ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО ПО ТЕХНИЧЕСКОМУ РЕГУЛИРОВАНИЮ И МЕТРОЛОГИИ

НАЦИОНАЛЬНЫЙ    ГОСТ Р

стандарт    54686—

российской    2011

ФЕДЕРАЦИИ

ИЗДЕЛИЯ КОНДИТЕРСКИЕ

Метод определения массовой доли насыщенных

жирных кислот

ISO 15304:2002 (NEQ)

Издание официальное

Москва

Стандартинформ

2013

Предисловие

Цели и принципы стандартизации в Российской Федерации установлены Федеральным законом от 27 декабря 2002 г. № 184-ФЗ «О техническом регулировании», а правила применения национальных стандартов Российской Федерации — ГОСТ Р 1.0-2004 «Стандартизация в Российской Федерации. Основные положения»

Сведения о стандарте

1    РАЗРАБОТАН Государственным научным учреждением Научно-исследовательским институтом кондитерской промышленности Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ НИИ КП Россельхозакадемии)

2    ВНЕСЕН Техническим комитетом по стандартизации ТК149 «Кондитерские изделия»

3    УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 13 декабря 2011 г. №845-ст

4    В настоящем стандарте учтены основные нормативные положения международного стандарта ИСО 15304:2002 «Жиры и масла животные и растительные. Определение содержания трансизомеров жирных кислот в растительных жирах и маслах. Метод газовой хроматографии» (ISO 15304:2002 «Animals and vegetable fats and oils — Determination of the content oftrans fatty acid isomers of vegetable fats and oils — Gas chromatographic method»)

5    ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодно издаваемом информационном указателе «Национальные стандарты», а текст изменений и поправок — в ежемесячно издаваемом информационном указателе «Национальные стандарты». В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячно издаваемом информационном указателе «Национальные стандарты». Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет

© Стандартинформ, 2013

Настоящий стандарт не может быть полностью или частично воспроизведен, тиражирован и распространен в качестве официального издания без разрешения Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии

УДК 664.6:543.06:006.354    ОКС 67.180.10    ОКП    91    2000

91 3000

Ключевые слова: изделия кондитерские, метод определения массовой доли насыщенных жирных кислот, разделение метиловых (этиловых) эфиров жирных кислот на кварцевой капиллярной газохроматографической колонке, методы испытаний, обработка результатов

9

Редактор Л.В. Коретникова Технический редактор В.Н. Прусакова Корректор В.И. Баренцева Компьютерная верстка А.Н. Золотаревой

Сдано в набор 22.07.2013. Подписано в печать 29.07.2013. Формат 60 х 84^. Гарнитура Ариал. Уел. печ. л. 1,40. Уч.-изд. л. 1,05. Тираж 203 экз. Зак. 815.

ФГУП «СТАНДАРТИНФОРМ», 123995 Москва, Гранатный пер., 4. www.gostinfo.ru    info@gostinfo.ru

Набрано во ФГУП «СТАНДАРТИНФОРМ» на ПЭВМ.

Отпечатано в филиале ФГУП «СТАНДАРТИНФОРМ» — тип. «Московский печатник», 105062 Москва, Лялин пер., 6.

НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ИЗДЕЛИЯ КОНДИТЕРСКИЕ Метод определения массовой доли насыщенных жирных кислот

Confectionery. Method for determination of a mass fraction of the sated fatty acids

Дата введения — 2013—01—01

1    Область применения

Настоящий стандарт распространяется на кондитерские изделия и кондитерские полуфабрикаты (далее — продукты) и устанавливает газохроматографический метод определения массовой доли насыщенных жирных кислот (приложение А), входящих в состав жиров продуктов.

2    Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:

ГОСТ Р ИСО 5725-6-2002 Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 6. Использование значений точности на практике

ГОСТ Р 12.1.019-2009 Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты

ГОСТ Р 53228-2008 Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания

ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности

ГОСТ 12.1.018-93 Система стандартов безопасности труда. Пожаровзрывобезопасность статического электричества. Общие требования

ГОСТ 1770-74(1042—83, ИСО 4788—80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия

ГОСТ 3022-80 Водород технический. Технические условия

ГОСТ 3273-75 Натрий металлический технический. Технические условия

ГОСТ 5904-82 Изделия кондитерские. Правила приемки, методы отбора и подготовки проб

ГОСТ 6995-77 Реактивы. Метанол-яд. Технические условия

ГОСТ 8677-76 Реактивы. Кальция оксид. Технические условия

ГОСТ 9293-74 (ИСО 2435—73) Азот газообразный и жидкий. Технические условия

ГОСТ 12026-76 Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия

ГОСТ 17299-78 Спирт этиловый технический. Технические условия

ГОСТ 17433-80 Промышленная чистота. Сжатый воздух. Классы загрязненности

ГОСТ 18300-87 Спирт этиловый ректификованный технический. Технические условия

ГОСТ 20015-88 Хлороформ. Технические условия

ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ 28498-90 Термометры жидкостные стеклянные. Общие технические требования. Методы испытаний

Издание официальное

ГОСТ 29227-91 (ИСО 835-1—81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования

ГОСТ 29228-91 (ИСО 835-2—81) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 2. Пипетки градуированные без установленного времени ожидания

Примечание — При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования — на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодно издаваемому информационному указателю «Национальные стандарты», который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по соответствующим выпускам ежемесячно издаваемого информационного указателя за текущий год. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

3    Условия проведения измерений

При подготовке и проведении измерений должны быть соблюдены следующие условия:

-    температура окружающего воздуха................................(20    +    5)    °С;

- атмосферное давление...............................(9,33 -10⁴—1,07 • 10⁵) Па;

-    относительная влажность воздуха..............................не    более    75    %;

-    напряжение в сети..........................................(220    +    10)    В.

4    Требования безопасности

При выполнении измерений необходимо соблюдать требования безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007, пожаровзрывобезопасности по ГОСТ 12.1.018, электробезопасности по ГОСТ Р 12.1.019, а также требования, изложенные в технической документации на применяемые средства измерений и вспомогательное оборудование.

5    Требования к квалификации оператора

К выполнению измерений и обработке результатов допускается специалист, имеющий опыт работы на газовом хроматографе и персональном компьютере и прошедший инструктаж по обращению с реактивами, технике электробезопасности и пожарной безопасности.

6    Отбор и подготовка проб

Отбор и подготовку проб для проведения измерений проводят по ГОСТ 5904.

7    Сущность метода

Метод заключается в разделении метиловых эфиров жирных кислот на кварцевой капиллярной газохроматографической колонке с последующим расчетом массовой доли насыщенных жирных кислот.

8 Средства измерений, вспомогательное оборудование, реактивы и материалы

Хроматограф газовый, оснащенный: пламенно-ионизационным детектором (ПИД), обеспечивающим нагревдотемпературы не менее 350 °С; термостатом, с программированием температуры, обеспечивающим нагрев колонки до температуры не менее 250 °С; инжектором, обеспечивающим нагрев до температуры не менее 300 °С; компьютером с программным обеспечением.

Колонка газохроматографическая кварцевая капиллярная с неподвижной фазой: цианопропилфе-нил 10 %, бисцианпропил полисилоксана 90 %; длиной не менее 30 м, внутренним диаметром 0,32 мм, толщина неподвижной фазы 0,2 мкм.

Микрошприц вместимостью 10 мм³. ¹

ГОСТ Р 54686-2011

Весы по ГОСТ Р 53228, обеспечивающие точность взвешивания с пределами допускаемой абсолютной погрешности + 0,2 мг;

Ротационный испаритель с диапазоном скорости вращения колбы от 5 до 100 об/мин, диапазоном температуры нагрева бани от 20 °С до 100 °С.

Баня водяная, обеспечивающая поддержание температуры до 100 °С с погрешностью не более + 2 °С.

Аппарат Сокслета, состоящий из:

-    насадки НЭТ-250 ТС по ГОСТ 25336;

-    холодильника ХШ-1-200-29/32 ХС по ГОСТ 25336;

-    колбы П-1 -250-29/32 по ГОСТ 25336.

Пипетка 1(2,3)-1(2)-1(2)-1; 1(2,3)-1(2)поГОСТ29227, ГОСТ 29228.

Пробирка П-4-10-14/23 ХС со шлифом и пластмассовой пробкой по ГОСТ 25336.

Цилиндр 1—250 или 3—250 по ГОСТ 1770.

Воронка лабораторная В-25-38 ХС или В-36-50 ХС по ГОСТ 25336.

Колба 2-25-2 по ГОСТ 1770.

Колба К-1 -1000-29/32 ТС-2 по ГОСТ 25336.

Колба К-1-500-29/32 ТС по ГОСТ 25336.

Холодильник ХШ-1-400-29/32 ХС по ГОСТ 25336.

Стаканчик для взвешивания СВ-19/9 по ГОСТ 25336.

Термометр жидкостный стеклянный по ГОСТ 28498, с интервалом температур от 0 °С до 100 °С и ценой деления 0,5 °С.

Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026.

Водород технический марки А по ГОСТ 3022 или водород электролизный от генератора водорода типа СГС-2.

Воздух класса 0 по ГОСТ 17433.

Газ-носитель: азот газообразный по ГОСТ 9293, ос. ч., или гелий (сжатый) тщательно просушенный, с содержанием кислорода менее 10 мг/кг.

Натрий металлический по ГОСТ 3273.

Окись кальция по ГОСТ 8677, ч. д. а.

Метилат натрия, ч. д. а., раствор в метаноле 30 %.

Гексан для хроматографии, ос. ч.

Метанол-яд по ГОСТ 6995, х. ч., для получения абсолютно сухого метилового спирта и метиловых эфиров жирных кислот.

Хлороформ (трихлорметан) по ГОСТ 20015.

Спирт этиловый технический по ГОСТ 17299 или спирт этиловый ректификованный технический по ГОСТ 18300.

Стандартная смесь метиловых эфиров жирных кислот.

Допускается применение других средств измерений и вспомогательного оборудования с метрологическими и техническими характеристиками и реактивов по качеству не ниже указанных.

9 Подготовка к измерению

9.1    Приготовление абсолютного метанола

В колбе вместимостью 500 см² взвешивают (30 ± 1) г окиси кальция, добавляют 250 см² метанола и кипятят с обратным холодильником типа ХШ в течение 6—8 ч. Затем метанол перегоняют в перегонном аппарате при температуре 64,7 °С.

9.2    Приготовление раствора метилата натрия в абсолютном метаноле концентрацией 2 моль/дм²

Взвешивают 2,7 г метилата натрия или 1,15 г металлического натрия в стаканчике для взвешивания. Результат записывают в граммах до второго десятичного знака.

В мерную колбу вместимостью 25 см² наливают 10—12 см² абсолютного метанола, добавляют метилат натрия или осторожно вносят маленькими кусочками натрий и перемешивают до полного растворения. После перемешивания раствор охлаждают до комнатной температуры и доводят абсолютным метанолом до метки.

Полученный раствор хранят в холодильнике при температуре от 3 °С до 8 °С в течение 1 мес.

9.3    Приготовление смеси хлороформа и этилового спирта в объемном соотношении 95 : 5

В мерную колбу вместимостью 10ОО см³ помещают 50 см³ этилового спирта. Объем раствора доводят до метки хлороформом и перемешивают.

9.4    Экстракция жира из кондитерских изделий и кондитерских полуфабрикатов

Массу анализируемой пробы рассчитывают так, чтобы она содержала от 1 доЗ г жира.

Измельченную анализируемую пробу взвешивают с записью результата в граммах до третьего десятичного знака, помещают в патрон из фильтровальной бумаги, который сворачивают таким образом, чтобы предотвратить переход анализируемой пробы в раствор. Патрон с образцом помещают в прибор Сокслета и проводят экстракцию смесью хлороформ — этиловый спирт в соотношении 95 : 5 в течение 5 ч.

После экстракции раствор жира выпаривают с помощью ротационного испарителя при температуре от 40 °С до 70 °С.

Оставшийся в колбе жир сушат при температуре от 60 °С до 70 °С на водяной бане до постоянной массы, затем охлаждают в эксикаторе 20 мин и взвешивают колбу с записью результата в граммах до третьего десятичного знака для определения массы экстрагированного жира.

9.5    Получение метиловых эфиров жирных кислот

Пробу полученного расплавленного жира перемешивают до равномерного распределения. В стеклянную пробирку вносят стеклянной палочкой 15—20 мгжира, растворяют его в 9,5 см³ гексана. В полученный раствор пипеткой добавляют 0,5 см³ раствора метилата натрия в абсолютном метаноле молярной концентрацией 2 моль/дм³. Реакционную смесь интенсивно перемешивают в течение 2 мин, затем отстаивают 5 мин. Декантируют верхний слой, содержащий метиловые эфиры.

Готовый раствор хранят в холодильнике не более суток.

9.6    Подготовка хроматографа к измерению

Подключение хроматографа к сети, подготовку и установку колонок и вывод прибора на режим выполняют согласно инструкциям по монтажу и наладке хроматографа.

10    Проведение измерений

На хроматографе устанавливают следующие условия анализа:

-    температура инжектора — 250 °С;

-    режим программирования термостата — от 50 °С до 240 °С со скоростью 10 °С/мин;

-    температура детектора — 290 °С;

-    скорость потока газа-носителя (азот или гелий) — от 1 до 5 см³/мин.

Проводят холостой опыт с гексаном, при этом на хроматограмме не должно быть посторонних пиков. Холостой опыт повторяют после анализа каждых десяти испытуемых проб.

Микрошприцем вводят в испаритель хроматографа 1 мм³ раствора метиловых эфиров кислот, запускают программу изменения температуры термостата и записи данных. Пример типичной хроматограммы, полученной при рекомендуемых условиях, приведен в приложении Б.

После разделения метиловых эфиров жирных кислот проводят идентификацию по времени выхода метиловых эфиров жирных кислот при анализе стандартной смеси метиловых эфиров жирных кислот.

11    Обработка резул ьтатов

11.1    Массовую долю метилового эфира каждой жирной кислоты рассчитывают путем определения скорректированной площади соответствующего пика относительно суммы скорректированных площадей всех пиков с учетом поправочного коэффициента для компенсации отклика ПИД на соответствующий компонент — метиловый эфир жирной кислоты.

При определении соответствующих поправочных коэффициентов используют расчетный метод или расчет на основании результатов анализа стандартной смеси метиловых эфиров жирных кислот, проведенных в условиях, идентичных условиям измерений анализируемой пробы.

11.2    Расчетный метод определения поправочного коэффициента

(1)

Поправочный коэффициент F_x для каждого компонента рассчитывают по формуле

_F м_х

4

^х (nx-i)A’

ГОСТ Р 54686-2011

где F_x — поправочный коэффициент для компонента х;

М_х — относительная молекулярная масса, рассчитанная по химической формуле компонентах; п_х — число атомов углерода метилированной жирной кислоты компонента х;

А_с — относительная атомная масса углерода (А_с = 12,01).

11.3    Расчет поправочного коэффициента на основании результатов анализа стандартной смеси метиловых эфиров жирных кислот

Проводят анализ стандартной смеси метиловых эфиров жирных кислот известного состава в условиях, идентичных условиям измерения анализируемой пробы.

Вычисляют поправочный коэффициент для метилового эфира каждой жирной кислоты (х) в стандартной смеси F_x по хроматограмме стандартной смеси и формуле

р _ m«-SAx    (2)

^Х АгхЦт_гх ’

где А_к — площадь пика метилового эфира каждой жирной кислоты (х) в стандартной смеси, в единицах площади;

^ А_к — сумма площадей всех пиков метиловых эфиров жирных кислот стандартной смеси, в единицах площади;

/л_к — масса метилового эфира каждой жирной кислоты (х) в стандартной смеси, мг;

^т_гх — сумма масс метиловых эфиров жирных кислот стандартной смеси, мг.

11.4    Расчет относительного поправочного коэффициента

Относительный поправочный коэффициент (по отношению к метиловому эфиру пальмитиновой кислоты С 16:0) рассчитывают для каждого компонента по формуле

где f_x — относительный поправочный коэффициент для компонента х;

F_x— поправочный коэффициент для компонентах;

F_r— поправочный коэффициент для С16:0.

Относительный поправочный коэффициент для С16:0 считается справочным (f_x = 1,00).

11.5 Расчет массовой доли компонента

Массовую долю метилового эфира каждой жирной кислоты w_x, %, с учетом относительного поправочного коэффициента рассчитывают по формуле

(4)

№Ю0

А

где А_х— площадь пика, соответствующего компоненту х, в единицах площади;

A_t— сумма скорректированных площадей всех пиков, за исключением пика растворителя, в единицах площади;

f_x — относительный поправочный коэффициент для компонента х.

11.6 Расчет массовой доли насыщенных жирных кислот

Вычисляют сумму массовых долей метиловых эфиров жирных кислот М, %, идентифицированных по полученной хроматограмме

М = 2>х.    (5)

где w_x — массовая доля компонента х, %.

Перечень насыщенных жирных кислот, входящих в жирно-кислотный состав триглицеридов кондитерских изделий и кондитерских полуфабрикатов, приведен в приложении Л.

Массовую долю насыщенныхжирных кислот в продуктахХ, %, рассчитывают по формуле

YT

00 ’

где Y — массовая доля экстрагированного жира, полученного по 9.5, %, рассчитанная по формуле

_y_(m₂-mi)-100    (7)

т

где — масса пустой колбы, г;

5

т₂ — масса колбы с полученным жиром, г; т — масса анализируемой навески, г.

Вычисления по (6) проводят до второго десятичного знака с последующим округлением до первого десятичного знака.

За окончательный результат определения массовой доли насыщенных жирных кислот в продуктах принимают среднеарифметическое двух параллельных определений, выполненных в условиях повторяемости, если выполняется условие приемлемости

1*1-*₂1 < 0,01- г_0тн х_ср,    (8)

гдеХ₁ иХ₂ — результаты двух определений, выполненных в условиях повторяемости, %;

Х_ср — среднеарифметическое двух определений, выполненных в условиях повторяемости, %; г— предел повторяемости (сходимости), приведенный в таблице при Р = 0,95, %.

Результат определения массовой доли насыщенных жирных кислот представляют в виде

Х_ср + 0,01 • 5 • Х_ср при Р = 0,95,    (9)

гдеХ_ср — среднеарифметическое значение двух определений массовой доли насыщенныхжирных кислот, признанных приемлемыми, %;

5 — значение относительной погрешности, приведенное в таблице 1, %.

Таблица!

Наименование показателя Диапазон измерений массовой доли, % Предел повторяемости (сходимости) при Р = 0,95 готн , % Предел воспроизводимости при Р = 0,95 ROTH, % Показатель точности (границы относительной погрешности) при Р = 0,95 + 5, % Массовая доля насыщенных жирных кислот От 0,1 до 50,0 4,0 6,0 5,0

12 Контроль точности результатов измерений

12.1    Проверку приемлемости результатов измерений, полученных в условиях повторяемости, проводят с учетом требований ГОСТ Р ИСО 5725-6 (пункт 5.2.2).

12.2    Проверку приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости, проводят с учетом требований ГОСТ Р ИСО 5725-6 (подпункт 5.3.2.1).

12.3    Процедуры и периодичность контроля точности (контроля стабильности) получаемых результатов измерений в пределах лаборатории проводят с учетом требований ГОСТ Р ИСО 5725-6 (раздел 6).

12.4    Разрешение противоречий в оценке качества продуктов между результатами двух лабораторий проводят в соответствии с ГОСТ Р ИСО 5725-6 (пункт 5.3.3).

6

ГОСТ Р 54686-2011

Приложение A (справочное)

Перечень насыщенных жирных кислот, входящих в состав жиров кондитерских изделий

и кондитерских полуфабрикатов

А.1 Перечень насыщенных жирных кислот, входящих в состав жиров кондитерских изделий и кондитерских полуфабрикатов, приведен в таблице А.1.

Таблица А.1

Условное обозначение жирных кислот	Наименование жирных кислот
	по женевской номенклатуре	по тривиальной номенклатуре
С4:0	Бутановая	Масляная
С6:0	Гексановая	Капроновая
С8:0	Октановая	Каприловая
С10:0	Декановая	Каприновая
С12:0	Додекановая	Лауриновая
С14:0	Т етрадекановая	Миристиновая
С16:0	Г ексадекановая	Пальмитиновая
С17:0	Гептадекановая	Маргариновая
С18:0	Октадекановая	Стеариновая
С20:0	Эйкозановая	Арахиновая
С22:0	Докозановая	Бегеновая

7

1

2