Министерство сельского хозяйства Российской Федерации

Государственная комиссия по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ

МОСКВА

ЦЕНТР НАУЧНО-ТЕХНИЧЕСКОЙ ИНФОРМАЦИИ, ПРОПАГАНДЫ И РЕКЛАМЫ 1994 г.

УТВЕРЖДЕНО

МИНИСТЕРСТВОМ ЗДРАВООХРАНЕНИЯ СССР " 29" июля    1991г.

Л 6176-91

ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ФЕНОКСИКАРВА (ИНСЕГАРА) В РАСТИТЕЛЬНОМ МАТЕРИАЛЕ, ВОДЕ И ПОЧВЕ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ

1.Краткая характеристика препарата

Инсегар - этил -2-( 4-феноксифенокси) этилкарбамат.

Феноксикарб (инсегар) - кристаллическое вещество, пл.Тпл 53-54°С. Растворим в большинстве органических растворителей, в гексане 5 г/л, в воде при 20°С 6 ppm. Не гидролизуется в водном растворе при pH 3,7 и 9 при 35°с.

Давление пара при 2£>°С - 1,7-1О^Ра (1,3.1О^мм рт.от.)

2. Методика определения феноксикарба в растительном материале,воде и почве методом газожидкостной хроматографии

2*1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на извлечении феноксикарба из исследуемого объекта ацетоном или хлороформом и последующим определением методом реакционной газожидкостной хроматографии в виде ацильного производного.

Разработчики: Мурашко С.В., Щербакова И.П., ВНШГИНТОКС, Киев

2*1 .2. Метрологическая характеристика метода Нижний предел определения ГЖХ- 0,1нг., ТСХ- 0,3мкг.

Исследуемый обьект	Предел обнаружения мг/кг		Среднее значение опреде-я	Стандартное отклонение, X	Доверит-й интервал сред-го X
	ГЖХ
Раститель	0,005	0,01	89,2	4,5	± 4,49
ный материаJ	k
Почва	0,001	0,006	90;3	4,99	± 4,95
Бода	0,001 1	0,001 1	90,5	4,5	± 7,51

2-1.3. Условия концентрации,очистки и последующего газохроматографического определения феноксикарба позволяют избирательно определять препарат в присутствии ФОС, пиретроидов.

2.2. Реактивы и материалы

Ацетон, ос.ч.ТУ- 3513-86.

Хлороформ, хч., ГОСТ 20015-74.

Бензол, хч., ГОСТ 5955-81.

Трифторуксусный ангидрид, ТУ 6-09-4135-75.

Пиридин, ч., ГОСТ 13647-78.

Сульфат натрия, безводный, ч., ГОСТ 4166-76.

Азот в баллоне, особой чистоты, ГОСТ 9293-74.

Неподвижная фаза 5Х S Е-30 на хрома тоне N-AW-ДМС S.

О-Толидин, ТУ 6-09-2232-75,1Х-ный раствор в ацетоне.

Уголь активированный, марки 0У-^мА".

Уксусная кислота, чда, ледяная, ГОСТ 61-75.

Калий марганцовокислый, чда, ГОСТ 20490-75.

Кислота соляная, хч, ГОСТ 4232-74.

Проявляющий реактив: 1% раствор о толидина в ацетоне.

т

Основной стандартный раствор (ОСР) феноксикарба с концентрацией 100 мкг/мл готовят взятием навески 10 мг (0,0100 г) х.ч. и растворением в ацетоне в мерной колбе емкостью 100 мл. Хранить в холодильнике в течение 2-х месяцев.

Рабочие стандартные растворы с содержанием 10 мкг/мл, 1 мкг/мл,

0,5 мкг/мл готовят соответствующим разбавлением ОСР ацетоном.

Хранить в холодильнике в течение 2-х месяцев.

2.3.    Приборы, аппаратура и посуда

Газовый хроматограф серии "Цвет¹¹ с ДПР.

Колонки стеклянные длиной 1 м,диаметр 3»!> мм.

Ротационный испаритель типа ИР-1 М,ТУ 25-11-917-76.

Колбы грушевидные,ГОСТ 25336-82,емкостью 500,250,100,50 мл.

Колбы мерные,ГОСТ 1770-74»емкостью 50,100 мл.

Пробирки мерные на шлифах,ГОСТ 1770-74«вместимостью 5 и 10 мл.

Аппарат для встряхивания,ТУ 25-11-917-79.

Колба Бунзена,ГОСТ 25336-82.

Воронка Бюхнера,ГОСТ 9147-80.

Делительная воронка,ГОСТ 25336-82,емкостью 500 мл.

Колбы конические,ГОСТ 25336-82.емкостью 500 мл.

Пипетки,ГОСТ 20292-74,на 0,1 ;0,2;1 ;5;10 мл.

Микрошприц на 10 мкл,МШ-10,ТУ SB-2833.024.

Секундомер СД Спр.1.2000,ГОСТ 5072-79.

2.4. Подготовка к определению

2.4.1-Отбор проб

Отбор,хранение и доставка проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции,пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколи-

45*

2.4-2.Подготовка колонки для ГЖХ

Колонку заполняют стандартной фазой (57. SB-30 на хрома тоне N-AW-ДМСБ),подключив ее к вакууму водоструйного насоса.Заполненную колонку кондиционируют в термостате колонок в течение 6 часов без подключения к детектору,продувая азотом (~ 60 мл/мин) и постепенно поднимая температуру от 100°С до 250°С.Затем колонку присоединяют к детектору.

2.4*3.Приготовление камеры для хроматографирования

На дно эксикатора помещают чашку Петри с 3-5 г КМпОд и добавляют туда 8-10 мл концентрированной НС1,Через 3-4 мин камера готова для проведения хлорирования.

2.5.Описание определения

2-5-1 .Экстракция,очистка и получение ацильного производишь фе-ноксикарбг

Почва.1.50 г анализируемой пробы помещают в плоскодонную колбу емкостью 500 мл,заливают 100 мл ацетона и 5-10 мл воды.Смесь перемешивают на аппарате для встряхивания в течение 1 час,фильтруют на воронке Бюхнера с фильтром "синяя лента ".Фоль трат сушат безводным сульфатом натрия и упаривают в вакууме водоструйного насоса досуха.К сухому остатку прибавляют 2 мл смеси ацетон:бензол (3:1) и 0,1 г угля марки ОУ^'А'.¹,встряхивают в течете 3-5 мин.Фильтрат упаривают в вакууме водоструйного насоса при температуре водяной бани-50^С досуха.

К сухому остатку прибавляют 100 мкл трифторуксусного ангидрида,20 мкл пиридина .Выдерживают реакционную смесь в течение ~ 40 мин,затем к ней прибавляют 1 мл бензола и 5 мл дистиллированной воды,встряхивают в течении ~ 2-х мин.После разделения фаз проводят хромг^тографический анализ бензольного верхнего слоя.

itt

11*50 г анализируемой пробы помещают в плоскодонную колбу емкостью 500 мл,заливают 100 мл хлороформа и 15-20 мл вода*Смесь перемешивают на аппарате для встряхивания в течение ~ 1 час.,после чего Фильтруют на воронке Бюхнера .Фильтрат разделяют в делительной воронке* Нижний слой хлороформа сушат безводным сульфатом натрия и упаривают в вакууме водоструйного насоса досуха при температуре бани 60^С.Дальше как 1 вариант.

Растительный материал.Вариант 1,25 г измельченных плодов помещают в плоскодонную колбу емкостью 500 мл,заливают 100 мл ацетона и 10 мл вода.Смесь перемешивают на аппарате для встряхивания в течение 1 часа, затем фильтруют на воронке Бюхнера с бумажным фильтром "синяя лента". Фильтрат сушат безводным сульфатом натрия и затем упаривают в вакууме водоструйного насоса досуха.К сухому остатку прибавляют 2 мл смеси ацетон-бензол (3:1) и 0,1 г активированного угля марки 0У-"А",встряхивают в течение 3-5 мин.Фильтруют через бумажный фильтр,тщательно прошвая 30 мл смеси ацетон-бензол (3:1).Фильтрат упаривают в вакууме водоструйного насоса при температуре водяной бани 50°С досуха.

К сухому остатку прибавляют 100 мкл трюфторуксусного ангидрида >20 мкл пиридина сухого .Реакционную смесь выдерживают в течение ~ 40 мин, затем к ней прибавляют 1 мл бензола и 5 мл дистиллированной воды,встряхивают в течение 2-х минут.После разделения фаз проводят хроматографический анализ бензольного верхнего слоя.

II вариант аналогично подготовке анализируемого образца почвы.

Вода. 200 мл анализируемой пробы вода помещают в плоскодонную колбу емкостью 500 мл, заливают 100 мл хлороформа. Смесь перемешивают на аппарате для встряхивания в течении ~ 1 часа, затем отделяют в делительной воронке нижний слой хлороформа. Его сушат безводным сульфатом натрия и упаривают в вакууме водоструйного насоса досуха при температуре бани 60°С. К сухому остатку прибавляют 100 мкл трифторуксусного ангидрида, 20 мкл

156

пиридина. Реакционную смесь выдерживают в течение ~ 40 минут, затем к н прибавляют 10 мл бензола и 5 мл дистилиллированкой воды, встряхивают в течение ~ 2-х мин. После разделения фаз проводят хроматографический ана лиз верхнего бензольного слоя.

2.5*2. Хроматографический анализ

Газовый хроматограф серии "Цвет" с ДПР Колонка хроматографическая стеклянная 1 м с внутренним диаметром 3,5 м Неподвижная фаза 5Х SB-30 на хроматоне N-AW-flMCS.

Температура колонки - 220°С Температура испарителя - 250°С Температура детектора - 270°С Газ-носитель - азот с расходом 65-70 мл/мин Вводимый обьем - 3 мкл

12

Шкала множителя - 20.10

Скорость диаграммной ленты 600 мм/час

Время удерживания 2,20 мин

Количественную оценку проводят методом СООТНОШЕНИЕ

со стандартом феноксикарба,из которюго получено ацильное производное,по схеме,указанной для рабочих проб.

Расчет результатов анализа проводят по формуле:

С - Н₂ . V, . Vg

Х=--.где

Н, . v₂ .Р

X-соде ржание феноксикарба в анализируемой пробе ,мг/кг,мг/л;

С-концентрация стандартного раствора для ГЖХ,вводимого в хроматограф, мкг/мл;

-высота пика стандартного раствора,мм;

Нр-высота пика пробы,мм;

-объем анализируемого экстракта пробы,мл;

1ST

У^-обьем стандартного ацшшроваяного раствора,введенного в хроматограф, мкл;

У^-обьем агцшфованной пробы,введенный в хроматограф,мкл] р-навеска анализируемой пробы,г.

2.5-3-Метод тонкослойной хроматографии

Пробу сконцентрированную до 0,5 мл количественно переносят на пластинку “Силуфол". Параллельно наносят серию стандартных растворов с Подержанием 0,3; 0,5; 1,0 мкг действующего вещества феноксикарба. Хроматографируют в системе растворителей гексан: етиладетат : уксусная кислота (66:35*1). После высушивания пластинку помещают на 1-2 с в камеру с хлором. Затем пластинку вынимают из камеры и оставляют на воздухе до исчезновения запаха хлора.После обработки пластинки 1Х-ным раствором о-толвдине в ацетоне феноксикарб проявляется в виде голубых пятен на белом фоне,при нагревании пластинки в сушильном шкафу при 60~80°С в течение 20 мин цвет пятен изменяется.Феноксикарб проявляется в виде коричневых пятен на горчичном фоне. К,42-0,04.

Содержание инсегаре в исследуемой пробе вычисляют до формуле!

^ .мг/кг (мг/л),где

А-количегство препарата,найденное на хроматограмме при сравнении со стандартом, мкг;

Р-навеска пробы В мя.

3.Техника безопасности

Соблюдать Все необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях,а также правила устройства,техники безопасности, производственной санитарии,противошхидемиологического режима и личной гигиены при работе в лабораториял,отделениях,отдеЛах санитарное з1ТИдемиол0Г1«ческих учреждениях систем Ш СССР Я 2455-81 от 20.10.81.

iS&