госкгагассЕР. по швчвсш средства борьбы с вреде елям
БОЛЕЭНЯЯ РЛСТВНИ1 й СОРНЯКАМИ ПРВ ШШСЕЙЫС08Е СССР
Ы2Т0ДЗЧЕСШ Ш8АНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ШКРОКОЛИЧВСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРНАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ
часть т-я
Мооюва - 1984
Настоящие методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исслег^вательских учреж-дений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других Министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продукт' х питания, кормах и внешней среде.
Срок действия временных методических укаАий устанавливается то утверждения гигиенических регламентов.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ ХСР.
Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Марциновского Е.И.
1 лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом упраздним Минздрава СССР.
РЕДАКЦИОННАЯ КОЛЛЕГИЯ :
Л.Г. Александрова, Д.В. Гиренко, А.А.Калинина (секретарь), М.А. Клисенко (председатель), Г.И. Короткова, Г.А. Хбхоль-кова ( зам. председателя), В.Е. Кривенчук.
Прилоязгшо
Метрологическая характеристика метода определения розалина в растительном материале, воде и почве
[Исполь-Объект вуемая нонпент-!рация |
(Точность определе--|нпя е % |
1-
■! с ! |
1-
1 5 ! |
Is* |
1-
i as
I |
Растительный 0,95 |
95 |
0,0475 |
0р0025 |
0,053 |
0,0032 |
материал 0,015 |
96 |
0,0144 |
0,011 |
0,821 |
0,0148 |
0,24 |
86 |
0,206 |
0,022 |
0,1092 0,028 |
Вода 0,15 |
95,5 |
0,143 |
0,0046 |
0,02В |
0,0058 |
0,4 |
92 |
0.368 |
0,0274 |
0 074 • |
0,348 |
0.3 |
88 |
0,264 |
0,029 |
0,112 |
0,037 |
Почва 0Д0 |
92 |
0,092 |
0,0061 |
0,0665 |
0,0076 |
0,24 |
95 |
0,228 |
0,0093 |
0,041 |
0,0117 |
0„з |
88 |
0,264 |
0,0296 |
ОДП |
0,0371 |
Зо Требования безопасности.
Соблюдать общие правила по технике безопасности, необходимые прв работе о химическими реактивами в пестицидами.
4. Разработчики.
Методические рекомзздацдв подготовлены: сотрудниками УэНИИСГПэ Маднидовым У.А,, Чола В.Д. н института химии растительных веществ АН УзССР Хакимовой Н.К., Абдуллаевны Ш,, Шакировым Т„Т,
347.
СОДЕРЖАНИЕ*
X. МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИИ В ВОЗШЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ:
отр.
Агелояа и ситрина.................. 3
Актеллика и пришпида............'. . . . 8
Алвпа........................13
Бен8оилпгюпэтпла и этилового эфипа N-3,4- дяхлор-
фенилаланина........ 17
Беномила и ЕМК.......... 22
Беятаэона......................30
Биопесметрина.....................35
Болстапа.......................40
Боояокота......................48
Бутилкаптакса .......... 52
Бутокагбоксима....................59
Гидрела . '.......................63
ГМК-Na....................... 66
Даконкля...................... 70
Диавиноня, эптама, гамма-изомера ГХЦГ.фенмедедифама,
лекапила.фосфашда и пиразояа..........77
Дигид ~ела...................... 69
Диквата........................93
Зоокука-чпа.....................37
Карбофурана.....................100
Кречетояа......................ХО**
Мепида и 3-хлор-4-метил8тгилина....... X0Q
Метазина и компонентов гярбишщной смеси "карагард" . ИЗ
Митака....................... 118
Офунака............. 124
Пликтрана..................... т28
Ратпяданэ..................... Х32
Раунда на..................... Х38
Ровряля ...................... 143
Розалина..................... Х43
Синтетических пиретроидов (амбуп.депис.рипкорд,
сут/;пп'Д':н). *. ......... 154
С томна....................... XGI
248.
стр.
Сумилекса......... 166
Томллона.................... 173
Триморфамида.................. 180
Фекама-трибуфона................ 136
Фталаиа.................... 192
Лропарата 242 и металлилхлорида (MX) ... . 200
Хоотаквкка ................... 206
Эдила..................... 210
П. МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРВДЛШЮ нвслмшиюв в ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ,КОРМАХ И ВНЕШНЕЙ СРЕДЕ
Хлороргапическяе пестициды
Методические указания по определению остаточных
количеств гексахлорана (линдэка) в оушеном
картофеле полярографическим методом....... 213
Фосфоропганические пеотипиды
Методические указания по определению дифосв (абата) в продуктах животного происхождения методом тонкослойной хроматографии ....... 218
Методические указания по определению мотафоса, фосфамида и хлорофоса в сушеных овощах и плодах (картофель, морковь, петрушка, яблоки, груши, слива) методами тонкослойной и газо-жидкостной хроматографии .................. 223
Временные методические указания по определению метилпитрофоса.фенитрооксона и п-нитрокреэола в лесной растительности и почьо тонкослойной
хроматографией .................. 241
Методические указами." по определению трихлорметвфоса-3 и его метаболитов в биоматериале методом газожидкостной хроматографии ............ 252
Методические указания по хроматографическому определених|5уторвкбокоима в почве,воде и расти
Методические указания "то определению ,IMK-Na,
гидрела,дигидпела методом спектрофотометрии в
воде .растительном материале (томатн,-блоки,свекла). . 267
Временнне методические указания по определению лонтре-ла в воде,почве и растениях методом газо-жидкостной хроматографии...........•..........275
Временнне методические указания по определению паагшана методом газо-жидкостной хроматографии в почве,табаке п в табачном днме...........285
Временнне методические указания по определению розал'.ша в растительннх объектах,воде и почве хромато-спектпофотометрическим методом ....... 296
Методические указания по определению треФлана в воде,почве,томатех и капусте методом УФ-опектпо-фотометгии с использованием тонкослойной хроматографии .................... 305
Методические указания по фотометрическому определению эдила в воде,растительном масле,семенах подсолнечника, траве....................... 311
Методические указания по определению остаточннх количеств пиреба в сушеннх овощах и плодах фотометрическим методом...........• . . . . 317
Биоппепапатн
Временнне методические указания по определению остаточных количеств препарата вирин-диприояа на растительных объектах ИФ-методом . .........325
Временнне методические указания по определению остаточннх количеств биопрепарата випин-КШ на растительных объектах иммуно-флюор-еспентным методом. .331
"УТВЕРЩЮ"
Заместитель Главного Государственного санитарного врача СССР
1981 г.а Л*7/-Я
временные
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ РОЗАЛИИ В РАСГЛТЕЛЬНЫХ ОБЪЕКТАХ, ВОДЕ И ПОЧВЕ ХРОЬ1АТО-СПЕКТРО^ТОл1ЕТР'/1ЧЕСКИ?Л МЕТОДОМ.
I. Краткая характеристика препората
5-хлор-2 метил-бензииидазола - порошок белого цвета с кремо-ватым оттенком с температурой плавления 204-206°С. Хорошо растворяется в этилсвом, метиловом спиртах, этилапетате, ацетоне, хлороформе, растворим в горячей воде, нерастворим в бензоле.
Розалин - гербицид избирательного действия против однолетних сорняков на посевах хлопчатника. JUX^q для крыс составляет 600 мг/кг.
гл
2. Методика определения розалина в растительных объектах.
Метод основвн на хромзтографкровэнБи розалина в тонком слое силикагеля в системе: бензол-ацетон (2:3) с проявлением зоны локализации препарата на пластинке 0,052 раствором азотнокислого серебро. Количественное определение проводят измерением оптической плотности зтанольного элюата на спектрофотометре СО-16 при длине волны 246 км в кюветах толщиной слоя I см. Чувствительность определения I мкг в анализируемой пробе.
2.1.2. .Метрологическая характеристика.
Диапазон определяемых концентраций:
растительны!! объект - 0,05-1,0 мг/кг;
- 0,01-1,0 мг/л;
- 0,02-1,0 кг/кг
Предел обнаружения:
растительный объект - 0,05 мг/кг •
- 0,01 мг/л ; -0,02 мг/кг
Число параллельных определений: растительный объект - 5 \
Среднее значение определений:
растительный объект - 92,3#; вода - 91,8#:
почва - 91,6#
Стандартное отклонение:
растительный объект - 0,011; воде - 0,0204;
почва - 0,013
Относительное стандартное отклонение: растительный объект - 0,327; вода - 0,0394;‘
почва - 0,072
Доверительный интервал среднего при Р*0,95 в п в % растительный объект - 2,5-3.10; вода - 2,5-3,80)
почва - 1,8-4,12
2.1.3. Избирательность метода.
Определению не мешают-ГХЦГ, ME, МД, МТ, рогер, антио,
базудин.
2.2. Реактивы и раствори.
Стандартные растворы розалина, ' ~ • х.ч., содержащие 100 мкг/мл хлороформа и спирта. 10 мг розалина растворяют в хлороформе, в мерной колбе на 100 мл к доводят до метки. Раствор устойчив в течение 3-х месяцев при хранении на холоду. Точно твкже готовят стандартный раствор розалина в спирте.
299.
Ацетон, х.ч., ГОСТ 2603-79 Бензол, х.ч., ГОСТ 5955-75 Гексан, ч.; ТУ 6-09-3375-73 Натрий сернокислый, х.ч., ГОСТ 4166-76 Окись алюминия, ч.д.а., МРТУ 6-09-2046-64 йод кристаллический, ч.д.а., ГОСТ 4139-79 Хлороформ, х.ч., ТУ 6-09-4263-76 Этиловый спирт ректификат, ТУ 6-09-4512-77 Серебро азотнокислое, х.ч., ГОСТ 1277-75, 0,5$ водно-ацетоновый раствор (I ч. воды и 3 ч. ацетона).
Бромфеноловыи синий, ч.д.а., ТУ 6-09-1058-76 , 0,05 гр.
растворяют в 10 мл ацетона (последний разбавляют раствором азотнокислого серебра до объёма 100 мл).
Лимонная кислота, х.ч., ГОСТ 3652-69; 2$-ный водный раствор
Вата обезжиренная
Эфир диэтиловый, ГОСТ 6266-52
2.3. Приборы и посуда.
Спектрофотометр С0-4А или СФ-16
Пластинки хроматографические марки
Делительные воронки на 500 и 250 мл верные колбы не 100 и 25 мл, ГОСТ 1770-74 Пипетки, ГОСТ 20292-74 Камера для хроматографирования Колонка хроматографическая^ стеклянная Пульверизаторы стеклянные Прибор для отгоню: растворителя Баня водяная
Зои.
Эксикатор для йодной камеры Шприцы комбинированныеf ТУ 64-1-378-73
2.4. Отбор, хранение п доставка проб,
2.4.1. Отбор проб проводится в соответствии с унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов, утвержденных заместителем Главного Государственного санитарного врача СССР 21.08.79 г. за .'#2051-79.
2.5. Проведение определения.
2.5.1. Условия экстракции и очистки.
Вода, 100 мл воды помещают в делительную воронку, заливают 30 мл хлороформа и экстрагируют 10 мин. Экстракцию повторяют с 30 и 20 мл хлороформа. Объединенные экстракты сушат безводным сернокислым натрием (10гр) в течение 5 мин., далее экстракт переносят в колбу для отгонки растворителя. Растворитель упаривают почти досуха (остаток к колбе 0,2-0,3 мд, испаряют при обычной температуре).
Почва. К 50 гр. увлажненной навески приливают 40 мл хлороформа, перемешивают 30 мин. на аппарате для встряхивания. Экстракцию повторяют с 30 мл хлороформа дввжды. Объединешше экстракты фильтруют через бумажный фильтр. Сушат оезводным сернокислым натрием (10 гр} 5 мин. Экстракт количественно переносят в колбу для отгонки растворителя и упаривают почти досуха.
Растительный материал. 20 гр. воздушно-сухого измельченного растительного материала (листья, стебли хлопчатника, надземная часть люцерны) помещают в колбу на 500 мл, заливают 200 мл дистиллированной воды и кипятят в течение 30 мин. Гомогенат
ж.
фильтруют в горячем виде, остаток на фильтре промывают несколькими порциями горячей двстял.:лроввнной воды. Фильтраты объединяют, количественно переносят в делительную воронку ёмкостью 500 мл и экстрагируют хлороформом по 30 мл триады. Экстракты объединяют и очищают от коэкстрэктивчых веществ; пропускал его через хроматографическую колонку, заполненную обезжиренной ватой (2 см), окисью алюминия (5-6 см) и безводным сернокислым натрием (5-6 см). Колонку перед тем как пропустить пробу, промывают хлороформом. Растворитель упвривают почти досуха.
2.5.2. Хроматографирование.
Сухой остаток в колбе после упаривания растворяют в 0,3-0,5 мп хлороформа. Пробу при помощи туберкулинового шприца количественно наносят на середину хроматографической пластинки так, чтобы диаметр пятна не преьышзл 1 см. Колбу дважды промывают небольшими порциями (0,4 мл) хлороформа, которые также наносят в ту же точку. На соседние полосы наносят стандартный раствор розалина, содержащий 2 в 5 мкг препарата. Пластинку с нанесенными пробами и стандартами помещают в камеру для хроматографирования, предварительно насыщенную в течение 30 мин. бензол-ацетоном в соотношении 2:3. Край пластинки погружают в
*>РОнт*
растворитель не более, чем на 0,5 см. После поднятия растворителя но высоту 10 см, пластинку вынимают из камеры и оставляют на воздухе до полного испарения растворителей. Затем пластинку опрыскивают проявляющей смесью 0,05$ бромЪенолювого синего в ацетоне и 0,5£ азотнокислого серебра. После того как пластинка подсохнет, ее орошают лимонной кисл?той для закрепления окраски пятка. На тег.зюм фоне плэстпнки проявляются синие пятна роза-
302.
лвна с tj. =0,56*0,05.
2.5.3. Алътернативтле условия хроматографирования.
Содержимое колбы после отгонки растворителя при определении розалнна в воде, почве и растительном материале растворяют в 0,2 мл хлороформа. Пластинку делят по длине на три параллельные полосы. На первую и вторую полосу наносят в виде сплошной линии
.. Л .. . рэствор экстрактов. Стенки колбы ополаскивают небольшими порциями хлороформа и наносят на те же полосы. На третью полосу наносят стандартный раствор розалнна, содержащий 10 мкг препарата. Пластинку помещают в камеру, куда за 20-30 мин. до хроматографирования наливают смесь растворителей: спирт-
гексан в соотношении 1:1. Как только фронт растворителя достигнет выооты 10 см, пластинку вынимают из камеры и после удаления запаха растворителей первую и вторую полосу закрывают стеклом в пластинку помещают в йодную камеру на 5-10 мин. Розалин обнаруживают на третьей лолосе по темко-коричневоцу пятку на желтом фоне в 0,60*0,07. По проявленной зоне отмечают участки силикагеля на первой и второй полосах и переносят зоны розалнна в колбу ёмкостью 100 мл. Элюируют 10 мл этилового спирта встряхиванием в точение 30 мин. Соответственно элюируют и зону чистого оилинагеля и измеряют оптическую плотность элюатов при 246 пм.
Количество розалнна определяют по калибровочному графику или сравнением оптических плотностей стандартного и испытуемого растворов. Для построения калибровочного графика в мерных колбах готовят стандартные растворы 5-хлор-2 мвтил-бензвмкдоэола • с концентрацией I, 2, 5, 10, 15, 20 мкг/мл. Измеряют оптические плотности растворов при 246 нм и-строят калибровочный
303.
график Д = (с), где с - концентрация розвлина.
2.5.4. Обработке результатов анализа.
Количественное определение розвлина в анализируемой пробе проводится визуально по интенсивности окрашивания пятен на хроматограмме и по площади пятен стан-дартных растворов и проб.
Концентрацию розвлина (X) в воде, почве и растительном материале по формуле
д • Q
Л Jo
B-SX
X - содержание препарата в пробе, лег/кг или мг/л;
А - количество препарата, найденное путём визуального сравнения размера и интенсивности пятен пробы и стандартных растворов, мкг;
В - содержание препарата в стандартном растворе, ыкг;
площадь пятна пробы, мм*;
5 j- площадь пятен стандартного раствора, мм2.
При спектрофотометрическом определении содержание розали-на в пробе вычисляют по формуле
А' В
С* Р
X - содержание розалина в анализируемой пробе, мг/кг или мг/л; А - количество розалина, найденное по калибровочному графику, мкг;
В - общий объём экстракта, мл;
С - объём раствора, нанесенный на хроматограмму, мл;
Р - масса анализируемой пробы, г.