МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

ВАКЦИНА ЖИВАЯ СУХАЯ ПРОТИВ РОЖИ СВИНЕЙ ИЗ ШТАММА ВР-2

ТЕХНИЧЕСКИЕ УСЛОВИЯ

Издание официальное

I

I

Москва

Стандартинформ

2006

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

ВАКЦИНА ЖИВАЯ СУХАЯ ПРОТИВ РОЖИ СВИНЕЙ ИЗ ШТАММА ВР-2

Технические условия

Vaccine against erysipelas from VR-2. Specifications

МКС 11.220 OKU 93 8415

Дата педали 01.07.90

Настоящий стандарт распространяется на живую сухую вакцину против рожи свиней из штамма ВР-2, представляющую собой концентрированную живую культуру вакцинного штамма (Erysipelothrix insidiosa) ВР-2, разведенную в сахарозо-пептон-желатиновой среде на калий-фосфат-ном буфере, подвергнутую сублимационному высушиванию и предназначенную для профилактической иммунизации свиней против данного заболевания.

1. ТЕХНИЧЕСКИЕ ТРЕБОВАНИЯ

1.1.    Вакцина должна изготовляться в соответствии с требованиями настоящею стандарта по технологическим правилам, утвержденным в установленном порядке.

1.2.    Характеристики

1.2.1. Вакцина по физическим и иммунобиологическим свойствам должна соответствовать характеристикам и нормам, указанным в таблице.

© Издательство стандартов, 1990 © Стандартинформ, 2006

Продолжение

Наимемонамие показатели Характеристика и норма Количество живых бактерий в одной дозе, млрд 0,2 Безвредность После подкожной иммунизации вакциной 20 белых мышей массой 17—18 г в дозе 100 млн микробных клеток объемом 0,2 см3 допускается псрсболсванис и гибель нс более 5 животных. Наблюдение проводят в течение 10 сут Иммуногенная активность Вакцина при подкожном введении 10 белым мышам массой 17—18 г в дозе 100 млн микробных клеток в объеме 0,2 см3 должна предохранять от гибели нс менее 8 животных после подкожного их заражения (через 11 — 12 сут посте иммунизации) сухой заражающей культурой штамма N? 149 на физиологическом растворе в дозе по 100 ЛДзд в объеме 0,1 см3. Все 10 кошрольных белых мышей аналогичной массы, зараженных одновременно с вакцинированными, должны погибнуть в течение 3—4 сут. Срок наблюдения 10 сут посте заражения

1.3. Упаковка

1.3.1.    Бактериальную культуру, разведенную средой высушивания из расчета 1:50— 1:150 к весу бактериальной массы, расфасовывают по 2 см³ в стерильные флаконы вместимостью 20 см³ из дрота для лекарственных средст в и подвергают лиофильной сушке. После этого флаконы с вакциной закрывают резиновыми пробками и закатывают алюминиевыми колпачками. При фасовании допускается погрешность ± 3 %.

1.3.2.    Флаконы с сухой вакциной укладывают по 20—40 шт. в картонные коробки по ГОСТ 12301 с разделительными перегородками, обеспечивающими неподвижность и целостность флаконов. В каждую коробку вкладывают настаатснис по применению вакцины и номер упаковщика.

1.3.3.    Коробки с вакциной упаковывают в дощатые ящики по ГОСТ 10131 массой брутто не более 20 кг, которые при соблюдении условий транспортирования и хранения должны обеспечить сохранность препарата. Внутрь каждою ящика вкладывают контрольный лист с указанием наименования изготовителя, наименования вакцины, количества флаконов и лоз препарата в ящике, номера серии, даты упаковки, номера или фамилии упаковщика.

1.4. Маркировка

1.4.1.    На флаконы несмываемой краской наносят наименование предприятия-изготовителя, наименование препарата, номер серии и номер госконтроля, надпись «Годен до .. .*.

1.4.2.    На коробку с флаконами наклеивают этикетку, на которой указывают: наименование и товарный знак предприятия-изготовители;

полное наименование вакцины; номер серии и номер госконтроля; количество флаконов в коробке; объем вакцины во флаконе; количество доз во флаконе;

объем растворителя, в котором нужно растворить содержимое одного флакона;

дату изготовления (месяц, год);

срок годности;

дозу вакцины;

условия хранения;

обозначение настоящего стандарта.

1.4.3.    На каждое грузовое место наносят транспортную маркировку по ГОСТ 14192 с указанием манипуляционных знаков «Хрупкое. Осторожно*, «Беречьот нагрева* и предупредительную надпись «Биопрепараты».

1.4.4.    Маркировка, характеризующая данные об упакованной продукции, должна содержать: наименование изготовителя;

наименование биопрепарата, его количество в ящике; срок годности;

ГОСТ 28333-89 С. 3

условия хранения;

обозначение настоящего стандарта.

Совмещение транспортной маркировки и маркировки, характеризующей данные об упакованной продукции, на одной стороне транспортной тары нс допускается.

1.5. Требования безопасности, производственной санитарии и санитарно-противоэпидсмичсс-кого режима выполняют в соответствии с правилами техники безопасности, производственной санитарии и санитарно-противоэпидемического режима для предприятий но производству бактерийных и вирусных препаратов, утвержденными Минздравом СССР и правилами безопасности, производственной санитарии, охранно-карантинного и ветеринарно-санитарного режимов на предприятиях биологической промышленности Госагропрома СССР, утвержденными в установленном порядке.

2. ПРИЕМКА

2.1.    Каждая серия вакцины должна быть принята (проверена) на прсдприятии-изготовитслс государственным контролером Всесоюзного государственного научно-контрольного института ветеринарных препаратов Госагропрома СССР.

2.2.    Серией вакцины следует считать определенное количество препарата, изготовленного в процессе одного технологического цикла при одновременном выращивании культуры производственного штамма с последующим одновременным рссуспсндированисм бактерийной массы в одной емкости, фасованием и высушиванием в одном аппарате, имеющего одинаковую концентрацию живых бактерий рожи, оформленного одним документом о качестве (паспортом) с указанием:

наименования предприятия-изготовителя; наименования препарата; номеров серии и госконтроля; даты изготовления;

результатов испытания по показателям качества;

срока годности;

условий хранения;

обозначения настоящего стандарта;

номера и даты выдачи документа о качестве;

заключения и подписи лица, выдавшего документ о качестве.

2.3.    При определении внешнего вида и качества упаковки просматривают все флаконы серии.

2.3.1. Для проверки качества вакцины по другим показателям государственный контролер из

разных мест каждой серии делает выборку в количестве 0,4 • п (п — число флаконов в серии).

2.4.    При получении неудовлетворительных результатов испытаний хотя бы по одному из показателей проводят повторную проверку вакцины по этому показателю из удвоенного количества образцов препарата, взятых из этой серии, и на удвоенном количесгве опытных животных или других материалов. При неудовлетворительных результатах повторной проверки серию препарата считают нс соответствующей требованиям государственного стандарга и бракуют.

2.5.    В случае рекламации проверку образцов определенных серий вакцины проводят на прсдприятии-изготовитслс Государственный контролер или Всесоюзный государственный научно-контрольный институт ветеринарных препаратов Госагропрома СССР.

3. МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЙ

3.1.    Отбор проб

3.1.1.    Флаконы отбирают из разных мест упаковки. 20 флаконов используют для проведения испытания и 20 флаконов хранят в архиве государственного контролера в течение 1,5 лет.

3.1.2.    Образцы препарата, направляемые в архив госконтролсра, опечатывают и снабжают соответствующим документом с указанием: наименования препарата, даты изготовления (месяц, год), номеров серии и госконтролсра, даты отбора пробы, общего количества единиц упаковки, количества доз, объема серии, должности и подписи лица, отобравшего пробу, и обозначения государственного стандарта.

3.2.    Определение внешнего вала

3.2.1. Определение внешнего вида, цвета; наличия посторонней примеси, плесени, следов

оттаивания, трещин флаконов с вакциной проводят визуально в проходящем свете, одновременно флаконы проверяют на прочность укупорки и правильность этикетирования.

3.3.    Определение растворимости

3.3.1.    Реактивы, материалы

Раствор физиологической стерильный pH 7,0—7,2.

Растворитель для вакцины живой сухой из штамма ВР-2 против рожи свиней.

Пипетки вместимостью 2,5 и 10 см³ по ГОСТ 29169, ГОСТ 29227—ГОСТ 29230.

3.3.2.    Проведение испытания

Для определения растворимости в 3 флакона с сухой вакциной вносят физиологический раствор или специальный растворитель для вакцины в объеме, соответствующем объему вакцины до высушивания, после чего флаконы встряхивают. В течение нс более 1—3 мин должна образоваться равномерная взвесь без хлопьев, комочков и осадка.

3.4.    Определение массовой доли влаги — по ГОСТ 24061.

3.5.    Определение контаминации посторонней микрофлорой и типичности роста — по ГОСТ 28085.

3.5.1.    Определение контаминации посторонней микрофлорой — по ГОСТ 28085.

3.5.2.    Определение типичности роста — по ГОСТ 28085 с дополнением, указанным ниже.

Через 24—48 ч роста вакцинный штамм образует на МПЛ бесцветные, прозрачные, гладкие

колонии; на МПБ через 24 ч — равномерное помутнение.

Одновременно проводят микроскопию мазков из суспензии вакцины, окрашенных по Грамму. В мазках должны быть тонкие, прямые или слегка изогнутые палочки штамма ВР-2, окрашенные грам положительно.

3.6.    Определение концентрации живых бактерий

3.6.1.    Аппаратура, материалы, реактивы

Термостат с температурой нагрева 36 *С — 37 *С.

Чашки Петри по ГОСТ 25336.

Агар мясо-пептонный печеночный pH 7,2—7,4.

Aiap Хогги нгера pH 7,2—7,4.

Пипетки по ГОСТ 29169, ГОСТ 29227-ГОСТ 29230.

Пробирки стеклянные по ГОСТ 25336.

Растворитель для вакцины живой сухой из штамма ВР-2.

Физиологический раствор стерильный pH 7,0—7,2.

3.6.2.    Подготовка к испытанию

Готовят пробу, состоящую из 3 флаконов с вакциной. Препарат во флаконах разводят до первоначального объема стерильным физиологическим раствором или растворителем для вакцины и переносят содержимое 3 флаконов в 1 флакон. Затем из пробы отдельными пипетками готовят разведения вакцины физиологическим раствором или растворителем от 10”¹ до 10“⁸ в 8 пробирках, в которые вносят по 4,5 см³ физиологического раствора или растворителя. Затем в первую пробирку добавляют 0,5 см³ суспензии вакцины, трижды перемешиваю! с помощью пипетки, отбирают 0,5 см³ и переносят во вторую пробирку и т. д. На каждое разведение используют отдельную пипетку.

3.6.3.    Проведение испытания

Для испытания применяют 3 разведения вакцины: 10“⁶, 10"⁷, 10~⁸. Из каждого разведения проводят посевы по 0,1 см³ на поверхность мясо-пептонного печеночною aiapa или агара Хотгингера в 3 чашках, предварительно выдержанного при температуре 36 *С—37 *С в течение 24 ч. Посевы инкубируют при температуре 35 *С—36 *С в течение 48—72 ч, после чего подсчитывают количество выросших колоний в чашках по каждому разведению. Полученные показатели суммируют и делят на количество чашек, определяя среднее количество живых бактерий для каждого разведения, содержащихся в 0,1 см³. Затем средние показатели по каждому разведению увеличивают в 10 раз, получая количество микробных клеток данного разведения вакцины. После этого добавляют столько нулей, каков показатель сделанного разведения, получая концентрацию микробных клеток исследуемой вакцины по одному разведению. Затем выводят среднюю концентрацию микробных клеток в 1 см³ вакцины, сложив результаты трех взятых разведений и разделив их на 3.

Количество доз вакцины устанавливают путем умножения показателя количества живых бактерий в I см³ вакцины на объем вакцины во флаконе и деления результата на 200 млн (одна иммунизирующая доза для свиней соответствует 200 млн живых бактерий рожи).

Концентрация живых бактерий рожи в I см³ сухой вакцины должна быть не менее I млрд.

ГОСТ 28333-89 С. 5

3.7.    Определение безвредности

3.7.1.    Материалы, реактивы

Шприцы стеклянные вместимостью I см³ по ГОСТ 22967.

Иглы инъекционные по ГОСТ 25377* или другие.

Тампоны ватные, стерильные.

Пробки ватно-марлевые по ГОСТ 22379.

Пипетки мерные вместимостью 5 и 10 см³ по ГОСТ 29169, ГОСТ 29227—ГОСТ 29230.

Пробирки стеклянные по ГОСТ 25336.

Флаконы стеклянные стерильные вместимостью 100 см³.

Физиологический раствор стерильный pH 7,0—7,2.

Растворитель для вакцины живой сухой из штамма ВР-2.

Мыши белые массой 17—18 г.

3.7.2.    Проведение испытания

Для испытания готовят общую пробу из 5 флаконов с препаратом. Содержимое каждого флакона рссуспсндируют в стерильном физиологическом растворе или растворителе для вакцины, объем которых соответствует объему вакцины до высушивания. Затем суспензию вакцины из всех флаконов переносят в стерильный флакон.

Общую пробу вакцины разводят физиологическим раствором или растворителем для вакцины до концентрации 500—600 млн живых микробных клеток в I см³ и вводят подкожно в области спины 20 белым мышам по 0,2 см³ (100 млн микробных клеток).

Вакцину считают безвредной, сети в течение 10 сут наблюдения переболеет и погибнет не более 5 белых мышей.

3.8.    Определение иммунногенной активности

3.8.1.    Материалы и реактивы по п. 3.7.1.

3.8.2.    Проведение испытания

Для определения иммунногенной активности вакцины используют белых мышей, находившихся в опыте но определению безвредности (п. 3.6). Через 11—12 сут 10 вакцинированных и 10 контрольных белых мышей аналогичной массы заражают подкожно сухой заражающей культурой штамма № 149 возбудителя рожи свиней на физиологическом растворе в дозе по 100 ЛДзд в объеме 0,1 см³.

Вакцина должна предохранять от заражения не менее 8 мышей из 10 вакцинированных при гибели 10 ко1ггрольных мышей в течение 3—4 сут.

4. ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ И ХРАНЕНИЕ

4.1.    Транспоргируют вакцину всеми видами транспорта с соблюдением правил перевозок скороноргящихся грузов и багажа, дейст вующих на данном виде транспорга.

4.2.    Вакцину живую сухую из штамма ВР-2 против рожи свиней хранят в сухом темном месте при температуре (4 *С—8 *С) ± 2 *С.

5. ГАРАНТИИ ИЗГОТОВИТЕЛЯ

5.1. Изготовитель гарантирует соответствие вакцины живой сухой из штамма ВР-2 против рожи свиней требованиям настоящего стандарта при соблюдении условий транспоргиронания и хранения в течение шести месяцев со дня ее изготовления. Окончание процесса сублимационного высушивания вакцины считают датой ее изготовления.

На территории Российской Федерации действует ГОСТ 25377-82.

ИНФОРМАЦИОННЫЕ ДАННЫЕ

1.    ВНЕСЕН Госа1ропромом СССР

2.    Постановлением Государственного комитета СССР но управлению качеством проекции и стандартов от 16.11.89 № 3389 стандарт Совета Экономической Взаимопомощи СТ СЭВ 6538—88 «Вакцина живая лиофилизированная ВР-2 против рожи свиней. Технические требования и методы контроля» введен в действие непосредственно в качестве государственного стандарта СССР с 01.07.90

3.    Стандарт полностью соответствует СТ СЭВ 6538—88

4.    ССЫЛОЧНЫЕ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИЕ ДОКУМЕНТЫ

Обозначение НТД, на который дана ссылка	Номер пункта
ГОСТ 10131-93	1.3.3
ГОСТ 12301-81	1.3.2
ГОСТ 14192-%	1.4.3
ГОСТ 22379 93	3.7.1
ГОСТ 22967-90	3.7.1
ГОСТ 24061 89	3.4
ГОСТ 25336-82	3.6.1; 3.7.1
ГОСТ 25377-93	3.7.1
ГОСТ 28085 89	1.2.1; 3.5; 3.5.1; 3.5.2
ГОСТ 29169 - 91	3.3.1. 3.6.1. 3.7.1
ГОСТ 29227-91-ГОСТ 29230-91	3.3.1, 3.6.1, 3.7.1

5.    Ограничение срока действия снято по протоколу № 4—93 Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации (ИУС 4—94)

6.    ПЕРЕИЗДАНИЕ. Декабрь 2005 г.

Редактор М.И. Максимова Технический редактор В.Н. Прусакова Корректор Т.И. Кононенко Компьютерная не рока ИА. Н&гейкиной

Слано в набор 28.11.2005. Подписано в печать 13.01.2006. Формат 60 х 84¹/*- Бумага офсетная. Гарнитура Таймс. Печать офсетам. Уел. печл. 0.93. Уч.-иил. 0.65. Тираж 35 экэ. Зак. 9. С 2334.

Ф1*УII «Стандарт«форм». 123995 Москва. Гранатный пер., 4. wM-w.gostinfo.ru    info@gostinfo.ru

Набрано и отпечатано но ФГУП «Стандартнформ».