Министерство сельского хозяйства Российской Федерации
Государственная комиссия по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ
Сборник № 22 Часть 1-ая
МОСКВА
ЦЕНТР НАУЧНО-ТЕХНИЧЕСКОЙ ИНФОРМАЦИИ, ПРОПАГАНДЫ И РЕКЛАМЫ 1994 г.
УТВЕРЖДЕНО МИНИСТЕРСТВОМ ЗДРАВО
ОХРАНЕНИЯ СССР
Н 29,, ипля
» 6238-91
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ НО ГАЗОХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ОПРЕДЕЛЕНИЮ ИМАЗАПИРА (АРСЕНАЛА) В ВОДЕ И ПОЧВЕ
1.Краткая характеристика препарата имазапир (арсенал,чаппер,имида*-золиыон),Действующее вещество г 2- (4-йзопропил-4-метял-э-оксо-2-имидазалин-2-ил)никотиновая кислота.
Структурная формула:
Белый порошок со слабым запахом уксуса.Т ал. 160-173^0.Давление пара при 45°С менее 2.10~7кв*.рт.ст.Растворимость в воде 10-15 г/л при 25°С.рН lx-ного водаого раствора 3.0-3,5.При 25°С раствор устойчив более чем 18 месяцев.Препарат ограниченно растворим в органических растворителях. В почве сохраняется в зависимости от климатических условий от 6 месяцев до 2 лет.
Разработчики:Маслаков С.Е.,Басова Ю.Г..Сабуров Г.Г..Федорова Л.Н.,
Подсвирова Т.И..Ленинградский НИИ Лесного хозяйства
Выпускается в виде водной эмульсии концентрацией 240 г/л и 5X гранул. Малотоксичен.ДЦ^0 для крыс%(Х)0 мг/^г,мышей болев 2000 мг/кг.МДК и ПДК не установлены.Имазапир является гербицидом и арборицидом.
2.Методика определения имазапира
2.1.Основные положения
2.1.1. Принцип метода
Метод основан на извлечении имазапира из воды хлороформом»из почвы буферным раствором и очистке экстракта между двумя несмешиваицимися жид костями.Конечное определение проводят методом газожидкостной хроматографии в виде метилового а<|ира 2- (4-изопропил-4-метил-5-оксо-2-имидазолин-2-ил)-никотиновой кислотц.
2.1.2. Метрологическая характеристика метода приведена в таблице.
Таблица
Метрологическая характеристика метода определения арсенала ГЖХ. |
Показатели точности измерения |
Почва |
Вода |
Сиднее значение определения У. |
86,8 |
92,5 |
Стандартное отклонение, -*/. |
5.9 |
1.2 |
Относительное стандартное отклонение,-И |
6.8 |
1,3 |
Доверительный интервал(-*/.)среднего (П=5,Р=0,95) |
8.4 |
3,5 |
Относительная погрешность измерений (-Z) |
15 |
12 |
Предел обнаружения (мг/кг,мг/л) |
0.05 |
0,01 |
Диапазон определяемых концентраций (мг/кг,мг/л) |
0.05-0.5 |
0,01-0,5 |
Минимально детектируемое количество |
0,5 нг |
0,5 нг |
|
2.1.3-Избирательность метода
Метод специфичен.другие гербициды,арборициды (например,велпар,payн-дап.глуфосинат аммония, 2,4~Д,гарлон) определению це мешают.
2.2.Реактивы и материалы
66
Аналитический стандарт:2- (4-изопроттил-4-метил-5 оксо-2-имидазолин~ 2-ил)никотиновая кислота.выпускается фирмой "Cyanamld" (США).Содержание основного вещества в препарате 99,1/.
Хлороформ.ГОСТ 20015-74.
Метанол,х.ч..ГОСТ 6995-77.
Калий фосфорнокислый однозамещонный.ч..ГОСТ 4190-75.
Натрий фосфорнокислый двузамещенный.ч..ГОСТ 4172-76.
Вода дистиллированная,ГОСТ 6709-72.
Кислота соляная,х.ч..ГОСТ 3118-77,1 н раствор.
Натрий сернокислый безводный,ч.д.а..свежэпрокаленный,ГОСТ 4166-76. Воздух сжатый,ГОСТ 9010-80.
Водород,ГОСТ 3022-88.
Триметилаыилин.ч.,ТУ 6-09-10-915-73»
Азот высокой чистоты,ТУ 6-16-40-14-88.
Фильтры бумажные беззольные "синяя лента",ТУ 6-09-1678-77. Хромосорб-750 (100-120 меш) с 3,8‘/. 07-17.
Основной стандартный раствор имазапира в метаноле с содержанием 100 мкг/мл,хранят в холодильнике до трех месяцев.
0,2 М раствор гидроокиси триметиланилина в метаноле готовится растворением триметиланилина в свежеперегнанном метаноле.
2.3•Приборы,аппаратура и посуда
Газовый хроматограф с термоионным детектором.
Колонка стекляиная,длиной 1800 мм,внутренним диаметром 4 мм. Микрошприцы на 10 мкл,МШ-10 М.ТУ 2.83-3-106.
Весы аналитические,ВЛР-200,ТУ 25-06-1131-75.
Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М.ТУ 25-11-917-74.
Вакуумный водоструйный насос,ГОСТ 25336-82.
Ваня водяная.ТУ 64-1-2850-76.
67
Вороша делительные емкостью *>00 мл,ГОСТ 25336-82.
Колбы мерные емкостью 25.50,100 мл,ГОСТ.1770-74.
Колбы плоскодонные емкостью 500 мл,ГОСТ 25336-82.
Колбы круглодонные емкостью 500 мл,ГОСТ 25336-82.
Цилиндры мерные емкостью 1000 мл,ГОСТ 1770-74.
Воронки химикеские,ГОСТ 25336-82.
Стеклянные палочки.
Пробирки на олифах,вместимостью 5 мл,ГОСТ 1770-74.
pH-метр,ГОСТ 15-150-69.
Линейка измерительная,цена деления 0,1 см,ГОСТ 17435-72.
2.4.Подготовка к определению.
2.4.1. Приготовление рабочих растворов.
В мерные колбы на 50 мл помещают по 0.5;1;2,5;5 и 10 мл основного растворе и доводят до метки метанолом.Эти растворы содержат 1,2,5.10 и 20 мкг/мп имазягтира соответственно.
Растворы имазапирэ стабильны при хранении в герметичной упаковке в хо лодильнике и могут быть использованы в течение 3 месяцев.
Перед хроматографированием к 4 мл рабочего стандартного раствора добавляют 20 мкл 0,2 М раствора гидроокиси триметиланилина в метаноле.
2.4.2. Приготовление буферного раствора с pH 7.
Фосфатный буфер готовят,растворяя 13,6 г одноосновного фосфата калия и 14,1 г двуосновноi*o фосфата натрия в 4 л дистиллированной воды.При необходимости раствор подкисляют или подщелачивают растворами Н^РОд и NaOH.
2.4.3. Приготовление 1,0 н раствора соляной кислоты.
83 мл концентрированной соляной кислоты помещают в мерную колбу на 1 л и доводят до метки дистиллированной водой.
2.4.4. Подготовка проб.
Вода.200-10U0 мл воды отфильтровывают через бумажный фильтр (синяя
лента) и помещают в плоскодонную колбу на 500 мл.
Почва.40 г воздушно-сухой и просеянной через сито с размером ячеек 1 мм почвы помещают в плоскодонную колбу на 500 мл.
2.5.Отбор проб
Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции,продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов".утвержденными заместителем Главного Государственного санитарного врача СССР 21.08.1979 за Л 2051-79.
2.6.Проведение определения.
2.6.1 .Вода
К пробе воды,подкисленной 1,0 н соляной кислотой до pH 2,0^0,1 добавляют 100 мл хлороформа.Имазапир экстрагируют при тщательном перемешивании на механическом встряхивателе в течение 2 минут.Содержимое колбы переносят в делительную воронку на 500 мл.Хлороформный экстракт отделяют и пропускают через слой сернокислого натрия в круглодоныую колбу на 500 мл Экстракцию повторяют еще дважды.Объединенный хлороформный (экстракт выпаривают на ротационном вакуумном испарителе при температуре 40^С.Колбу обмывают дважды по 50 мл метанолом,каждый раз испаряя метанол досуха.Сухой остаток растворяют в 4 мл метанола,тщательно обмывая стенки колбы.1 мл полученного мотанольного раствора смешивают с 50 мкл 0,2 М раствора гидроокиси триметиланилина в метаноле и хроматографируют.
2.6-2-Почва
К пробе почвы приливают 200 мл фосфатного буферного раствора.Полученную суспензию тщательно перемешивают на механическом встряхивателе в тече кие 30 минут и фильтруют через бумажный складчатый фильтр.К твердому осадку приливают 100 мл буферного раствора,встряхивают суспензию 5 минут и отфильтровывают.Объединенный фильтрат подкисляют 1 н соляной кислотой
69
до pH 2,0-0,1.Из полученного раствора арсенал экстрагируют 100 мл хлороформа при онергичном перемешивании в точение 2 минут,после чего содержимое колбы переносят в делительную воронку на 500 мл.Хлороформный слой отделяют и пропускают через слой сернокислого натрия в круглодонную колбу на 500 мл.Экстракцию повторяют еще 2 раза.Обьединенный хлороформный экстракт упаривают на вакуумном испарителе при температуре 40°С.Колбу обмывают дважды по 50 мл метанола,каждый раз испаряя растворитель досуха. Сухой остаток растворяют в 4 мл метанола,тщательно обмывая стенки колбы. Из полученного раствора отбирают 1 мл,прибавляют 50 мкл 0,2 М гидроокиси триметиланилина и хроматографируют.
2.7.Условия хроматографирования
Газохроматографическое определение имазапира проводится на хроматографе с термоионным детектором при следующих условиях:
Твердый носитель-Хромосорб 750 (100-120 меш) с 3.0Х 0V-17.
Колонка стеклянная 1800 мм с внутренним диаметром 4 мм.
Скорость газа-носителя (азот высокой чистоты)-30 мл/мин,водорода 3,3 мл/мин,воздуха 55 мл/мин.
Температура колонки 230®С,
испарителя 250^С, детектора 300°С.
Скорость протяжки лепты самописца 0,25 см/мин.
Время удерживания при указанных условиях 8,40-0,40 мин.
Вводимый объем 1-5 мкл.
Линейный диапазон детектирования 1-100 нг.
Минимально детектируемое количество 0,5 нг.
2.8.Обработка результатов анализа
Количественное определение проводят методом соотношения со стандартом по высоте пиков.Расчет концентрации препарата (X) в почве в мг/кл и
70
воде в мг/л проводят по формуле
X-концентрация арсенала в воде (мг/л).почве (мг/кг);
Hfip-высота пика рабочой пробы,мм;
Сл-количество имазапира в хроматографируемом обьсме стандартного раст-ст
вора,кг;
V2-объем рабочего раствора,мл;
7^-объем аликвоты рабочей пробы,вводимой в хроматограф,мкл;
P-масса анализируемой пробы,мл,г;
Нст~высота пика стандартного раствора имазапира,мм.
3.Требования безопасности.
Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями,токсическими веществами,концентрированными кислотами.