбранных коров в определенном хозяйстве по 100 мл	1.0 л	То же	0.5 л
	Из торговой сети	Методом ОШ, бутылки иди другая упаховка Молочные напитки (см	1.0 л стана, йогурт и т	а * . п.)	0.5 л
	С молокозавода и in торговой сети	Из цистерн (танков) 3 ппо-бм с разной глубины. Из упаковок методом ОШ	100 мл	Каждая средняя проба является средним образцом	300 мл
	Масло	Методом IIP или ПУ	0,5—2 кг	Разовые пробы смешать и выделить средний образец	0.2—0,23

Сыры

Твердые сыры	Методом ПР	0.05-0.1 кг	Средние пробы измельчить н перемешать, это составит средний образец
Мягкие сыры	То же	0.5-2 кг	Разовые пробы смешать и выделить средний образец
В упаковке	Методом ОШ	0.5 кг	То же

Л. П. Моргунова, Г. К. Морина, Ю. Ф. Моряков, В. И. Мочалов, В. И. Мурзой А. А. Непоклонов, И. П. Нестерова, К. Ф. Новикова, Л. В. Новикова, Н. И. Пав лова, Ф. И. Патрашку, К. Н. Пашкевич, С. Д. Павлов, Т. М. Петрова Н. В. Перетолчин, Р. Д. Петухов, М. С. Петросян, А. Л. Перцовский, И. И. Пи лснкова, М. В. Письменная, Т. В. Пластинина, Л. Р. Полищук, В. Н. Полякова Н. Г. Попова, Н. Я. Пестовский, Л. С. Прииутина, IO. А. Присмотров Н. В. Птицина, У. Ф. Пулатов, Г. Г1. Пушкина, Б. А. Рехтер, Л. Д. Рузанкова И. И. Ряженов, П. А. Самгин, Э. О. Сахкалян, В. А. Силаев, М. А. Стемпков ская, Л. С. Самосват, Л. А. Смирнова, А. А. Сиверина, Л. К. Слепова Ж. С. Степанян, Н. Г. Стеланченко, В. В. Стеценко, Г. А. Таланов, С. М. Ти хомиров, Г. А. Трондина, Г. П. Угрюмова, А. Д. Фатьянова, Ь. Ф. Филимонов М. М. Филимонова, Л. А. Хилик, Л. И. Хлюпнна, В. Д. Чмиль, Д. И. Чканни ков, Л. Д. Чудакова, Э. П. Чурпий, Н. И. Шадрин, А. М. Шмигидина А. И. Шумкова, 3. Ф. Юркова.

Методические указания апробированы группой экспертов при Госкомнссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками Министерства сельского хозяйства СССР, одобрены лабораторным советом при Министерстве здравоохранения СССР и утверждены заместителем Главного государственного санитарного врача СССР в качестве официальных.

Методические указания предназначены для контроля за содержанием остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктах, кормах, объектах окружающей среды агрохимическими, ветеринарными, контрольно-токсикологическими лабораториями Министерства сельского хозяйства СССР, санитарно-эпидемиологическими станциями и научно-исследовательскими институтами Министерства здравоохранения СССР, лабораториями Госкомгидромета СССР, а также лабораториями научно-исследовательских институтов других министерств и ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

БИОПРЕПАРАТЫ

Утверждаю Заместитель Главного государственного санитарного врача СССР

А. И. Зайченко 18.10.1977 № 1796—77

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ГОМЕЛИНА В ОБЪЕКТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИМ МЕТОДОхМ ¹

Краткая характеристика препарата. Гомелин — бактериальный инсектицидный препарат, состоящий из энтомопатогенного компонента (споры и продукты жизнедеятельности кристалло-спорообразующих бактерий Bacillus thuringiensis var. thuringiensis) 5—10% и инертного наполнителя (каолин и т. п.) 90—95%. Препарат представляет собой мелкодисперсный аморфный порошок серого цвета, имеющий слабый специфический запах. В воде образует нестойкую суспензию. Споры Вас. thuringiensis выдерживают длительное кипячение, а кристаллоиды белоксодержащего эндотоксина разрушаются при температуре 60°С и выше.

Бациллы Вас. thuringiensis неинфекцнонны для теплокровных организмов. Токсичность гомелина малая: ЛДм для белых мышей и крыс при введении в желудок более 10 г/кг. Допустимые остаточные количества препарата в продуктах питания не установлены. Ориентировочное значение ПДК в воздухе рабочей зоны 1,0 мг/м³.

Препарат применяют в качестве кишечного и контактного инсектицида. Он обладает относительно высокой избирательностью действия на насекомых.

Методика определения. Основные положения. Принцип метода. Метод основан на получении смыва с фильтрующего материала, растений Вас. thuringiensis при оптимальной температуре, идентификации и подсчете выросших колоний, пересчете бактериальной обсемсненности на содержание технического препарата в исследуемом объекте.

Метрологическая характеристика метода. Диапазон определяемых концентраций от 0,01 мкг до 10 мг в 1 мл. Предел обнаружения 0,01 мкг, 0,08 мг/кг, 0,8 мкг/м³ воздуха. Среднее значение степени определения стандартных количеств препарата составляет 80% (95—60) при шести исследованных параллельных пробах. Стандартное отклонение отдельного определения равно 10,5%. Относительное стандартное отклонение соответствует 0,13. Доверительный интервал среднего значения при 6 и надежности а=0,95 равен ±13,8%.

Избирательность метода. Метод избирателен в присутствии Bacillus cereus и других почвенных спорообразующих бактерий.

Реактивы и материалы. Аналитические аэрозольные фильтры типа АФА-БА, АФА-ХА и т. п. Иммерсионное масло. Малахитовый зеленый, 5%-ный водный раствор. Метиленовый синий, 0,3%-ный этанольный раствор. хМясо-псптонный агар 1,5%-ный при pH 7,0—7,2. Физиологический раствор стерильный. Формалин. Эозин, 0,5%-ный водно-карболовый раствор.

Приборы и посуда. Автоклав. Аппарат для встряхивания. Водяная баня. Колбы на 100 мл. Микроскоп. Петля микробиологическая. Пипетки на 1 и 10 мл. Пробирки. Резиновые соединительные трубки. Стекла предметные. Термостат. Фильтродержатели. Чашки Петри. Шпатель Дрыгальского. Эксикатор. Электроаспиратор. Посуду и питательные среды стерилизуют в автоклаве при

120°С в течение 30 мин. Аналитические фильтры стерилизуют в эксикаторе в парах формалина в течение 24 ч.

Отбор пробы. Улавливание гомелина (Bacillus thuringiensis) из воздуха осуществляется на аналитические аэрозольные фильтры из ацетилцеллюлозы путем фильтрации через них воздуха. Через фильтр просасывают 10—100 л воздуха со скоростью 5—15 л/мин. Пробы растений, почвы и других объектов окружающей среды отбирают в количестве 10—15 г. Отбор и хранение проб проводятся с соблюдением стерильности. Пробы хранят при температуре 2— 5°С.

Ход анализа. Аналитический фильтр, или навеску растений, почвы и т. п., в количестве 1—2 г помещают в колбу, заливают 10—20 мл физиологического раствора и смывают гомелин (Вас. thuringiensis) путем встряхивания в течение 20—30 мин. Затем колбу помещают в водяную баню с температурой воды 80°С на 10 мин. Из пастеризованного смыва готовят разведения в физиологическом растворе 1 : 10, 1 : 100 и т. д. На чашки Петри с мясо-пептонным агаром засевают по 0,1 мл исходного смыва и его разведений (в зависимости от предполагаемого бактериального обсеменения исследуемой пробы). На каждое разведение используют по 2—5 чашек.

Чашки Петри помещают в термостат с температурой нагрева 28°С. Через 48—72 ч проводят идентификацию и подсчет колоний Вас. thuringiensis. При идентификации учитывают внешний вид колоний (компактные, 1,5—2,5 мм в диаметре, сероватого цвета, с ризоидиыми краями) и готовят из «характерных»» колоний препараты для микроскопического исследования.

На чистое обезжиренное предметное стекло наносят каплю физиологического раствора и микробную массу из части колонии, смешивают и распределяют на площади 0,5—1,0 см², высушивают на воздухе, фиксируют над пламенем горелки и красят раствором метиленового синего в течение 2—3 мин. Рассматривают препарат в микроскоп через иммерсионную систему.

Вас. thuringiensis-сине-фиолетовые крупные палочки [(2,5—5,0) X (1,3— 1,8) мкм) с закругленными концами, одиночные или в виде нитей из 5—10 клеток. Через 48—72 ч роста на мясо-пептонном агаре Вас. thuringiensis образуют споры (овальной формы, 0,7x1,0 мкм, размещенные около центра клетки) и кристаллоидные бслоксодержащие включения эндотоксина (ромбовидной или овальной формы, 0,5X2,0 мкм). Для дифференциации Вас. thuringiensis от Вас. cereus и других почвенных спорообразующих бактерий применяют специальный метод окраски препаратов.

Мазок красят раствором малахитового зеленого при подогреве над пламенем горелки до появления паров, промывают водой и докрашивают в течение 30 с водно-карболовым раствором эозина. При этом способе окраски споры становятся зелеными, а кристаллоиды эндотоксина — красными. Вас. cereus и другие почвенные спорообразователи не содержат указанных кристаллоидов, что и служит дифференциальным признаком.

После идентификации подсчитывают колонии Вас. thuringiensis, выросшие на каждой чашке Петри. В расчет принимают то разведение смыва, при дублированном посеве которого на чашке Петри выросло по 25—250 колоний Вас. thuringiensis.

Обработка результатов анализа. Концентрацию гомелина в пробе воздуха (X, мг/м³), почвы, растений и других объектов (X, мг/кг) рассчитывают по формуле:

АВУу 1000 ^х ~    CVV,

где А — среднее значение количества колоний Вас. thuringiensis на чашках Петри, засеянных принятым в расчет разведенным смывом, мг; В — принятое в расчет разведение смыва (1, 10, 100 и т. п.); С — «титр» гомелина, микробных тел/мг; V — объем засеянного на чашку Петри разведенного смыва, мл; V\ — объем смыва, мл; V₂— объем пробы воздуха, приведенный к нормальным условиям, или навеска пробы растений и т. п., л или г; 1000 — коэффициент пересчета литров в кубические метры или граммов в килограммы.

Помимо определения гомелина, метод применим для целей санитарного

контроля за процессами производства и применения других бактериальных инсектицидных препаратов на основе кристалло-спорообразуюших бактерий вида Вас. thuringiensis (инсектин, дендробациллин, битоксибаииллин и т. п.). Эти препараты содержат споры и продукты жизнедеятельности различных вариете-тов Вас. thuringiensis, но столь близки по физико-биологическнм и токсиколого-гигиеническим характеристикам, что нет необходимости в строгой дифференциации их при совместном нахождении в объектах окружающей среды. По этим соображениям идентификация Вас. thuringiensis до вариетста (серотипа) не предусматривается данной методикой.

Отбор проб растительного материала на корню

Максимальная величина поля или партия дли отбора проб	Маге риал	Способ отбора проб*	Величпа средней npoSM или исходного обрами	Подготовка среднего обратив	Величина среднего об рези*, кт
100 га	Злаковые на корню	Зерновы Методы ОШ, 0,5 кг в	3 кг	Зерно отделить, измель-	0,25—0,50
100 га	Кукуруза	точке Семена кормовых культ Методом СС, не менее	пур на корню Початки из 18 рас-	чить, тщательно перемешать и выделить средний образец Зерно отделить, измель-	0,25-0,50
50 га	Боб кормовой	18 растений Методом ПД	тений 1000 бобов	чить и отвесить средний образец То же	0,5—1,0
50 га/30 т	Рапс, сурепица, горчица	Промышленные Метод СС. 0.5 кг в	культуры 3 кг	Семена вышелушить,	0,25
50 га/30 т	Мах масличный	точке Метод СС, 0,5 кг в	3 кг	измельчить, перемешать и отвесить средний образец То же	0,25
50 га/ЭО т	Подсолнечник	точке Метод СС, по 5 корей-	20—30 корзинок	> »	0,25
20 га/30 т	Лен	иок в точке Метод СС	1 кг коробочек	а »	0,25
20 га/30 т	Хмель	Метод ПД, взять нес-	0,30 кг шишек	Шишки измельчить, пе-	0,25
100 га		кольхо шишек		ре мешать и выделить средний образах

3 С- Максимальная М-ЛЯГЯИИ* ПОЛЯ иля партии дли отЛорв проб Материал Способ отбора проб среднее пробм ИДИ ПС ЙОДНОГО OCfMMla Подготовка среднего обрами Вслижая среднего оврага* ■ КГ 50 га/100 т Кормовая свекла, Метод ПД, не менее 15 Нс мсмсс 15 корней. измельчить, перемешать и выделить средний образец Корни вымыть, обсу- 0,5 50 га/100 т брюква Картофель целых растений Метод ПД, с 15 точек нс менее 3 кг Нс менее 3 кг шить, почетвертовать. От каждого взять Ч, часть, четвертинки измельчить, перемешать и отвесить средний образец Клубни вымыть, обсу- 0.5 взять окаю 50 гнезд выборочно шить, с каждого взять патовину или четверть, измельчить и отвесить средний образец Овощные культуры 2—5 га 0,5-0,25 Капустные овощные килтуры 20 га 1 Капуста белая, красная, 1 | Метод ПД, не менее 10 I 4 кг | С каждого кочана взять 1 0.5 савойская растений, не мсисс Ч, часть. Перед из 1 1 4 КГ 1 мельчением четвертинок! Овощные корнеплоды (морковь, петрушка, сельдерей. с толовая свекла, редис, редька и ДР.)

Крупные — 3 кг. мелкие — I кг, ранние —0,25—0,5 кг Метод ПД. корни, а для овощей, используемых в ранний период развития (петрушка, столовая свекла). целые растения

Отбросить несъедобные части растений, остатки материл.'л вымыть, обсушить, крупные овощи почетвертовать и отбросить */,. Пробу измельчить, перемешать и выделить средний образец

---

1

Методические указания разработаны В. И. Мурзой (ВНИИГИНТОКС).